Effect of Free Cells and Additional Supporting Material on Performance of Polyethylene Glycol (PEG)-Pellet Reactor to Treat NH4-N Contaminated Groundwater

To study the effect of free cells (suspended bacteria) on performance of entrapped bacteria system (i.e. polyethylene glycol (PEG)-pellet reactor) to treat NH4-N contaminated groundwater, two PEG-pellet reactors with a lot of free cells - Reactor A containing PEG-pellet and Reactor B containing PEG-pellet and supporting material - and the another control reactor without free cells (Reactor C) were set-up. Three reactors were operated under various NH4-N concentrations (40-60 mg/L) and various temperatures (5-25oC). The results show that the free cells effected on the NH4-N removal efficiency significantly. The free cells developed to be a biofilm layer on the pellet surface for Reactor A, the biofilm layer caused the decreasing NH4-N diffusion and incomplete nitrification eventually. On the other hand, most free cells attached to the supporting material for Reactor B. Although the NH4-N could diffuse properly, the free cells consuming acetate caused the added acetate was insufficient for complete denitrification. However, the results suggest that the supporting material could reduce the effect of free cells on the reactor performance at low temperature as indicated by 1) higher efficiency and 2) lower activation energy (Ea) for nitrification and denitrification in Reactor B than Reactor A.

激活的富血小板血浆促进Pellet培养的脂肪间充质干细胞成软骨样分化

目的探讨激活的富血小板血浆(PRP)对Pellet培养的人脂肪来源间充质干细胞向软骨样细胞分化及相关信号通路的影响。方法添加不同比例(5%、10%和15%)的激活PRP,检测不同培养时间(1、3、5、7、9、11 d)脂肪干细胞的增殖能力。将采用Pellet培养的P3代的h ADSCs分为3组,对照组、激活PRP组和含TGF-β3的软骨诱导组,持续培养21 d后,阿利新蓝和苏木精-伊红染色进行软骨分化鉴定,real-time PCR测定Sox-9、Aggrecan和II型胶原的基因表达,DMMB法测定胞外基质中GAG含量,Western blot进一步检测对照组和激活PRP组中Sox-9、Gli-1和BMP-2蛋白的表达。结果 MTT实验结果显示,在10%激活PRP培养条件下,11 d的生长时间内hADSCs的增殖率最适宜。阿利新蓝和苏木精-伊红染色显示,激活PRP组和软骨诱导组中软骨表达呈阳性。Real-time PCR结果表明软骨诱导组其Sox-9、Aggrecan和II型胶原mRNA表达的能力高于激活PRP组(P<0.05)。GAG实验结果显示,软骨诱导组促GAG分泌的能力优于激活PRP组(P<0.05)。Western blot结果显示,相比对照组,激活PRP组中伴随Gli-1和BMP-2的蛋白表达升高,而Sox-9蛋白表达随之升高。结论激活PRP刺激hADSCs的最适增殖能力的浓度比例为10%。激活PRP和软骨诱导剂对脂肪干细胞成软骨分化中的诱导表达具有相似的能力,激活PRP对h ADSCs诱导成软骨作用与Hedgehog和BMP信号通路有关。

基于人诱导多能干细胞的组织工程化软骨再生

目的:构建一种稳定高效的人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)向软骨中胚层方向分化的培养方法,初步探究hiPSCs来源的软骨用于关节软骨再生的可能。方法:通过模拟体内发育过程和三维(three dimensions,3D)悬浮培养体系,逐步诱导hiPSCs向软骨中胚层和成熟的软骨组织分化;利用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blotting)、免疫荧光及免疫组织化学技术检测整个培养过程中多能干性、中胚层及软骨相关基因和蛋白的动态变化;最后利用裸鼠皮下模型研究hiPSCs软骨球软骨表型的稳定性及成瘤性。结果:通过模拟体内发育过程,成功逐步诱导hiPSCs向软骨中胚层方向分化,最终分化为成熟的软骨组织。结论:本研究成功构建了一种稳定高效诱导hiPSCs向软骨中胚层方向分化的培养体系,为探究hiPSCs介导的软骨组织发育和再生提供了一个研究平台。

黑曲霉菌丝球的形成及应用研究综述

黑曲霉是食品和生物工程行业中应用广泛的微生物。黑曲霉菌丝球在液态培养中有提高传质,容易分离菌体,提高生物量,提高产物含量等诸多优点,在柠檬酸生产、海藻收获、污水处理、酶生产等方面都有成功应用。黑曲霉菌丝球在培养过程中会受到多种因素的影响,例如p H、孢子浓度、营养成分、培养条件、黑曲霉的生长状态等。该文综述了黑曲霉形成菌丝球的机理和形成技术,总结了它在多个方面的应用。

针刺对NIDDM大鼠作用的形态学观察

目的 :探讨针刺对非胰岛素依赖型糖尿病 (NIDDM)大鼠胰岛素B细胞形态的影响。方法 :采用生化、放免等技术观察针刺对NIDDM大鼠空腹血糖 (FBS)、空腹胰岛素 (FINS)、C -肽 (C -P)、胰岛素敏感性指数 (IAI)的变化 ,同时用电子显微镜观察针刺对NIDDM大鼠胰岛B细胞形态学的改变。结果 :NIDDM大鼠B细胞体积增大 ,内分泌颗粒增多 ,苍白颗粒减少 ,芯颗粒与分泌颗粒的面积之比也明显增多 ,可见胰岛外分泌细胞可化生B细胞。针刺治疗后NIDDM大鼠FBS ,FINS ,C -P均显著下降 ,而IAI显著回升。与此同时 ,上述形态学的异常均出现逆转。结论

雷公藤红素抑制抗体形成及抗炎作用

雷公藤红素是雷公藤主妻活性成分之一,本支报道它在试管内及整体均明显抑制小鼠脾细胞溶血空斑细胞的形成,此作用与浓度呈依赖关系。对手大鼠实验性棉球肉芽肿的形成,小鼠二硝基氧苯。(DNCB)所致迟发型超敏反应均有明显抑制作用,回时还观察到它能延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间。

葡萄原生质体培养中若干因素的研究

试验结果表明,处于对数生长期、再生能力强的培养细胞有利于原生质体分离和培养。原生质体分离和初期培养的适宜渗透浓度为0.5M;固体包埋法的效果明显优于液体培养,前者分裂率为后者的3.8倍,达13.8%;外源激素浓度以 B_5基本培养基添加 NAA 2.0mg/L,BA 2.0mg/L,原生质体分裂率最高;葡萄糖取代常规稳压剂甘露醇,效果显著,细胞分裂率是后者的2.6倍。

米曲霉3042的液体培养特性及其产氨基酰化酶的特性研究

对液体培养的米曲霉（Aspergillusoryzae）3042所产生的氨基酰化酶胞内外分布及其酶的最适pH、温度和热稳定性进行了探讨。结果表明：米曲霉3042属于凝聚型菌株，当搅拌速率为90～120r／min时可获得较好的菌球；氨基酰化酶属于胞内酶，存在于细胞内部或分布于细胞壁上；菌体酶活最适pH为7．0，最适温度为55℃。

高温加速贮存对热电池性能的影响

研究了高温加速贮存对热电池性能的影响,结果表明,高温贮存加快了锂合金负极与水的反应,造成电池的工作时间缩短;高温贮存加速了活性铁粉的氧化,导致电池的激活时间增大。

牙周膜干细胞聚合体：一种潜在骨组织再生方法

目的:探索牙周膜干细胞的成骨能力。方法:体外培养牙周膜干细胞(PDLSCs),经体外鉴定、扩增构建PDLSCs细胞膜片(CS)和细胞聚合体(CP),通过大体观察、HE和免疫组化染色、扫描电镜进行形态学检测,实时定量PCR检测CS和CP成骨相关基因的表达水平,并观察裸鼠体内成骨能力。结果:成功分离、培养并鉴定PDLSCs后,构建PDLSCs CS和CP。组织学观察发现CP内细胞外基质丰富;免疫组化染色发现这些细胞外基质中骨涎蛋白(BSP)、碱性磷酸酶(ALP)和I型胶原表达呈阳性;CP上BSP、ALP和Runx2基因表达水平明显高于CS;体内实验发现CP组大量骨样组织形成,而CS组可见纤维样骨组织形成。结论:PDLSCs细胞聚合体技术为修复牙槽骨缺损提供了一种新的方法。

水平圆台式排种器型孔结构尺寸对囊种率影响的研究

在对新型水平圆台排种器研究基础上,从水平圆台式排种器的结构和工作原理出发,结合丸粒化种子尺寸分布的特点,采用可靠性理论对型孔结构和参数进行了研究,确定了型孔参数的模型,进一步通过试验确定了影响型孔囊种率的主要因素,最后通过试验数据分析确定了具有最佳效果的参数组合,即动盘倾角32°,型孔直径15mm,导种槽角度55°,导种槽高度为7mm,动盘转速为17r/min时囊种效果最好,为该类排种器的设计提供了借鉴和理论依据。

菱灵颗粒有效成分的抗肿瘤作用研究

目的:研究菱灵颗粒有效成分—化合物Ⅰ在体外对Hela细胞的作用及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)还原法检测化合物Ⅰ对肿瘤生长抑制作用,应用光学显微镜、透射电子显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果:化合物Ⅰ对人宫颈癌细胞生长具有明显的抑制作用及诱导细胞凋亡作用,且这种作用有剂量依赖关系,化合物Ⅰ25、12.5、6.25mg/L剂量组30h抑瘤率为52.04%、34.44%、23.72%,100、50、25、12.5、6.25、3.125mg/L剂量组30h抑瘤率显著正相关,相关系数r=0.9860(p<0.01),IC50值为10.9mg/L。透射电子显微镜对化合物Ⅰ25、12.5、6.25mg/L剂量组受试细胞观察,均出现不同程度细胞凋亡现象,细胞核明显皱缩、染色质趋边凝聚、线粒体空化等特征。流式细胞仪检测发现凋亡峰。结论:化合物Ⅰ对Hela细胞增殖抑制作用明显并且有诱导细胞凋亡作用。

棉秸秆含水率及粒径对颗粒燃料性能的影响

以棉秸秆为原料,利用环模式颗粒成型机制备颗粒燃料,通过研究原料粒径及含水率的变化对颗粒燃料的成粒率、长度、直径、颗粒密度、机械耐久性、灰分及低位发热值的影响规律,探索棉秸秆颗粒燃料的较佳制备方法.结果表明：原料的含水率及粒径对颗粒燃料的基本性能有明显的影响,当原料含水率控制在20％左右,原料粒径为2～4mm时,颗粒燃料显示出了较佳的性能特征,具有较大的商业推广价值.

右归饮对假体周围骨溶解大鼠模型体外培养破骨细胞分化和相关基因表达的影响

[目的]为进一步观察右归饮对假体周围骨溶解模型大鼠体外诱导培育破骨细胞的分化以及相关基因表达的影响。[方法]制备假体周围骨溶解大鼠模型,六周后(造模)处死,无菌条件下用造模完成的大鼠的四肢骨髓腔中分离破骨细胞,接种于象牙薄片底物上,然后随机分为4组:高、中、低浓度右归饮血清模型组(Y1、Y2、Y3)和生理盐水对照血清模型组(Y4),分别添加高、中、低浓度右归饮含药血清及生理盐水对照血清;没有造模的大鼠的破骨细胞培养设为空白对照组(Y5),于第7d终止培养,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色对TRAP阳性多核破骨细胞计数;采用吖啶橙荧光染色法计数破骨细胞的凋亡率;用RT-PCR测定ATP6i、IL-1、IL-6基因相对表达量,分析破骨细胞骨吸收活性。[结果]高、中、低浓度右归饮血清模型组(Y1、Y2、Y3)与生理盐水血清模型组(Y4)相比,TRAP染色阳性的破骨细胞数量显著减少,破骨细胞的凋亡率明显增加,ATP6i、IL-1、IL-6基因表达明显减少。生理盐水血清模型组(Y4)与生理盐水血清空白组(Y5)相比,TRAP染色阳性的破骨细胞数量显著增加,破骨细胞的凋亡率无显著性差异(P>0.05)。[结论]一定浓度的右归饮含药血清对体外培养的颗粒病模型大鼠破骨细胞的增殖和分化具有明显的抑制作用,能显著抑制破骨细胞相关基因的表达。

温肾益心丹对慢性心力衰竭老年患者心肌细胞凋亡的影响

目的观察温肾益心丹联合西医常规治疗对老年慢性心力衰竭(CHF)患者心肌细胞凋亡的影响。方法 50例CHF患者随机分为对照组和研究组,对照组予西医常规治疗,研究组在西医常规治疗基础上加服温肾益心丹(每次3粒,每日3次),疗程均为28 d。治疗前后采集血液标本,应用酶联免疫法测定血清中sFas、sFasL水平。结果研究组治疗后血清中sFas、sFasL水平明显下降,对照组治疗后血清中sFas、sFasL水平也下降,但较治疗前无明显差异。两组治疗后比较,研究组血清中sFas、sFasL水平下降更显著。结论温肾益心丹能较好地降低CHF患者血清中凋亡相关因子sFas、sFasL的水平,可能是其发挥作用的机制之一。

犀黄丸对多种人恶性肿瘤细胞株MDA-MB-231、SMMC7721、T24、HL-60、A549增殖的影响

目的:研究犀黄丸对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、人肝癌细胞株SMMC7721、人膀胱癌细胞株T24、人早幼粒细胞白血病细胞株HL-60、人肺腺癌A549细胞株细胞增殖的影响。方法:将不同浓度犀黄丸浸出液,直接加入含肿瘤细胞培养板中,MTT法分别测定其对多种恶性肿瘤细胞株增殖的影响。结果:犀黄丸浸出液对MDA-MB-231、SMMC7721、T24、HL-60、A549肿瘤细胞的增殖均有明显的抑制作用(P<0.05;P<0.01),且随浓度的增加,抑制率上升,呈剂量依赖关系,抑瘤作用的IC50以MDA-MB-231、SMMC7721为敏感。结论:体外实验结果表明,犀黄丸对多种人肿瘤细胞增殖有明显抑制作用,不同的恶性肿瘤细胞株对其的敏感性存在较大的差异,其抑瘤作用表现出一定的选择性。提示犀黄丸在传统上用于“乳岩”———乳腺癌的治疗确有一定的科学性,故传统抗肿瘤中药在现代临床使用时也应选择敏感的肿瘤类型。

牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血再灌注后Nestin表达的影响

目的 :探讨牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血再灌注后神经干细胞Nestin表达的影响。方法 :采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血再灌注模型 ,应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞巢蛋白 (Nestin)的表达 ,观察牛珀至宝微丸对脑缺血后神经上皮干细胞巢蛋白的影响。结果 :脑缺血再灌注后 ,牛珀至宝微丸组缺血侧室管膜、室管膜下区、皮层和纹状体Nestin阳性细胞数显著多于缺血对照组 (P <0 0 5 ) ,且神经病学评分明显低于缺血对照组 (P <0 0 5 )。结论 :牛珀至宝微丸能持续上调脑缺血再灌注后Nestin的表达 ,这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。

细胞膜片技术及其在牙周组织再生中的研究进展

目前临床上常规采用的牙周治疗方法尚不能完全实现完整的和有效的牙周组织再生。细胞膜片技术(cell sheet technology,CST)是一种无需支架材料的细胞移植方法,可保留完整的细胞外基质及细胞重要离子通道、生长因子受体等,保证了细胞间及细胞与胞外基质之间的相互作用。本文从细胞膜片的种类、构建方法,综述其在牙周组织再生领域的应用及研究进展。不同类型的种子细胞均可制备成单层细胞膜片、多层细胞膜片、细胞膜片片段及细胞膜片聚合体。其中,单层细胞膜片较容易破损,对操作者要求较高。多层细胞膜片可提高机械性,但其厚度需控制,以避免出现细胞坏死。细胞膜片片段可应用于牙槽骨和牙根牙骨质之间的狭窄空间,降低操作难度,也提高膜片机械性。细胞膜片聚合体是三维结构,可提供强有力的机械支持,提高细胞膜片的稳定性,但其生物活性的稳定性尚需进一步提高。在构建细胞膜片的方法中,羊膜基底膜的抗纤维化抗血管生成的生物属性决定了其很适合充当细胞培养的基质;温度敏感性培养皿法简单易行;维生素C连续诱导法可保留细胞表面的一些重要蛋白;磁力组织工程法可使细胞粘附力增加,更容易形成稳定的细胞膜片,以上方法各有特点。在临床应用中,单层细胞膜片多应用于直接移植到受区位点,构建牙周组织;同种或异种多层细胞膜片叠加后移植到受区位点;同种多层细胞膜片包裹支架材料后移植到受区位点,构建三维结构组织。总而言之,CST在牙周组织再生中表现出了巨大的潜力。

活络效灵丹拆方对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用研究

目的探讨活络效灵丹含药血清对乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用及其机制。方法取体外培养的乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧心肌细胞损伤模型。实验分为正常组、模型组(H/R组)、活络效灵丹拆方组和阳性药对照组(单硝酸异山梨酯组)。用MTT比色法检测活络效灵丹对H/R损伤心肌细胞存活率和细胞上清液中LDH漏出量的影响,优选活络效灵丹的最佳配伍组合,并测定各组细胞浆丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;用RT-PCR法检测心肌细胞Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的表达。结果实验优选出活络效灵丹全方、丹参当归配伍、丹参乳香配伍、丹参当归乳香配伍为最佳配伍。与正常组比较,模型组MDA含量升高、SOD活性降低(P<0.01),细胞Bcl-2 mRNA表达降低、Bax mRNA表达增高(P<0.01);与模型组比较,优选的活络效灵丹各配伍组胞浆SOD活性增高、胞浆MDA含量减少(P<0.01),心肌细胞Bax mRNA表达减少、Bcl-2 mRNA表达增高(P<0.01)。结论活络效灵丹对H/R损伤的心肌细胞具有保护作用,其作用机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化、上调Bcl-2 mRNA和下调Bax mRNA表达等有关。

牛珀至宝微丸对内毒素致急性肺损伤纤维化大鼠辅助性T细胞的影响

目的：观察牛珀至宝微丸对内毒素致急性肺损伤纤维化（RPF）大鼠辅助性T细胞（Th细胞）的影响。方法将224只健康Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、地塞米松组（地米组）和牛珀至宝微丸组（牛丸组），每组56只。采用内毒素“三次打击”造成RPF模型。于制模前3 d和制模后7 d牛丸组给予牛珀至宝微丸500 mg/kg灌胃，每日2次，共用10 d；地米组腹腔注射地塞米松3.0 mg/kg，每日1次，连用7 d；对照组给予等体积蒸馏水灌胃。于给药后1、3、7、9、14、21、28 d 7个时间点取血和支气管肺泡灌洗液（BALF），用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清及BALF中γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）含量；然后取肺组织用苏木素-伊红（HE）染色及Van Gieson法染色，光镜下观察肺组织形态学变化。结果 HE染色显示，模型组肺间质增厚，肺泡腔内大量炎性渗出，腔内微血栓形成；地米组肺间质增厚，炎性渗出减少明显；牛丸组渗出较地米组稍增多，肺间质基本正常。Van Gieson法染色显示：模型组胶原纤维表达明显；地米组胶原纤维表达减少不明显；牛丸组胶原纤维表达显著减少。ELISA试验显示：模型组BALF和血清中IFN-γ显著升高，地米组7 d时最低，14 d上升至治疗前水平，21 d逐渐下降；牛丸组IFN-γ持续处于高水平后缓慢回落，给药后7 d起各时间点BALF和血清中IFN-γ水平即明显高于模型组和地米组〔BALF（ng/L）：140.47±4.22比149.23±8.35、90.67±6.65；血清（ng/L）：140.47±4.15比100.43±11.05、99.35±7.85，P＜0.05或P＜0.01〕。各组BALF和血清中IL-4显著升高，7 d时最高，以后逐渐降低，给药后28 d牛丸组显著低于模型组和地米组〔BALF（ng/L）：6.60±1.05比7.20±1.25、8.55±1.05，血清（ng/L）：6.75±1.05比7.21±1.25、8.25±1.15，P＜0.05或P＜0.01〕。结论牛珀至宝微丸通过促进IFN-γ分泌、抑制IL-4分泌，调整Th细胞失衡，以达到抗炎、减轻肺损伤、抑制肺纤维化的作用。