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初级纤毛/鞭毛转运系统介导力学反应性信号通路促骨髓基质干细胞成骨分化
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作者 马占华 严旭 +7 位作者 姜岩 曹争明 王永魁 李东哲 杨腾越 靳宜楷 付苏 张春霖 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第25期3937-3941,共5页
背景:目前已证实力学刺激可以促进骨髓基质干细胞成骨分化,但其机制未完全明了。初级纤毛是重要的力学感受器并调控TGF-β1/BMP-2/SMAD等多种信号通路,很可能是骨髓基质干细胞力学调控的重要靶点。目的:探讨流体剪切力对骨髓基质干细胞... 背景:目前已证实力学刺激可以促进骨髓基质干细胞成骨分化,但其机制未完全明了。初级纤毛是重要的力学感受器并调控TGF-β1/BMP-2/SMAD等多种信号通路,很可能是骨髓基质干细胞力学调控的重要靶点。目的:探讨流体剪切力对骨髓基质干细胞成骨分化的影响及机制。方法:将大鼠骨髓基质干细胞分为对照组、力学刺激组(通过摇床施加流体剪切力学干预)、力学刺激+IFT88沉默组(力学刺激+使用siRNA沉默IFT88表达),干预24 h后,采用qRT-PCR检测转化生长因子β1、骨形成蛋白2的表达、Western blot检测磷酸化SMAD2/3蛋白的表达,初级纤毛免疫荧光染色及形态学分析。结果与结论:剪切力刺激可促进骨髓基质干细胞的初级纤毛表达,转化生长因子β1及骨形成蛋白2基因转录激活,提高磷酸化SMAD2/3蛋白表达。siRNA干扰初级纤毛生成后,这一力学反应效应明显减低。骨髓基质干细胞的初级纤毛面积改变比值与转化生长因子β1及骨形成蛋白2基因转录增高比例具有Spearman相关性。结果表明:初级纤毛/鞭毛转运系统介导了流体剪切力反应性的TGF-β1/BMP-2/SMAD信号通路激活,促进骨髓基质干细胞成骨分化。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 转化生长因子β1 骨形成蛋白2 初级纤毛 鞭毛转运系统 剪切力学刺激
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An Engineer’s View of Hair Cell Function: A Theory of Capacitive Transduction
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作者 Michelangelo Rossetto 《Natural Science》 2015年第3期158-164,共7页
Using an engineering perspective which is looking at the hair cells cilia as a total entity interacting with its neighboring cilia along their entire length, a theory of capacitive transduction is developed. This larg... Using an engineering perspective which is looking at the hair cells cilia as a total entity interacting with its neighboring cilia along their entire length, a theory of capacitive transduction is developed. This larger scaled view of cilia interaction suggests that transduction may be achieved through a mechanically controlled variable capacitor in the cilia bundle. A brief review of some seldom considered facts about electrical capacitors supports the hypothesis presented. Experimental measurements of hair cell reversal potential and ionic conditions surrounding the cilia during transduction, long reported in the biophysical literature, also support a capacitive hypothesis of transduction. 展开更多
关键词 HAIR cell cilia TRANSDUCTION Nernst
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胃癌细胞系SGC7901通过间充质干细胞原纤毛调控钙信号对成骨分化的影响
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作者 陈茜 李梦雪 +3 位作者 王吉春 刘杰 许洁 汪长东 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2023年第1期23-32,共10页
目的探究胃癌细胞系SGC7901如何影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化。方法分离SD大鼠乳鼠股骨,获取原代MSCs。将原代MSCs和经血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)处理的原代MSCs分别与胃黏膜细胞系GES-1和胃癌细胞系... 目的探究胃癌细胞系SGC7901如何影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化。方法分离SD大鼠乳鼠股骨,获取原代MSCs。将原代MSCs和经血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)处理的原代MSCs分别与胃黏膜细胞系GES-1和胃癌细胞系SGC7901共培养,并以成骨诱导培养基(OS培养基)诱导72 h,提取MSCs总蛋白和总RNA。对总RNA进行RNA-seq检测并对显著差异基因进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和真核直系同源群(euKaryotic Ortholog Groups,KOG)可视化分析;以GAPDH为内参,Western blot检测成骨标志蛋白,钙信号相关蛋白和原纤毛结构相关蛋白表达;对共培养后获取的MSCs总蛋白进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测。结果MSCs原代培养细胞呈多角形或梭形;经过成骨诱导培养基(OS培养基)诱导,茜素红染色矿化结节呈红色;以SGC7901为对照,MSCs细胞高表达CD44,低表达CD34。与GES-1共培养相比,SGC7901共培养的MSCs中骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和Runx2表达均降低(P<0.01),ALP酶活力显著降低(P<0.001)。SGC7901共培养上调了MSCs中乙酰化α-微管蛋白和γ-微管蛋白表达(P<0.01)。RNA-seq分析显著差异基因共3712个,2756个基因表达上调,956个基因表达下调;SGC7901共培养的MSCs中ADRB3和PLN表达均降低(P<0.001)。经过AngⅡ处理后,SGC7901共培养抑制的Runx2和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达水平增加(P<0.05),ALP酶活力增强(P<0.001)。结论胃癌细胞SGC7901通过促进MSCs原纤毛生长,抑制钙信号从而抑制MSCs成骨分化。 展开更多
关键词 SGC7901 间充质干细胞 成骨分化 原纤毛 钙信号
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鼻粘膜纤毛细胞的分离及观察 被引量:6
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作者 苏振伦 孙燕荣 +1 位作者 杨伟炎 姜泗长 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 1998年第4期203-205,共3页
目的为从细胞水平研究鼻粘膜纤毛上皮的生理功能,建立豚鼠鼻粘膜纤毛细胞的分离方法,提出单离纤毛细胞活性鉴定标准。方法利用木瓜蛋白酶消化及机械分离法分离出豚鼠鼻粘膜单个纤毛细胞,用配备相差或微分干涉相衬(diferent... 目的为从细胞水平研究鼻粘膜纤毛上皮的生理功能,建立豚鼠鼻粘膜纤毛细胞的分离方法,提出单离纤毛细胞活性鉴定标准。方法利用木瓜蛋白酶消化及机械分离法分离出豚鼠鼻粘膜单个纤毛细胞,用配备相差或微分干涉相衬(diferentialinterferencecontrast,DIC)装置的倒置显微镜在100倍油镜下(总放大率1000倍)观察。结果从每只豚鼠的鼻粘膜平均可分离出单离纤毛细胞(12587±2437)个。活性良好的单离纤毛细胞的纤毛运动活跃,双折射性良好,质膜光滑,细胞无水肿或皱缩,可存活2~9h以上。观察到纤毛呈来回摆动,具有快慢相,运动方向相同但不同步,运动速率为51~119次/min。结论本实验建立了豚鼠鼻粘膜纤毛细胞分离方法和单离纤毛细胞活性判断标准,观察了纤毛运动方式和频率。 展开更多
关键词 鼻粘膜 细胞分离 纤毛 细胞存活
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丙泊酚对离体兔气管黏膜上皮纤毛运动的影响 被引量:3
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作者 李小葵 张罗 +1 位作者 金善哲 韩德民 《北京医学》 CAS 2009年第10期609-611,共3页
目的观察不同浓度的丙泊酚对体外培养的兔气管黏膜上皮细胞纤毛运动的影响,探讨一氧化氮(NO)在丙泊酚影响纤毛运动中的作用。方法无菌条件下从健康新西兰兔获取离体气管标本,分离上皮组织培养7~8d后观察。以Hank平衡盐溶液(HBSS)将丙... 目的观察不同浓度的丙泊酚对体外培养的兔气管黏膜上皮细胞纤毛运动的影响,探讨一氧化氮(NO)在丙泊酚影响纤毛运动中的作用。方法无菌条件下从健康新西兰兔获取离体气管标本,分离上皮组织培养7~8d后观察。以Hank平衡盐溶液(HBSS)将丙泊酚的终浓度分别稀释为1、10、20、50、100、200μg/ml。将组织块随机分为8组,前7组分别加入HBSS(P0)和上述6种浓度的丙泊酚(P1、P2、P3、P4、P5、P6),第8组(P7)在加入0.1mmol/L的一氧化氮合酶(NOS)总抑制剂——L-NMMA后再以200μg/ml丙泊酚处理。在加药前(T0),加药后1min(T1)、5min(T2)、10min(T3)、20min(T4)、30min(T5),采用高速数码摄像系统采集纤毛摆动图像,通过IPLabV3.65软件分析,计算纤毛摆动频率(ciliarybeatfrequency,CBF),分别进行组内和组间对比。结果①P0组、P1组和P2组的CBF值在各时点与各自的基础值比较均无明显变化;P1组和P2组的CBF值与P0组相应时间点相比无明显变化;②P3组CBF在T1时点比基础值和P0组T1时点值明显升高(P<0.05);在随后的各个观察时点与基础值及P0组相应时间点比较无明显变化;③P4、P5、P6组加药后各个观察时点的CBF均明显高于基础值和P0组各时点值(P<0.05);④P7组加药后各时点的CBF值与基础值相比均无明显变化。结论50μg/ml以上浓度的丙泊酚可促进纤毛摆动,50、100、200μg/ml浓度的丙泊酚可能通过促进NO合成和释放而加速离体纤毛运动。 展开更多
关键词 丙泊酚 气管黏膜 上皮细胞 纤毛
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呼吸道纤毛上皮细胞的组织块法培养 被引量:7
6
作者 王奎吉 张罗 +4 位作者 韩德民 王鸿 范尔钟 宋晓红 刘仲燕 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2006年第12期833-837,共5页
目的建立组织块法呼吸道纤毛上皮细胞原代培养模型,观察细胞生长分化情况,为深入研究黏液纤毛传输系统提供方法学基础。方法应用组织块法在鼠尾胶原上培养兔气管纤毛上皮细胞,对培养7天的标本行苏木素-伊红染色、黏蛋白5AC(mucin-5AC,MU... 目的建立组织块法呼吸道纤毛上皮细胞原代培养模型,观察细胞生长分化情况,为深入研究黏液纤毛传输系统提供方法学基础。方法应用组织块法在鼠尾胶原上培养兔气管纤毛上皮细胞,对培养7天的标本行苏木素-伊红染色、黏蛋白5AC(mucin-5AC,MUC5AC)单克隆抗体免疫组织化学染色、扫描电镜及透射电镜观察、纤毛摆动频率测量。结果①细胞培养7天后可以见到大量的纤毛细胞和杯状细胞,纤毛形态正常,摆动活跃;②苏木素-伊红染色和黏蛋白MUC5AC单克隆抗体免疫组织化学染色可见分化良好的纤毛细胞和杯状细胞;③扫描电镜及透射电镜观察见纤毛细胞分化良好,纤毛形态正常;④(30±1)℃下测得纤毛摆动频率为(13.2±0.9)次/s。结论应用组织块法进行兔气管纤毛上皮细胞培养,可以得到分化良好的纤毛细胞和杯状细胞,纤毛摆动活跃,可应用此模型对黏液纤毛传输系统进行深入研究。 展开更多
关键词 纤毛 上皮细胞 细胞培养 粘蛋白类
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气管黏膜上皮细胞无血清培养的初步实验研究 被引量:4
7
作者 唐隽 马玲国 +2 位作者 何发尧 张剑利 王跃建 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2005年第6期403-406,共4页
目的:探讨应用无血清培养液培养气管黏膜上皮细胞的可行性。方法:取4只Beagle犬的气管黏膜,在无血清培养基中分别采用酶消化分散法、机械分散法、组织块培养法行气管黏膜上皮细胞的体外培养,于培养后的第10天、第14天和第16天行细胞学... 目的:探讨应用无血清培养液培养气管黏膜上皮细胞的可行性。方法:取4只Beagle犬的气管黏膜,在无血清培养基中分别采用酶消化分散法、机械分散法、组织块培养法行气管黏膜上皮细胞的体外培养,于培养后的第10天、第14天和第16天行细胞学观察、扫描电镜观察和纤毛运动频率的测量。结果:酶消化分散法和机械分散法培养的气管黏膜上皮细胞生长缓慢,无纤毛长出。组织块培养法培养的气管黏膜上皮细胞增殖较旺盛,有纤毛生长。纤毛摆动频率最大值为9.33Hz,最小值为3.85Hz,平均(6.8±0.52)Hz。结论:应用无血清培养液可进行气管黏膜纤毛上皮细胞的体外培养。组织块培养法培养的纤毛上皮细胞的分化能力保持较好。 展开更多
关键词 细胞培养 气管黏膜 纤毛
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卷曲螺旋结构域蛋白74B对纤毛生成和细胞周期调控作用研究 被引量:3
8
作者 李萍 方霞 +3 位作者 曹雨娜 陆惠娜 梁爱斌 张虹 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期292-295,共4页
背景卷曲螺旋结构域蛋白(CCDC)参与基因转录、细胞凋亡及细胞周期过程,并调控恶性肿瘤细胞的侵袭和转移等多种生物学行为,然而多数CCDC的生物学功能目前尚未明确。目的探讨CCDC74B的细胞定位及对纤毛生成和细胞周期的影响。方法 2013年3... 背景卷曲螺旋结构域蛋白(CCDC)参与基因转录、细胞凋亡及细胞周期过程,并调控恶性肿瘤细胞的侵袭和转移等多种生物学行为,然而多数CCDC的生物学功能目前尚未明确。目的探讨CCDC74B的细胞定位及对纤毛生成和细胞周期的影响。方法 2013年3—9月通过构建在人视网膜色素上皮(RPE1)中的Tet-On表达系统,实现CCDC74B在细胞内的蛋白表达,然后通过细胞免疫荧光染色观察CCDC74B的细胞定位,通过小干扰RNA(siRNA)转染敲除CCDC74B在RPE1细胞中的表达,分为对照组、siRNA#1组、siRNA#2组,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测CCDC74B mRNA表达水平;采用细胞免疫荧光染色及流式细胞术观察下调CCDC74B表达后纤毛生成情况和对细胞周期分布的影响。结果在正常上皮细胞中,CCDC74B位于中心体,细胞免疫荧光染色示,下调CCDC74B表达后细胞初级纤毛生成。siRNA#1组及siRNA#2组转染后36 h及48 h纤毛生成率分别高于对照组(P<0.05)。RT-PCR法结果显示,siRNA#1组及siRNA#2组均有效抑制了CCDC74B mRNA表达。细胞免疫荧光染色示,下调CCDC74B表达后cyclin A表达减少,提示存在细胞周期停滞;流式细胞术检测示,下调CCDC74B表达后G_1期细胞比例增高,S期及G_2/M期细胞比例减少。结论中心体蛋白CCDC74B在细胞增殖过程中参与对纤毛生成和细胞周期的调控。 展开更多
关键词 卷曲螺旋结构域蛋白 纤毛 细胞周期 细胞增殖
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人牙周膜细胞和牙周膜组织的初级纤毛观察 被引量:2
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作者 尹凤英 孙慧芳 +3 位作者 王敏 张璠 程祥荣 夏海斌 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期131-133,共3页
目的:观察牙周膜组织和体外培养的牙周膜细胞的初级纤毛情况。方法:切取人牙根中1/3的牙周膜组织的冰冻切片和切取小鼠切牙牙周膜组织石蜡切片,原代培养人牙周膜细胞至P3,采用acet-α-tubulin利用间接免疫荧光的方法观察初级纤毛结构... 目的:观察牙周膜组织和体外培养的牙周膜细胞的初级纤毛情况。方法:切取人牙根中1/3的牙周膜组织的冰冻切片和切取小鼠切牙牙周膜组织石蜡切片,原代培养人牙周膜细胞至P3,采用acet-α-tubulin利用间接免疫荧光的方法观察初级纤毛结构。结果:人及小鼠牙周膜组织以及人牙周膜细胞均可见绿色短棒状荧光信号,位于细胞核附近,长度约2~3μm。结论:牙周膜组织及体外培养的人牙周膜细胞均含有初级纤毛结构。 展开更多
关键词 牙周膜 人牙周膜细胞 初级纤毛
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输卵管正常伞与积水远端的超微结构比较 被引量:5
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作者 江小蓉 侯海燕 +3 位作者 陈亚琼 潭为 柳柯 黄文华 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期174-176,189,共4页
目的:通过扫描电镜观察正常与积水输卵管远端黏膜上皮的超微结构,并比较两者之间的差异。方法:实验组选取9例因输卵管积水、远端闭锁、需要伞端整形的不孕症患者,取其远端闭锁部位中心;对照组选取5例因子宫全切除的、输卵管无积水... 目的:通过扫描电镜观察正常与积水输卵管远端黏膜上皮的超微结构,并比较两者之间的差异。方法:实验组选取9例因输卵管积水、远端闭锁、需要伞端整形的不孕症患者,取其远端闭锁部位中心;对照组选取5例因子宫全切除的、输卵管无积水的患者,在远端取同等大小的组织块;两组均在扫描电镜下观察并测量相关数据。结果:实验组纤毛细胞数、分泌细胞数分别与对照组比较差异有统计学意义。实验组纤毛长度、直径与对照组均没有差异。积水输卵管的纤毛长度与直径没有明显变化,但是纤毛细胞数目明显减少且每个纤毛细胞上的纤毛数量减少,分泌细胞数目明显增加。结论:分泌细胞的明显增多,可能是引起输卵管积水的主要原因。 展开更多
关键词 输卵管 积水 纤毛 分泌细胞 扫描电镜
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TBC1D24基因的致聋机制研究进展 被引量:2
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作者 陈鹏辉 杨涛 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第2期299-303,共5页
TBC1D24基因编码含TBC结构域和TLDc结构域的蛋白质。该基因具有基因多效性,所涉及的基因型-表型关联复杂,不同突变可分别导致重度-极重度先天性耳聋、迟发性/渐进性耳聋等不同听力表型及在神经、骨骼等系统的不同发育障碍。在内耳中,TBC... TBC1D24基因编码含TBC结构域和TLDc结构域的蛋白质。该基因具有基因多效性,所涉及的基因型-表型关联复杂,不同突变可分别导致重度-极重度先天性耳聋、迟发性/渐进性耳聋等不同听力表型及在神经、骨骼等系统的不同发育障碍。在内耳中,TBC1D24表达于螺旋神经节及毛细胞静纤毛,具有特异的表达位置和表达时间。对该基因的功能学研究有助于人们了解听觉及神经系统的发育及相关遗传性疾病的分子发病机制。 展开更多
关键词 TBC1D24 螺旋神经节 静纤毛 耳聋基因
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白藜芦醇对NIH3T3细胞Shh信号通路的影响 被引量:3
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作者 郭霜 廖鸿雁 +2 位作者 刘杰 唐凡人 杨琴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期179-184,共6页
目的探讨白藜芦醇对NIH3T3细胞Shh信号通路的影响。方法实验分为对照组和白藜芦醇组。白藜芦醇处理NIH3T3细胞24 h。CCK-8法测定细胞活力,免疫荧光法检测初级纤毛蛋白(Ac-tu)、Smo和Gli-1的表达,Western blotting法检测Shh、Ptc、Smo、G... 目的探讨白藜芦醇对NIH3T3细胞Shh信号通路的影响。方法实验分为对照组和白藜芦醇组。白藜芦醇处理NIH3T3细胞24 h。CCK-8法测定细胞活力,免疫荧光法检测初级纤毛蛋白(Ac-tu)、Smo和Gli-1的表达,Western blotting法检测Shh、Ptc、Smo、Gli-1蛋白的表达。结果 1.0.5和1μmol/L白藜芦醇组(0.679±0.047,0.774±0.054)细胞活力分别较对照组(0.585±0.039)明显增强(P<0.05),其中以1μmol/L白藜芦醇组最强。之后随白藜芦醇浓度(10、20、40、80μmol/L)的增高,细胞活力逐渐降低(0.428±0.043,0.395±0.031,0.373±0.017,0.361±0.016),且均较对照组明显减弱(P<0.05),而0.1μmol/L(0.602±0.065)和5μmol/L组(0.556±0.041)细胞活力与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。2.NIH3T3细胞表达Ac-tu、Shh、Ptc-1、Smo、Gli-1从蛋白,有1根初级纤毛,Smo和Gli-1蛋白位于细胞质。白藜芦醇处理24 h时,Gli-1从细胞质进入细胞核,Smo从细胞质进入初级纤毛,且Shh(0.756±0.659比0.441±0.769,P<0.05)、Ptc-1(0.655±0.347比0.351±0.026,P<0.05)、Smo(0.779±0.064比0.451±0.035,P<0.05)和Gli-1(0.856±0.044比0.560±0.058,P<0.05)蛋白表达较对照组高。结论白藜芦醇可能通过激活Shh信号通路增强NIH3T3细胞的活力。 展开更多
关键词 白藜芦醇 SHH信号通路 初级纤毛 NIH3T3细胞 免疫印迹法
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绒山蝠小肠细胞超微结构的研究 被引量:2
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作者 张维道 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期218-221,共4页
应用光镜和电镜,观察了绒山蝠小肠组织和细胞超微结构,首次报道了该动物小肠上皮分布有纤毛细胞。这种纤毛细胞,在其它动物小肠上还未发现,可能是绒山蝠对特殊食物一种适应性结构。
关键词 绒山蝠 小肠 纤毛细胞 超微结构
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呼吸道纤毛上皮细胞培养技术研究 被引量:3
14
作者 王奎吉 张罗 韩德民 《国外医学(耳鼻咽喉科学分册)》 2005年第2期67-70,共4页
纤毛在呼吸道机械防御机制中发挥着重要作用,纤毛细胞培养是纤毛研究领域的重要技术之一,本文对纤毛细胞培养技术的进展作一综述。
关键词 纤毛 呼吸道 上皮细胞 毛细胞 防御机制 综述 培养技术
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初级纤毛介导的Shh信号对大鼠骨髓基质细胞神经元样细胞分化的影响 被引量:3
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作者 黄家贵 徐兰 +2 位作者 沈长波 刘舒 杨琴 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期934-939,共6页
目的探讨初级纤毛介导的Sonic hedgehog(Shh)信号对大鼠骨髓基质细胞(MSCs)神经元样细胞分化的影响。方法全骨髓贴壁法分离培养大鼠MSCs。实验分为白藜芦醇正常培养组、白藜芦醇诱导组、Smoothened(Smo)激动剂SAG组、Smo抑制剂环巴明组... 目的探讨初级纤毛介导的Sonic hedgehog(Shh)信号对大鼠骨髓基质细胞(MSCs)神经元样细胞分化的影响。方法全骨髓贴壁法分离培养大鼠MSCs。实验分为白藜芦醇正常培养组、白藜芦醇诱导组、Smoothened(Smo)激动剂SAG组、Smo抑制剂环巴明组,分别给予相应的药物处理。倒置显微镜下观察各组细胞形态;免疫荧光法检测各组细胞初级纤毛及Shh信号通路相关蛋白[Ac-Tu、Patched(Ptc)、Smo、Gli1]的表达;RT-PCR检测各组细胞Smo、Gli1mRNA的表达;蛋白质印迹法检测各组细胞Smo和Gli1蛋白的表达。结果正常培养的大鼠MSCs不表达初级纤毛。经过预诱导或饥饿处理24h后,MSCs表达初级纤毛及Ptc、Smo和Gli1蛋白,其中Smo和Gli1蛋白位于胞质,Ptc蛋白位于初级纤毛。正常培养时,白藜芦醇不能促使Smo移位及MSCs向神经元样细胞分化。当MSCs表达初级纤毛时,白藜芦醇及SAG可使Smo从胞质进入初级纤毛,同时伴随MSCs向神经元样细胞分化及Smo、Gli1mRNA和蛋白表达水平的增加(P<0.05);加入抑制剂环巴明后,Smo仍主要表达于胞质,Smo、Gli1mRNA和蛋白的表达水平降低(P<0.05),MSCs向神经元样细胞的分化受抑制。结论 MSCs表达初级纤毛并存在Shh信号,初级纤毛介导的Shh信号参与调控大鼠MSCs的神经元样细胞分化。 展开更多
关键词 Shh信号 初级纤毛 骨髓基质细胞 神经元样细胞 细胞分化
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初级纤毛细胞外氧感受器功能和机制研究
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作者 高玉海 漆欣筑 +3 位作者 周建 王昕 陈克明 马慧萍 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期618-624,共7页
目的:探索初级纤毛是否为PC12细胞的细胞外氧感受器。方法:通过小干扰RNA(siRNA)干扰细胞纤毛内转运蛋白88的表达抑制体外培养PC12细胞初级纤毛的发生;免疫荧光染色法观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子E2相关因子2(Nrf2)核转位和PC1... 目的:探索初级纤毛是否为PC12细胞的细胞外氧感受器。方法:通过小干扰RNA(siRNA)干扰细胞纤毛内转运蛋白88的表达抑制体外培养PC12细胞初级纤毛的发生;免疫荧光染色法观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、核因子E2相关因子2(Nrf2)核转位和PC12细胞初级纤毛生长情况;实时定量RT-PCR法检测HIF-1α、Nrf2、血管内皮生长因子(VECF)和超氧化物歧化酶(SOD)基因表达。结果:siRNA干扰组细胞的初级纤毛被抑制。与常氧对照组比较,缺氧对照组和阴性对照组细胞的HIF-1α和Nrf2发生了明显的核转位,细胞内HIF-1α、Nrf2、VEGF基因表达量增加,SOD表达量下降;siRNA干扰组细胞在缺氧状态下HIF-1α和Nrf2未发生核转位,细胞内HIF-1α、Nrf2、VEGF基因表达受到抑制,而SOD表达量升高。结论:PC12细胞的初级纤毛可能具有细胞外氧感受器的作用,可以感知细胞外环境中的缺氧和氧化应激状态,并通过一定途径将缺氧信号传导至细胞内,进而启动细胞抗缺氧机制。 展开更多
关键词 PC12细胞 纤毛 感受器 感觉 缺氧/病理生理学 动力传导 细胞 RNA 小分子干扰
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Hath1基因转染后大鼠耳蜗毛细胞前体细胞的扫描电镜观察 被引量:1
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作者 张媛 孙建和 +2 位作者 郭维 胡吟燕 翟所强 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2006年第5期309-312,共4页
目的探讨Hath1基因对大鼠耳蜗大上皮嵴(greaterepithelialridge,GER)细胞的诱导分化作用。方法取出生后第1天的大鼠耳蜗,利用机械分离和酶消化相结合的方法分离出纯的GER细胞,于含10%血清DMEM培基中进行培养。以腺病毒为载体对GER培养... 目的探讨Hath1基因对大鼠耳蜗大上皮嵴(greaterepithelialridge,GER)细胞的诱导分化作用。方法取出生后第1天的大鼠耳蜗,利用机械分离和酶消化相结合的方法分离出纯的GER细胞,于含10%血清DMEM培基中进行培养。以腺病毒为载体对GER培养物进行Hath1基因的转染,并对感染后10天的标本进行扫描电镜观察。结果扫描电镜观察显示GER细胞在含10%血清DMEM培基中呈片状贴壁生长特性,表现为典型的上皮样多角型外观。Hath1感染后10天的GER细胞培养物可见在细胞团的边缘出现了细丝状纤毛样结构,而无病毒感染对照组未见到该结构。结论GER细胞作为毛细胞前体细胞可以实现体外原代培养,在Hath1基因重表达情况下,部分细胞的表面可见不成熟的纤毛样结构,提示Hath1基因也许可以诱导离体培养下的纯的毛细胞前体细胞向毛细胞的初步分化。 展开更多
关键词 毛细胞 再生 显微镜检查 电子 扫描 纤毛
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中老年妇女阴道分泌物检查结果与分析 被引量:6
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作者 苏霞 《国际老年医学杂志》 2013年第1期20-21,共2页
目的:通过对中老年妇女阴道分泌物的检测,了解本地区中老年妇女阴道健康现状,探索其防治措施。方法:对2009~2011年我院4880例中老年妇女的阴道分泌物采用显微镜革兰氏染色镜检,观察清洁度、霉菌、线索细胞、滴虫和纤毛菌。结果:... 目的:通过对中老年妇女阴道分泌物的检测,了解本地区中老年妇女阴道健康现状,探索其防治措施。方法:对2009~2011年我院4880例中老年妇女的阴道分泌物采用显微镜革兰氏染色镜检,观察清洁度、霉菌、线索细胞、滴虫和纤毛菌。结果:清洁度在Ⅱ度最多,清洁度Ⅳ度时最少,检出霉菌420例(8.0%),线索细胞210例(4.3%),滴虫38例(0.08%),纤毛菌196例(4.0%),混合感染701例(14.4%)。结论:加强本地区中老年妇女卫生健康教育及预防与控制阴道炎感染,降低宫颈癌的发生。 展开更多
关键词 阴道分泌物 清洁度 霉菌 线索细胞 滴虫 纤毛菌
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初级纤毛在白藜芦醇诱导大鼠骨髓基质细胞分化为神经元样细胞中的作用 被引量:1
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作者 黄家贵 沈长波 +2 位作者 刘舒 徐兰 杨琴 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期775-778,863,共5页
目的:研究初级纤毛在白藜芦醇诱导大鼠骨髓基质细胞(MSCs)分化为神经元样细胞中的作用.方法:全骨髓贴壁法分离、培养、纯化MSCs.含15 μmol/L白藜芦醇的无血清DMEM/F12诱导MSCs分化.倒置显微镜下观察细胞形态,免疫印迹检测神经元特... 目的:研究初级纤毛在白藜芦醇诱导大鼠骨髓基质细胞(MSCs)分化为神经元样细胞中的作用.方法:全骨髓贴壁法分离、培养、纯化MSCs.含15 μmol/L白藜芦醇的无血清DMEM/F12诱导MSCs分化.倒置显微镜下观察细胞形态,免疫印迹检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达.免疫荧光法检测MSCs增殖情况.扫描电子显微镜检测MSCs表面初级纤毛,免疫荧光法检测初级纤毛蛋白(Ac-Tu)的表达.结果:白藜芦醇诱导后60%的细胞胞体收缩,立体感增强,类似神经元.免疫印迹显示MSCs及对照组细胞有NSE蛋白的轻度表达,诱导后NSE、MAP-2蛋白表达阳性,随着诱导时间延长,NSE、MAP-2的表达渐增强.经过24 h饥饿后,90%的MSCs处于生长静止状态.扫描电子显微镜及免疫荧光显示,处于生长静止期的MSCs具有初级纤毛,且白藜芦醇可诱导具有初级纤毛的MSCs分化为神经元样细胞.对照组则无明显变化.结论:白藜芦醇能诱导MSCs分化为神经元样细胞.在此过程中,初级纤毛可能发挥着重要作用. 展开更多
关键词 白藜芦醇 初级纤毛 骨髓基质细胞 神经元样细胞 细胞分化
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建立水合氯醛去除成骨细胞初级纤毛的细胞模型
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作者 马小妮 石文贵 +4 位作者 谢艳芳 马慧萍 葛宝丰 甄平 陈克明 《中国骨伤》 CAS 2015年第6期547-552,共6页
目的:建立水合氯醛去除成骨细胞初级纤毛的细胞模型,并观察去除成骨细胞初级纤毛对电磁场提高成骨细胞ALP染色和钙化结节染色的影响。方法:贴壁法分离培养3只出生3 d,体重6~9 g的雄性SD大鼠的乳鼠颅骨成骨细胞;待上述细胞生长至融合... 目的:建立水合氯醛去除成骨细胞初级纤毛的细胞模型,并观察去除成骨细胞初级纤毛对电磁场提高成骨细胞ALP染色和钙化结节染色的影响。方法:贴壁法分离培养3只出生3 d,体重6~9 g的雄性SD大鼠的乳鼠颅骨成骨细胞;待上述细胞生长至融合状态时传代培养并随机分成4组:不加水合氯醛组(对照组)、2 m M、4 m M和8 m M水合氯醛处理组;将上述4组细胞置于37℃、5%CO2的培养箱培养72 h,用激光共聚焦扫描显微镜观察初级纤毛形态,并用Image-Pro Plus 6.0软件分析成骨细胞初级纤毛发生率;筛选出能有效去除成骨细胞初级纤毛的水合氯醛浓度的细胞,并将其分为以下3组:正常对照组(control group,C),电磁场处理(electromagnetic fields,EMFs)组及电磁场处理+4 m M水合氯醛组。向上述3组细胞加入含10%FBS的DMEM培养液继续培养9 d,碱性磷酸酶组织化学染色观察ALP的形成;培养12 d,茜素红染色观察钙化结节的形成。结果:与对照组和2 m M水合氯醛组相比,4 m M水合氯醛能有效地去除成骨细胞初级纤毛的发生(P〈0.01);去除成骨细胞初级纤毛消弱了EMFs促进成骨细胞ALP和钙化结节的形成,具体表现在:与EMFs组相比,EMFs+水合氯醛组ALP和钙化结节的染色面积明显减少(P〈0.01)。结论:4 m M水合氯醛能有效去除成骨细胞的初级纤毛;初级纤毛部分参与了电磁场促进成骨细胞ALP和钙化结节的形成,为探讨电磁场促进成骨细胞成熟矿化的机理提供新思路。 展开更多
关键词 成骨细胞 纤毛 水合氯醛 细胞
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