蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。

宫颈癌3、6、11和18号染色体遗传不稳定性的研究

背景与目的:人乳头瘤病毒的感染以及细胞内的遗传性改变是宫颈癌的主要病因。本研究拟分析人宫颈癌组织部分染色体位点遗传不稳定性,以为宫颈癌相关基因的定位以及筛选宫颈癌诊断分子标志提供依据。方法:应用3、6、11和18号染色体上的8个微卫星多态性位点,对50例原发性宫颈癌活检标本进行杂合性丢失(lossofheterozygosity,LOH)和微卫星不稳定性(microsatelliteinstability,MI)分析。结果:一个或多个位点发生LOH的样本占66%(33/50)。D18s474(18q21)位点的LOH率最高,达40.5%,其它位点的LOH频率为:D3s1478(3p21.3-21.2,31.7%)、D3s1766(18q21.32,15.0%)、D6s260(6p23,23.3%)、D11s925(11q22-23,17.9%)、D18s35(18q21.1-21.31,8.7%)、D18s64(18q21.32,16.7%)、D18s68(18q22.1,27.3%)。MI发生频率很低,仅为8%(4/50)。结论:宫颈癌染色体特定区域存在不同频率的LOH,而MI是宫颈癌中的低频事件。染色体3p和18q上的LOH高频区可能存在潜在的宫颈癌相关抑癌基因。

端粒酶反义寡核苷酸体外抑制宫颈癌细胞端粒酶活性的研究

目的探讨端粒酶反义寡核苷酸(ASON)对宫颈癌Hela细胞端粒酶活性的影响。方法针对端粒酶RNA的ASON作用于Hela细胞,同时以加有转染剂FuGENE6者为对照组,计数连续作用1,3,5 d后的细胞数。TRAP方法测定端粒酶的活性。结果ASON组与随机引物及空白对照组比较,端粒酶活性降低,细胞的增殖速度延缓;有转染剂FuGENE6的ASON组的细胞增殖数目和端粒酶活性显著低于无FuGENE6的ASON组;细胞对有FuGENE6的ASON的摄取显著多于单纯的ASON。在FuGENE6的介导下,ASON对端粒酶活性的抑制与ASON的浓度和治疗时间呈正相关。结论针对端粒酶RNA的ASON能抑制Hela细胞的端粒酶活性,转染剂FuGENE6可以增强端粒酶ASON对宫颈癌细胞端粒酶活性的抑制作用。

IIb期宫颈癌同步放化疗结合手术治疗的疗效评价

目的：探讨同步放化疗结合手术综合治疗IIb期宫颈癌的疗效。方法：34例IIb期宫颈鳞癌患者纳入放化疗结合手术治疗组（以下均简称为治疗组），放疗时同步行PMP方案化疗，放射治疗均采用6MVx线盆腔照射加Ir192高剂量率后装治疗。同期收冶的34例仅行同步放化疗的患者作为对照组。结果：两组治疗后5年生存率治疗组（76．5％）明显高于放化疗组（58．8％，P〈0．05），5年无瘤生存率治疗组（64．7％）低于放化疗组的（50％，P〈0．05）。泌尿生殖道瘘发生率治疗组（11．76％）与放化疗组（5．88％，P〉0．05）无明显差异。结论：同步放化疗结合手术治疗中晚期宫颈癌可提高5年生存率及无瘤生存率，降低局部复发率，近远期并发症无明显增加，因此，同步放化疗结合手术治疗是安全可行的。

乳头瘤病毒16型E6,P53,RB,PCNA在宫颈癌中的表达状态及相关性

应用核酸原位杂交和免疫组织化学技术，检测人子宫颈癌中人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型Ｅ６ＯＲＦ与抑癌基因产物Ｐ５３，ＲＢ和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。在４４例宫颈癌石蜡切片中，原位杂交检测出ＨＰＶ１６Ｅ６ＯＲＦ阳性２７例（６１．３６％），其中免疫组化检测出Ｐ５３、ＲＢ、ＰＣＮＡ阳性分别为８例（２９．６３％），１４例（５２．８５％）、２０例（７４．０７％），而在１７例ＨＰＶ１６Ｅ６阴性标本中Ｐ５３、ＲＢ、ＰＣＮＡ阳性分别为７例（４１．１７％），９例（５２．９４％）、１２例（７０．５８％）。而在５例正常宫颈组织中未测出ＨＰＶ１６Ｅ６ＯＲＦ，ＰＣＮＡ只在宫颈组织上皮基底层细胞中表达。统计学分析表明，ＨＰＶ１６Ｅ６与宫颈癌密切相关（Ｐ＜０．０５），ＰＣＮＡ在宫颈癌与正常宫颈组织中有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。未能发现宫颈癌组织中ＨＰＶ１６Ｅ６ＯＲＦ与Ｐ５３蛋白相关性（Ｐ＞０．０５）。

宫颈癌基质金属蛋白酶、Ⅳ型胶原和微血管密度的临床意义

目的:研究宫颈癌中MMP-2、MMP-9、Ⅳ型胶原表达和微血管密度的临床意义。方法:采用SABC免疫组织化学方法对64例子宫颈癌组织(全部为鳞癌),20例正常宫颈组织进行MMP-2、MMP-9,Ⅳ型胶原和微血管密度的检测。结果:(1)MMP-2,MMP-9二者在正常宫颈组织、宫颈癌(ICC)的细胞浆的阳性表达率分别为:MMP-2阳性20.0%(4/20)、75.0%(48/64);MMP-9的阳性为:15.0%(3/20)、78.1%(50/64),MMP-2、MMP-9的正常组与宫颈癌组相比差异有显著性(p<0.05)。(2)Ⅳ型胶原表达随着宫颈癌的进展、分期升级,基底膜破坏程度明显增加而显著减少,正常组织与宫颈癌之间差异显著。有淋巴结转移者Ⅳ型胶原表达则明显低于无淋巴结转移组(p<0.005)。(3)微血管密度与宫颈癌的恶性程度及淋巴结转移密切相关,宫颈癌患者的微血管密度明显高于对照组,在临床II、III期明显高于I期。MVD与肿瘤大小、病理分级无关。结论:MMP-2、MMP-9活性表达与Ⅳ型胶原的表达负相关,与MVD正相关。Ⅳ型胶原的表达与宫颈癌的临床分期及有无淋巴结转移相关,可作为判定宫颈癌浸润及转移程度的一个生物学指标。微血管密度与宫颈癌的恶性程度及淋巴结有无转移密切相关。因此采用MVD评价宫颈癌预后是有意义的。