白念珠菌CDR1/CDR2和MDR1基因高表达对氧化应激的影响

目的探索白念珠菌CDR1/CDR2和MDR1基因高表达对氧化应激的影响。方法以白念珠菌CDR1/CDR2和MDR1基因高表达株及其亲本株为研究对象,测定过氧化氢(H2O2)对菌株生长的影响。以H2O2建立氧化应激模型,比较各菌株细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,ΔΨm)、氧化应激相关基因(CAP1和GRP2)和ROS清除相关基因(SOD2和SOD5)转录水平的差异。结果各菌株均在5mmol/L H2O2作用时出现100%生长抑制;H2O2能升高细胞内ROS和降低ΔΨm(P<0.05),其中高表达株中两者的变化幅度较亲本株低(P<0.05);同时高表达株中CAP1和GRP2基因在转录水平的表达上调以及SOD2和SOD5基因的下调也较亲本株少(P<0.05)。结论 CDR1/CDR2和MDR1基因高表达能够降低白念珠菌的氧化应激反应,增强其对氧化应激的适应性。

阴道白假丝酵母菌的耐药性与ABC转运蛋白基因表达的关系研究

目的:探讨白假丝酵母菌中cdr1、cdr2基因表达水平与菌株对吡咯类药物敏感性下降的关系。方法:收集白假丝酵母菌感染患者的菌株60株,用科玛嘉念珠菌显色培养基作菌种鉴定,纸片扩散法进行药敏试验;实时定量PCR方法检测菌株中cdr1和cdr2的表达水平,并进行统计分析。结果:60株白假丝酵母菌中,38株为中度敏感或耐药株,其中12株菌株对氟康唑、酮康唑和咪康唑中度敏感或耐药,14株菌株对酮康唑和咪康唑中度敏感或耐药;氟康唑中度敏感或耐药组cdr1、cdr2相对表达量显著高于敏感组,酮康唑中度敏感或耐药组和咪康唑中度敏感或耐药组cdr1、cdr2相对表达量与敏感组比较,差异无统计学意义。结论:部分白假丝酵母菌耐药为多重耐药;cdr1及cdr2的高表达与临床白假丝酵母菌对氟康唑耐药有关,cdr1及cdr2的表达量与临床白假丝酵母菌对酮康唑或咪康唑耐药无关。

光滑念珠菌临床分离株对氟康唑耐药的分子机制

目的明确光滑念珠菌临床分离株对氟康唑耐药的主要分子机制。方法采用实时荧光定量RT—PCR技术对光滑念珠菌临床分离株ERG11、CDR1和CDR2基因表达的mRNA进行相对定量，比较氟康唑耐药株与敏感株基因表达水平的差异。结果在光滑念珠菌氟康唑耐药株、剂量依赖性敏感株及敏感株中，ERG11基因mRNA相对表达量分别为：121．4±96．8、102．9±78．8、51．2±20．7；CDR1基因mRNA相对表达量分别为：3．1±1．4、1．9±0．7、1．1±0．4；CDR2基因mRNA相对表达量分别为：3．7±2．2、3．4．4-2．4、1．9±0．9。耐药株ERG11基因mRNA表达量高于敏感株（P=0．041）；耐药株（P〈0．001）和剂量依赖性敏感株（P=0．009）CDRl基因mRNA表达量均高于敏感株；耐药株CDR2基因mRNA表达量高于敏感株（P=0．018）。随着光滑念珠菌对氟康唑敏感性的降低，ERG11、CDR1及CDR2基因mRNA的表达量均不同程度上升。结论ERG11、CDR1及CDR2基因mRNA的上调表达与光滑念珠菌临床分离株对氟康唑的耐药性有关，ERG11、CDR1及CDR2基因上调表达是光滑念珠菌临床分离株对氟康唑耐药的主要分子机制。