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Primary study on the resistance to bacterial blight(X. oryzae)in Cecropin B gene transgenic rices
1
作者 HUA Zhihua HUANG Danian XUE Rui WANG Xiaoling GAO Zhenyu CNRRI,Hangzhou 310006,China. 《Chinese Rice Research Newsletter》 1998年第3期3-4,共2页
Bacterial blight (BB) is one of the major dis-eases to rice. Antibacterial Cecropin B genehas been cloned and transformed into rice. Westudied the resistance to bacterial blight inCecropin B gene transgenic rices.Rice... Bacterial blight (BB) is one of the major dis-eases to rice. Antibacterial Cecropin B genehas been cloned and transformed into rice. Westudied the resistance to bacterial blight inCecropin B gene transgenic rices.Rice variety JYll9 transformed withCecropin B gene by particle bombardment andprogenies were randomly planted in the field in 展开更多
关键词 oryzae)in cecropin b gene transgenic rices Primary study on the resistance to bacterial blight gene
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Introduction of cecropin B gene into rice (Oryza sativa L.) by particle bombardment and analysis of transgenic plants 被引量:7
2
作者 黄大年 朱冰 +5 位作者 杨炜 薛锐 肖晗 田文忠 李良材 戴顺洪 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1996年第6期652-661,共10页
An expression vector pCBl suitable for rice transformation, harboring a synthesized cecropin B gene and a selectable marker gene (bar), was constructed. It was introduced into immature embryos of two japonica varietie... An expression vector pCBl suitable for rice transformation, harboring a synthesized cecropin B gene and a selectable marker gene (bar), was constructed. It was introduced into immature embryos of two japonica varieties by particle bombardment, and several transgenic plants were obtained. The results from Basta treatment, PCR analysis, dot and Southern blot analysis of cecropin B gene in transgenic plants indicated that both bar and cecropin B gene were integrated into the genome of transformed plants. Northern blot analysis of transgenic plants showed the expression of cecropin B gene at transcriptional level. Some of transgenic plants revealed improved resistances to two types of bacterial diseases, rice bacterial blight and rice bacterial streak to different extent. 展开更多
关键词 cecropin b gene particle bOMbARDMENT bar gene RICE (Oryza SATIVA L..).
原文传递
Cecropin B抗菌肽基因的定向诱变与表达 被引量:21
3
作者 胡云龙 胡泰山 +5 位作者 林世康 苏剑 施国民 李伟 赵学忠 屈贤铭 《药物生物技术》 CAS CSCD 1999年第4期193-197,共5页
采用寡核苷酸介导的定向点突变法,对天蚕抗菌肽Cecropin B基因13 位甲硫氨酸( Met) 诱变为亮氨酸(Leu) 或缬氨酸(Val) ,保留1 位上的Met,诱变后的Cecropin BDNA序列分析证明产生了预期的... 采用寡核苷酸介导的定向点突变法,对天蚕抗菌肽Cecropin B基因13 位甲硫氨酸( Met) 诱变为亮氨酸(Leu) 或缬氨酸(Val) ,保留1 位上的Met,诱变后的Cecropin BDNA序列分析证明产生了预期的点突变。将Cecropin B 突变体基因与pGEX4T2 融合表达载体中的谷胱甘肽转移酶(GST) 基因融合,在E.coli 中表达,当IPTG 诱导30min 后,工程菌的数量开始减少,然后逐渐恢复正常。说明Cecropin B 突变体与GST 基因融合表达后仍然具有很强杀伤原核细胞的作用。 展开更多
关键词 抗菌肽 定向诱变 基因表达 cecropin b
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抗菌肽Cecropin B基因导入番茄提高青枯病抗性 被引量:2
4
作者 高媛媛 余文贵 +4 位作者 赵统敏 张保龙 倪万潮 何晓兰 姚姝 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2007年第6期652-653,共2页
关键词 抗菌肽cecropin b基因 番茄 青枯病 抗性
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抗菌肽Cecropin B—肿瘤血管生长抑制因子Kringle5融合蛋白表达载体的构建及其表达 被引量:4
5
作者 樊钰虎 冯瑄 +1 位作者 杨晓燕 边六交 《药物生物技术》 CAS CSCD 2005年第5期281-284,290,共5页
通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽Cecropin B(CB)基因,从ThioA/L15-7上卸下肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)基因,将两者按正确的阅读框架融合并定向克隆至大肠杆菌高效表达载体pET32a上,构建成pET32a/CB-K5重组载体。重组载体转化BL21(... 通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽Cecropin B(CB)基因,从ThioA/L15-7上卸下肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)基因,将两者按正确的阅读框架融合并定向克隆至大肠杆菌高效表达载体pET32a上,构建成pET32a/CB-K5重组载体。重组载体转化BL21(DE3)细胞后,提取质粒进行PCR鉴定和序列分析,证明重组质粒pET32a/CB-K5阅读框架和融合基因序列均与预期相符。实验结果显示,成功地构建了抗菌肽CecropinB(CB)和肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)融合蛋白的表达载体pET32a/CB-K5。转化E.coliBL21(DE3),SDS-PAGE分析显示,在IPTG诱导下,融合蛋白以包涵体的形式在重组转化菌株中获得高效表达,表达量达到菌体总蛋白的50%。 展开更多
关键词 抗菌肽cecropin b 肿瘤血管生长抑制因子Kringle5 重叠区扩增法 融合表达载体
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转CecropinB基因柑桔对溃疡病的离体抗性评价 被引量:1
6
作者 刘琦琦 邹修平 +3 位作者 彭爱红 许兰珍 何永睿 陈善春 《中国南方果树》 北大核心 2014年第2期1-4,21,共5页
为评价转抗菌肽基因Cecropin B的锦橙植株对柑桔溃疡病的抗性,分别用喷雾法和针刺法进行了离体叶接种柑桔溃疡病菌试验,并用Real-time PCR和Southern blot进一步分析了Cecropin B在转基因植株中的表达、整合情况。结果显示,与喷雾法相比... 为评价转抗菌肽基因Cecropin B的锦橙植株对柑桔溃疡病的抗性,分别用喷雾法和针刺法进行了离体叶接种柑桔溃疡病菌试验,并用Real-time PCR和Southern blot进一步分析了Cecropin B在转基因植株中的表达、整合情况。结果显示,与喷雾法相比,针刺接种处理的离体叶片显症时间短,发病率高,便于统计分析。针刺接种6天,大部分转基因植株发病率与非转基因植株无显著差异;其中,PR8、PR11、AAT8和AAT14单株的发病率分别为67.0%、62.9%、68.1%和54.2%,显著低于非转基因植株(96.7%)。对柑桔溃疡病具有抗性的转基因植株(PR8、PR11、AAT8和AAT14)的Cecropin B基因表达量明显高于对照(非转基因植株)。PR8和AAT14植株中的Cecropin B为单拷贝,PR11和AAT8植株中的Cecropin B分别为2个拷贝和3个拷贝。转入Cecropin B可提高锦橙对柑桔溃疡病的抗性。 展开更多
关键词 转基因柑桔 cecropinb基因 柑桔溃疡病 抗病性 针刺法
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家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析 被引量:3
7
作者 杨莹 王成林 +3 位作者 徐家萍 尤征英 凌琳 周敬波 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期246-253,共8页
动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogast... 动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。 展开更多
关键词 家蚕 果蝇 抗菌肽 cecropin b 原核表达 抗菌活性 基因结构
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转抗菌肽B基因和bar基因籼稻植株的再生 被引量:12
8
作者 王慧中 华志华 +3 位作者 高振宇 颜美仙 钱前 黄大年 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期129-132,共4页
运用基因枪法将含有 bar基因和 cecropin B基因的质粒 p CB1导入籼稻品种特青的幼胚细胞 ,筛选后得到 3株转基因植株。PCR检测和 Southern杂交结果表明 ,外源基因已整合到水稻基因组中。转化当代植株表现出对 Basta很强的抗性 。
关键词 水稻 bAR基因 抗菌肽b基因 转基因 抗病性
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转抗菌肽B基因水稻植株的获得与鉴定 被引量:8
9
作者 黄大年 朱冰 +4 位作者 杨炜 薛锐 肖晗 田文忠 李良才 《高技术通讯》 CAS CSCD 1996年第5期4-6,共3页
构建了一个适合在水稻中表达含有抗菌肽B基因的转化载体(pCB1),应用基因枪转化法将其导入水稻未成熟胚,获得了一些转基因水稻植株。根据对选择标记基因和目的基因的分子检测和抗病性测定,证明抗菌肽B基因已整合入转化水稻基... 构建了一个适合在水稻中表达含有抗菌肽B基因的转化载体(pCB1),应用基因枪转化法将其导入水稻未成熟胚,获得了一些转基因水稻植株。根据对选择标记基因和目的基因的分子检测和抗病性测定,证明抗菌肽B基因已整合入转化水稻基因组并在转基因水稻中表达了抗病性。 展开更多
关键词 抗菌肽b基因 水稻 水稻植株
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新型融合基因hIFNα1-CB在大肠杆菌中表达 被引量:3
10
作者 邱定红 毛晓华 +3 位作者 高向东 李新荣 林碧蓉 徐蘅 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期521-525,共5页
目的 构建人干扰素 α1和抗菌肽 B的融合蛋白表达质粒 p HC,并初步研究融合蛋白的抗病毒活性。方法 重组质粒 p HC转化 E.coli JM83 ,温控诱导表达 ,SDS- PAGE制备蛋白质 ,病变抑制法测定其抗病毒比活性。结果 得到分子量约为 2 1ku... 目的 构建人干扰素 α1和抗菌肽 B的融合蛋白表达质粒 p HC,并初步研究融合蛋白的抗病毒活性。方法 重组质粒 p HC转化 E.coli JM83 ,温控诱导表达 ,SDS- PAGE制备蛋白质 ,病变抑制法测定其抗病毒比活性。结果 得到分子量约为 2 1ku的目的蛋白 ,抗病毒比活性为 2 .62× 10 6 IU/ m g。结论 成功构建了融合蛋白表达质粒 p HC,重组蛋白的构象及 C-端的 展开更多
关键词 大肠杆菌 表达 基因重组 人干扰素 抗菌肽b 抗病毒活性
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逆转录病毒介导的天蚕抗菌肽B在奶牛乳腺中的表达
11
作者 王铁东 逄大欣 欧阳红生 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第10期6-10,共5页
为了研究天蚕抗菌肽在奶牛乳腺组织长期表达的可行性以及对大肠杆菌的抑制作用,将天蚕抗菌肽B(cecropin B,CB)的基因序列以哺乳动物偏爱的密码子优化后,合成了四条相互重叠的DNA片段,通过重叠延伸PCR法获得了天蚕抗菌肽B的基因,将其亚... 为了研究天蚕抗菌肽在奶牛乳腺组织长期表达的可行性以及对大肠杆菌的抑制作用,将天蚕抗菌肽B(cecropin B,CB)的基因序列以哺乳动物偏爱的密码子优化后,合成了四条相互重叠的DNA片段,通过重叠延伸PCR法获得了天蚕抗菌肽B的基因,将其亚克隆至T载体,测序正确后构建逆转录病毒载体pLNCX-bCP-cecB,经过包装细胞的包装,获得含有天蚕抗菌肽B表达框的逆转录病毒,注射入奶牛乳腺组织,通过琼脂板孔穴扩散法检测基因的表达及活性;实验结果表明,克隆的抗菌肽基因在乳腺中获得了表达,表达产物对大肠杆菌具有抑制作用,抑制效果可以持续至13天以上。 展开更多
关键词 抗菌肽 天蚕素b 乳腺 基因表达 逆转录病毒
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转抗菌肽B基因水稻(Oryza sativa L.)植株的再生
12
作者 王慧中 《杭州师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2001年第5期31-33,共3页
通过研究除草剂Basta对水稻品种台安 1号愈伤组织生长的影响 ,确定了能抑制愈伤组织生长的最低剂量 ;在此基础上将抗菌肽B基因 (cecropinB)和bar基因导入了台安 1号基因组。除草剂抗性鉴定结果表明 :转基因植株表现出对Basta较强的抗性 .
关键词 水稻 basta 抗菌肽b基因 bAR基因 转基因
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应用基因枪将蚕抗菌肽基因导入水稻获抗白叶枯病株系 被引量:33
13
作者 简玉瑜 吴新荣 +3 位作者 莫豪葵 陈凤珍 董春 黄自然 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期1-7,共7页
将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻发芽种胚,获得转基因植株。经Basta抗性鉴定,应用PCR技术和Southern印迹分折表明,抗菌肽B基因已整合到水稻的基因组。T3抗白叶枯病株系Northern印迹分折证明抗菌... 将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻发芽种胚,获得转基因植株。经Basta抗性鉴定,应用PCR技术和Southern印迹分折表明,抗菌肽B基因已整合到水稻的基因组。T3抗白叶枯病株系Northern印迹分折证明抗菌肽B基因在RNA水平有表达。 展开更多
关键词 抗菌肽b基因 基因枪 水稻 白叶枯病 抗病育种
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转基因水稻外源基因的遗传和表达初步研究 被引量:16
14
作者 简玉瑜 陈远玲 +2 位作者 李静 高丽丽 董春 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期56-59,共4页
将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻TN1发芽种胚 ,获得转基因植株 2株 .转基因水稻T1~T55个世代不同株系 ,对bar基因、抗菌肽基因的遗传和表达进行初步研究 .结果表明 :转基因后代株系barR∶barS 大部分符合 3∶1分离比率 .T1、T4... 将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻TN1发芽种胚 ,获得转基因植株 2株 .转基因水稻T1~T55个世代不同株系 ,对bar基因、抗菌肽基因的遗传和表达进行初步研究 .结果表明 :转基因后代株系barR∶barS 大部分符合 3∶1分离比率 .T1、T4 转基因株系PCR、Southern印迹分析表明 :T18株有抗菌肽B基因 ;T4 仍有 4个株系有抗菌肽基因 ,其他的株系基因丢失 .T3 1个株系Northern印迹证明抗菌肽基因在RNA水平有表达 ;抗菌肽B转基因水稻对白叶枯病的抗病性有提高 ,抗性能传递到高世代 ,在T3 展开更多
关键词 天蚕抗菌肽b基因 bAR基因 水稻 转基因植株 白叶枯病 遗传 表达
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双价抗菌肽基因表达载体的构建 被引量:1
15
作者 张银东 金小平 +2 位作者 曾宪松 彭存智 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1994年第S1期61-66,共6页
将人工合成的抗菌肽D基因和抗菌肽B基因克隆到同一植物表达载体pBⅠ121,且各自具有其35s启动子和Nos终止子。先将抗菌肽D基因及其启动子和终止子克隆到pB121HindⅢ位点获得pECVⅠ重组子。然后将抗菌肽B基... 将人工合成的抗菌肽D基因和抗菌肽B基因克隆到同一植物表达载体pBⅠ121,且各自具有其35s启动子和Nos终止子。先将抗菌肽D基因及其启动子和终止子克隆到pB121HindⅢ位点获得pECVⅠ重组子。然后将抗菌肽B基因克隆到pECVⅠ的BamHⅠ位点,经Agarosegel检测和酶切鉴定获得具有抗菌肽D,抗菌肽B基因的双价基因表达载体pECVⅡ。 展开更多
关键词 抗菌肽D基因 抗菌肽b基因 双价抗菌肽基因植物表达载体
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转基因水稻目的性状稳定性的研究 被引量:2
16
作者 潘重光 吴爱忠 沈大棱 《上海农学院学报》 1999年第2期98-101,共4页
本文根据分子杂交的证据,确认转基因水稻株以后,用人工接种白叶枯病病菌的办法,从转入抗菌肽 B( Cecropin B) 基因的水稻种子后代中筛选出抗性植株。连续3 年,用人工接种病原菌的办法检测抗性植株有性后代的抗病性。... 本文根据分子杂交的证据,确认转基因水稻株以后,用人工接种白叶枯病病菌的办法,从转入抗菌肽 B( Cecropin B) 基因的水稻种子后代中筛选出抗性植株。连续3 年,用人工接种病原菌的办法检测抗性植株有性后代的抗病性。结果表明,转基因水稻有性后代的目的性状( 抗白叶枯病) 并不一致,出现敏感、中感、中抗等分离,而从有性后代中选出中抗植株后,中抗株的有性后代能保持目的性状的稳定性。 展开更多
关键词 转基因 水稻 抗菌肽b 白叶枯病
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双抗植物表达载体的构建
17
作者 马国斌 王鸣 郑学勤 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 1999年第3期1-5,共5页
用限制性内切酶将抗虫的胰蛋白酶抑制剂(TI)基因从质粒pBin20上切下,插入带有抗细菌的抗菌肽B和抗菌肽D基因的植物表达载体pDB3的XbaⅠ位点。通过点杂交和酶切鉴定,得到了带有3个抗性基因的双抗植物表达载体pD... 用限制性内切酶将抗虫的胰蛋白酶抑制剂(TI)基因从质粒pBin20上切下,插入带有抗细菌的抗菌肽B和抗菌肽D基因的植物表达载体pDB3的XbaⅠ位点。通过点杂交和酶切鉴定,得到了带有3个抗性基因的双抗植物表达载体pDBT. 展开更多
关键词 胰蛋白酶抑制剂 抗菌肽b基因 载体 作物 育种
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