清热化痰通腑方对脑梗死合并细菌性肺炎大鼠血清IL-1β、ET-1及肺组织IL-1β的影响

[目的]研究清热化痰通腑方对脑梗死合并细菌性肺炎大鼠血清白介素-1β(IL-1β)、内皮素1(ET-1)以及肺组织IL-1β的影响,探讨清热化痰通腑方对脑梗死合并细菌性肺炎大鼠抗炎的作用机制。[方法]将18只大鼠随机分成假手术组、模型组、清热化痰通腑方组,每组6只。采用改良线栓法结合气管注射法建立脑梗死合并细菌性肺炎的大鼠模型,清热化痰通腑方组灌肠给予清热化痰通腑方药液(剂量为7.6 ml/d),假手术组、模型组灌肠给予等量生理盐水,连续给药7 d。第1 d及第7 d测定各组神经功能评分,第7 d采集各组血液标本和脑、肺组织。用HE染色法观察各组脑、肺组织病理变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-1β、ET-1以及肺组织IL-1β的含量。[结果]清热化痰通腑方组神经功能评分明显降低,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01);清热化痰通腑方能够改善脑梗死合并细菌性肺炎大鼠脑、肺组织病理学损伤及炎症;与模型组比较,清热化痰通腑方组血清IL-1β、ET-1和肺组织IL-1β浓度明显降低,差异有显著性意义(P<0.01)。[结论]清热化痰通腑方可以改善脑梗死合并细菌性肺炎大鼠肺部炎症反应以及神经功能缺损症状,可能与清热化痰通腑方能够降低IL-1β、ET-1表达水平有关。

脑梗死合并细菌性肺炎大鼠模型的建立与评价

目的:评价3种不同细菌接种方法结合改良线栓法建立的脑梗死合并细菌性肺炎大鼠模型。方法:采用改良线栓法诱发脑梗死,再分别采用滴鼻法(D组)、经口腔气管插管法(K组)和气管注射法(Q组)诱发细菌性肺炎,建立脑梗死合并细菌性肺炎大鼠模型。比较3组大鼠脑梗死面积、外周血白细胞计数(WBC)及中性粒细胞百分比(MEUT),并根据细菌学及病理学等指标对所建立的模型进行评价。结果:D组大鼠造模后第3、第7天WBC和MEUT均升高(P<0.05或P<0.01),K组、Q组大鼠造模后第1、第3、第7天WBC和MEUT均显著升高(P<0.05或P<0.01);3组大鼠造模后第1、第3、第7天肺组织均有炎性改变。结论:改良线栓法结合气管注射法建立的脑梗死合并细菌性肺炎大鼠模型,造模成功率较高,操作简便、可重复性好,适合于后续研究。

清热化痰通腑方对脑梗死合并细菌性肺炎大鼠肠道菌群的影响

目的探讨清热化痰通腑方对脑梗死合并细菌性肺炎大鼠肠道菌群的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠30只,按照随机数字表法分为5组,即空白对照组、模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组6只。除空白对照组不作任何处理外,其余4组大鼠均择优方法建立脑梗死合并细菌性肺炎大鼠模型。模型建立24 h后,高剂量组、中剂量组、低剂量组3组分别予7.6、3.8、1.9 g/d清热化痰通腑方灌肠治疗,1次/d,连续7 d;模型组、空白对照组不予任何处理。观察清热化痰通腑方直肠治疗对脑梗死合并细菌性肺炎大鼠外周血白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(N%)、肺组织病理和肠道菌群的影响。结果药物干预7 d后,与模型组比较,高剂量组大鼠WBC及N%显著降低(P<0.01),中剂量组和低剂量组大鼠WBC及N%均降低(P<0.05),但仍均高于空白对照组(P<0.05)。高剂量组大鼠肺泡水肿、充血不明显,肺泡间质未见明显增宽,伴少量散在炎性细胞浸润;中剂量组和低剂量组大鼠肺泡均水肿、充血明显,肺泡间质增宽,伴中量炎性细胞浸润。药物干预7 d后,与模型组比较,高剂量组大鼠肠道厌氧菌和大肠杆菌明显减少(P<0.05,P<0.01),乳酸杆菌明显增加(P<0.01);中剂量组和低剂量组大鼠肠道乳酸杆菌明显增加(P<0.01)。结论清热化痰通腑方直肠滴注治疗可以改善脑梗死合并细菌性肺炎大鼠的肺部炎症及肠道菌群失衡,且以高剂量给药为优。

清热化痰通腑方对脑梗死合并细菌性肺炎大鼠脑组织病理改变及IL-6表达水平的影响

目的:探讨清热化痰通腑方对脑梗死合并细菌性肺炎大鼠脑组织病理改变及炎性因子白细胞介素6(IL-6)表达水平的影响。方法:30只SPF级雄性SD大鼠,按随机数字表法分为空白对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组6只。空白对照组不予任何处理,剩余4组大鼠采用改良线栓法结合气管注射法诱导脑梗死合并细菌性肺炎大鼠模型。模型建立24 h后,低、中、高剂量组每天分别给予1.9 g/d、3.8 g/d、7.6 g/d清热化痰通俯方药液灌肠治疗,模型组予以等量生理盐水灌肠,1次/d,连续7 d,空白对照组不予任何处理。造模期间观察各组大鼠一般情况,同时于第2、第4、第6天监测各组大鼠体温、体重变化;于干预后第7天进行神经功能缺损评分,苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠脑组织病理改变,免疫组化(IHC)法检测脑肺肠组织IL-6表达水平。结果:空白对照组大鼠一般状况良好,体温正常,体重逐渐增长;模型组大鼠行动迟缓、饮食减少、体温升高、体重下降、鼻周分泌物增多,神经功能缺损评分明显高于空白对照组(P<0.01)。低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠一般状态、体温、体重及神经功能缺损评分均较模型组改善(均P<0.01)。光学显微镜下可见,模型组大鼠脑组织神经元肿胀,脑、肺、肠组织中IL-6呈强阳性表达(P<0.01);与模型组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠脑、肺、肠组织IL-6阳性表达降低(P<0.05),以高剂量组表达最少。结论:清热化痰通腑方能减轻脑卒中合并细菌性肺炎大鼠各组织炎症反应,促使神经功能恢复,其机制可能与下调炎症因子IL-6表达有关。

穿心莲内酯对脑梗死合并细菌性肺炎大鼠模型肺组织炎症和神经功能的影响

目的探索穿心莲内酯(ANG)对脑梗死(CI)合并细菌性肺炎(BP)大鼠模型肺组织炎症和神经功能的影响。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组和穿心莲内酯高、中、低剂量组(250、125、62.5 mg/kg,连续灌胃14 d)各12只。除对照组外所有大鼠均采用改良线栓法联合气管注射法制备CI合并BP模型。ANG连续灌胃14 d后,Longa评分法评估神经功能缺损评分,氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测脑梗死灶体积百分比,原位末端标记法(TUNEL)检测脑组织细胞凋亡率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和肺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-6和IL-1β水平,Western blot检测肺组织中Toll样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB) p65、p-NF-κB p65、裂解的半胱天冬酶3(cleaved Caspase-3)表达;HE染色观察脑组织和肺组织病理变化。结果与对照组相比,模型组和穿心莲内酯低剂量组大鼠神经元细胞凋亡率升高(P<0.05),血清和肺组织中TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P<0.05),肺组织TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65和cleaved Caspase-3水平升高(P<0.05);与模型组相比,穿心莲内酯高、中剂量组大鼠神经功能缺损评分下降[(2.42±0.48)分、(2.76±0.50)分vs (3.32±0.51)分,P<0.05],脑梗死体积百分比缩小[(24.76±5.33)%、(28.53±5.24)%vs (33.28±5.82)%,P<0.05],神经元细胞凋亡率下降[(15.32±3.90)%、(19.36±4.87)%vs (27.65±5.84)%,P<0.05],血清和肺组织中TNF-α、IL-6、IL-1β水平下降(P<0.05),肺组织TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65和cleaved Caspase-3水平下降(P<0.05),HE染色显示脑组织和肺组织损伤减轻。结论 ANG可能通过抑制CI合并BP大鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路,降低机体的炎症因子水平,减轻脑组织和肺组织损伤。

脑梗死合并肺炎外周血PS和PSGL-1与MMP-9表达及意义

目的观察脑梗死合并肺炎患者外周血P选择素(PS)、PS糖蛋白配体1(PSGL-1)及基质金属蛋白9(MMP-9)水平变化及意义。方法选取2016年5月-2019年12月安贞医院神经内科诊治的脑梗死患者157例,根据患者是否合并肺炎,分为肺炎组和无肺炎组,另招募同期入院体检健康者50名作对照组;根据患者肺炎严重指数(PSI),分为低危组和中高危组;随访合并肺炎患者90 d结局事件,将患者分为预后良好组和预后不良组。统计脑梗死患者肺炎发生率,观察其病原菌分布情况;检测各组外周血PS、PSGL-1、MMP-9及感染指标[超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及淀粉样蛋白A(SAA)]水平,进行对比分析。结果脑梗死患者合并肺炎发生率为33.12%(52/157),革兰阴性菌占63.23%;肺炎组PS、PSGL-1、MMP-9、hs-CRP及SAA水平均高于无肺炎组、对照组(P<0.05),中高危组患者PS、PSGL-1、MMP-9、hs-CRP及SAA水平均高于低危组(P<0.05);预后不良组PS、PSGL-1、MMP-9、hs-CRP及SAA水平均高于预后良好组(P<0.05)。结论脑梗死患者血清PS、PSGL-1、MMP-9水平显著上升,且随着肺炎的发生变化加剧,其可作为脑梗死合并肺炎患者病情评估及预后的重要指标。