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Prognostic Impact of Cell Division Cycle Associated 2 Expression on Pancreatic Ductal Adenocarcinoma 被引量:2
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作者 Meng-yi Wang Zhe-yu Niu +3 位作者 Xiang-Gao Li Zhou Quan Liao Yu-pei Zhao 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2016年第3期149-154,共6页
Objective To examine the expression of cell division cycle associated 2(CDCA 2) in pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC) and investigate its role in prognosis of PDAC patients.Methods This retrospective study include... Objective To examine the expression of cell division cycle associated 2(CDCA 2) in pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC) and investigate its role in prognosis of PDAC patients.Methods This retrospective study included 155 PDAC patients who underwent surgical treatment and complete post-operative follow-up.Clinicopathologic data were collected through clinical database.Tissue microarray was constructed and immunohistochemistry was performed to detect CDCA2 expression in the PDAC tumor tissues and adjacent non-tumor tissues.Clinicopathological characteristics between high and low CDCA2 expression were compared.Correlation of CDCA2 expressions with patients' survival was analyzed using Kaplan-Meier method and Cox regression analysis.Results Expression of CDCA2 in PDAC cells was significantly higher than that in adjacent non-tumor tissues(U=4056.5,P<0.001).Univariate analysis showed that CDCA2 expression [hazard ratio(HR)=1.574,95% confidence interval(CI)=1.014-2.443,P=0.043] and node metastasis(HR=1.704,95%CI=1.183-2.454,P=0.004) were significantly associated with prognosis.Cox regression analysis showed CDCA2 expression was not an independent prognostic risk factor(HR=1.418,95%CI=0.897-2.242,P=0.135) for PDCA patients.Stratification survival analysis demonstrated CDCA2 expression as an independent prognostic risk factor in male patients(HR=2.554,95%CI=1.446-4.511,P=0.003) or in non-perineural invasion patients(HR=2.290,95%CI=1.146-4.577,P=0.012).Conclusions CDCA2 is highly expressed in PDAC tumor tissue.Although CDCA2 is not an independent prognostic risk factor for PDAC patients,it might be used to help predict prognosis of male or non-perineural invasion patients of PDAC. 展开更多
关键词 细胞分裂周期 预后判断 胰腺癌 相关蛋白 导管 免疫组织化学方法 危险因素 临床资料
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Expression of p27Kip1, A Cell Cycle Repressor Protein with Dual Roles for Both Cancer Prevention and Promotion, Is Regulated Primarily at the Level of Unusual p27Kip1 mRNA—A Short Concept Proposal 被引量:2
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作者 Isao Eto 《American Journal of Molecular Biology》 2018年第3期186-193,共8页
The p27Kip1 is a cell cycle repressor protein that regulates primarily the cell cycle transition from G1 to S phase and hence the DNA replication is in the S phase and cell division in the M phase. Expression of p27Ki... The p27Kip1 is a cell cycle repressor protein that regulates primarily the cell cycle transition from G1 to S phase and hence the DNA replication is in the S phase and cell division in the M phase. Expression of p27Kip1 protein has dual roles for both cancer prevention and promotion. For example, numerous nutritional and chemopreventive anti-cancer agents specifically increase the expression of p27Kip1 protein without directly affecting the expression of any other cell cycle regulatory proteins. On the other hand, pro-cancer agents (like glucose, insulin and other growth factors frequently seen in obesity and/or diabetes) specifically decrease the expression of p27Kip1 protein without directly affecting the expression of any other cell cycle regulatory proteins. Unlike expression of any other cell cycle regulatory proteins, expression of p27Kip1 protein is very unusual. The mRNA of p27Kip1 has a very long and unusual 5’-untranslated region (from -575 to -1 in human). It appears that the 5’-untranslated region of p27Kip1 mRNA forms two alternative secondary structures. One increases the expression of p27Kip1 protein when anti-cancer agents are added and another decrease the expression of p27K1p1 when pro-cancer agents are added. For this short concept proposal, Dr. Albert Einstein’s “visualized thought experiments (German: Gedanken experiment)” were used as a fundamental tool for understanding how either anti- or pro-cancer agents bring the primary structure of the 5’-untranslated region of p27Kip1 mRNA into two alternative secondary structures, thereby either increasing or decreasing, respectively, the translation initiation of p27Kip1 protein. 展开更多
关键词 P27KIP1 cell cycle Repressor protein CANCER Prevention Anti-Cancer AGENTS CANCER PROMOTION Pro-Cancer AGENTS P27KIP1 MRNA 5-Prime-Untranslated Region Translation Initiation 5-Prime Cap Upstream Open Reading Frame Internal Ribosome Entry Site
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白藜芦醇通过下调PRMT5表达抑制肝胆管癌SMMC-7721细胞的增殖、侵袭和细胞周期
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作者 沈兴艳 孙象军 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期219-223,共5页
目的:探究白藜芦醇(Res)通过调控PRMT5表达对肝胆管癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭、细胞周期的影响及其机制。方法:常规培养正常肝细胞LO2和SMMC-7721细胞,用0、20、40、80μmol/L的Res进行处理,用qPCR法、MTT法、Transwell实验、流式细胞... 目的:探究白藜芦醇(Res)通过调控PRMT5表达对肝胆管癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭、细胞周期的影响及其机制。方法:常规培养正常肝细胞LO2和SMMC-7721细胞,用0、20、40、80μmol/L的Res进行处理,用qPCR法、MTT法、Transwell实验、流式细胞术和WB法分别检测Res处理后PRMT5 mRNA在LO2和SMMC-7721细胞中的表达,Res对SMMC-7721细胞增殖能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡,以及PRMT5、cyclin D1和cyclin E1蛋白表达的影响。结果:PRMT5在SMMC-7721细胞中呈高表达(P<0.01);20、40、80μmol/L Res均能明显抑制PRMT5 mRNA和蛋白在SMMC-7721细胞中的表达(均P<0.01),抑制SMMC-7721细胞的增殖能力(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05),阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期并促进其凋亡(P<0.01),明显抑制SMMC-7721细胞中周期蛋白cyclin D1、cyclin E1蛋白的表达(P<0.01)。结论:PRMT5在SMMC7721细胞中呈高表达,Res可有效抑制SMMC-7721细胞的增殖和侵袭能力并诱导其凋亡,其机制可能与抑制PRMT5表达相关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 肝胆管癌 SMMC-7721细胞 蛋白质精氨酸甲基转移酶5 增殖 侵袭 细胞周期 凋亡
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分裂相关增强子1、细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C在直肠癌组织中的表达及其临床意义
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作者 张景旭 李德舫 +1 位作者 于渌 张玉田 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第1期21-26,共6页
目的探讨分裂相关增强子1(Hairy and enhancer of split related protein 1,HESR-1)、细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(Cell division cycle 25C,CDC25C)在直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法选择166例行根治性手术的直肠癌患者为研究对... 目的探讨分裂相关增强子1(Hairy and enhancer of split related protein 1,HESR-1)、细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(Cell division cycle 25C,CDC25C)在直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法选择166例行根治性手术的直肠癌患者为研究对象,采用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁组织中HESR-1和CDC25C的表达,收集患者临床病理参数并进行随访,分析HESR-1和CDC25C表达对直肠癌患者临床病理参数及预后的影响。结果肠癌组织中CDC25C、HESR-1的阳性率均高于癌旁组织(46.9%vs 12.6%,41.6%vs 7.6%),差异有统计学意义(P<0.05)。在癌组织中,CDC25C mRNA与HESR-1 mRNA的表达呈正相关(r=0.862,P=0.003)。癌组织CDC25C及HESR-1表达阳性患者的肿瘤直径和淋巴结转移率均高于表达阴性者(P<0.05)。Cox多因素分析结果显示,肿瘤直径、淋巴结转移、CDC25C阳性及HESR-1阳性是影响直肠癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论HESR-1和CDC25C在直肠癌组织中表达升高,且与患者预后密切相关。 展开更多
关键词 直肠癌 分裂相关增强子1 细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C
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CDCA5、miR-146a、S100A7水平与过敏性鼻炎严重程度的关系及其临床价值
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作者 石昊 薛媛 +3 位作者 安丽 闫娟 拓明祥 李二乐 《检验医学与临床》 CAS 2023年第15期2170-2173,2177,共5页
目的 检测过敏性鼻炎(AR)患者外周血中细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)、微小RNA-146a(miR-146a)及鼻腔分泌物中S100钙结合蛋白A7(S100A7)的水平,分析上述3项指标与AR病情严重程度的关系及其对AR的临床诊断价值。方法 回顾性选取2019年7月... 目的 检测过敏性鼻炎(AR)患者外周血中细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)、微小RNA-146a(miR-146a)及鼻腔分泌物中S100钙结合蛋白A7(S100A7)的水平,分析上述3项指标与AR病情严重程度的关系及其对AR的临床诊断价值。方法 回顾性选取2019年7月至2022年3月于延安市人民医院就诊的83例AR患者作为观察组,另选取同期在该院体检且无过敏性疾病和呼吸道相关疾病的健康人50例作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶联反应和酶联免疫吸附试验分别检测两组受试者外周血中CDCA5、miR-146a水平及鼻腔分泌物中S100A7水平;采用Spearman相关分析CDCA5、miR-146a、S100A7与AR病情严重程度的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析CDCA5、miR-146a、S100A7对AR的诊断效能。结果 观察组患者CDCA5水平高于对照组,miR-146a和S100A7水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CDCA5水平与AR病情严重程度呈正相关(r=0.637,P<0.05);miR-146a、S100A7水平与AR病情严重程度呈负相关(r=-0.596、-0.605,P<0.05)。CDCA5、miR-146a、S100A7单独诊断AR的曲线下面积(AUC)分别为0.778、0.784、0.806,而3项指标联合诊断AR的AUC为0.897、灵敏度为87.9%、特异度为83.6%。结论 CDCA5、miR-146a、S100A7水平与AR患者病情严重程度关系密切,3项指标联合检测能提高对AR的临床诊断效能,对评估患者病情及指导临床诊治具有重要意义。 展开更多
关键词 过敏性鼻炎 细胞分裂周期相关蛋白5 微小RNA-146a S100钙结合蛋白A7
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结肠癌患者癌组织中CDCA5的表达变化及机制
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作者 牛学敏 赵树巧 +6 位作者 郭争荣 韩聪 郝津 王娜 范红伟 张晓博 张新元 《河北医药》 CAS 2023年第11期1641-1645,共5页
目的观察结肠癌患者癌组织及癌旁正常组织中细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)的表达水平,并探讨其在结肠癌发病中的机制研究。方法收集石家庄市人民医院住院治疗的结肠癌组织及癌旁组织各30份,采用免疫组织化学检测结肠癌组织及癌旁正常组... 目的观察结肠癌患者癌组织及癌旁正常组织中细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)的表达水平,并探讨其在结肠癌发病中的机制研究。方法收集石家庄市人民医院住院治疗的结肠癌组织及癌旁组织各30份,采用免疫组织化学检测结肠癌组织及癌旁正常组织中CDCA5的蛋白水平,采用qRT-PCR、Western Blot检测结肠癌患者癌组织及癌旁正常组织中CDCA5的mRNA及蛋白表达水平,同时采用qRT-PCR和Western blot检测癌组织及癌旁正常组织细胞周期蛋白B1(cyclinB1)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、P21、半胱氨酸天冬氨酸酶-3(caspase3)mRNA及蛋白的表达。结果结肠癌患者癌组织中CDCA5在mRNA及蛋白水平明显高于结肠癌旁正常组织(P<0.01),癌组织相关基因cyclinB1、ERK、P21的mRNA及蛋白表达均显著增高(P<0.01),而caspase3表达显著降低(P<0.05或<0.01)。结论结肠癌组织中CDCA5高表达,可能通过上调cyclinB1、ERK、P21及下调caspase3参与结肠癌的发生发展。 展开更多
关键词 结肠癌 癌旁组织 细胞分裂同期相关蛋白5 ERK信号通路
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miR-138-5p调控CDC5L表达对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响 被引量:1
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作者 王欧洋 朱鹏磊 +1 位作者 林杰 童凌云 《中国现代医生》 2023年第8期43-49,共7页
目的探讨微RNA(microRNA,miR)-138-5p对胶质瘤细胞增殖、侵袭的调控机制。方法体外培养人胶质瘤U251细胞,采用随机数字表法将其分为对照组(n=6)、miR-NC组(n=6)、miR-138-5p组(n=6)、miR-138-5p+pc-NC组(n=6)、miR-138-5p+pc-细胞分裂周... 目的探讨微RNA(microRNA,miR)-138-5p对胶质瘤细胞增殖、侵袭的调控机制。方法体外培养人胶质瘤U251细胞,采用随机数字表法将其分为对照组(n=6)、miR-NC组(n=6)、miR-138-5p组(n=6)、miR-138-5p+pc-NC组(n=6)、miR-138-5p+pc-细胞分裂周期5样(cell division cycle 5-like,CDC5L)组(n=6)。采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测细胞中miR-138-5p、CDC5L mRNA水平,检测细胞增殖活力、细胞周期和细胞凋亡以及细胞侵袭能力,检测细胞中CDC5L和侵袭相关蛋白表达。结果miR-138-5p的过表达可下调CDC5L mRNA和蛋白水平,降低胶质瘤细胞增殖活力和侵袭能力,并诱导G2/M期细胞周期停滞,促进细胞凋亡,降低N-钙粘蛋白、波形蛋白水平,升高E-钙粘蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05);上调CDC5L表达可明显逆转过表达miR-138-5p对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响(P<0.05);与miR-NC和CDC5L-WT质粒共转染比较,miR-138-5p mimic和CDC5L-WT质粒共转染的细胞中荧光素酶活性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论过表达miR-138-5p可能通过靶向下调CDC5L,抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 胶质瘤 微RNA-138-5p 细胞分裂周期5 增殖 侵袭
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miR-5701抑制胶质瘤细胞迁移和细胞周期的分子机制研究 被引量:1
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作者 武霞 孙世玉 +2 位作者 田蜜 洪春 林勇 《医学研究杂志》 2023年第10期76-80,154,共6页
目的 研究微小RNA(miRNA)-5701通过下调TXNDC5基因表达抑制胶质瘤细胞迁移和诱导其细胞周期停滞。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测胶质瘤细胞株(LN382、U251、SNB-19、U8... 目的 研究微小RNA(miRNA)-5701通过下调TXNDC5基因表达抑制胶质瘤细胞迁移和诱导其细胞周期停滞。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测胶质瘤细胞株(LN382、U251、SNB-19、U87MG)及正常脑胶质细胞HEB中miR-5701表达水平。培养SNB-19细胞分为两组,转染阴性对照序列(NC组)和miR-5701拟似物(miR-5701组)。RT-qPCR检测miR-5701的表达水平。划痕实验检测SNB-19细胞迁移能力,流式细胞术检测SNB-19细胞周期。RT-qPCR和Western blot法检测TXNDC5基因的表达水平。通过GEPIA数据库分析胶质瘤组织和癌旁组织中TXNDC5基因表达差异。双荧光素酶报告基因实验验证miR-5701靶向TXNDC5。结果 与HEB细胞比较,胶质瘤细胞株中miR-5701表达水平明显降低(P<0.05)。NC组和miR-5701组miR-5701表达分别为1.66±0.40和13.75±1.61,与NC组比较,miR-5701组miR-5701表达明显增加(P<0.01)。NC组和miR-5701组SNB-19细胞划痕愈合率分别为76.43%±4.38%和40.15%±7.46%,NC组显著高于miR-5701组(P<0.05)。NC组和miR-5701组G_(0~1)期细胞比例分别为48.24%±2.22%和67.38%±2.95%,与NC组比较,miR-5701组G_(0~1)期比例显著增加(P<0.01)。与NC组比较,miR-5701组TXNDC5基因表达水平显著下降(P<0.01)。胶质瘤组织中TXNDC5基因表达明显高于癌旁组织(P<0.01)。TXNDC5基因mRNA第215~235碱基是miR-5701的结合位点(P<0.01)。结论 miR-5701在胶质瘤细胞株中表达下调,过表达miR-5701能够抑制胶质瘤SNB-19细胞的迁移能力及诱导细胞周期停滞,靶向抑制TXNDC5基因表达是miR-5701作用的分子机制。 展开更多
关键词 胶质瘤 miR-5701 硫氧还蛋白5 迁移 细胞周期
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宫颈鳞癌组织中miR-590-3P、FoxM1及Cdc25B细胞核内蛋白水平与高危型HPV感染的相关性研究
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作者 黄玺瑞 廖艳芳 +4 位作者 唐剑 邹伟文 任洁 宋楚莹 朱正 《医学理论与实践》 2023年第3期380-383,共4页
目的:研究宫颈鳞癌组织中微小RNA-590-3P(miR-590-3P)、叉头盆蛋白质M1(FoxM1)及细胞分裂周期因子25B(Cdc25B)细胞核内蛋白水平与高危型人乳头状瘤病毒(HPV)感染的相关性。方法:将2014年2月—2019年12月医院通过宫颈活检、锥切以及子宫... 目的:研究宫颈鳞癌组织中微小RNA-590-3P(miR-590-3P)、叉头盆蛋白质M1(FoxM1)及细胞分裂周期因子25B(Cdc25B)细胞核内蛋白水平与高危型人乳头状瘤病毒(HPV)感染的相关性。方法:将2014年2月—2019年12月医院通过宫颈活检、锥切以及子宫切除获取的宫颈组织标本300份纳入研究。将其分为正常组织59例,宫颈上皮内瘤变(CIN)1组织62例,CIN2/3组织101例,宫颈鳞癌组织78例。采用实时荧光定量PCR检测不同组织中的miR-590-3P表达水平,以免疫组织化学法检测FoxM1、Cdc25B蛋白表达情况,并进行23种基因型HPV DNA的检测。比较不同宫颈组织中的miR-590-3P以及FoxM1、Cdc25B蛋白表达情况,高危型HPV感染情况,并以Spearman相关性分析明确宫颈鳞癌组织中的miR-590-3P以及FoxM1、Cdc25B蛋白表达情况与高危型HPV感染的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线明确miR-590-3P以及FoxM1、Cdc25B蛋白诊断CIN2+的效能。结果:CIN2/3组织以及宫颈鳞癌组织中的miR-590-3P表达水平均高于正常组织、CIN1组织,且CIN1组织中的miR-590-3P表达水平均高于正常组织(F=46.873,P=0.000);CIN2/3组织以及宫颈鳞癌组织中的FoxM1蛋白阳性率及Cdc25B蛋白阳性率均高于正常组织及CIN1组织,且CIN1组织中的FoxM1、Cdc25B蛋白阳性率均高于正常组织(χ^(2)=47.293、51.041,P=0.000、0.000)。CIN2/3组织以及宫颈鳞癌组织中的高危型HPV感染率明显高于正常组织、CIN1组织,且CIN1组织中的高危型HPV感染率明显高于正常组织(χ^(2)=67.293,P=0.000)。经Spearman相关性分析可得:宫颈鳞癌组织中miR-590-3、FoxM1、Cdc25B蛋白表达率均和高危型HPV感染呈正相关。经ROC曲线分析发现:miR-590-3P以及FoxM1、Cdc25B蛋白联合检测诊断CIN2+的曲线下面积、灵敏度、特异度分别为0.884、0.90、0.88,均高于上述三项指标单独检测。结论:宫颈鳞癌组织中miR-590-3P、FoxM1及Cdc25B细胞核内蛋白水平与高危型HPV感染密切相关,有望成为早期诊断CIN2+的潜在生物学指标,值得临床重点关注。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 miR-590-3P 叉头盆蛋白质M1 细胞分裂周期因子25B 人乳头状瘤病毒
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miR-105-5p调控CDC5L表达对胶质瘤细胞增殖迁移的影响
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作者 宋海龙 徐东为 +4 位作者 余秋男 荆彦平 李世冲 刘建中 刘京让 《河北医学》 CAS 2023年第6期906-912,共7页
目的:分析微小RNA-105-5p(miR-105-5p)通过调控细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体(CDC5L)对胶质瘤细胞增殖、迁移的影响。方法:收集本院35例经手术治疗的人脑胶质瘤组织及因脑外伤行减压术的正常脑组织样本。取对数生长期U251细胞,分为对照(c... 目的:分析微小RNA-105-5p(miR-105-5p)通过调控细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体(CDC5L)对胶质瘤细胞增殖、迁移的影响。方法:收集本院35例经手术治疗的人脑胶质瘤组织及因脑外伤行减压术的正常脑组织样本。取对数生长期U251细胞,分为对照(control)组、转染miR-105-5p阴性对照(miR-NC)组、转染miR-105-5p模拟物(miR-105-5p mimics)组、转染沉默CDC5L阴性对照(si-NC)组、转染沉默CDC5L(si-CDC5L)组、共转染miR-105-5p mimics及pcDNA(pcDNA)组以及共转染miR-105-5p mimics及pcDNA-CDC5L(miR-105-5p mimics+pcDNA-CDC5L)组。qRT-PCR检测胶质瘤组织、正常脑组织及各组U251细胞中miR-105-5p及CDC5L mRNA的表达情况;CCK-8法检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移;Western blot法检测CDC5L、细胞周期蛋白(CyclinDl)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)表达;双荧光素酶报告实验验证miR-105-5p与CDC5L的靶向关系。结果:与正常脑组织比较,胶质瘤组织中miR-105-5p水平显著下降,CDC5L mRNA显著升高(P<0.05)。miR-105-5p表达水平与CDC5L表达水平呈负相关(r=-0.512,P=0.002)。与control组、si-NC组比较,si-CDC5L组细胞p21蛋白表达量升高(P<0.05),24h、48h、72h OD值、迁移细胞数、CDC5L mRNA表达量及CDC5L、CyclinDl、MMP-2、MMP-9蛋白表达量均降低(P<0.05);与control组、miR-NC组比较,miR-105-5p mimics组miR-105-5p表达量和p21蛋白表达量升高(P<0.05),24h、48h、72h OD值、迁移细胞数、CDC5L mRNA表达量以及CDC5L、CyclinDl、MMP-2、MMP-9蛋白表达量均降低(P<0.05);过表达CDC5L逆转miR-105-5p对U251细胞的增殖、迁移及CyclinDl、MMP-2、MMP-9、p21蛋白蛋白的影响(P<0.05)。双荧光素酶实验验证,CDC5L是miR-105-5p的下游靶点。结论:miR-105-5p通过靶向下调CDC5L抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移。 展开更多
关键词 微小RNA-105-5p 细胞分裂周期蛋白5样蛋白抗体 胶质瘤 增殖 迁移
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钠钾ATP酶抑制剂通过调节DNA损伤感应复合体Mre11/Rad50/Nbs1的表达诱导肝癌HepG2细胞周期阻滞 被引量:7
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作者 徐忠伟 王凤梅 +2 位作者 王聪聪 单娜娜 徐瑞成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期323-327,共5页
目的研究钠钾ATP酶抑制剂华蟾毒配基(cinobufagin)对人肝癌HepG2细胞DNA损伤修复阻断及其发生机制。方法免疫组化分析人肝癌临床组织标本、正常肝组织中钠钾ATP酶α1亚单位的表达;以人肝癌细胞HepG2为靶细胞,实验分为对照组、5μmol... 目的研究钠钾ATP酶抑制剂华蟾毒配基(cinobufagin)对人肝癌HepG2细胞DNA损伤修复阻断及其发生机制。方法免疫组化分析人肝癌临床组织标本、正常肝组织中钠钾ATP酶α1亚单位的表达;以人肝癌细胞HepG2为靶细胞,实验分为对照组、5μmol·L^(-1)华蟾毒配基作用6、12和24 h组;单细胞电泳检测DNA双链断裂,Real time-PCR和Western blot检测损伤修复基因Mre11、Rad50、Nbs1和p53的表达变化,流式细胞术检测细胞周期。结果肝癌组织钠钾ATP酶α1亚单位表达与癌旁组织相比明显升高(P<0.05);华蟾毒配基诱导HepG2细胞DNA断裂的发生率与作用时间高度相关,作用时间延长断裂效应更加明显(P<0.05),Mre11,Nbs1,Rad50和p53表达随药物作用时间延长逐渐升高(P<0.05),流式细胞术分析细胞周期对照组S期细胞比例为(21.32±4.21)%,5μmol·L^(-1)华蟾毒配基处理6 h后为(33.25±5.72)%,处理12 h后为(56.72±6.29)%,作用24 h后为(67.32±9.42)%。结论华蟾毒配基激活Mre11/Rad50/Nbs1损伤感应复合体介导肝癌Hep G2细胞周期阻滞。 展开更多
关键词 华蟾毒配基 HepG2细胞 DNA双链断裂 钠钾ATP酶 细胞周期 细胞周期相关蛋白
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Rock2对细胞周期检查点Cdc25A的调节作用 被引量:5
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作者 刘天德 余新 +3 位作者 袁荣发 王庆诺 杨志强 邵江华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期961-968,共8页
目的:探讨肝癌细胞中Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)对细胞周期检查点细胞分裂周期蛋白25A(Cdc25A)的调节作用。方法:Western blotting检测51对肝癌及癌旁组织中Rock2与Cdc25A的蛋白表达情况。构建并筛选shRock2干扰质粒,稳定转染... 目的:探讨肝癌细胞中Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)对细胞周期检查点细胞分裂周期蛋白25A(Cdc25A)的调节作用。方法:Western blotting检测51对肝癌及癌旁组织中Rock2与Cdc25A的蛋白表达情况。构建并筛选shRock2干扰质粒,稳定转染到人肝细胞癌Huh-7和HepG2细胞中,Western blotting检测Cdc25A蛋白表达变化;针对Rock2干扰序列,利用PCR定点突变技术进行碱基突变,构建Rock2突变质粒从而"恢复"Rock2表达,分析Cdc25A蛋白表达变化并用MTT法检测肝癌细胞增殖的改变。Western blotting检测Rock2稳定低表达的肝癌细胞中检查点激酶1(Chk1)和检查点激酶2(Chk2)蛋白的变化,免疫共沉淀及免疫荧光分析Rock2与Cdc25A的相互作用。结果:Rock2与Cdc25A蛋白在肝癌组织中较癌旁组织呈现高表达,而且两者呈正相关。肝癌细胞中稳定低表达Rock2后,Cdc25A蛋白表达明显下降;"恢复"Rock2表达后,Cdc25A蛋白表达增加而且肝癌细胞也出现增殖加快现象。Rock2低表达对Chk1和Chk2蛋白变化无明显影响。免疫共沉淀表明Rock2与Cdc25A直接相互作用,免疫荧光检测表明Rock2与Cdc25A存在共定位。结论:Rock2对细胞周期检查点Cdc25A起直接的正向调控作用,而且不依赖于Chk1/Chk2,可能为肝癌基因表达调控研究提供新的靶基因。 展开更多
关键词 Rho相关含卷曲螺旋蛋白激酶2 细胞分裂周期蛋白25A 细胞周期 肝肿瘤
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siRNA靶向抑制CDCA5基因表达对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响 被引量:5
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作者 陈墅圳 聂玉强 +2 位作者 杜艳蕾 徐言 沈桂佳 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2014年第2期97-101,共5页
目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向抑制细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)基因表达对人肝癌HepG2细胞株增殖及凋亡的影响。方法优化siRNA转染条件,将3条靶向抑制CDCA5基因的siRNA载体片段(序列1、2和3)分别高效转染人肝癌HepG2细胞(A、B和C组),... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向抑制细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)基因表达对人肝癌HepG2细胞株增殖及凋亡的影响。方法优化siRNA转染条件,将3条靶向抑制CDCA5基因的siRNA载体片段(序列1、2和3)分别高效转染人肝癌HepG2细胞(A、B和C组),并设阴性对照组(NC组)及空白组。免疫印迹法检测转染72h各组CDCA5蛋白的表达水平。CCK-8法检测转染24、48、72、96、120h各组细胞的增殖能力,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测各组转染48h的凋亡情况。结果 A、B和C组的CDCA5蛋白水平均低于NC组和空白组(P<0.05),其中B组的表达率最低,抑制率最高,达89.3%,故选择序列2进行后续实验。自转染48h起,B组的相对增殖率均低于NC组和空白组(P<0.05);B组转染72h的相对增殖率为(66.58±2.58)%,均低于其他观察时间点(P<0.05)。B组转染48h的早期和晚期凋亡率分别为(17.43±2.31)%和(22.37±2.21)%,均高于NC组和空白组(P<0.05)。结论通过siRNA能够降低HepG2细胞的CDCA5表达水平,有效抑制HepG2细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 小干扰RNA 肝癌 细胞分裂周期相关蛋白5 增殖 凋亡
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肺癌患者血清中PDCD5、Bax含量与肿瘤病灶内病理特征的相关性研究 被引量:7
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作者 黄茜 张春莹 粟军 《海南医学院学报》 CAS 2018年第8期857-860,共4页
目的:研究肺癌患者血清中PDCD5、Bax含量与肿瘤病灶内病理特征的相关性。方法:选择在本院接受手术治疗的肺癌患者作为研究的肺癌组,术前取血清标本、术后取肺癌病灶及癌旁病灶;选择同期在华西医院体检的健康者作为对照组,体检时取血清标... 目的:研究肺癌患者血清中PDCD5、Bax含量与肿瘤病灶内病理特征的相关性。方法:选择在本院接受手术治疗的肺癌患者作为研究的肺癌组,术前取血清标本、术后取肺癌病灶及癌旁病灶;选择同期在华西医院体检的健康者作为对照组,体检时取血清标本;测定血清中PDCD5、Bax的含量以及肺癌病灶、癌旁病灶中PDCD5、Bax含量及增殖基因、侵袭基因的表达量。结果:肺癌组血清中PDCD5、Bax的含量显著低于对照组,肺癌病灶内PDCD5、Bax的含量显著低于癌旁病灶且肺癌患者血清中PDCD5、Bax的含量与肺癌病灶内PDCD5、Bax的含量呈正相关;肺癌病灶中C-myc、RACK1、CatL、MMP2、N-cadherin的mRNA表达量显著高于癌旁病灶且与血清中PDCD5、Bax的含量呈负相关,LAST1、PAQR3、TCF21、E-cadherin、TIMP1、TIMP2的mRNA表达量显著低于癌旁病灶且与血清中PDCD5、Bax的含量呈正相关。结论:肺癌患者血清中PDCD5、Bax含量的降低与肿瘤病灶内癌细胞增殖、侵袭的加剧密切相关。 展开更多
关键词 肺癌 程序化细胞死亡分子5 Bcl-2相关X蛋白 增殖 侵袭
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5-杂氮-2′-脱氧胞苷抑制人鼻咽癌CNE细胞生长的机制 被引量:3
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作者 张松 孔维佳 +2 位作者 郭长凯 王彦君 陈雄 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期795-798,共4页
目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)抑制人鼻咽癌CNE细胞系生长增殖的机制,寻找鼻咽癌治疗的新靶点。方法用5-Aza-CdR处理人鼻咽癌CNE细胞,应用MTT试验观察不同浓度的5-Aza-CdR对癌细胞生长增殖的影响。用甲基化特异性PCR(MSP)分... 目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)抑制人鼻咽癌CNE细胞系生长增殖的机制,寻找鼻咽癌治疗的新靶点。方法用5-Aza-CdR处理人鼻咽癌CNE细胞,应用MTT试验观察不同浓度的5-Aza-CdR对癌细胞生长增殖的影响。用甲基化特异性PCR(MSP)分析死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因甲基化状态;逆转录聚合酶链反应、免疫细胞化学、流式细胞仪检测用药前后DAPK mRNA、蛋白的表达情况及细胞凋亡和细胞周期的变化。结果从CNE细胞生长曲线知各浓度的5-Aza-CdR对细胞生长均有抑制作用。未经5-Aza-CdR处理的CNE细胞中DAPK基因CpG岛过甲基化,且DAPK mRNA不表达。经5-Aza-CdR处理后,甲基化的DAPK基因部分去甲基化,用药组的细胞中均有DAPK mRNA表达,且表达随药物浓度增高而增强。免疫细胞化学结果显示,经药物处理后的CNE细胞中DAPK蛋白表达呈阳性,而对照组不表达。流式细胞分析结果显示,药物处理后细胞凋亡率明显增加,且G0/G1期细胞增加,G2/M期减少。结论5-Aza-CdR对体外培养的鼻咽癌细胞生长增殖的抑制作用,可能是由于其能使因甲基化而失活的DAPK基因再转录,诱导该基因重新表达的结果。 展开更多
关键词 5-杂氮-2'-脱氧胞苷 死亡相关蛋白激酶 CNE细胞系 甲基化
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死亡相关蛋白(DAP-5)在庆大霉素诱导的人肾小管上皮细胞凋亡过程中的表达变化及机制 被引量:2
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作者 高建军 谷昭艳 +4 位作者 许永星 梁勃然 韦加美 高月花 那宇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期906-910,共5页
目的建立庆大霉素诱导人肾小管上皮细胞(HK2)凋亡模型;观察死亡相关蛋白5(DAP5)在HK2凋亡过程中的表达变化,并探讨其与PI3K/Akt/m TOR通路之间的关系。方法以3.2mg/ml庆大霉素作用于HK2,应用琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA条带,流式细... 目的建立庆大霉素诱导人肾小管上皮细胞(HK2)凋亡模型;观察死亡相关蛋白5(DAP5)在HK2凋亡过程中的表达变化,并探讨其与PI3K/Akt/m TOR通路之间的关系。方法以3.2mg/ml庆大霉素作用于HK2,应用琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA条带,流式细胞仪测定细胞凋亡率。采用Western blotting法观察DAP5与Akt、p-Akt表达的改变,应用雷帕霉素阻断PI3K/Akt/m TOR通路后观察DAP5的表达变化。结果庆大霉素作用24h后HK2细胞即出现凋亡,凋亡率随时间延长而增加,24、36、72h的凋亡率分别为5.9%,23.0%,49.9%(P<0.05)。与此同时,细胞DAP5活化裂解生成DAP5/p86,且表达逐渐增加(P<0.05)。在凋亡的同时p-Akt蛋白的表达水平也逐渐增加(P<0.05),应用雷帕霉素阻断PI3K/Akt/m TOR通路后,裂解产生的DAP5/p86减少(P<0.05)。结论庆大霉素可诱导HK2细胞发生细胞凋亡,凋亡率随时间的延长而增加。在诱导HK2细胞凋亡过程中DAP5裂解活化产生DAP5/p86,且这一过程可能是经过PI3K/Akt/m TOR途径来完成的。 展开更多
关键词 庆大霉素 凋亡 死亡相关蛋白 肾小管上皮细胞
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CDC20在肺腺癌组织中的表达及对肺腺癌细胞增殖和侵袭的影响研究
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作者 周雪芹 栾艳超 +2 位作者 赵莉 戎超超 杨娜 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期460-472,共13页
背景与目的:肺腺癌具有早期发现难、肿瘤进展快及晚期手术切除率低等特点。尽管单药免疫治疗和免疫治疗联合化疗的相关研究在改善预后、克服耐药方面已初显成效,但是大部分肺腺癌患者从中获益仍有限。因此,迫切需要寻找具有相对较高灵... 背景与目的:肺腺癌具有早期发现难、肿瘤进展快及晚期手术切除率低等特点。尽管单药免疫治疗和免疫治疗联合化疗的相关研究在改善预后、克服耐药方面已初显成效,但是大部分肺腺癌患者从中获益仍有限。因此,迫切需要寻找具有相对较高灵敏度和特异度的新型生物标志物,以改善肺腺癌患者的预后。细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle protein 20,CDC20)参与多种肿瘤的发生、发展,但在肺腺癌中的生物学作用及机制尚未明确。本研究旨在探究CDC20在肺腺癌中的表达情况及其对肺腺癌患者预后的预测价值,并分析CDC20对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测CDC20在肺腺癌中的表达情况并结合生物信息学和临床病理学参数分析其与预后不良的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线描述CDC20对肺腺癌患者术后生存率的影响,采用COX多因素回归分析影响肺腺癌患者术后生存率的独立预后因素。通过受试者工作特征曲线分析CDC20表达在肺腺癌患者中的诊断价值。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测人正常肺上皮细胞系BEAS-2B、人肺腺癌细胞系A549和H1299中CDC20的表达水平。细胞实验中,通过敲低肺腺癌细胞中的CDC20,分为si-NC(对照组)、si-CDC20#1(敲低组1)和si-CDC20#2(敲低组2)3个组。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、克隆形成、transwell和划痕实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过基因本体论(Gene Ontology,GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析CDC20在肺腺癌中的生物学作用。通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)CDC20在肺腺癌中可能的调控通路。本研究经河北省胸科医院伦理委员会批准(编号:2022051)。结果:生物信息学及IHC结果均显示,CDC20在肺腺癌组织中显著高表达(P<0.05)。生物信息学与临床参数分析结果均显示,CDC20高表达与患者预后不良相关。Kaplan-Meier生存分析和COX回归分析均显示,CDC20表达情况与患者术后生存率呈显著负相关(P<0.05)。敲低CDC20能抑制肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。GO功能、KEGG通路和GSEA结果均显示,CDC20与细胞周期相关。结论:CDC20在肺腺癌中高表达,CDC20高表达是肺腺癌患者不良预后的独立危险因素。CDC20能促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 细胞分裂周期蛋白20 肺腺癌 细胞增殖 细胞周期 细胞运动
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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对人肝癌细胞株SMMC7721增殖及DAPK mRNA表达的影响 被引量:4
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作者 谢海 仇小强 +1 位作者 余红平 李孟英 《广西医科大学学报》 CAS 2012年第1期13-16,共4页
目的:探讨去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人肝癌细胞株SMMC7721细胞增殖以及对死亡相关蛋白激酶(Death-associated protein kinase,DAPK)基因mRNA表达水平的影响。方法:用不同浓度(0.5,5.0,50.0... 目的:探讨去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对人肝癌细胞株SMMC7721细胞增殖以及对死亡相关蛋白激酶(Death-associated protein kinase,DAPK)基因mRNA表达水平的影响。方法:用不同浓度(0.5,5.0,50.0μmol/L)的5-Aza-CdR对SMMC7721细胞处理后,采用MTT法检测细胞的增殖情况;半定量RT-PCR法检测各组细胞DAPK mRNA的表达水平。结果:5-Aza-CdR对肝癌细胞株SMMC7721生长有明显抑制作用,并且存在剂量依赖性反应关系(F=242.40,P<0.01);半定量RT-PCR结果显示,MMC7721细胞中DAPK mRNA表达水平很弱,采用不同浓度5-Aza-CdR处理SMMC7721细胞72h后,SMMC7721细胞中DAPK mRNA表达水平呈剂量依赖性逐渐升高(F=360.41,P<0.01)。结论:5-Aza-CdR可诱导MMC7721细胞DAPK mRNA表达,并抑制SMMC7721细胞增殖。 展开更多
关键词 肝癌细胞 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 死亡相关蛋白激酶 DNA甲基化 细胞增殖
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基于数据挖掘技术探讨细胞分裂周期相关蛋白在肝细胞癌中的表达及对预后的影响
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作者 姚梦础 徐建波 谢宇 《中国医药导报》 CAS 2024年第10期6-10,共5页
目的 基于数据挖掘技术研究细胞分裂周期相关蛋白(CDCA)在肝细胞癌(HCC)中的表达特征及其与临床病理分期和预后的关系。方法 通过TCGA数据库获得266例HCC组织及50例正常肝组织样本数据,分析CDCA在HCC与正常肝组织中表达的差异,再以CDCA... 目的 基于数据挖掘技术研究细胞分裂周期相关蛋白(CDCA)在肝细胞癌(HCC)中的表达特征及其与临床病理分期和预后的关系。方法 通过TCGA数据库获得266例HCC组织及50例正常肝组织样本数据,分析CDCA在HCC与正常肝组织中表达的差异,再以CDCA基因表达中位数为界将HCC组织分为高、低表达组,每组133例。Kaplan-Meier法比较高、低表达组患者总生存期(OS)差异。采用单因素和多因素Cox比例危险回归模型识别独立预后因素。另收集江苏省淮安市第一人民医院2019年6月至2020年6月被病理证实的HCC组织及对应的癌旁组织24例,采用随机数字表法将其分为8组,每组3对,采用免疫组织化学染色检测CDCA在HCC及癌旁组织中表达的差异。结果CDCA1-8在HCC标本中表达量高于正常肝组织(P<0.05)。CDCA1/2/5/6/8高表达组总生存率低于低表达组(P<0.05)。CDCA6(HR=1.51,95%CI:1.29~1.75,P<0.001)、CDCA8(HR=1.69,95%CI:1.08~2.64,P<0.05)、年龄(HR=1.03,95%CI:1.01~1.05,P<0.05)、患者肿瘤大小分期[T3(HR=1.46,95%CI:1.47~4.32,P<0.001)、T4(HR=6.61,95%CI:2.84~15.34,P<0.001)]是HCC OS的独立预测因子。结论 CDCA在HCC组织中表达升高,多数CDCA家族成员表达水平与HCC预后显著相关,其中,CDCA6/8是独立预测指标。 展开更多
关键词 细胞分裂周期相关蛋白 细胞周期 预后 肝细胞癌
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皮肤黑素瘤中细胞分裂周期相关蛋白8的表达水平及功能学分析
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作者 袁涛 江佳慧 +7 位作者 陈楠 张元林 苏豆 孟秀梅 唐彪 何彩凤 卢晓红 慈超 《齐齐哈尔医学院学报》 2024年第3期207-211,共5页
目的基于生物信息学方法分析CDCA8在皮肤黑素瘤组织中的表达水平及其相关生物学功能。方法TCGA数据库中下载皮肤黑素瘤数据集,分析CDCA8在皮肤黑素瘤组织中的表达,K-M曲线分析皮肤黑素瘤组织中CDCA8表达水平与总体生存率的关系,UALCAN... 目的基于生物信息学方法分析CDCA8在皮肤黑素瘤组织中的表达水平及其相关生物学功能。方法TCGA数据库中下载皮肤黑素瘤数据集,分析CDCA8在皮肤黑素瘤组织中的表达,K-M曲线分析皮肤黑素瘤组织中CDCA8表达水平与总体生存率的关系,UALCAN数据库筛选皮肤黑素瘤中与CDCA8的共表达基因,并对共表达基因进行GO和KEGG富集分析。TIMER数据库分析皮肤黑素瘤组织中CDCA8与免疫细胞浸润的相关性。HPA数据库验证CDCA8在皮肤黑素瘤组织及正常组织中的表达差异。结果与正常组织相比,CDCA8在皮肤黑素瘤组织中明显高表达(P<0.5);与皮肤黑素瘤TP-53野生型相比,CDCA8表达水平在TP-53突变型中明显升高(P<0.05)。皮肤黑素瘤中CDCA8高表达组总体生存率显著低于CDCA8低表达组(HR=1.500,P=0.005)。皮肤黑素瘤组织中CDCA8共表达基因主要富集于细胞核、细胞质、细胞分裂、细胞周期、DNA修复、蛋白结合、RNA结合、细胞周期、DNA复制及细胞核质转运等过程。皮肤黑素瘤中CDCA8与B细胞(r=0.166,P<0.001)、CD8^(+)T细胞(r=0.176,P<0.001)、中性粒细胞(r=0.193,P<0.001)及树突状细胞(r=0.230,P<0.001)浸润程度存在显著正相关性。免疫组化显示CDCA8在皮肤黑素瘤组织中均呈现高强度表达,而在正常组织中无表达或低表达。结论CDCA8在皮肤黑素瘤组织中呈现高表达状态,与患者不良预后显著相关,CDCA8可能通过调控细胞周期及免疫细胞浸润参与皮肤黑素瘤的发病机制。 展开更多
关键词 皮肤黑素瘤 细胞分裂周期相关蛋白8 预后 免疫微环境
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