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人谷胱甘肽硫转移酶M1基因在CHO细胞中的表达
被引量:
1
1
作者
陈萍萍
张朝武
+2 位作者
谢东
吴逸明
韩良峰
《中国工业医学杂志》
CAS
北大核心
2004年第5期289-292,296,共5页
目的 构建人谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)的CHO细胞表达体系。方法 重组质粒pcDNA3 1 GSTM1用LipofectamineTM2 0 0 0转染CHO细胞 ,用G418筛选细胞的阳性克隆 ,并用PCR、RT PCR和Westernblot进行鉴定 ,测定GSTM1酶活性。结果 GSTM1基...
目的 构建人谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)的CHO细胞表达体系。方法 重组质粒pcDNA3 1 GSTM1用LipofectamineTM2 0 0 0转染CHO细胞 ,用G418筛选细胞的阳性克隆 ,并用PCR、RT PCR和Westernblot进行鉴定 ,测定GSTM1酶活性。结果 GSTM1基因已转染到CHO细胞的基因组 ,并转录表达 ,生成GSTM1蛋白 ,经测定活性达到2 8mmol/ (min·mgprot)。结论 通过CHO GSTM1细胞表达 ,为基因工程生产具有完整功能GSTM1的进一步纯化提供了材料 ,为研究化学致癌物在真核细胞中的代谢 ,作为遗传药理学、毒理学研究的候选细胞株奠定了基础。
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关键词
GSTM1
序列测定
CHO细胞
细胞转染
表达
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职称材料
p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞对化疗药物敏感性的研究
被引量:
1
2
作者
曹岩
郑永洁
+1 位作者
郑永晨
黄颖
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第9期1221-1223,共3页
目的探讨p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞(7721细胞)对化疗药物的敏感性,深入研究p21基因对肝癌细胞的治疗作用。方法应用磷酸钙介导p21基因转染人肝癌7721细胞;通过G418筛选稳定表达细胞株并扩大培养;采用MTT法检测肿瘤细胞增殖...
目的探讨p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞(7721细胞)对化疗药物的敏感性,深入研究p21基因对肝癌细胞的治疗作用。方法应用磷酸钙介导p21基因转染人肝癌7721细胞;通过G418筛选稳定表达细胞株并扩大培养;采用MTT法检测肿瘤细胞增殖速度;流式细胞术检测细胞周期变化。结果经过3~4w G418筛选得到稳定表达的细胞株,p21基因稳定转染并联合化疗药物应用可明显抑制7721细胞的体外增殖,细胞周期明显改变,细胞从G1期到G2期发生阻滞。结论提示转染外源p21基因联合化疗药物可使7721细胞周期阻滞于G1期,并可抑制肿瘤细胞增殖。
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关键词
P21基因
肝癌细胞株
MTT法
基因转染
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职称材料
小菜蛾NanosO基因启动子的克隆及功能验证
3
作者
王亚军
黄宇萍
+4 位作者
于慧慧
徐雪娇
杨广
艾倩倩
尤民生
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期1376-1383,共8页
【目的】克隆小菜蛾Plutella xylostella NanosO基因PxnosO启动子,并验证其具有生殖腺特异性活性,以期应用于基因功能研究或转基因昆虫的构建,为小菜蛾等农业害虫的综合治理提供新的研究思路。【方法】根据小菜蛾基因组序列信息,利用PC...
【目的】克隆小菜蛾Plutella xylostella NanosO基因PxnosO启动子,并验证其具有生殖腺特异性活性,以期应用于基因功能研究或转基因昆虫的构建,为小菜蛾等农业害虫的综合治理提供新的研究思路。【方法】根据小菜蛾基因组序列信息,利用PCR技术克隆NanosO的启动子并进行序列分析。构建PxnosO-EGFP表达质粒,利用脂质体细胞转染技术将PxnosO-EGFP和IE1-EGFP表达质粒转入到小菜蛾胚胎细胞系(Px-6)和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢细胞系(Sf9)中,通过激光共聚焦荧光显微镜观察和qRT-PCR技术分别定性和定量分析EGFP基因的表达,验证小菜蛾NanosO启动子的活性。【结果】克隆获得小菜蛾PxnosO(Px004767)启动子区序列,长1 743 bp。对启动子序列进行分析,发现该序列不仅包含启动子共有核心元件TATA box以及上游启动子成分CAAT box和GC box等,还包含有数十个转录因子结合位点。利用细胞转染技术,在PxnosO启动子驱动下成功地在Px-6和Sf9细胞系中表达外源基因EGFP。【结论】克隆了小菜蛾NanosO基因PxnosO启动子,在细胞水平上验证其能驱动外源EGFP基因的表达,为分析PxnosO在小菜蛾不同发育时期的表达模式和PxnosO启动子在体内的功能验证奠定基础。
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关键词
小菜蛾
NanosO
生殖腺特异性启动子
表达质粒
细胞转染
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职称材料
题名
人谷胱甘肽硫转移酶M1基因在CHO细胞中的表达
被引量:
1
1
作者
陈萍萍
张朝武
谢东
吴逸明
韩良峰
机构
郑州大学医学院公共卫生学院
四川大学华西公共卫生学院
中国科学院上海生命科学研究院营养科学研究所
河南省卫生监督所
出处
《中国工业医学杂志》
CAS
北大核心
2004年第5期289-292,296,共5页
基金
河南省自然科学基金资助 (0 0 4 0 2 560 0 )
文摘
目的 构建人谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)的CHO细胞表达体系。方法 重组质粒pcDNA3 1 GSTM1用LipofectamineTM2 0 0 0转染CHO细胞 ,用G418筛选细胞的阳性克隆 ,并用PCR、RT PCR和Westernblot进行鉴定 ,测定GSTM1酶活性。结果 GSTM1基因已转染到CHO细胞的基因组 ,并转录表达 ,生成GSTM1蛋白 ,经测定活性达到2 8mmol/ (min·mgprot)。结论 通过CHO GSTM1细胞表达 ,为基因工程生产具有完整功能GSTM1的进一步纯化提供了材料 ,为研究化学致癌物在真核细胞中的代谢 ,作为遗传药理学、毒理学研究的候选细胞株奠定了基础。
关键词
GSTM1
序列测定
CHO细胞
细胞转染
表达
Keywords
Glutathione-S-tr ansferase M1 gene
C hinese Hamster Ovary(CHO)
cell
s
transfectio
n
Expression
分类号
R382.31 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞对化疗药物敏感性的研究
被引量:
1
2
作者
曹岩
郑永洁
郑永晨
黄颖
机构
吉林大学第二医院中心实验室
吉林大学中日联谊医院肿瘤内科
出处
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第9期1221-1223,共3页
文摘
目的探讨p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞(7721细胞)对化疗药物的敏感性,深入研究p21基因对肝癌细胞的治疗作用。方法应用磷酸钙介导p21基因转染人肝癌7721细胞;通过G418筛选稳定表达细胞株并扩大培养;采用MTT法检测肿瘤细胞增殖速度;流式细胞术检测细胞周期变化。结果经过3~4w G418筛选得到稳定表达的细胞株,p21基因稳定转染并联合化疗药物应用可明显抑制7721细胞的体外增殖,细胞周期明显改变,细胞从G1期到G2期发生阻滞。结论提示转染外源p21基因联合化疗药物可使7721细胞周期阻滞于G1期,并可抑制肿瘤细胞增殖。
关键词
P21基因
肝癌细胞株
MTT法
基因转染
Keywords
p21 gene
Hepato
cell
ular carcinoma
cell
line
MTr assay
Gene
transfectio
n
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
小菜蛾NanosO基因启动子的克隆及功能验证
3
作者
王亚军
黄宇萍
于慧慧
徐雪娇
杨广
艾倩倩
尤民生
机构
福建农林大学生命科学学院
福建农林大学应用生态研究所
福建农林大学
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第12期1376-1383,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31320103922,31230061).
文摘
【目的】克隆小菜蛾Plutella xylostella NanosO基因PxnosO启动子,并验证其具有生殖腺特异性活性,以期应用于基因功能研究或转基因昆虫的构建,为小菜蛾等农业害虫的综合治理提供新的研究思路。【方法】根据小菜蛾基因组序列信息,利用PCR技术克隆NanosO的启动子并进行序列分析。构建PxnosO-EGFP表达质粒,利用脂质体细胞转染技术将PxnosO-EGFP和IE1-EGFP表达质粒转入到小菜蛾胚胎细胞系(Px-6)和草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda卵巢细胞系(Sf9)中,通过激光共聚焦荧光显微镜观察和qRT-PCR技术分别定性和定量分析EGFP基因的表达,验证小菜蛾NanosO启动子的活性。【结果】克隆获得小菜蛾PxnosO(Px004767)启动子区序列,长1 743 bp。对启动子序列进行分析,发现该序列不仅包含启动子共有核心元件TATA box以及上游启动子成分CAAT box和GC box等,还包含有数十个转录因子结合位点。利用细胞转染技术,在PxnosO启动子驱动下成功地在Px-6和Sf9细胞系中表达外源基因EGFP。【结论】克隆了小菜蛾NanosO基因PxnosO启动子,在细胞水平上验证其能驱动外源EGFP基因的表达,为分析PxnosO在小菜蛾不同发育时期的表达模式和PxnosO启动子在体内的功能验证奠定基础。
关键词
小菜蛾
NanosO
生殖腺特异性启动子
表达质粒
细胞转染
Keywords
Plutella xylostella
NanosO
gonad-specific promoter
expression plasmid
cell transfectio
分类号
Q966 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人谷胱甘肽硫转移酶M1基因在CHO细胞中的表达
陈萍萍
张朝武
谢东
吴逸明
韩良峰
《中国工业医学杂志》
CAS
北大核心
2004
1
下载PDF
职称材料
2
p21基因转染人肝癌SMMC-7721细胞对化疗药物敏感性的研究
曹岩
郑永洁
郑永晨
黄颖
《中国老年学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
下载PDF
职称材料
3
小菜蛾NanosO基因启动子的克隆及功能验证
王亚军
黄宇萍
于慧慧
徐雪娇
杨广
艾倩倩
尤民生
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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