缺氧条件下肺岩宁方抑制TC2N的表达对肺癌细胞培养基诱导的HUVEC细胞增殖、迁移侵袭和管腔形成的影响

目的探讨缺氧条件下肺岩宁方(FYN)对肺癌细胞培养基诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移侵袭和管腔形成的影响。方法使用不同浓度的肺岩宁方(200-6400μg·mL^(-1))处理HUVEC细胞,CCK-8法检测细胞存活率,计算其半数抑制浓度(IC_(50)),确定最佳干预浓度。使用A549细胞培养基在缺氧条件下诱导血管新生模型,将HUVEC细胞分为对照组(Control)、模型组(Model)、800μg·mL^(-1)肺岩宁方组(FYN)、100μg·mL^(-1)贝伐珠单抗组(Bevacizumab,阳性对照)、800μg·mL^(-1)肺岩宁方+慢病毒载体组(FYN+vector)、800μg·mL^(-1)肺岩宁方+TC2N过表达组(FYN+TC2N),每组设置6个复孔。分别检测细胞增殖、迁移与侵袭,管腔生成实验评价血管形成,qRT-qPCR检测HIF-1α、TC2N基因水平,Western blot法检测HIF-1α、TC2N、E-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达。结果肺岩宁方对HUVEC细胞的IC_(50)为893.00μg·mL^(-1);与对照组比较,模型组细胞存活率、细胞迁移与侵袭能力、管腔形成节点数、Vimentin、Snail、HIF-1α、TC2N基因及蛋白表达升高,E-cadherin表达降低(P<0.05);与模型组比较,肺岩宁方组与贝伐珠单抗组细胞存活率、细胞迁移与侵袭能力、管腔形成节点数、Vimentin、Snail、HIF-1α、TC2N基因及蛋白表达降低,E-cadherin表达升高(P<0.05);与肺岩宁方+慢病毒载体组比较,肺岩宁方+TC2N过表达组细胞存活率、细胞迁移与侵袭能力、管腔形成节点数、Vimentin、Snail、TC2N基因及蛋白表达升高,E-cadherin表达降低(P<0.05)。结论肺岩宁方可通过抑制TC2N的表达,抑制HUVEC细胞增殖、迁移、侵袭与血管生成。

骨科祛痰逐瘀方经MAPK/ERK通路诱导血管内皮细胞迁移与血管管腔形成

目的探究祛痰逐瘀方(Qutan Zhuyu Decoction,QZD)经MAPK/ERK通路诱导血管内皮细胞迁徙与血管管腔形成的作用,明确QZD在骨血管化重建中的机制。方法对大鼠进行QZD灌胃,并采集和分离获得含药血清;培养SVEC和10T1/2细胞,分别将二者分为空白组、bFGF组(阳性对照组)、QZD中药组(实验组),其中实验组为将QZD含药血清加入细胞培养基中。对干预后的SVEC进行迁徙实验,另外对SVEC进行管腔形成实验,对10T1/2进行免疫荧光染色观察中药促管腔形成效果,运用Western blot检测ERK1/2、p38等蛋白表达,研究QZD对SVEC的作用机制。结果 (1)QZD含药血清较空白组促进SVEC细胞的迁徙(P<0.05);(2)QZD含药血清较空白组可促进SVEC血管管腔形成,包括管腔面积(P<0.05)和管腔腔周长度(P<0.05);(3)荧光染色实验提示,QZD含药血清较空白组促进10T1/2细胞呈规律性聚集,并形成管腔状状态;(4)Western blot实验提示,QZD含药血清可促进SVEC中ERK1/2和p38的磷酸化(P<0.05)。结论 QZD经MARK/ERK通路调控和诱导血管内皮细胞的迁徙和血管官腔的形成,提示其可运用于骨血管化重建中。

杨树木材细胞腔径分布的分形表征

应用杨树木材横切面的细胞直径分布描述木材横切面空隙分布的分形特征。通过对不同高度处木材细胞腔直径分布进行分析，分别计算出它们的分形维数（D=1．24-1．31）。结果表明：腔径分布分形维数的大小可以作为表征木材多孔性的一个参数。

全反式维A酸体外抗血管新生作用机制的探讨

目的:探讨全反式维A酸(ATRA)对内皮细胞的作用,明确其抗血管新生作用的机制。方法:利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定ATRA对于内皮细胞增殖的影响,利用迁移实验和体外管腔形成实验观测ATRA对内皮细胞迁移及管腔形成能力的影响,并利用流式细胞仪检测ATRA对内皮细胞凋亡的影响。结果:ATRA明显抑制碱性成纤维细胞生长因子诱导的内皮细胞增殖,并导致内皮细胞迁移及管腔形成能力下降,同时可诱导内皮细胞的凋亡。结论:ATRA可以直接作用于内皮细胞,通过抑制其增殖、迁移及管腔形成,以及诱发内皮细胞凋亡而发挥其抗血管新生作用。

马尾松纤维细胞腔加填的研究

以国内南方的马尾松纤维为原料,利用高速搅拌作用将二氧化钛粒子加填进入纤维细胞腔内,探讨了加填工艺参数及助剂阳离子聚丙烯酰胺(CPAM)的使用对加填的影响,用扫描电镜观察了加填前后纤维的横截面。结果表明:打浆后的浆料纤维不适用于细胞腔加填;混合搅拌30～45min、浆料浓度0.5%～2.0%时加填效果较好;增大填料浓度能提高加填量;使用CPAM能提高加填量,其使用量0.05%～0.4%时效果较好;电镜观察显示加填后填料粒子很好地留着在细胞腔内。

三种鲤科鱼类肠道内分泌细胞的初探

使用Grimelius嗜银染色法对草鱼、鲤、翘嘴红鲌3种不同食性的鲤科鱼的肠道内分泌细胞进行了研究。在3种鱼的整个肠道上均发现有内分泌细胞的分布。在前肠前段中,内分泌细胞分布最多,愈向后分布愈少。在肠褶各处均有内分泌细胞分布,以基部分布最密。内分泌细胞几乎都为开放型,位于上皮细胞和杯状细胞之间,将胞突伸向肠腔。有极少数内分泌细胞兼有开放型和封闭型细胞的特点,在它们顶端胞突伸向肠腔的同时,基部也伸出突起将分泌物送入邻近细胞或细胞间隙中。肠上皮中还发现一种与内分泌细胞具有同样嗜银特性的圆形颗粒。

桑叶对肿瘤血管生成的影响

目的研究桑叶对肿瘤血管生成中血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的影响。方法用CCK-8试剂盒测定HUVEC-2C细胞数量的变化;用Transwell转移小室研究HUVEC-2C细胞迁移情况;用包被Matrigel的24孔板来培养HUVEC-2C细胞观察其管腔形成情况。实验分为实验组和对照组,每组分别设置3个复孔,在实验组中加入桑叶浸出液。观察桑叶对肿瘤血管生成的影响。结果桑叶液可抑制HUVEC-2C细胞的增殖能力,抑制作用随着浓度的增长而增强。在浓度为100、50、25 mg/mL时,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。当浓度为100 mg/mL的桑叶液时细胞增殖抑制率可达到37.6%。通过观察Transwell小室,与对照组比较,添加了桑叶液的HUVEC-2C细胞,其迁移能力受到一定的制约作用。Matrigel实验中,与未加入桑叶液的HUVEC-2C细胞所形成的较完整的环状结构比较,加入桑叶液的HUVEC-2C细胞在管腔形成方面受到明显的抑制作用。结论桑叶液通过抑制血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成,对肿瘤血管的生成具有抑制作用。

肝圆韧带内腔形态及内皮化情况观察

目的观察肝圆韧带内腔形态及内皮化情况。方法肝圆韧带40条,来自肝硬化、无肝硬化患者各20条;取其裂隙段和游离段制成蜡块,切片后行HE染色观察其有无内腔,并选取两段分界处的切片观察其内腔形态、大小;对切片行CD34和Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色,观察肝圆韧带内腔内皮化情况。结果本组肝圆韧带未见明显管腔5例,管腔限于视野内17例,管腔满视野或溢出视野18例;无管腔5例,管腔横截面呈非类圆形21例、类圆形14例;肝圆韧带CD34和Ⅷ因子相关抗原染色均阳性25例。结论大多数人肝圆韧带的裂隙段和游离段内有一连续的内腔,其腔面被覆血管内皮细胞。

纸浆细胞内加填及其纸页性质

本文主要叙述了纸浆细胞腔加填和纸浆细胞壁现场加填的方法、原理及其纸页的强度性质和光学性质。

肾发生期间管腔形成的机制研究

管腔发生是肾脏发育的关键过程。目前体外构建肾发育,通常选肾组织上皮细胞系即小猎犬肾远曲小管的可传代细胞进行体外培养,以研究肾脏胚胎发生过程及管腔形成的机制。而细胞极性的建立是管腔的形成基础,在三维组织培养模型中,利用基因剔除、RNA干扰或抑制蛋白质表达等技术鉴定极性蛋白质(如Crb复合物、Par/aPKC复合物和Scribble复合物等)及紧密连接在管腔形成中的作用。这些蛋白质只有正确表达并定位在适当的位置,才能形成单一的管腔,而它们下调将产生无腔或多腔型,从而影响肾脏的正常发育,并最终导致重大疾病。了解肾发生中间充质细胞上皮转化过程及管腔形成的内在机制有利于为某些疾病的预防和治疗提供理论基础。

Power PICC双腔导管在异基因造血干细胞移植中的应用效果探讨

目的探讨Power PICC双腔导管在造血干细胞移植中的应用效果,并对其护理方法进行分析。方法选取我科2015年7月~2016年4月收治的52例行异基因造血干细胞移植患者作为研究对象,均在经超声引导下置入美国巴德公司生产5Fr双腔耐高压注射型PICC（Power PICC）导管进行治疗,将其作为观察组,并以2014年7月~2015年6月在我科接受异基因造血干细胞移植,但行颈内CVC置管的患者50例作为对照组,分别比较其操作完成时间、一次置管成功率、导管留置时间、并发症发生率。结果观察组和对照组患者的操作完成时间分别为（23.1±2.3）min、（24.0±2.5）min,一次置管成功率分别为100.0%（52/52）、84.0%（42/50）,导管留置时间分别为（79.8±4.2）d、（42.8±3.5）d,除操作完成时间外,观察组其余指标均显著优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。导管堵塞、导管异位/移位、意外脱管、导管局部感染、穿刺口渗血等的发生率比较,观察组显著低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Power PICC在造血干细胞移植治疗中具有操作方便、置管成功率高、患者痛苦小、舒适度高的特点,但也需要通过全方位针对性的护理干预,最大程度降低各项并发症的发生率。

缺氧条件下骨髓间充质干细胞对血管内皮细胞迁移和管腔形成的影响

目的:探讨缺氧条件下骨髓间充质干细胞(BMSCs)对血管内皮细胞迁移和管腔形成的影响。方法:制备3种细胞的条件培养基(CM),分别为对照组(血管内皮细胞培养基,VCM)、常氧条件下BMSCs的CM组(NCM)和缺氧条件下BMSCs的CM组(HCM)。分别用以上3种CM培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)和猴脉络膜-视网膜血管内皮细胞(RF/6A)6~24h后,观察血管内皮细胞迁移和管腔形成的能力。结果:相对于对照组和常氧组的CM,缺氧组即HCM作用下的血管内皮细胞的迁移数目和成管数量(包括成管总长度和分支数)均显著增加(均P<0.05)。在RF/6A细胞,对照组VCM、常氧组NCM和缺氧组HCM作用24h后,迁移的细胞数分别为19.00±3.61、32.33±3.06、114.00±11.53个(F=153.3,P<0.001);而HUVECs的3组细胞迁移个数则分别是76.00±9.54、122.00±18.68、307.70±25.97个(F=121.5,P<0.001)。RF/6A细胞经各组CM孵育6h后,成管数目分别为12.00±3.00、37.00±4.58、51.00±3.61个(F=81.7,P<0.0001);3组HUVECs细胞管腔形成的结果类似。结论:缺氧条件下BMSCs可促进血管内皮细胞的迁移和成管能力,这种机制可能在视网膜新生血管中发挥作用。

血清外泌体对高糖作用后HUVECs细胞增殖、迁移及管腔形成能力的影响

目的观察正常大鼠血清外泌体对高糖作用后人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移及管腔形成能力的影响。方法从正常SD大鼠血清中提取外泌体,并经电子显微镜及Western blotting法证实。将HUVECs分为外泌体组、高糖组和对照组,外泌体组、高糖组加入40 mmol/L葡萄糖,对照组加入7 mmol/L葡萄糖;同时外泌体组分别加入10、40、160μg/mL大鼠血清外泌体,高糖组和对照组不加入外泌体。各组分别于培养0、12、24、36 h,采用CCK-8法检测细胞增殖的光密度(OD)值;培养24 h,采用细胞划痕实验检测细胞迁移率;培养8 h,采用管腔形成实验测量成管长度和成管分支点数。结果与对照组比较,高糖组作用12、24、36 h的OD值及细胞迁移率、成管长度、成管分支点数均降低(P均<0.05)。与高糖组比较,加入10μg/mL外泌体的外泌体组作用12、24、36 h的OD值及细胞迁移率、成管长度、成管分支点数均无明显变化(P均>0.05),加入40、160μg/mL外泌体的外泌体组上述指标均升高,且加入160μg/mL外泌体的外泌体组升高更明显(P均<0.05)。结论高糖会引起HUVECs细胞增殖、迁移及管腔形成能力下降,高浓度的正常大鼠血清外泌体可逆转上述变化,对HUVECs具有保护作用。

黄曲霉毒素B1在乳畜中的转化

黄曲霉毒素主要是由曲霉菌产生的一类具有高致癌性的次级代谢产物,我国饲料及饲料原料普遍受到黄曲霉毒素B1污染。乳畜摄入黄曲霉毒素B1后,代谢生成的羟基化产物黄曲霉毒素M1可通过乳汁污染乳及乳制品,并因这两种毒素都具有极强的毒性越来越受到人们的关注。黄曲霉毒素B1在乳畜的肝脏、瘤胃和乳腺等部位均可代谢转化,黄曲霉毒素M1向乳中的转移受到多种因素的影响。文章从黄曲霉毒素B1的代谢与转移排泄、影响黄曲霉毒素M1的转化因素以及黄曲霉毒素B1对乳腺上皮细胞和瘤胃微生物的影响进行论述。

龙蛭汤含药血清对氧化损伤人脐静脉内皮细胞管型形成的影响

目的:探讨龙蛭汤含药血清对氧化损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)管型形成的影响。方法:建立过氧化氢(H2O2)诱导HUVECs氧化损伤模型,采用CCK-8增殖实验、划痕实验和Matrigel实验比较龙蛭汤含药血清(治疗组)和补阳还五汤含药血清(对照组)对氧化损伤的HUVECs的增殖、迁移和管型形成的不同影响。结果:治疗组较对照组细胞具有较高增殖能力、更快迁移速度及迁移距离、形成更多的管形腔及小分支(P<0.05)。此外,24 h后治疗组细胞仍能保持完整的管腔结构和形态,而对照组则不能。结论:龙蛭汤含药血清较补阳还五汤含药血清在促进氧化损伤HUVECs管型形成方面具有更优效果。

基于MATLAB图像处理的棉纤维成熟度检测系统的开发

中腔胞壁对比法测试棉纤维成熟度是以单个、手工、目测为特点的传统检测,显著不足是单一、目测、效率和精度低。本文使用计算机图像分析技术开发了棉纤维成熟度检测系统,实现了基于棉纤维的显微图像自动测试棉纤维中腔胞壁对比的图像分析法。与传统的中腔胞壁对比法比较图像分析法具有若干优点,为今后客观检测的发展提供了一定参考。

沉默Nodal抑制高糖条件下培养的视网膜血管内皮细胞的生物学行为

目的观察高糖状态下Nodal对猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A细胞)生物学行为的影响。方法将RF/6A细胞分为正常组、甘露醇组、高糖组、高糖联合非特异小干扰RNA处理组(HG+NC组)、高糖联合小干扰Nodal处理组(HG+siNodal组)。蛋白质免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应观察细胞内Nodal蛋白、mRNA相对表达量;噻唑蓝比色法检测Nodal对RF/6A细胞增殖的影响;细胞划痕实验检测Nodal对RF/6A细胞迁移能力的影响;Matrigel体外三维成型法检测Nodal对RF/6A细胞管腔形成的影响;蛋白质免疫印迹法检测RF/6A细胞内磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(pERK1/2)蛋白相对表达量。多组间比较采用单因素方差分析。结果与HG+NC组比较,HG+siNodal组细胞内Nodal蛋白(F=33.469)、mRNA相对表达量(F=38.191)显著下降,细胞增殖能力(F=28.548)、细胞迁移能力(F=24.182)显著降低,细胞管腔形成数量显著减少(F=52.643),差异均有统计学意义(P<0.05)。与HG+NC组比较,HG+siNodal组细胞内pERK1/2蛋白相对表达量显著降低,差异有统计学意义(F=44.462,P<0.01)。结论沉默Nodal表达可抑制高糖诱导的RF/6A细胞增殖、迁移及成管能力;其可能通过抑制pERK1/2的表达发挥作用。

pH值对人真皮微血管内皮细胞成管的影响及其分子机制

目的探讨pH值对人真皮微血管内皮细胞(HDMEC)成管的影响并研究其分子机制,为促进创面愈合过程中血管新生的研究提供理论依据。方法采用实验研究方法。取第4、5代对数生长期HDMEC进行实验,制备pH值分别为6.4、6.6、6.8、7.0、7.2、7.4、7.6、7.8的培养液,用其适应性培养细胞(培养方式下同)24 h后进行后续实验。另培养36 h,采用流式细胞仪测定胞质pH值的相对荧光值并对胞质pH值的相对荧光值与培养液pH值进行相关分析。另培养1.5、2.5、3.5、4.5、5.5 d,采用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖活性。采用Oris^(TM)细胞迁移检测试剂盒检测去掉播种塞后0(即刻)、24、48 h细胞迁移剩余面积。进行三维基质胶细胞成管实验,检测另培养48 h细胞成管的管腔直径。另培养48 h,采用蛋白质印迹法检测细胞中蛋白激酶B(Akt)磷酸化位点473、308的蛋白表达。样本数均为3。对数据行Pearson相关性分析、单因素方差分析、析因设计方差分析、重复测量方差分析与Bonferroni校正。结果另培养36 h,与pH值6.4培养液相比,pH值6.8~7.8培养液培养细胞胞质pH值的相对荧光值均显著升高(P<0.05);与pH值6.6~7.0培养液相比,pH值7.4~7.8培养液培养细胞胞质pH值的相对荧光值均显著升高(P<0.05),且pH值6.6培养液培养细胞胞质pH值的相对荧光值明显低于pH值7.0、7.2培养液(P值均<0.05);pH值7.6、7.8培养液培养细胞胞质pH值的相对荧光值均显著高于pH值7.2、7.4培养液(P<0.05)。胞质pH值的相对荧光值与培养液pH值呈显著正相关(r=0.99,P<0.05)。8种pH值培养液另培养1.5 d细胞增殖活性相近(P>0.05)。另培养2.5 d,与pH值7.6培养液相比,pH值6.4~6.8培养液培养细胞增殖活性均显著下降(P<0.05)。另培养3.5 d,与pH值6.4~6.8培养液相比,pH值7.0~7.8培养液培养细胞增殖活性均显著升高(P<0.05);与pH值7.6培养液相比,pH值7.0~7.4、7.8培养液培养细胞增殖活性均显著下降(P<0.05)。另培养4.5、5.5 d,与pH值6.4培养液相比,pH值6.8~7.8培养液培养细胞增殖活性均显著升高(P<0.05);与pH值6.6、6.8培养液相比,pH值7.0~7.8培养液培养细胞增殖活性均显著升高(P<0.05)。另培养4.5 d,pH值7.6培养液培养细胞增殖活性显著高于pH值7.0培养液(P<0.05)。另培养5.5 d,与pH值7.0培养液相比,pH值7.2~7.6培养液培养细胞增殖活性均显著升高(P<0.05);与pH值7.2、7.4培养液相比,pH值7.6培养液培养细胞增殖活性显著升高(P值均<0.05),pH值7.8培养液培养细胞增殖活性显著降低(P值均<0.05)。去掉播种塞后0 h,8种pH值培养液培养细胞迁移剩余面积相近(P>0.05)。去掉播种塞后24 h,与pH值6.4培养液相比,pH值6.6~7.8培养液培养细胞迁移剩余面积均显著缩小(P<0.05);与pH值6.6、6.8培养液相比,pH值7.0~7.6培养液培养细胞迁移剩余面积均显著缩小(P<0.05)。去掉播种塞后48 h,与pH值6.4、6.6培养液相比,pH值7.0~7.8培养液培养细胞迁移剩余面积均显著缩小(P<0.05);pH值7.2、7.4培养液培养细胞迁移剩余面积均显著小于pH值6.8、7.0、7.8培养液(P<0.05),均显著大于pH值7.6培养液(P<0.05);pH值7.6培养液培养细胞迁移剩余面积显著小于pH值6.8、7.8培养液(P值均<0.05)。另培养48 h,pH值7.0、7.2、7.4、7.6、7.8培养液培养细胞成管的管腔直径分别为(5.0±0.5)、(7.6±0.9)、(8.5±0.7)、(11.0±0.8)、(5.3±0.8)μm,均显著长于pH值6.4培养液的(2.8±0.8)μm(P<0.05);pH值6.6[(4.2±0.3)μm]、6.8[(4.5±0.6)μm]、7.0、7.8培养液培养细胞成管的管腔直径均显著短于pH值7.6培养液(P<0.05)。另培养48 h,与pH值6.4、6.6培养液相比,pH值6.8~7.8培养液培养细胞中Akt磷酸化位点473、308蛋白表达均明显升高(P<0.05),且pH值6.6培养液培养细胞中Akt磷酸化位点308蛋白表达明显高于pH值6.4培养液(P<0.05);与pH值6.8培养液相比,pH值7.0、7.4~7.8培养液培养细胞中Akt磷酸化位点473蛋白表达均明显升高(P<0.05);与pH值7.6培养液相比,pH值7.0~7.4、7.8培养液培养细胞中Akt磷酸化位点473蛋白表达均明显降低(P<0.05);与pH值7.8培养液相比,pH值7.0~7.6培养液培养细胞中Akt磷酸化位点308蛋白表达均明显升高(P<0.05)。结论pH值可调控HDMEC形成毛细血管的管腔直径,该调控作用与Akt的激活密切相关;7.2~7.6为构建组织工程毛细血管的适宜pH值。

血管管腔形成的遗传调控

血管系统是脊椎动物机体中最早发育并行使重要生理功能的复杂系统。血管管腔形成启始于心脏开始跳动和所有其他组织器官形成之前,对于促进血管系统的精确建成和有效灌流,通过营养运输、气体交换和代谢废物清除以确保所有组织器官的形成和生长至关重要。在血管发育过程的两个阶段,即血管发生(vasculogenesis)和血管形成(angiogenesis)中,有效管腔的形成和维持均是保证血管正常发育并行使生理功能的关键环节。血管管腔形成大致可以分为两个关键环节:血管管腔形成的诱导以及内皮细胞极性的建立和维持。重点依据体内遗传修饰模式生物方面的研究结果,从上述两个环节分别阐述血管管腔形成的遗传调控机制。