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Effect and mechanism of adrenomedullin on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury
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作者 赵海红 《外科研究与新技术》 2011年第4期241-242,共2页
Objective To investigate the effect and mechanism of adrenomedullin ( AM ) on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury. Methods Thirty-two Wistar rats were random... Objective To investigate the effect and mechanism of adrenomedullin ( AM ) on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury. Methods Thirty-two Wistar rats were randomly divided into 4 groups: control group,IRI group, empty plasmid group and AM group. One week after re- 展开更多
关键词 cell Effect and mechanism of adrenomedullin on apoptosis of renal tubular epithelial cell in rats induced by renal ischemia reperfusion injury
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Chronic hepatitis B serum promotes apoptotic damage in human renal tubular cells 被引量:26
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作者 Cun-Liang Deng Xin-Wen song +3 位作者 Hai-Jun Liang Chen Feng Yun-Jian Sheng Ming-Yong Wang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第11期1752-1756,共5页
AIM: To investigate the effect of the serum of patients with chronic hepatitis B (CHB) on apoptosis of renal tubular epithelial cells in vitro and to study the role of hepatitis B virus (HBV) and transforming gro... AIM: To investigate the effect of the serum of patients with chronic hepatitis B (CHB) on apoptosis of renal tubular epithelial cells in vitro and to study the role of hepatitis B virus (HBV) and transforming growth factor-β1 (TGF-β1) in the pathogenesis of hepatitis B virus associated glomerulonephritis (HBV-GN). METHODS: The levels of serum TGF-β1 were measured by specific enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) and HBV DNA was tested by polymerase chain reaction (PCR) in 44 patients with CHB ,and 20 healthy persons as the control. The normal human kidney proximal tubular cell (HK-2) was cultured together with the sera of healthy persons, CHB patients with HBV-DNA negative(20 cases) and HBV-DNA positive (24 cases) for up to 72 h. Apoptosis and Fas expression of the HK-2 were detected by flow cytometer. RESULTS: The apoptosis rate and Fas expression of HK-2 cells were significantly higher in HBV DNA positive serum group 19.01±5.85% and 17.58±8.35%, HBV DNA negative serum group 8.12±2.80% and 6.96 ± 2.76% than those in control group 4.25±0.65% and 2.33 ± 1.09%, respectively (P 〈 0.01). The apoptosis rate and Fas expression of HK-2 in HBV DNA positive serum group was significantly higher than those in HBV DNA negative serum (P 〈 0.01). Apoptosis rate of HK-2 cells in HBV DNA positive serum group was positively correlated with the level of HBV-DNA (r = 0.657). The level of serum TGF-β1 in CHB group was 163.05 ± 91.35 μg/L, signifi- cantly higher as compared with 81.40 ± 40.75 μg/L in the control group (P 〈 0.01).CONCLUSION: The serum of patients with chronic hepatitis B promotes apoptotic damage in human renal tubular cells by triggering a pathway of Fas up-regulation. HBV and TGF-β1 may play important roles in the mechanism of hepatitis B virus associated glomerulonephritis. 展开更多
关键词 renal tubular epithelial cells HBV TGF-Β1 apoptosis
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肾小管HIF-1α/miR-23a通路在脓毒血症急性肾损伤中的作用机制
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作者 陈思宇 强立娟 +2 位作者 朱嘉兴 马世兰 陈占龙 《河北医药》 CAS 2024年第5期645-651,共7页
目的探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型。LPS处理的HK-... 目的探讨肾小管低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/MicroRNA-23a(miR-23a)通路在脓毒血症急性肾损伤(SA-AKI)中的作用及相关作用机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),采用脂多糖(LPS)处理HK-2细胞构建SA-AKI细胞模型。LPS处理的HK-2细胞分为LPS组、NC siRNA组、HIF-1αsiRNA组、anti-miR-NC组、anti-miR-23a组、HIF-1αsiRNA+miR-NC组、HIF-1αsiRNA+miR-23a组,以正常培养的HK-2细胞作为空白对照组(Control组)。采用qRT-PCR法检测细胞中HIF-1α、miR-23a基因表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA法检测细胞中炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]水平;Western blot法检测细胞中HIF-1α蛋白、NF-κB通路蛋白表达。结果与Control组比较,LPS组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05)。与LPS组比较,HIF-1αsiRNA组HK-2细胞中HIF-1α蛋白和mRNA表达水平、miR-23a mRNA表达水平均降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05)。与LPS组比较,anti-miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低(P<0.05)。与HIF-1αsiRNA组比较,HIF-1αsiRNA+miR-23a组HK-2细胞中miR-23a mRNA表达水平升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、细胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高(P<0.05)。与Control组比较,LPS组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05)。与LPS组比较,HIF-1αsiRNA组和anti-miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均降低(P<0.05)。与HIF-1αsiRNA组比较,HIF-1αsiRNA+miR-23a组HK-2细胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均升高(P<0.05)。结论肾小管HIF-1α通过调控miR-23a表达调节NF-κB信号通路,从而参与LPS诱导的肾小管上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 脓毒血症急性肾损伤 肾小管上皮细胞 肾小管低氧诱导因子-1α miR-23a 炎性反应 细胞凋亡 NF-ΚB信号通路
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银杏内酯B调控miR-155-5p对高糖诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 秦美灵 吴春丽 +3 位作者 陈延玲 廉波 尚海玉 韩英 《川北医学院学报》 CAS 2024年第2期150-155,共6页
目的:探讨银杏内酯B(GB)对高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞凋亡及炎症因子的影响及其可能作用机制。方法:采用HG诱导人肾小管上皮细胞HK-2建立细胞损伤模型,不同剂量的GB处理HK-2细胞,并将anti-miR-NC、anti-miR-155-5p分别转染至HK-2细... 目的:探讨银杏内酯B(GB)对高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞凋亡及炎症因子的影响及其可能作用机制。方法:采用HG诱导人肾小管上皮细胞HK-2建立细胞损伤模型,不同剂量的GB处理HK-2细胞,并将anti-miR-NC、anti-miR-155-5p分别转染至HK-2细胞后加入25 mmol/L葡萄糖处理24 h,将miR-NC、miR-155-5p mimics分别转染至HK-2细胞后加入100μmol/L GB与25 mmol/L葡萄糖共同处理24 h;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA法检测炎症因子IL-6、TNF-α的水平;RT-qPCR法检测miR-155-5p的表达量;Western blot检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤(Bcl-2)蛋白表达水平。结果:GB处理后,高糖诱导的HK-2细胞凋亡率、IL-6、TNF-α水平、miR-155-5p表达量和Bax蛋白表达水平均降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染anti-miR-155-5p后,高糖诱导的HK-2细胞凋亡率、IL-6、TNF-α水平、miR-155-5p表达量和Bax蛋白表达水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05);转染miR-155-5p mimics可减弱GB对HG诱导的HK-2细胞凋亡及炎症因子表达的影响。结论:GB可通过抑制细胞凋亡及炎症因子表达来减轻HG诱导的肾小管上皮细胞损伤,其作用机制可能与抑制miR-155-5p表达有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 人肾小管上皮细胞 银杏内酯B miR-155-5p 细胞凋亡 炎症
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远隔缺血预处理分离液对人肾小管上皮细胞缺氧性损伤的保护作用
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作者 戴文俊 裴汉军 《包头医学院学报》 CAS 2024年第2期87-92,共6页
目的:研究远隔缺血预处理(RIPC)分离液对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及机制。方法:将HK-2细胞分为时间对照组、H/R、RIPC处理组、自噬干预组。时间对照组细胞在正常条件下培养,RIPC组细胞使用RIPC分离液预处理,自... 目的:研究远隔缺血预处理(RIPC)分离液对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及机制。方法:将HK-2细胞分为时间对照组、H/R、RIPC处理组、自噬干预组。时间对照组细胞在正常条件下培养,RIPC组细胞使用RIPC分离液预处理,自噬干预组细胞在RIPC处理基础上,加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3MA),后三组细胞使用三气培养箱进行H/R构建损伤模型。模型成功后使用光学显微镜观察各组细胞状态,应用Western blot观察LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白、Beclin1蛋白的表达水平。结果:镜下示RIPC分离液可明显减轻H/R对HK-2细胞的损伤,加入自噬抑制剂,RIPC分离液对HK-2细胞H/R损伤的保护作用被阻断。Western blot结果显示,RIPC分离液可使HK-2细胞线粒体中的自噬特异性蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达水平增高。Real-time PCR结果显示,与H/R组比,RIPC组LC3及Beclin1的mRNA表达量明显升高;加入自噬抑制剂,HK-2细胞线粒体中的自噬特异性蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1表达降低,LC3及Beclin1的mRNA表达量同时也明显降低。结论:RIPC分离液对HK-2细胞H/R后损伤具有保护作用,作用机制可能与线粒体自噬相关。 展开更多
关键词 远隔缺血预处理分离液 人肾小管上皮细胞 缺氧/复氧 线粒体自噬
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1-磷酸鞘氨醇受体3对脂多糖处理大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响
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作者 吴晋 应静 《现代实用医学》 2024年第2期166-169,共4页
目的探讨1-磷酸鞘氨醇受体3(S1PR3)对脂多糖(LPS)处理大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法将培养好的大鼠肾小管细胞(NRK-52E)分为对照组、LPS组、S1PR3激动剂+LPS组。对照组不做处理;LPS组予LPS(20μg/ml)刺激12h后做离心收集待检;S1PR... 目的探讨1-磷酸鞘氨醇受体3(S1PR3)对脂多糖(LPS)处理大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法将培养好的大鼠肾小管细胞(NRK-52E)分为对照组、LPS组、S1PR3激动剂+LPS组。对照组不做处理;LPS组予LPS(20μg/ml)刺激12h后做离心收集待检;S1PR3激动剂+LPS组先用S1PR3激动剂KRX-725预处理2 h后再予LPS(20μg/ml)刺激12 h后做离心收集待检。流式细胞术检测各组细胞凋亡率、钙离子表达及caspase-3表达的差异,ELISA试剂盒检测Calpain 1、Calpain 2的表达差异,Western Blot检测各组细胞中S1PR3的表达差异。结果LPS处理后脓毒症NRK-52E细胞模型成功建立,相比于对照组,LPS组和S1PR3激动剂+LPS组的细胞凋亡率、S1PR3表达、钙离子浓度、Calpain 1与Calpain2的表达、caspase-3表达均显著增加(均P<0.05);与LPS组相比,S1PR3激动剂+LPS组的细胞凋亡率、钙离子浓度、Calpain 1与Calpain2的表达、caspase-3表达均显著增加(均P<0.05),S1PR3表达显著增加(P<0.05)。结论S1PR3的激活能够增加肾小管上皮细胞内的钙离子浓度,从而激活caspase-3细胞凋亡信号通路,导致脓毒症肾小管上皮细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 脓毒症 1-磷酸鞘氨醇受体3 肾小管上皮细胞 凋亡
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雷公藤多苷对高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡及CXCL10/CXCR3轴的影响 被引量:5
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作者 李明霞 乔海霞 +3 位作者 王晓玲 贾丽媛 胡利梅 任卫东 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第2期139-143,共5页
目的 探讨雷公藤多苷(TG)对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2凋亡及CXC趋化因子配体10(CXCL10)/CXC趋化因子受体3(CXCR3)轴的影响。方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并分为对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖培养基)、高糖组(含25 mmol/L葡萄糖... 目的 探讨雷公藤多苷(TG)对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2凋亡及CXC趋化因子配体10(CXCL10)/CXC趋化因子受体3(CXCR3)轴的影响。方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并分为对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖培养基)、高糖组(含25 mmol/L葡萄糖培养基)和12.5、25、50 mg/L TG组(分别用12.5、25、50 mg/L的TG和25 mmol/L葡萄糖培养基)。四甲基偶氮唑盐比色法检测HK-2细胞活力;流式细胞术检测HK-2细胞凋亡情况;2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯法检测HK-2细胞活性氧(ROS)水平;黄嘌呤氧化酶法检测HK-2细胞超氧化物歧化酶(SOD)水平;酶联免疫吸附试验检测HK-2细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;蛋白免疫印迹法检测HK-2细胞凋亡蛋白[胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9]以及CXCL10、CXCR3蛋白表达。结果 与对照组比较,高糖组HK-2细胞活力、SOD水平显著降低,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达升高(P<0.05);与高糖组比较,12.5、25、50 mg/L TG组HK-2细胞活力、SOD水平升高,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达降低,且高剂量效果更好(P<0.05)。结论 TG可抑制高糖诱导的HK-2细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,其机制可能与抑制CXCL10/CXCR3轴有关。 展开更多
关键词 雷公藤 趋化因子CXCL10 受体 CXCR3 细胞凋亡 氧化性应激 雷公藤多苷 高糖 人肾小管上皮细胞HK-2
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地黄多糖上调miR-216a表达对缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 其其格 夏丽华 任睿 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1466-1472,1576,共8页
目的探讨地黄多糖对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响及可能机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,用不同剂量(10、20、40μg·mL^(-1))地黄多糖干预HK-2细胞24 h后,建立H/R模型(缺氧6 h,复氧12 h)... 目的探讨地黄多糖对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响及可能机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,用不同剂量(10、20、40μg·mL^(-1))地黄多糖干预HK-2细胞24 h后,建立H/R模型(缺氧6 h,复氧12 h),试剂盒检测细胞中MDA含量及GSH-PX和SOD活性,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达,qRT-PCR检测细胞中miR-216a表达。转染miR-216a模拟物或抑制剂至HK-2细胞后,建立H/R模型,上述相同方法检测细胞氧化应激水平和凋亡情况。结果与H/R组比较,地黄多糖降低H/R诱导的HK-2细胞中MDA含量、凋亡率、蛋白(cleaved-caspase3、cleaved-caspase9)表达(P<0.05),而提高GSH-PX和SOD活性(P<0.05)。同时,地黄多糖促进了H/R诱导的HK-2细胞中miR-216a的表达(P<0.05)。上调miR-216a降低H/R诱导的HK-2细胞中MDA含量、凋亡率、蛋白(cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9)表达(P<0.05),而提高GSH-PX和SOD活性(P<0.05)。下调miR-216a逆转地黄多糖对H/R诱导的HK-2细胞氧化应激和凋亡的影响。结论地黄多糖可能通过上调miR-216a抑制H/R诱导的HK-2细胞氧化应激和凋亡。 展开更多
关键词 地黄多糖 肾小管上皮细胞 miR-216a 氧化应激 凋亡
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姜黄素对高糖环境下大鼠肾小管上皮细胞凋亡影响
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作者 李钰 包佩玲 +3 位作者 谢赛 虞典元 李丹 冯爱桥 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第13期1795-1799,共5页
目的 探讨姜黄素对高糖环境下大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法 取对数生长期的大鼠肾小管上皮细胞,实验分为4组:对照组培养基中加入5.5 mmol/L D-葡萄糖;高糖组培养基中加入30 mmol/L D-葡萄糖;姜黄素低剂量组培养基中加入30 mmol/L... 目的 探讨姜黄素对高糖环境下大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法 取对数生长期的大鼠肾小管上皮细胞,实验分为4组:对照组培养基中加入5.5 mmol/L D-葡萄糖;高糖组培养基中加入30 mmol/L D-葡萄糖;姜黄素低剂量组培养基中加入30 mmol/L D-葡萄糖和5μmol/L姜黄素;姜黄素高剂量组培养基中加入30 mmol/L D-葡萄糖和10μmol/L姜黄素。应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot和实时荧光定量PCR法检测细胞中Bax、Bcl-2蛋白及mRNA表达情况。结果 与对照组比较,高糖组肾小管上皮细胞凋亡率明显增高(P<0.05);肾小管上皮细胞中Bax蛋白及mRNA相对表达量均明显增高(P均<0.05),Bcl-2蛋白及mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05)。与高糖组比较,姜黄素低、高剂量组细胞凋亡率均明显降低(P均<0.05),肾小管上皮细胞中Bax蛋白及mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05),Bcl-2蛋白及mRNA相对表达量均明显增高(P均<0.05),且姜黄素高剂量组各指标改变较姜黄素低剂量组更明显(P均<0.05)。结论 姜黄素可以抑制高糖环境下肾小管上皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 姜黄素 肾小管上皮细胞 凋亡 高糖
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杨桃根DMDD对高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2内质网应激IRE1α通路及炎症反应的抑制作用 被引量:2
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作者 王誉湘 谢静晓 +6 位作者 张晓萍 庞川皓 王璐 陈秋燕 陈林倩 黄仁彬 韦晓洁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1270-1275,共6页
目的研究杨桃根活性成分2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(DMDD)对高糖诱导肾小管上皮细胞HK-2内质网应激及炎症反应的抑制作用。方法体外培养HK-2细胞,并分为正常组、高糖组、内质网应激抑制剂4-PBA组(5 mmoL·L^(-1))和... 目的研究杨桃根活性成分2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(DMDD)对高糖诱导肾小管上皮细胞HK-2内质网应激及炎症反应的抑制作用。方法体外培养HK-2细胞,并分为正常组、高糖组、内质网应激抑制剂4-PBA组(5 mmoL·L^(-1))和DMDD高、中、低浓度组(8、4、2μmol·L^(-1))。各组细胞培养结束后,采用CCK-8法检测细胞存活率;ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-6的水平;AO/EB染色法检测细胞凋亡;Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平、内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP的表达水平以及IRE1α通路相关蛋白(IRE1α、JNK)的磷酸化水平。结果与高糖组比较,DMDD各浓度组细胞存活率明显升高;TNF-α、IL-6水平,Bax/Bcl-2、GRP78、CHOP蛋白表达水平和IRE1α、JNK蛋白磷酸化水平均明显降低,细胞中橙红色荧光明显减少。结论DMDD可能部分通过抑制内质网应激及IRE1α通路相关蛋白的表达,减少炎症反应,达到HK-2细胞的保护作用。 展开更多
关键词 2-十二烷基-6-甲氧基-2 5-二烯-1 4-环己二酮 糖尿病肾病 肾小管上皮细胞 内质网应激 凋亡 IRE1α通路
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佛手苷内酯下调miR-503表达抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞炎性因子表达和细胞凋亡
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作者 杨玉玺 李雪梅 +2 位作者 吉黎 黄俊 尉冬英 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第2期148-153,共6页
目的考察佛手苷内酯(bergapten,BG)是否通过下调miR-503表达抑制高糖(high glucose,HG)诱导的肾小管上皮细胞炎性因子表达和细胞凋亡。方法将肾小管上皮细胞分为正常对照(Con)组、高糖(HG)组、高糖+BG低、中、高浓度(HG+BG-L、-M、-H)组... 目的考察佛手苷内酯(bergapten,BG)是否通过下调miR-503表达抑制高糖(high glucose,HG)诱导的肾小管上皮细胞炎性因子表达和细胞凋亡。方法将肾小管上皮细胞分为正常对照(Con)组、高糖(HG)组、高糖+BG低、中、高浓度(HG+BG-L、-M、-H)组、HG+inhibitor-NC组、HG+miR-503 inhibitor组、HG+BG+miR-NC组、HG+BG+miR-503组。利用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)表达,流式细胞术测定细胞凋亡,Western印迹测定凋亡蛋白裂解天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)3、cleaved-caspase 9表达,qRTPCR测定miR-503表达。结果HG组肾小管上皮细胞的TNF-α、IL-6表达、凋亡率、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9蛋白、miR-503表达量均比Con组增加(P_(均)<0.05)。HG+BG-L组、HG+BG-M组、HG+BG-H组肾小管上皮细胞的TNF-α、IL-6表达、凋亡率、cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9蛋白、miR-503表达量均比HG组减少(P_(均)<0.05),且BG的抑制作用呈现浓度依赖性。干扰miR-503表达后,HG+miR-503 inhibitor组肾小管上皮细胞的miR-503表达量、TNF-α、IL-6表达、凋亡率、cleaved-caspase 3蛋白、cleaved-caspase 9蛋白均比HG+inhibitor-NC组降低(P_(均)<0.05)。HG+BG+miR-503组肾小管上皮细胞的miR-503表达量、TNF-α、IL-6表达、凋亡率、cleaved-caspase 3蛋白、cleaved-caspase 9蛋白表达量均高于HG+BG+miR-NC组(P_(均)<0.05)。结论BG通过下调miR-503的表达,以浓度依赖方式抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞炎性因子表达和细胞凋亡。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 佛手苷内酯 肾小管上皮细胞 miR-503 炎性因子 细胞凋亡
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白藜芦醇对缺氧复氧致肾小管上皮细胞内质网应激和炎性损伤的影响
12
作者 朱冬菊 吴祥 祝司霞 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第5期42-44,I0016,共4页
目的 探讨白藜芦醇对缺氧复氧致肾小管上皮细胞内质网应激和炎性损伤的影响。方法 将HK-2细胞分为对照组、模型组、白藜芦醇组,其中对照组放于37℃、95%空气及5%CO_(2)的培养箱中培养;模型组按照缺氧复氧处理方法培养;白藜芦醇组在缺氧... 目的 探讨白藜芦醇对缺氧复氧致肾小管上皮细胞内质网应激和炎性损伤的影响。方法 将HK-2细胞分为对照组、模型组、白藜芦醇组,其中对照组放于37℃、95%空气及5%CO_(2)的培养箱中培养;模型组按照缺氧复氧处理方法培养;白藜芦醇组在缺氧复氧处理时换成含50 mg/L白藜芦醇的培养液,按照缺氧复氧处理方法培养。采用DCFH-DA检测细胞活性氧水平;采用流式细胞仪测定细胞凋亡率;采用Western blot法测定内质网应激蛋白糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达;采用ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果 模型组细胞活性氧表达明显增强,而白藜芦醇组细胞活性氧表达降低。模型组和白藜芦醇组细胞凋亡率高于对照组,而白藜芦醇组细胞凋亡率低于模型组(P<0.05)。模型组和白藜芦醇组GRP78和CHOP表达高于对照组,而白藜芦醇组GRP78和CHOP表达低于模型组(P<0.05)。模型组和白藜芦醇组TNF-α和IL-1β水平高于对照组,而白藜芦醇组TNF-α和IL-1β水平低于模型组(P<0.05)。结论 白藜芦醇可减轻缺氧复氧致肾小管上皮细胞凋亡,降低缺氧复氧致肾小管上皮细胞内质网应激和炎症因子水平,减轻炎性损伤。 展开更多
关键词 白藜芦醇 缺氧复氧 肾小管上皮细胞 内质网应激 炎性损伤
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HIF-2α通过调控NEK1表达减轻肾小管上皮细胞缺氧损伤的研究
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作者 陈芳 刘红 +1 位作者 胡韬韬 陈丹 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第3期299-306,共8页
目的探讨缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在肾小管上皮细胞缺氧损伤中的作用及机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),以2.5μmol/L抗霉素A作用24 h构建缺氧HK-2细胞模型,采用qRT-PCR法和Western blot法检测HIF-2α在正常HK-2细胞... 目的探讨缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在肾小管上皮细胞缺氧损伤中的作用及机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),以2.5μmol/L抗霉素A作用24 h构建缺氧HK-2细胞模型,采用qRT-PCR法和Western blot法检测HIF-2α在正常HK-2细胞和缺氧HK-2细胞中的表达;将HIF-2α干扰序列(siRNA-HIF-2α)及其阴性对照(siRNA-NC)、NIMA相关激酶-1(NEK1)过表达质粒(pcDNA3.0-NEK1)及空载体质粒(pcDNA3.0-NC)转染至缺氧HK-2细胞后,采用CCK-8法检测缺氧HK-2细胞增殖活性,Annexin V-FITC/PI双染法检测缺氧HK-2细胞凋亡率,qRT-PCR法和Western blot法检测缺氧HK-2细胞中NEK1表达。结果与正常HK-2细胞比较,缺氧HK-2细胞中HIF-2αmRNA和蛋白表达量均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与Control组比较,Hypoxia组细胞增殖活性降低、细胞凋亡率升高、细胞中NEK1 mRNA和蛋白表达量均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与Hypoxia组比较,si-NC组细胞增殖活性、细胞凋亡率、细胞中NEK1 mRNA和蛋白表达量均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);与si-NC组比较,si-HIF-2α组细胞增殖活性降低、细胞凋亡率升高、细胞中NEK1 mRNA和蛋白表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与si-HIF-2α组比较,si-HIF-2α+pcDNA3.0-NC组细胞增殖活性、细胞凋亡率均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);与si-HIF-2α+pcDNA3.0-NC组细胞比较,si-HIF-2α+pcDNA3.0-NEK1组细胞增殖活性升高、细胞凋亡率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HIF-2α可能通过调控NEK1表达促进缺氧HK-2细胞增殖、抑制细胞凋亡,从而减轻HK-2细胞缺氧损伤。 展开更多
关键词 HIF-2α 肾小管上皮细胞 NEK1 缺氧损伤 细胞增殖 细胞凋亡
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人脐带间充质干细胞源外泌体减缓衣霉素诱导的肾小管上皮细胞凋亡的研究
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作者 雷艳 詹世淮 +4 位作者 施晓华 杨兰 王佳伟 王水良 张胜行 《新医学》 CAS 2023年第6期397-402,共6页
目的研究人脐带间充质干细胞源外泌体(hUC-MSC-Exo)对衣霉素诱导的肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的作用。方法利用衣霉素诱导HKC产生内质网应激,CCK-8法检测细胞增殖活性;蛋白免疫印迹法检测内质网应激相关分子抗体葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、... 目的研究人脐带间充质干细胞源外泌体(hUC-MSC-Exo)对衣霉素诱导的肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的作用。方法利用衣霉素诱导HKC产生内质网应激,CCK-8法检测细胞增殖活性;蛋白免疫印迹法检测内质网应激相关分子抗体葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、GRP94和C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达,流式细胞术检测细胞凋亡;hUC-MSC-Exo经分离与流式细胞术表面标志物鉴定后,检测不同浓度外泌体(0、40、60、80、100、150、200μg/mL)对细胞活性的影响;resazurin法与流式细胞术分别检测外泌体与衣霉素共处理组的细胞增殖活性及细胞凋亡水平。结果1、2、4μg/mL衣霉素均能抑制HKC的细胞增殖活性并呈浓度依赖性;不同浓度衣霉素均可诱导HKC细胞内质网应激,并明显诱导细胞凋亡。100、150、200μg/mL外泌体能增强细胞增殖活性;与衣霉素2μg/mL组相比,衣霉素2μg/mL+外泌体150μg/mL组细胞增殖活性明显增强;此外,衣霉素2μg/mL组细胞凋亡率为(14.16±1.58)%,衣霉素2μg/mL+外泌体150μg/mL组细胞凋亡率为(8.18±0.58)%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论间充质干细胞源外泌体能明显减缓衣霉素诱导的HKC细胞凋亡。 展开更多
关键词 内质网应激 间充质干细胞源外泌体 细胞凋亡 衣霉素 肾小管上皮细胞
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人近曲肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤模型的建立 被引量:16
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作者 杜逸亭 董文斌 +1 位作者 王明勇 航永伦 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期619-622,F0005,共5页
目的建立一种新的人近曲肾小管上皮细胞HK2缺氧/复氧损伤模型。方法本实验使用人近曲HK2。实验分为缺氧4、12和24h及缺氧24h后复氧4、12和24h组,每个实验组均设立空白对照组。采用经高温灭菌的液体石蜡覆盖法造成缺氧环境;苔盼兰摄取法... 目的建立一种新的人近曲肾小管上皮细胞HK2缺氧/复氧损伤模型。方法本实验使用人近曲HK2。实验分为缺氧4、12和24h及缺氧24h后复氧4、12和24h组,每个实验组均设立空白对照组。采用经高温灭菌的液体石蜡覆盖法造成缺氧环境;苔盼兰摄取法进行细胞计数及检测细胞存活率,生化法检测培养基中的乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果人肾小管上皮细胞经过缺氧/复氧处理后,苔盼兰摄取率显著提高,细胞存活率显著下降,LDH含量升高。说明缺血再灌注损伤导致了细胞膜的完整性破坏,甚至细胞发生了不可逆转的损伤。结论采用液体石蜡覆盖法建立人近曲肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤模型,较其他制模方法操作简单、易行、可靠。 展开更多
关键词 人近曲肾小管 上皮细胞 缺氧/复氧损伤 动物模型 液体石蜡
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冬虫夏草提取液对肾小管上皮细胞Klotho表达和凋亡的影响 被引量:10
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作者 唐荣 周巧玲 +4 位作者 舒金勇 汤天凤 敖翔 彭卫生 张义德 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期300-307,共8页
目的:研究冬虫夏草(cordyceps sinensis,CS)提取液及氯沙坦(losartan,Los)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激后的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中Klotho(Kl),P53,P21表达和凋亡的影响,探讨CS对AngⅡ诱导肾小管上皮细胞凋亡影响的机制。方法:CS(0,5... 目的:研究冬虫夏草(cordyceps sinensis,CS)提取液及氯沙坦(losartan,Los)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激后的大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中Klotho(Kl),P53,P21表达和凋亡的影响,探讨CS对AngⅡ诱导肾小管上皮细胞凋亡影响的机制。方法:CS(0,5,10,20,40,80mg/L)单独或与AngⅡ(1×10-8mol/L)共同培养24h。确定CS的最佳干预浓度后设立对照组,AngⅡ(1×10-8mol/L)组,AngⅡ(1×10-8mol/L)+CS(40mg/L)组,AngⅡ(1×10-8mol/L)+Los(1×10-5mol/L)组和AngⅡ(1×10-8mol/L)+CS(40mg/L)+Los(1×10-5mol/L)组,培养24h后进行实验。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的增殖;分别用RT-PCR和Western印迹法检测Kl,P53和P21mRNA及蛋白的表达;分光光度法检测caspase-3的活性;AnnexinV-FITC双染法及流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:一定浓度范围的CS单独作用可促进NRK-52E细胞增殖,还能拮抗AngⅡ对其增殖的抑制(P<0.01或P<0.05);AngⅡ可下调KlmRNA及蛋白表达,上调P53和P21mRNA及蛋白表达,增加caspase-3活性和细胞凋亡率(均P<0.01);加入CS或/和Los后,KlmRNA及蛋白表达明显上调,P53和P21mRNA及蛋白表达下调,caspase-3活性和细胞凋亡率明显降低(均P<0.05),各药物干预组间的作用差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CS可逆转AngⅡ诱导的Kl低表达,并抑制P53及P21的表达,从而抑制AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞凋亡,可能是其对高血压肾损害起保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 冬虫夏草 KLOTHO 血管紧张素Ⅱ 肾小管上皮细胞 凋亡
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氧化应激和P53参与波动高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡 被引量:13
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作者 李素娟 李剑敏 +4 位作者 汪洋 王万铁 邱晓晓 许益笑 金可可 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2302-2306,共5页
目的:探讨波动性高糖引起的肾小管上皮细胞凋亡的机制。方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),给予稳定高糖或波动高糖干预,并使用抗氧化剂和P53特异性抑制剂验证氧化应激和P53在波动高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用;此外,SD大鼠... 目的:探讨波动性高糖引起的肾小管上皮细胞凋亡的机制。方法:体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),给予稳定高糖或波动高糖干预,并使用抗氧化剂和P53特异性抑制剂验证氧化应激和P53在波动高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡中的作用;此外,SD大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病稳定高血糖组(B)和糖尿病波动高血糖组(C)。采用链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg腹腔注射诱发糖尿病,血糖波动组每天定时腹腔注射速效胰岛素,并错时给予葡萄糖,造成一天中血糖浓度大幅波动模型。采用比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组化法和Western blotting检测NADPH氧化酶4(Nox4)和P53蛋白表达,流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)检测肾脏细胞凋亡。结果:(1)与稳定高糖比较,波动高糖引起更加明显的HK-2细胞凋亡,P53蛋白表达明显上调,同时培养上清液中MDA含量增加和SOD活性下降,抗氧化剂和P53抑制剂可明显抑制磷酸化P53蛋白表达和细胞凋亡。(2)在体动物实验制模12周后,与B组比较,C组肾组织Nox4表达明显增加,肾小管磷酸化P53蛋白表达上调,细胞凋亡数增加。结论:氧化应激和P53参与波动性高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 氧化性应激 P53 血糖波动 细胞凋亡 肾小管上皮细胞
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JNK在血糖波动的糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡中的作用 被引量:8
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作者 郝卯林 戴雍月 +3 位作者 倪世容 汪大望 李素娟 金可可 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期309-312,388,共4页
目的:探讨血糖波动的糖尿病大鼠发生肾小管上皮细胞凋亡的信号转导机制。方法:健康SD大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病稳定高血糖组(B)和糖尿病波动高血糖组(C),采用链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg腹腔注射诱发糖尿病,血糖波动组每天定时腹... 目的:探讨血糖波动的糖尿病大鼠发生肾小管上皮细胞凋亡的信号转导机制。方法:健康SD大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病稳定高血糖组(B)和糖尿病波动高血糖组(C),采用链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg腹腔注射诱发糖尿病,血糖波动组每天定时腹腔注射速效胰岛素,并错时给予葡萄糖,造成一天中血糖浓度大幅度波动模型。制模12周后,采用比色法检测肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,免疫组化法和Western blot检测肾脏Nox4和JNK蛋白表达,原位缺口末端标记法(TUNEL)检测肾脏细胞凋亡。结果:与A组比较,B组和C组肾组织MDA含量增加、SOD活性下降,肾小管上皮细胞Nox4表达增加,肾小管磷酸化JNK(P-JNK)蛋白表达上调,细胞凋亡率明显增加,且C组的以上变化均较B组更加明显(P<0.05,P<0.01)。结论:波动性高血糖较稳定性高血糖更易促进糖尿病肾小管上皮细胞凋亡,其机制与JNK信号转导通路激活有关。 展开更多
关键词 JNK 血糖波动 凋亡 肾小管上皮细胞
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庆大霉素诱导肾小管上皮细胞凋亡及细胞周期调节蛋白表达 被引量:3
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作者 傅鹏 袁伟杰 +2 位作者 崔若兰 许静 于光 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1312-1315,共4页
目的:观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用;研究在细胞凋亡过程中细胞周期调节蛋白cy-clin E、CDK_2和p27^(Kipl)蛋白表达的改变,并探讨细胞凋亡与细胞周期调节蛋白表达之间的关系。方法:0.2~3.2 mg/ml的庆大霉素作... 目的:观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用;研究在细胞凋亡过程中细胞周期调节蛋白cy-clin E、CDK_2和p27^(Kipl)蛋白表达的改变,并探讨细胞凋亡与细胞周期调节蛋白表达之间的关系。方法:0.2~3.2 mg/ml的庆大霉素作用于体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株(LLC-PK1细胞)24~96 h,MTT法测定庆大霉素对细胞增殖的抑制率,琼脂糖凝胶电泳法观察凋亡细胞DNA条带,流式细胞术测定细胞凋亡率(AI)和细胞增殖动力学,Western印迹分析检测培养96 h时细胞内cyclin E、CDK_2和p27^(Kipl)的蛋白表达。结果:庆大霉素对LLC-PK1细胞增殖有抑制作用,庆大霉素具诱导细胞凋亡的作用,AI呈药物浓度和作用时间依赖性;庆大霉素致细胞周期停滞于G_1期。随着庆大霉素浓度的增加,细胞内cy-clin E和 CDK_2蛋白表达逐渐下调,而p27^(Kipl)蛋白表达则逐渐上调。结论:庆大霉素诱导的LLC-PK1细胞凋亡与细胞周期调节蛋白cyclin E和 CDK_2表达下调以及p27^(Kipl)表达上调有关。 展开更多
关键词 庆大霉素 肾小管上皮细胞 细胞周期调节蛋白 细胞凋亡 测定 肾毒性
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银杏叶提取物抗肿瘤坏死因子-α诱导的人肾小管上皮细胞凋亡及机制 被引量:7
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作者 王琳 徐西振 +4 位作者 凃玲 赵刚 郑常龙 吴蕊 姜美华 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期181-184,280,共5页
目的研究银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba,EGB)抵抗肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人肾小管上皮细胞凋亡及其作用机制。方法将人肾小管上皮细胞分成4组:对照组,TNF-α组,EGB+TNF-α组,EGB... 目的研究银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba,EGB)抵抗肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导的人肾小管上皮细胞凋亡及其作用机制。方法将人肾小管上皮细胞分成4组:对照组,TNF-α组,EGB+TNF-α组,EGB组,各组细胞培养至80%~90%汇合时加入相应药物干预。采用MTT法检测TNF-α对细胞的毒性作用,通过细胞形态学检测(AO/EB染色)和流式细胞仪计数测定细胞凋亡发生情况,Western blot法测定细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果TNF-α对人肾小管上皮细胞的毒性作用呈剂量和时间依赖性;TNF-α(10μg/ml)可显著诱导人肾小管上皮细胞凋亡,而EGB(50mg/ml)可明显抑制它的作用,同时Western blot测定显示EGB可显著上调Bcl-2的表达而下调Bax的表达。结论EGB可以显著抑制TNF-α诱导的人肾小管上皮细胞凋亡,此作用可能与其上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达和下调促凋亡蛋白Bax的表达有关。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 肿瘤坏死因子-Α 肾小管上皮细胞 细胞凋亡
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