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抗菌肽CecropinB对鸡肠道正常微生物群的影响 被引量:1
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作者 王秀青 张婵 +2 位作者 朱明星 张爱君 杨风琴 《宁夏医科大学学报》 2010年第7期762-766,共5页
目的探讨重组抗菌肽CecropinB对鸡肠道正常微生物群的影响。方法 50羽健康雏鸡随机分成5组:设盐酸环丙沙星对照组,基因工程抗菌肽cecropinB高、中、低三个剂量组及空白对照组,每组10羽,均以饮水混饮的方式饲喂,分别于42、49d取盲肠、回... 目的探讨重组抗菌肽CecropinB对鸡肠道正常微生物群的影响。方法 50羽健康雏鸡随机分成5组:设盐酸环丙沙星对照组,基因工程抗菌肽cecropinB高、中、低三个剂量组及空白对照组,每组10羽,均以饮水混饮的方式饲喂,分别于42、49d取盲肠、回肠内容物进行聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE),对肠道的几种优势菌的多样性进行研究,并对回肠16SrDNA进行全序列克隆、测序。结果雏鸡盲肠菌群在42日龄和49日龄之间相似性达到50%。相同日龄各组间盲肠菌群分为两大类,其中抗菌肽不同剂量组间相似性为73%及以上,而抗菌肽不同剂量组与空白对照组及抗生素对照组之间的相似性分别为61%以上和50%。各组雏鸡回肠显示两大类优势菌群,抗生素对照组为一大类,其他组别为一大类,两者间的相似性为59%;各组内样品之间相似性在92%以上,组间相似性在70%左右。对回肠内容物16SrDNA克隆、测序显示,抗菌肽高剂量组比空白对照组多出一条与厌气弯杆菌同源性为78%的条带。结论 CecropinB作为一种饲料添加剂对42与49日龄雏鸡肠道菌群无明显影响。 展开更多
关键词 cecropinb 雏鸡 肠道菌群 DGGE
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转CecropinB基因柑桔对溃疡病的离体抗性评价 被引量:1
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作者 刘琦琦 邹修平 +3 位作者 彭爱红 许兰珍 何永睿 陈善春 《中国南方果树》 北大核心 2014年第2期1-4,21,共5页
为评价转抗菌肽基因Cecropin B的锦橙植株对柑桔溃疡病的抗性,分别用喷雾法和针刺法进行了离体叶接种柑桔溃疡病菌试验,并用Real-time PCR和Southern blot进一步分析了Cecropin B在转基因植株中的表达、整合情况。结果显示,与喷雾法相比... 为评价转抗菌肽基因Cecropin B的锦橙植株对柑桔溃疡病的抗性,分别用喷雾法和针刺法进行了离体叶接种柑桔溃疡病菌试验,并用Real-time PCR和Southern blot进一步分析了Cecropin B在转基因植株中的表达、整合情况。结果显示,与喷雾法相比,针刺接种处理的离体叶片显症时间短,发病率高,便于统计分析。针刺接种6天,大部分转基因植株发病率与非转基因植株无显著差异;其中,PR8、PR11、AAT8和AAT14单株的发病率分别为67.0%、62.9%、68.1%和54.2%,显著低于非转基因植株(96.7%)。对柑桔溃疡病具有抗性的转基因植株(PR8、PR11、AAT8和AAT14)的Cecropin B基因表达量明显高于对照(非转基因植株)。PR8和AAT14植株中的Cecropin B为单拷贝,PR11和AAT8植株中的Cecropin B分别为2个拷贝和3个拷贝。转入Cecropin B可提高锦橙对柑桔溃疡病的抗性。 展开更多
关键词 转基因柑桔 cecropinb基因 柑桔溃疡病 抗病性 针刺法
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Stable Expression of Antibacterial Peptide CecropinB in Dairy Goat Mammary Gland Epithelial Cells
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作者 TONG Huili YIN Deyun ZHANG Li GAO Xuejun 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2010年第1期53-56,共4页
The paper aimed at constructing the eukaryotic expression vector of CecropinB and transfecting it into the goat mammary epithelial cell line. The recombinant plasmid inserted with CecropinB was transfected into the go... The paper aimed at constructing the eukaryotic expression vector of CecropinB and transfecting it into the goat mammary epithelial cell line. The recombinant plasmid inserted with CecropinB was transfected into the goat mammary epithelial cell by liposome Tfx^M-20. By screening with G418, the stable transfected goat mammary epithelial cell line was established and the transcription and expression of CecropinB were identified by RT-PCR and agarose diffusion experiment, respectively. Results showed that eukaryotic expression vector pECFP-B was constructed successfully. Stable transfected goat mammary epithelial cell line was established and the CecropinB protein was expressed successfully. It provides the solid foundation for further experimental studies on the function of CecropinB. 展开更多
关键词 cecropinb eukaryotic expression vector goat mammary epithelial cell line stable transfection
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抗菌肽Cecropin B-人溶菌酶融合蛋白表达载体的构建 被引量:7
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作者 冯瑄 杨晓燕 边六交 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第6期3-5,共3页
目的是构建抗菌肽B (CecropinB)和人溶菌酶 (hLyso)的融合蛋白表达载体。从pUC118-hLyso上卸下人溶菌酶基因后 ,通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽B基因 ,并将其融合到人溶菌酶基因的 5’端。将抗菌肽B基因和人溶菌酶基因按正确的阅读框... 目的是构建抗菌肽B (CecropinB)和人溶菌酶 (hLyso)的融合蛋白表达载体。从pUC118-hLyso上卸下人溶菌酶基因后 ,通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽B基因 ,并将其融合到人溶菌酶基因的 5’端。将抗菌肽B基因和人溶菌酶基因按正确的阅读框架定向克隆至大肠杆菌高效表达载体pET32a,终止子位于人溶菌酶基因的 3’端。PCR鉴定及序列分析表明 ,所转化的BL2 1(DE3)菌落中含有插入CecropinB -hLyso基因的重组质粒pET32a -CB -hLyso。 展开更多
关键词 抗菌肽cecropinb 人溶菌酶 融合蛋白 融合表达载体
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天蚕素B基因在奶山羊乳腺上皮细胞系中的稳定表达
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作者 尹德云 高学军 +2 位作者 佟慧丽 张莉 曲一函 《畜牧与兽医》 北大核心 2008年第11期66-69,共4页
采用RT-PCR方法,以家蚕cDNA为模板扩增天蚕素B(Cecropin B)基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pECFP-C1,构建CecropinB真核表达载体,经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染奶山羊乳腺上皮细胞,通过G... 采用RT-PCR方法,以家蚕cDNA为模板扩增天蚕素B(Cecropin B)基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pECFP-C1,构建CecropinB真核表达载体,经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染奶山羊乳腺上皮细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的奶山羊乳腺上皮细胞系,用RT-PCR及琼脂糖扩散试验检测抗菌肽CecropinB基因及其表达活性。结果成功构建了pECFP-B真核表达载体,并建立了稳定转染的奶山羊乳腺上皮细胞系,成功地表达了目的基因,为进一步研究CecropinB的功能奠定良好的实验基础。 展开更多
关键词 cecropinb 真核表达载体 奶山羊乳腺上皮细胞系 转染 基因表达
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杂合抗菌肽LPCB在毕赤酵母中的表达条件优化 被引量:7
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作者 李增婷 谢力 +5 位作者 冯顺利 尤芳芳 何桂桦 林强 曹毅 乔代蓉 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期65-69,共5页
为获取能表达具有天然活性的杂合抗菌肽的重组酵母菌,确定其最佳表达条件,将构建好的重组酵母表达载体pPICZα-A-CecropinB(1~10)-Magainin2(1~12)(简称pPICZα-A-CBMA)和pPICZα-A-Lfcin-Pro-CecropinB(简称pPICZα-A-LPCB)经SacⅠ... 为获取能表达具有天然活性的杂合抗菌肽的重组酵母菌,确定其最佳表达条件,将构建好的重组酵母表达载体pPICZα-A-CecropinB(1~10)-Magainin2(1~12)(简称pPICZα-A-CBMA)和pPICZα-A-Lfcin-Pro-CecropinB(简称pPICZα-A-LPCB)经SacⅠ线性化处理,分别电转入巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris X-33,利用抗生素Zeocin筛选阳性克隆,PCR扩增验证,甲醇诱导表达.采用抑菌圈法初步测定产物活性,优化杂合肽LPCB诱导时间、诱导剂浓度、诱导温度、培养基pH等表达条件,传代检测其质粒稳定性.结果显示,基因工程菌P.pastoris X-33/pPICZα-A-CBMA和P.pastoris X-33/pPICZα-A-LPCB成功构建.表达产物前者抑菌活性微弱,后者抑菌活性良好.杂合肽LPCB的最佳表达条件为:25℃,pH中性培养,每24 h添加0.5%(V/V,φ)甲醇,诱导表达72 h.重组酵母菌pPICZα-A-LPCB在培养超过100代后,未发生质粒丢失. 展开更多
关键词 杂合抗菌肽 Lfcin-Pro-cecropinb 毕赤酵母 表达条件优化
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