安徽省4个地方鸡品种OCX-32基因外显子4的多态性及其与淮南麻黄鸡蛋品质的相关分析

【目的】研究OCX-32基因在淮南麻黄鸡、五华鸡、淮北麻鸡和皖南三黄鸡等4个安徽省地方鸡品种中的遗传多态性及OCX-32基因与淮南麻黄鸡蛋品质的相关性,为揭示这些群体的遗传特征提供基础数据。【方法】采用PCR-RFLP技术,对淮南麻黄鸡、五华鸡、淮北麻鸡和皖南三黄鸡4个地方鸡品种的OCX-32基因外显子4进行遗传多态性研究,并对外显子4遗传多态性与淮南麻黄鸡蛋品质的相关性进行分析。【结果】OCX-32基因外显子4存在A494C1个单核苷酸多态性位点。该位点在安徽省4个地方鸡品种中的基因频率和基因型频率分布差异不大,C等位基因频率较高。4个地方鸡品种群体在A494C位点处于Hardy-Weinberg平衡状态,均表现为中度多态。相关分析结果表明,OCX-32基因外显子4的A494C位点基因多态性与淮南麻黄鸡的开产蛋质量、30周龄蛋质量、蛋白高度和哈氏单位显著相关(P<0.05);CC基因型的开产蛋质量和30周龄蛋质量显著高于AA基因型,AA和CC基因型的蛋白高度显著高于AC基因,AA基因型的哈氏单位显著高于AC基因型(P<0.05)。【结论】OCX-32基因与淮南麻黄鸡蛋品质存在一定的相关性,可作为发掘淮南麻黄鸡蛋品质的分子育种标记。

蛋鸡OCX-32、OVA基因多态性及其与蛋品质性状的关联分析

试验旨在研究卵钙蛋白-32(ovocalyxin-32,OCX-32)、卵清蛋白(ovalbumin,OVA)基因多态性与蛋品质性状的关联性,寻找与蛋鸡蛋品质性状相关的分子遗传标记。采用PCR-SSCP技术对海兰褐蛋鸡父母代中OCX-32、OVA基因的多态位点进行检测,使用SPSS 22.0软件将不同基因型与海兰褐蛋鸡蛋品质性状进行关联分析,并进一步在子代中验证,寻找优势基因型。结果显示,OCX-32基因第6外显子中检测到AA、BB和CC 3种基因型,2个突变位点,分别位于7018和7116 bp;OVA基因第5外显子中检测到AA、BC、BB 3种基因型,2个突变位点位于4296和4323 bp。关联分析结果表明,海兰褐蛋鸡父母代OCX-32基因AA基因型的蛋黄重极显著高于BB和CC基因型(P<0.01);海兰褐蛋鸡父母代OVA基因AA基因型的哈氏单位及蛋白高度极显著高于BC基因型(P<0.01),显著高于BB基因型(P<0.05),AA基因型蛋白重显著高于BC基因型(P<0.05)。在子代中验证进一步确定了OCX-32基因的AA基因型为调控蛋黄重的优势基因型,OVA基因的AA基因型为调控哈氏单位、蛋白高度和蛋白重的优势基因型。综上所述,OCX-32及OVA基因对蛋品质性状有一定影响,可作为蛋鸡的分子育种标记。

OCX-32基因内含子变异对长顺绿壳蛋鸡蛋壳品质的影响

【目的】探讨OCX-32基因对长顺绿壳蛋鸡蛋壳品质的遗传效应,为长顺绿壳蛋鸡的保种选育及开发利用提供参考依据。【方法】以长顺绿壳蛋鸡为材料,采用PCR产物直接测序法筛选OCX-32基因SNP多态位点,实时荧光定量PCR检测组织表达谱,运用SPSS 19.0广义线性模型(GLM)分析SNP位点基因型或双倍型与所测定性状指标的相关性。【结果】在长顺绿壳蛋鸡OCX-32基因中检测到3个SNPs位点,分别是位于内含子1上的g.22592323G>T及内含子3上的g.22597350T>C和g.22597555G>A。卡方(χ2)检测结果发现,g.22597350T>C位点的基因型分布显著偏离HardyWeinberg平衡(P<0.05,下同)。连锁不平衡分析结果显示,3个SNPs突变位点不存在强连锁不平衡,共发现4种单倍型和8种双倍型,单倍型H1和双倍型H1H2频率最高,分别为0.523和0.345。实时荧光定量PCR检测结果显示,OCX-32基因在长顺绿壳蛋鸡12个组织中存在不同程度的表达,表达量排序为肾脏>心脏>子宫>腹脂>小肠>脾脏>肝脏>腺胃>胸肌>胰腺>肺脏>肌胃。关联分析结果显示,g.22597350T>C位点CC基因型在蛋壳强度和蛋壳重2个品质指标上显著高于CT基因型和TT基因型;双倍型H4H4个体的蛋壳强度显著高于其他7种双倍型个体,蛋壳重显著高于H2H4个体。【结论】OCX-32基因内含子变异能影响长顺绿壳蛋鸡蛋壳品质,检测到的3个SNPs位点可作为鸡蛋壳品质选择的遗传分子标记,其中突变位点g.22597350T>C的CC基因型和双倍型H4H4是影响蛋壳强度和蛋壳重的关键基因型和双倍型,有利改善蛋壳品质。

Mscomm32.ocx控件在计量称重系统中的应用

文章简介了8142称重显示仪,详细介绍了Mscomm32.ocx串行通讯控件的属性以及在运用Power-Builder 8.0编程过程中代码的实现情况。

OCX-32基因表达载体构建及其对鸡子宫上皮细胞Ca^(2+)浓度和脂质指标的影响

为探究卵黄蛋白原-32(ovocalyxin-32,OCX-32)基因过表达与鸡子宫上皮细胞Ca^(2+)含量和脂质指标之间的关联性,本研究采用Ⅳ型胶原酶法分离培养长顺绿壳蛋鸡子宫上皮细胞,构建pcDNA3.1(+)+OCX-32+Flag表达载体并转染子宫上皮细胞,测定OCX-32基因过表达量、Ca^(2+)浓度和脂质指标并进行相关性分析。结果显示,试验组的总胆固醇(TCHO)浓度显著高于对照组(P<0.05),对照组的Ca^(2+)浓度显著高于试验组(P<0.05)。OCX-32基因过表达量与Ca^(2+)浓度呈显著负相关关系(P<0.05),与甘油三酯(TG)浓度呈显著正相关关系(P<0.05),与TCHO浓度呈极显著负相关关系(P<0.01),TCHO浓度与TG浓度呈极显著负相关关系(P<0.01),研究结果揭示了OCX-32基因过表达能够调控鸡子宫上皮细胞的Ca^(2+)含量和脂质的合成转运,为深入阐释鸡子宫上皮细胞中脂质和钙分泌的调控机制提供试验基础和数据支持。

多发性骨髓瘤手术治疗患者外周血细胞积分和IL-32与预后的关系

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)手术治疗患者外周血细胞积分和白细胞介素(IL)-32水平与预后的关系。方法选取2019年1月—2021年1月大连市第二人民医院行手术治疗的MM患者102例。检测所有患者术前1 d的单核细胞绝对数(MO#)、血小板(PLT)计数、红细胞平均体积(MCV)和IL-32水平,计算外周血细胞积分。收集所有患者的临床资料和实验室检测结果。对患者进行术后随访(1年),根据MM患者的生存情况分为存活组(76例)和死亡组(26例)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各项指标判断MM患者术后死亡的效能。采用Kaplan-Meier生存曲线分析MM患者的预后情况,采用Cox比例风险回归分析评估MM患者术后死亡的危险因素。结果死亡组外周血细胞积分2~3分、MO#>0.6×10^(9)·L^(-1)和MCV>100 fL所占比例,以及胱抑素C(Cys C)、IL-32水平均高于存活组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血细胞积分、IL-32单项检测和联合检测(串联)判断MM患者术后死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.811、0.837、0.905。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,外周血细胞积分2~3分组生存率显著低于0~1分组(P<0.05),高IL-32组(IL-32≥62.38 ng·L^(-1))生存率显著低于低IL-32组(IL-32<62.38 ng·L^(-1))(P<0.05)。Cox比例风险回归分析结果显示,外周血细胞积分、IL-32和Cys C均是MM患者术后1年死亡的危险因素[风险比(HR)分别为3.854、3.677、3.575,95%可信区间(CI)分别为1.394~10.650、1.330~10.161、1.294~9.880]。结论外周血细胞积分联合IL-32可作为判断MM患者术后1年死亡的敏感指标。

miR-32-5p通过p53/SLC7A11信号通路介导的铁死亡对甲状腺癌细胞增殖的作用机制

目的探讨miR-32-5p能否通过调节p53/SLC7A11信号通路介导的铁死亡影响甲状腺细胞增殖。方法将TPC-1细胞随机分为Control组、miR-NC组、miR-32-5p组、miR-32-5p+Fer-1组、miR-32-5p+si-p53组、miR-32-5p+Fer-1+si-p53组。RT-PCR检测细胞中miR-32-5p相对表达量;CCK-8法检测细胞增殖;检测细胞中Fe^(2+)、MDA、SOD、GSH及ROS的含量;JC-1法检测细胞中线粒体膜电位水平;蛋白质印迹检测细胞中p53、GPX4、SLC7A11蛋白表达。结果甲状腺癌细胞系BCPAP、TPC-1、SW1736细胞中miR-32-5p相对表达量均低于人正常甲状腺细胞系HT-ori3细胞(P<0.01)。和Control组相比,miR-32-5p组细胞中miR-32-5p相对表达量、细胞中MDA含量、Fe^(2+)含量和ROS荧光强度及细胞中p53蛋白表达明显增加,细胞存活率、细胞中GSH含量和SOD活性、线粒体膜电位水平及细胞中GPX4、SLC7A11蛋白表达明显降低(P<0.01);和miR-32-5p组相比,miR-32-5p+Fer-1组、miR-32-5p+si-p53组和miR-32-5p+Fer-1+si-p53组细胞中miR-32-5p相对表达量、细胞中MDA含量、Fe^(2+)含量和ROS荧光强度及细胞中p53蛋白表达均明显降低,细胞存活率、细胞中GSH含量和SOD活性、线粒体膜电位水平及细胞中GPX4、SLC7A11蛋白表达明显增加(P<0.01);且miR-32-5p+Fer-1+si-p53组细胞中miR-32-5p相对表达量、细胞中MDA含量、Fe^(2+)含量和ROS荧光强度及细胞中p53蛋白表达明显低于miR-32-5p+Fer-1组,细胞存活率、细胞中GSH含量和SOD活性、线粒体膜电位水平及细胞中GPX4、SLC7A11蛋白表达高于miR-32-5p+Fer-1组(P<0.05)。结论过表达miR-32-5p可通过促进铁死亡抑制甲状腺癌何丽琼细胞增殖,其可能和调控p53//SLC7A11信号通路有关。

白细胞介素32对人脐带来源间充质干细胞向脂肪细胞分化的调控作用

目的探讨白细胞介素32(IL-32)对人脐带来源间充质干细胞(HuMSC)成脂分化的调控作用。方法①用肿瘤坏死因子α(TNF-α)20μg·L^(-1)和干扰素γ(IFN-γ)20μg·L^(-1)处理HuMSC 24 h得到激活的HuMSC(S-HuMSC),流式细胞术检测HuMSC和S-HuMSC表面标志物CD14,CD34,CD45,CD73,CD90和CD105表达鉴定其表型;对HuMSC和S-HuMSC进行成脂诱导10 d后进行油红O染色检测脂滴面积,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测成脂相关转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)和脂肪酶(ADI)mRNA表达,测定其成脂分化能力;成骨诱导14 d后进行碱性磷酸酶(ALP)染色检测ALP着色面积,RT-qPCR检测成骨相关转录因子Runt相关转录因子2(RUNX2)、ALP和无远侧同源盒5(DLX5)mRNA表达,测定其成骨分化能力。②构建含有过表达IL-32基因序列且带有绿色荧光蛋白及嘌呤霉素抗药基因的慢病毒载体和阴性对照(NC)空载体并收获慢病毒,分别感染HuMSC得到IL-32^(high)HuMSC和NC-HuMSC。对HuMSC,NC-HuMSC和IL-32^(high)HuMSC进行成脂诱导分化,于诱导后第0,3,5,7,10和14天进行油红O染色检测细胞内脂滴形成面积,RT-qPCR检测成脂分化相关转录因子PPARγ,C/EBPα和ADI mRNA表达。结果①流式细胞术检测结果表明,HuMSC和S-HuMSC均高表达CD73,CD90和CD105,低表达或不表达CD14,CD34和CD45,两者表型符合MSC的生物学特征。HuMSC和S-HuMSC成脂和成骨诱导分化后,与各自自分化对照组相比,诱导组ALP染色面积和脂滴面积增加(P<0.01),成骨分化相关转录因子RUNX2,ALP和DLX5及成脂分化相关转录因子PPARγ,C/EBPα和ADI mRNA表达亦显著增加(P<0.01),表明两者均具有MSC的特性。与HuMSC诱导组相比,S-HuMSC诱导后脂滴形成面积明显减少(P<0.01),成脂分化相关转录因子PPARγ,C/EBPα和ADI mRNA表达亦显著下降(P<0.05),且S-HuMSC高表达IL-32(P<0.01)。②HuMSC,NC-HuMSC和IL-32^(high)HuMSC体外成脂诱导后,从第3天开始IL-32^(high)HuMSC诱导组细胞脂滴形成面积明显小于HuMSC和NC-HuMSC诱导组(P<0.01),且成脂相关转录因子PPARγ,C/EBPα和ADI mRNA表达也显著降低(P<0.05)。结论过表达IL-32可显著降低HuMSC的成脂分化能力。

纤维支气管镜肺泡灌洗液中sTREM-1、IL-32及PCT水平对呼吸机相关性肺炎病情及预后判断的价值

目的:探讨纤支镜支气管肺泡灌洗液中可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)、白细胞介素32(IL-32)及降钙素原(PCT)水平与呼吸机相关肺炎(VAP)患者病情及预后判断的价值。方法:选取确诊的53例VAP患者作为VAP组;另选取同期实施机械通气但是未发生VAP的56例患者作为对照组。记录两组患者肺泡灌洗液中sTREM-1、IL-32、PCT水平、CPIS评分、APACHEⅡ评分,并探究其与患者病情和预后的相关性。结果:VAP组患者肺泡灌洗液sTREM-1、IL-32、PCT水平及CPIS评分、APACHEⅡ评分均高于对照组(P<0.05);VAP组患者肺泡灌洗液的sTREM-1、IL-32、PCT水平与CPIS评分正相关(r=0.614、0.603、0.621,P<0.05);VAP组患者肺泡灌洗液的sTREM-1、IL-32、PCT水平与APACHEⅡ评分正相关(r=0.414、0.463、0.409,P<0.05);53例VAP患者,经过28 d治疗,死亡17例、存活36例,死亡的VAP患者肺泡灌洗液sTREM-1、IL-32、PCT水平及CPIS评分、APACHEⅡ评分均高于存活组(P<0.05);肺泡灌洗液sTREM-1、IL-32、PCT水平预测VAP患者不良预后结局的受试者工作曲线下面积(AUC)分别为0.900、0.862、0.917。结论:VAP患者肺泡灌洗液中sTREM-1、IL-32、PCT水平升高,并且与患者肺部感染程度、病情危重程度正相关,对于预测患者不良结局具有较高的价值。

RGC-32通过调节肝癌中Wnt/β-catenin信号诱导Treg/Th17失衡的研究

目的:研究肝癌患者中RGC-32水平与Treg/Th17细胞比率相关性,初步探究RGC-32对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测健康对照和肝癌患者血浆中RGC-32、IL-17、IL-22、TGF-β1、IL-10表达水平;采用流式细胞术检测健康对照和肝癌患者外周血中Th17细胞和Treg细胞数;采用siRNA转染敲低单个核细胞(PMBC)中RGC-32水平,通过蛋白质免疫印迹(Western blot)检测RGC-32敲低后对Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果:与健康对照比较,肝癌患者血浆中RGC-32水平显著升高(P<0.01),Th17细胞数升高而Treg细胞数下降,Treg/Th17细胞比率显著下降(P<0.01)。与健康对照比较,肝癌患者血浆中Th17细胞分泌的促炎细胞因子IL-17和IL-22显著升高(P<0.01),而Treg细胞分泌的抗炎细胞因子TGF-β1和IL-10显著下降(P<0.01)。线性回归分析显示,在健康对照中RGC-32水平与Treg/Th17无相关性(P>0.05),在肝癌患者中RGC-32水平与Treg/Th17呈负相关(P<0.01)。敲低RGC-32后,检测到促炎细胞因子IL-17表达下降(P<0.01),抗炎因子TGF-β1表达升高(P<0.01),Wnt/β-catenin信号的激活被抑制。结论:RGC-32的上调导致肝癌患者Treg/Th17细胞的失衡,RGC-32下调能抑制Wnt/β-catenin信号的激活。

基于MScomm32和LabVIEW的串口通信技术

串行通信是一种常用的数据传输方法,它用于计算机与外设,或者计算机与计算机之间的通信。文中针对串口通信技术,详细介绍串口通信控件MSCOMM32．0CX在LabVIEW7．1下的使用方法,并介绍串行通信中断接收及数据处理的技巧。该项技术已成功运用到实际工作中。

microRNA-32抑制小鼠2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的机制研究

目的探讨2型糖尿病中microRNA-32(miR-32)对胰岛β细胞凋亡的影响及其机制。方法以70只C57BL/KsJ-db/db小鼠为研究对象,将其中40只小鼠按随机数字表法分为糖尿病组及阴性对照组,每组20只,以血糖浓度≥11.1mmol·L-1时判为建模成功,并测定体质量;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测糖尿病组及阴性对照组中胰腺组织miR-32的表达;脂质体法转染miR-32的模拟物(miR-32mimic)至胰岛β细胞,使其在细胞中呈过表达状态,进行TUNEL染色对比转染前后胰岛β细胞的凋亡情况;并利用蛋白质印迹技术(Western blot)检测miR-32过表达胰岛β细胞中Apaf-1和Caspase-3蛋白的表达。再选择30只C57BL/KsJ-db/db小鼠,按随机数字表法分为随机对照组(n=10)、NC组(n=10,建模成功后在小鼠体内注射miR-NC)和miR-32组(n=10,建模成功后在小鼠体内注射miR-32agomir),观察体内过表达miR-32对糖尿病小鼠空腹血糖的影响。结果糖尿病组小鼠胰腺组织中miR-32的表达量较阴性对照组明显减少(P<0.01);过表达miR-32的胰岛β细胞的细胞凋亡率明显下降(P<0.01);生物信息学预测显示Apaf-1为miR-32的下游靶基因,过表达miR-32后,Apaf-1显著下调。与随机对照组相比,NC组、miR-32组小鼠空腹血糖明显升高,NC组、miR-32组小鼠体内分别注射miR-NC和miR-32agomir后第4周,miR-32组小鼠空腹血糖较NC组明显降低(均P<0.01),提示miR-32可显著降低2型糖尿病小鼠的空腹血糖。结论 miR-32可以通过抑制Apaf-1的表达减少糖尿病小鼠中胰岛β细胞的凋亡,进而改善2型糖尿病的发生和发展进程。

B淋巴细胞信号转导相关接头蛋白Bam32与Hic-5的相互作用

32kDB淋巴细胞接头分子(Bam32)是调控B细胞抗原受体(Bcellantigenreceptor,BCR)信号转导通路的关键蛋白质分子之一.为了研究Bam32的功能及其作用机理,应用酵母双杂交技术筛选了能与Bam32相互作用的蛋白质分子.筛选发现1个呈强阳性反应的克隆,其基因编码Hic5,为paxillin蛋白家族成员之一.Paxillin是整合素(integrin)信号转导通路中的关键蛋白质分子,而整合素在细胞对细胞外基质分子的粘附、细胞运动等方面起了重要的作用,因此对Bam32与Hic5的相互作用进行了进一步研究.用293T细胞共转染和特异性免疫共沉淀法证实,Bam32可在哺乳动物细胞中与Hic5共沉淀,证明它们可以在细胞内相互作用.应用免疫共沉淀法和抗磷酸化酪氨酸抗体检测显示,激酶Lyn可导致Bam32和Hic5的磷酸化.这些研究结果提示,Bam32与Hic5的相互作用可能在激活下游分子的信号转导级联反应以及调节细胞的粘附和运动等功能中发挥了重要的作用.

日本血吸虫31/32kDa重组抗原细胞免疫机制

目的探讨细胞免疫在重组日本血吸虫31/32kDa抗原(rSj31/32)保护性免疫机制中的作用。方法采用rSj31/32抗原免疫BALB/c小鼠,ELISA分别检测免疫前后小鼠血清干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL-4)的含量,攻击感染后以脾细胞培养法检测经刀豆蛋白(ConA)和可溶性虫卵抗原(SEA)刺激后,小鼠脾细胞分泌IFN-γ和IL-4的水平。结果rSj31/32抗原免疫后血清IFN-γ的水平明显增加(P<0.001),而IL-4的含量无明显变化;经SEA刺激,免疫组脾细胞产生较高水平的IFN-γ,而产生的IL-4水平较其他组低(P<0.01)。结论细胞免疫在rSj31/32诱导的保护性免疫中起着重要作用。

乙型肝炎患者T细胞亚群、IL-32水平的变化及其临床意义

目的比较感染乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)后患者血液T细胞亚群及血清白细胞介素-32(IL-32)水平的变化,探讨HBV对机体免疫系统(特别是细胞免疫)的影响。方法选择2013年2月至2014年2月于感染科就诊的328例乙肝患者(包括急性乙肝患者53例,慢性乙肝患者189例,乙肝合并肝硬化患者45例,肝癌患者41例)及67例健康者,使用流式细胞仪检测T细胞亚群分布、酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清IL-32水平,实时荧光定量PCR法(real-time PCR)测定乙肝患者血液中HBV-DNA的载量,比较各种不同类型乙肝患者的T细胞亚群和血清IL-32水平,以及它们与HBV-DNA载量的相互关系。结果 (1)患者在感染HBV后,CD3+和CD4+T细胞百分比明显降低(P<0.05),CD8+T细胞百分比明显增高(P<0.05),CD4+/CD8+T细胞比例也明显降低(P<0.05);各指标的变化程度与肝脏病变的程度呈正比,并且与HBV-DNA载量呈正比(r=0.05,P<0.01)。(2)乙肝患者血清IL-32水平与健康对照组相比明显升高(P<0.01),急性乙肝患者的IL-32水平最高,但IL-32水平与HBV-DNA载量无明显相关性(r=0.00,P=0.45)。结论 HBV感染人体后会严重扰乱免疫系统,特别是细胞免疫功能;IL-32可能参与了细胞免疫应答,但与HBV-DNA的复制调控没有太大的关系。

组蛋白乙酰化修饰调控RAR-β2表达与宫颈病变的相关性

目的：探讨组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达及宫颈病变发生发展的关系。方法：收集正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ-Ⅲ和宫颈鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）组织，分别采用免疫组织化学和WesternBlot方法检测AcH3、RAR—B：和Involucrin的表达；分析组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达及宫颈病变程度的关系。结果：随着宫颈病变的进展，AcH3、RAR-β2和Involucrin的表达逐渐降低，甚至缺失，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达呈正相关（r=0．797，P〈0．05），AcH3和RAR-β2的表达均与宫颈病变程度呈负相关[r=-0．5479（Ach3）,r=-0．585（RAR-β2），P〈0．05]。结论：组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达调控有关，并可能参与宫颈癌的发生。

生长底物对培养胚胎大鼠脊髓运动神经元的作用

目的 :为了研究几种生长底物对培养的胚胎大鼠脊髓运动神经元生长特性的作用。方法 :采用胚胎大鼠脊髓腹侧组织进行分离培养 ,建立脊髓运动神经元原代分散细胞培养 ,并应用免疫组织化学染色进行鉴定 ;选取生长底物如多聚赖氨酸 (PLL)、Ⅰ型胶原、层粘连蛋白 (LN)、PLL和LN联合等进行包被 ,观察脊髓运动神经元的生长特性。结果 :PLL用 0 0 1mol L硼酸溶解 ,细胞生长良好 ;PLL和LN联合包被时 ,脊髓运动神经元存活率高 ,细胞分散良好。结论 :PLL和LN联合包被培养脊髓运动神经元 。

燃料电池驱动的自主机器人控制系统实现

针对野外作业机器人面临的能源动力问题,设计了基于32位微控制器的燃料电池驱动机器人系统。以32位嵌入式微控制器为核心的机器人控制系统可以实时检测燃料电池的能量状态、机器人本体的状态参数,基于此对机器人姿态、功率需求进行相应调整。并给出了系统的总体方案设计,阐明了硬件设计与软件实现。

放射性^(32)P-磷酸铬胶体治疗H22移植瘤的实验研究

目的 :探讨不同剂量的3 2 P 磷酸铬 (Cr3 2 PO4)胶体局部注射对小鼠H2 2移植瘤和区域淋巴结转移灶的治疗作用。方法 :建立小鼠H2 2移植瘤模型 14d后分别给予高、中、低剂量的Cr3 2 PO4胶体瘤体局部注射 ,观察Cr3 2 PO4胶体的治疗作用及对肿瘤组织和细胞的形态学影响。结果 :不同剂量Cr3 2 PO4胶体注射后瘤体局部依次出现红肿、表面苍白、囊性变 ,水肿消退后爪垫坏死。光镜下瘤体癌细胞呈多边形 ,大小不一 ,核大 ,可见病理分裂像并侵袭达肌层 ,同侧月国窝和腹股沟淋巴结均出现淋巴结结构破坏 ,呈现大量癌细胞浸润。治疗早期瘤体和月国窝淋巴结转移灶呈现局灶性坏死 ,后期移植瘤和淋巴结转移灶肿瘤组织完全坏死 ,结构破坏 ,并可见出血灶。电镜下 ,治疗早期淋巴结转移灶和瘤体中癌细胞线粒体空化 ,内质网和细胞器少见。治疗后期细胞结构消失 ,呈现大量细胞碎片、脂肪滴和空泡。结论 :Cr3 2

miR-32-5p和FKBP14基因转染对SPC-A1细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其靶向关系验证

目的观察miR-32-5p和FK506结合蛋白14(FKBP14)基因转染对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系SPC-A1增殖、迁移、侵袭能力的影响,并验证两者之间靶向关系。方法选取SPC-A1细胞,将细胞为A、B、C、D、E、F组,分别转染miR-32-5p+pcDNA-FKBP14、miR-32-5p+pcDNA、miR-32-5p、miR-con、pcDNA-FKBP14、pcDNA-con,采用MTT法检测细胞吸光度值,并计算细胞存活率;Transwell实验检测细胞迁移数、侵袭数,Western blotting法检测细胞CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量。取SPC-A1细胞,将细胞分为G、H、I、J组,分别转染FKBP14-WT+miR-con、FKBP14-WT+miR-32-5p、FKBP14-MUT+miR-con、FKBP14-MUT+miR-32-5p,采用荧光素酶活性检测试剂盒检测细胞荧光素酶活性。取SPC-A1细胞,将细胞分为K、L、M、N组,分别转染miR-32-5p、miR-con、anti-miR-32-5p、anti-miR-con,Western blotting法检测细胞中KBP14蛋白相对表达量。结果与B组比较,A组细胞存活率、迁移细胞数、侵袭细胞数及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量增加(P均<0.05);与D组比较,C组细胞存活率、迁移细胞数、侵袭细胞数及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量减少(P均<0.05);与F组比较,E组SPC-A1细胞存活率、迁移细胞数、侵袭细胞数及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量增加(P均<0.05)。与G组比较,H组细胞荧光素酶活性减弱(P<0.05);与I组比较,J组细胞荧光素酶活性无显著变化(P>0.05)。与L组比较,K组FKBP14蛋白相对表达量减少(P<0.05);与N组比较,M组FKBP14蛋白相对表达量增加(P<0.05)。结论过表达miR-32-5p或敲减FKBP14后SPC-A1细胞存活率降低,迁移细胞数、侵袭细胞数减少,miR-32-5p与FKBP14存在靶向调控关系。