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血清cf-DNA水平对子宫颈癌患者诊断和生存状况的判断价值 被引量:1
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作者 冯达红 王敏 《中国实验诊断学》 2015年第9期1475-1477,共3页
目的探讨血清cf-DNA定量检测在宫颈癌辅助诊断及生存状况判断中的价值。方法分别采集2008年3月至2009年3月我院收治的宫颈癌患者及门诊体检健康妇女各100例的血清。运用荧光定量RT-PCR方法检测血清cf-DNA含量,采用化学发光法检测血清中... 目的探讨血清cf-DNA定量检测在宫颈癌辅助诊断及生存状况判断中的价值。方法分别采集2008年3月至2009年3月我院收治的宫颈癌患者及门诊体检健康妇女各100例的血清。运用荧光定量RT-PCR方法检测血清cf-DNA含量,采用化学发光法检测血清中鳞状细胞癌抗原(SCC)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)的含量。结果宫颈癌患者和健康对照者血清cf-DNA浓度检测结果分别为134.5(7.9-1721.3ng/ml),18.3(0.32-47.5)ng/ml,宫颈癌患者的cf-DNA明显高于健康对照组(Z=-7.324,P<0.001)。用ROC曲线分析血清cf-DNA浓度对宫颈癌患者的诊断效能,其曲线下面积(0.923),高于传统指标血清SCC(0.721)、CYFRA21-1(0.734)、CA125(0.652)、CA19-9(0.617)。生存时间>5年患者的血清cf-DNA浓度明显低于生存时间<5年的患者(Z=6.438,P<0.001)。结论血清cf-DNA水平有助于宫颈癌的辅助诊断及预后判断。血清cf-DNA对宫颈癌的辅助诊断价值要优于传统肿瘤标志物。 展开更多
关键词 宫颈癌 cf-dna 肿瘤标记物 生存时间
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血清cf-DNA定量分析在宫颈癌早期辅助诊断及预后判断中的价值 被引量:1
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作者 方玲妹 孔海深 《健康研究》 CAS 2016年第6期702-704,共3页
文章对宫颈癌、CINⅢ及健康妇女行血清cf-DNA定量检测,探讨血清cf-DNA定量分析诊断技术在宫颈癌的早期诊断及判断宫颈癌预后的辅助作用。结果显示,宫颈癌患者血清cf-DNA含量显著高于CINⅢ患者和健康妇女,Ⅱ、Ⅲ期宫颈癌患者血清cf-DNA... 文章对宫颈癌、CINⅢ及健康妇女行血清cf-DNA定量检测,探讨血清cf-DNA定量分析诊断技术在宫颈癌的早期诊断及判断宫颈癌预后的辅助作用。结果显示,宫颈癌患者血清cf-DNA含量显著高于CINⅢ患者和健康妇女,Ⅱ、Ⅲ期宫颈癌患者血清cf-DNA含量明显高于Ⅰ期患者;血清cf-DNA对于宫颈癌诊断的敏感性和特异性均高于传统肿瘤标志物。 展开更多
关键词 血清cf-dna 宫颈癌 分支DNA技术 肿瘤标志物
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不同品牌cf-DNA保存管效果对比
3
作者 李燕虹 华静宇 +4 位作者 赵安琪 李菲 李丹杰 程杰 崔景强 《生物过程》 CAS 2021年第4期140-145,共6页
目的:对比驼人自主研发cf-DNA保存管与市售两种品牌DNA保存管对样本中cf-DNA保存效果。方法:随机选取志愿者,每位志愿者分别静脉采集血液至三种cf-DNA保存管,采集样本分别保存0~2 h,3 d,7 d,10 d,14 d,提取cf-DNA进行实时荧光定量PCR分... 目的:对比驼人自主研发cf-DNA保存管与市售两种品牌DNA保存管对样本中cf-DNA保存效果。方法:随机选取志愿者,每位志愿者分别静脉采集血液至三种cf-DNA保存管,采集样本分别保存0~2 h,3 d,7 d,10 d,14 d,提取cf-DNA进行实时荧光定量PCR分析及二代测序。结果:在驼人自主研发cf-DNA保存管与市售三种品牌cf-DNA保存管中保存样本测序结果保持一致,驼人自主研发采血管可无损伤稳定保存样本。 展开更多
关键词 采血管 cf-dna 实时荧光定量PCR 二代测序
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外周血cf-DNA/NETs水平在脓毒症患者中的临床价值研究 被引量:7
4
作者 张春容 陶武 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第20期2740-2742,共3页
目的探讨cf-DNA/NETs在脓毒症(sepsis)患者中的临床价值。方法收集健康体检者(control组)30例、sepsis患者(sepsis组)42例和非感染性全身炎症反应综合征(nf-SIRS组)患者36例的抗凝血标本,检测cf-DNA/NETs表达,并与C反应蛋白(CRP)、降钙... 目的探讨cf-DNA/NETs在脓毒症(sepsis)患者中的临床价值。方法收集健康体检者(control组)30例、sepsis患者(sepsis组)42例和非感染性全身炎症反应综合征(nf-SIRS组)患者36例的抗凝血标本,检测cf-DNA/NETs表达,并与C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)对比分析。结果与control组比较,sepsis组炎症指标均处于较高的水平。与nf-SIRS组比较,sepsis组PCT[(1.2±1.7)ng/mLvs.(5.1±6.8)ng/mL]和cf-DNA/NETs[(596±183)ng/mLvs.(1 576±254)ng/mL]显著升高。sepsis组和nf-SIRS组PCT水平在第7天时差异无统计学意义(P>0.05),但sepsis组仍维持较高水平的cf-DNA/NETs[(1389±673)ng/mL vs.(474±122)ng/mL]。结论 cf-DNA/NETs和PCT在早期诊断sepsis方面均有一定价值,但cf-DNA/NETs在后期辨别sepsis与nf-SIRS方面更优于PCT。 展开更多
关键词 脓毒症 全身炎症反应综合征 降钙素原 中性粒细胞胞外诱捕网
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急性胰腺炎患者血清cf-DNA/NETs、MAP1-LC3、DPB表达水平及临床意义 被引量:3
5
作者 袁燕文 陈孟君 +3 位作者 许哲 黄妙兴 陈至操 叶衬轩 《分子诊断与治疗杂志》 2021年第7期1055-1058,1062,共5页
目的探究血清游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cf-DNA/NETs)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)、维生素D结合蛋白(DPB)在急性胰腺炎患者中的表达水平及临床意义。方法收集2015年9月至2020年9月本院收治的急性胰腺炎患者150例,随访30 d,根据... 目的探究血清游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cf-DNA/NETs)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)、维生素D结合蛋白(DPB)在急性胰腺炎患者中的表达水平及临床意义。方法收集2015年9月至2020年9月本院收治的急性胰腺炎患者150例,随访30 d,根据预后分为生存组(138例)与死亡组(12例),比较两组临床资料、治疗前后血清cf-DNA/NETs、MAP1-LC3、DPB水平、急性生理与慢性健康评价系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、Ranson评分,分析血清cf-DNA/NETs、MAP1-LC3、DPB与APACHEⅡ、Ranson评分相关性及血清各指标与急性胰腺炎患者预后的关系。结果死亡组入院时、治疗3、7 d后血清cf-DNA/NETs、MAP1-LC3高于生存组,DPB低于生存组,差异均有统计学意义(P<0.05);死亡组入院时、治疗3、7 d后APACHEⅡ、Ranson评分高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05)。入院时、治疗3、7 d后血清cf-DNA/NETs、MAP1-LC3与APACHEⅡ、Ranson评分呈正相关,DPB与APACHEⅡ、Ranson评分呈负相关(P<0.05);入院时、治疗3、7 d后血清cf-DNA/NETs、MAP1-LC3、DPB均为急性胰腺炎患者预后的影响因素(P<0.05)。结论急性胰腺炎患者血清cf-DNA/NETs、MAP1-LC3、DPB表达水平明显异常,且与患者APACHEⅡ、Ranson评分及预后密切相关。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网 微管相关蛋白1轻链3 维生素D结合蛋白
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肾综合征出血热患者血浆cf-DNA特征及其深度测序分析
6
作者 孙艺祯 张圆 +5 位作者 马樱 张宇丝 易静 李琦 庄然 金伯泉 《科学技术与工程》 北大核心 2016年第7期151-155,161,共6页
探讨肾综合征出血热(HFRS)患者血浆cf-DNA含量与不同病情、病期等指标的相关性,定性分析游离DNA(cf-DNA)的来源与特征。收集了47例HFRS不同病情患者不同病程的128份血浆标本,以及20例健康志愿者的20份血浆标本。定量分析血浆总cf-DN... 探讨肾综合征出血热(HFRS)患者血浆cf-DNA含量与不同病情、病期等指标的相关性,定性分析游离DNA(cf-DNA)的来源与特征。收集了47例HFRS不同病情患者不同病程的128份血浆标本,以及20例健康志愿者的20份血浆标本。定量分析血浆总cf-DNA水平,提取纯化cf-DNA后进行定性分析,对其中9份HFRS患者血浆标本进行DNA高通量测序和生物信息学分析。统计学分析各参数指标间相关性。健康人血浆cf-DNA水平中位数为919.0 ng/m L,HFRS患者血浆cf-DNA含量明显增高,随着病程进展呈现动态变化的规律。轻型/中型患者与重型/危重型患者有着明显不同的分布格局:发热期cf-DNA水平即明显高于健康对照,在低血压休克期达到峰值,然后逐步下降,至多尿期与健康对照无显著性差异;急性期重型/危重型患者cf-DNA平均水平显著高于同期轻型/中型患者水平(p〈0.001)。健康人cf-DNA多为高分子量大片段DNA,而患者血浆cf-DNA高度富集于150-200 bp区域,显示为凋亡片段;血浆cf-DNA片段读长(reads)均匀分布于人类基因组的各条染色体,分布频度与染色体长度高度正相关(p〈0.001),且与HTNV病毒基因组无同源性。HFRS患者,急性期血浆cf-DNA即明显升高,并且随病程进展的不同分期与病情分型,呈现出动态变化的规律。HFRS患者血浆cf-DNA主要来源于疾病状态下,机体细胞发生凋亡后产生的基因组和线粒体DNA断裂片段,不包含HTNV病毒基因组成分。 展开更多
关键词 游离脱氧核糖核酸 肾综合征出血热 汉滩病毒 胱氧核糖核酸测序
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血清cf-DNA定量检测对宫颈癌早期辅助诊断及预后判断中的价值 被引量:11
7
作者 万妮娅 《中南医学科学杂志》 CAS 2018年第4期365-367,共3页
探讨血清游离DNA(cf-DNA)定量检测在宫颈癌早期诊断和临床预后判断中的应用价值。将本院收治的48例宫颈癌患者作为研究组,同时选取健康女性50例作为对照组,使用电化学发光分析仪检测所有研究对象的血清cf-DNA、糖类抗原125(CA125)、糖... 探讨血清游离DNA(cf-DNA)定量检测在宫颈癌早期诊断和临床预后判断中的应用价值。将本院收治的48例宫颈癌患者作为研究组,同时选取健康女性50例作为对照组,使用电化学发光分析仪检测所有研究对象的血清cf-DNA、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)、鳞状细胞癌抗原(SCC)、β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)的浓度,比较两组研究对象之间的差异。结果显示,宫颈癌患者血清中SCC、β-HCG、血清cf-DNA的浓度相对于健康妇女来说有明显升高(P<0.05),而CA125、CA19-9的水平变化不大;cf-DNA灵敏度及特异度高于CA125、CA19-9、SCC、β-HCG;宫颈癌患者临床分期为Ⅱ期、Ⅲ期的患者和癌细胞低分化程度的患者血清中cf-DNA水平显著高于Ⅰ期患者和中、高分化程度的患者(P<0.05),血清cf-DNA和临床病理组织分型无明显的相关性。因此,血清cf-DNA水平可以作为宫颈癌早期诊断和临床预后判断的一个标准。 展开更多
关键词 血清游离DNA 宫颈癌 定量检测 辅助诊断 预后
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外周血cf-DNA/NETs水平与重症肺炎并发ARDS患者病情严重程度及预后的相关性 被引量:9
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作者 董照刚 郑喜胜 +2 位作者 赵聪源 魏超 周小超 《热带医学杂志》 CAS 2020年第11期1433-1437,共5页
目的探讨外周血游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网陷阱(cf-DNA/NETs)水平与重症肺炎并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者病情严重程度及预后的相关性。方法选取南阳市中心医院2016年8月-2018年4月收治重症肺炎并发ARDS组患者82例,同期重症肺... 目的探讨外周血游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网陷阱(cf-DNA/NETs)水平与重症肺炎并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者病情严重程度及预后的相关性。方法选取南阳市中心医院2016年8月-2018年4月收治重症肺炎并发ARDS组患者82例,同期重症肺炎组患者67例,及本院健康体检者82人为对照组,比较治疗前、入住本院ICU治疗24、48 h重症肺炎并发ARDS组患者、同期重症肺炎组患者及对照组的cf-DNA/NET水平、白细胞介素-6(IL-6)水平、白细胞计数(WBC)、急性生理学及慢性健康(APACHEⅡ)评分。用荧光染色法检测外周血中cf-DNA/NETs水平。分析cf-DNA/NETs水平、APACHEⅡ评分与预后的关系。结果治疗前,与对照组相比,重症肺炎组、重症肺炎并发ARDS组患者外周血cf-DNA/NETs水平、IL-6水平、WBC计数及APACHEⅡ评分升高,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后24、48 h,两组患者外周血cf-DNA/NETs水平、IL-6水平、WBC计数及APACHEⅡ评分组间和组内差异有统计学意义(P<0.05)。治疗48 h后,与存活组相比,死亡组重症肺炎并发ARDS患者血清cfDNA/NETs、IL-6水平、WBC计数、APACHEⅡ评分显著较高,差异有统计学意义(P<0.05)。重症肺炎并发ARDS患者外周血cf-DNA/NETs水平与IL-6、WBC计数、APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.05)。Logistic分析显示,cf-DNA/NETs是重症肺炎并发ARDS患者不良预后危险因素(P<0.05)。结论外周血cf-DNA/NETs可能参与重症肺炎并发ARDS病情发展,cf-DNA/NETs高水平是重症肺炎并发ARDS患者不良预后危险因素。 展开更多
关键词 重症肺炎 急性呼吸窘迫综合征 NETS cf-dna
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Cf-DNA/NETs与重症哮喘并肺部感染患者肺功能及呼吸动力学的关系 被引量:4
9
作者 曹义 韩利红 +1 位作者 王彤兵 张娜莉 《热带医学杂志》 CAS 2022年第2期207-211,共5页
目的 探究血浆游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(Cf-DNA/NETs)水平与重症支气管哮喘合并肺部感染患者肺功能及呼吸动力学指标的关系。方法 选取2019年9月-2020年9月洛阳市中心医院收治的重症支气管哮喘患者87例。按照是否合并肺部感染分为... 目的 探究血浆游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(Cf-DNA/NETs)水平与重症支气管哮喘合并肺部感染患者肺功能及呼吸动力学指标的关系。方法 选取2019年9月-2020年9月洛阳市中心医院收治的重症支气管哮喘患者87例。按照是否合并肺部感染分为感染组(n=31)和非感染组(n=56)。同时选取健康人64名为对照组。采用免疫荧光染色法检测患者Cf-DNA/NETs水平,对比不同Cf-DNA/NETs水平感染组患者的肺功能、呼吸动力学指标以及相关指标分析。采用单因素和Logistic多因素回归分析影响重症哮喘合并肺部感染患者危险因素。结果 与对照组相比,感染组和非感染组Cf-DNA/NETs、气道阻力(Raw)、气道峰压(PIP)、呼吸做功(WOB)参数水平明显升高,动态顺应性(Cdyn)、肺功能参数水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);感染组Cf-DNA/NETs、Raw、PIP、WOB参数水平高于非感染组,Cdyn、肺功能参数水平低于非感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cf-DNA/NETs低水平组患者第1秒用力呼气量(FEV1)、第1秒用力呼气容积占预计肺活量值百分比(FEV1%pred)以及用力肺活量占预计值百分比(FVC%pred)均低于对应高水平的患者,差异有统计学意义(t=3.534、2.648、1.358,P<0.05),Cf-DNA/NETs低水平组患者Raw、PIP以及WOB均低于对应高水平组患者,而Cdyn明显高于对应高水平组患者,差异有统计学意义(t=25.096、9.948、6.683、13.737,P<0.05),高水平组心率、呼吸、平均动脉压、有创机械通气时间均高于低水平组,血氧饱和度低于低水平组,差异均有统计学意义(t=10.122、9.181、8.013、4.147、8.856,P<0.05)。哮喘家族史、Cf-DNA/NETs水平升高均是影响重症哮喘合并肺部感染患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 Cf-DNA/NETs水平与重症支气管哮喘合并肺部感染患者肺功能及呼吸动力学指标密切相关,为进一步研究重症支气管哮喘合并肺部感染患者病情提供了数据参考。 展开更多
关键词 游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网 重症哮喘 肺部感染 呼吸动力学
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HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清巨噬细胞移动抑制因子和游离DNA水平变化及其临床价值
10
作者 邹旭晨 石春霞 +2 位作者 张丹眉 郭金 龚作炯 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2024年第3期199-201,206,共4页
目的:观察乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、游离DNA(cf-DNA)水平变化,并分析MIF、cf-DNA在肝衰竭中的作用。方法:选取HBV相关ACLF患者60例(肝衰竭组),体检健康者30例(对照组),收集临床资... 目的:观察乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、游离DNA(cf-DNA)水平变化,并分析MIF、cf-DNA在肝衰竭中的作用。方法:选取HBV相关ACLF患者60例(肝衰竭组),体检健康者30例(对照组),收集临床资料,试剂盒检测各组患者血清MIF、cf-DNA水平,Pearson相关或Spearman秩相关分析法分析MIF、cf-DNA与临床炎症指标的相关性。结果:与对照组相比,肝衰竭组患者血清MIF和cf-DNA水平升高(P<0.05)。血清MIF与cf-DNA(r=0.482)、降钙素原(PCT)(r=0.566)、超敏C反应蛋白(r=0.285)呈正相关(P<0.05);cf-DNA与PCT(r=0.526)、超敏C反应蛋白(r=0.336)呈正相关(P<0.05)。结论:HBV相关ACLF患者血清MIF、cf-DNA水平升高,MIF和cf-DNA在肝衰竭炎症过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 肝功能衰竭 巨噬细胞移动抑制因子 游离DNA 炎症指标
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血浆游离cf-DNA定量分析在脓毒症患者诊断中的临床价值 被引量:3
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作者 银雪 杨敬平 +1 位作者 孙德俊 王文明 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2016年第6期631-635,共5页
目的探讨脓毒症患者血浆游离DNA(cf-DNA)定量检测的临床应用价值。方法选取2012年11月至2013年5月,收治于包钢医院呼吸与危重症医学科的35例脓毒症患者和31例全身炎症反应综合征(SIRS)患者,并以17例健康者血浆作为对照样本;用"血... 目的探讨脓毒症患者血浆游离DNA(cf-DNA)定量检测的临床应用价值。方法选取2012年11月至2013年5月,收治于包钢医院呼吸与危重症医学科的35例脓毒症患者和31例全身炎症反应综合征(SIRS)患者,并以17例健康者血浆作为对照样本;用"血浆游离DNA提取试剂盒"提取血浆cf-DNA,采用荧光定量PCR技术(SYBR Green I染料法)检测血浆DNA水平,酶联免疫吸附测定法检测血清降钙素原(PCT)和C-反应蛋白(CRP)水平,并应用ROC曲线分析比较cf-DNA、PCT及CRP在脓毒症诊断中的价值。结果脓毒症组cf-DNA明显高于SIRS组和健康对照组,差异有显著性(P<0.001);入院第1天cf-DNA浓度显著高于第3天,差异有显著性(P<0.001);入院第1天的cf-DNA浓度与SOFA评分具有相关性,SOFA评分越高,其cf-DNA越高,且差异有统计学意义(r=0.561,P<0.001);以血浆cf-DNA浓度≥8 939 GE/ml作为诊断脓毒症的临界值,其检测的灵敏度为77.14%,特异度为80.65%。结论血浆游离DNA的定量检测可作为脓毒症的早期预测、随访观察疗效和监测复发的指标。 展开更多
关键词 cf-dna 降钙素原 C-反应蛋白 ROC曲线 脓毒症
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Revolutionizing Non-Invasive Biomarker Discoveries: The Power of Methylation Screening Analysis in Cell-Free DNA Liquid Biopsy
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作者 Min Seob Lee Na Young Min +2 位作者 Hyuk Jung Kwon Yonjung Kim Isaac Kise Lee 《Open Journal of Genetics》 CAS 2023年第1期48-74,共27页
Epigenetic changes of DNA, including methylation, have long been recognized as key indicators of various diseases, including aging, cancer, and neurological disorders. Biomarker discoveries based on distinct methylati... Epigenetic changes of DNA, including methylation, have long been recognized as key indicators of various diseases, including aging, cancer, and neurological disorders. Biomarker discoveries based on distinct methylation patterns for both hypermethylation and hypomethylation lead the way in discovery of novel diagnosis and treatment targets. Many different approaches are present to detect the level of methylation in whole genome (whole genome bisulfite sequencing, microarray) as well as at specific loci (methylation specific PCR). Cell-free DNA (cf-DNA) found in body fluids like blood provides information about DNA methylation and serves as a less invasive approach for genetic screening. Cell-free DNA and methylation screening technologies, when combined, have the potential to transform the way we approach genetic screening and personalized therapy. These technologies can help enhance disease diagnostic accuracy and inform the development of targeted therapeutics by providing a non-invasive way for acquiring genomic information and identifying disease-associated methylation patterns. We highlight the clinical benefits of using cell-free DNA (cf-DNA) liquid biopsy analysis and available methylation screening technologies that have been crucial in identifying biomarkers for disease from patients using a non-invasive way. Powering such biomarker discoveries are various methods of cf-DNA methylation analysis such as Bisulfite Sequencing and most recently, Methylation-Specific Restriction Enzyme (MSRE-seq) Analysis, paving the way for novel epigenetic biomarker discoveries for more robust diagnosis such as early disease detection, prognosis, monitoring of disease progression and treatment response as well as discovery of novel drug targets. 展开更多
关键词 Epigenetics Biomarkers Cell-Free DNA (cf-dna) METHYLATION Liquid Biopsy Drug Target Methylation-Specific Restriction Enzyme (MSRE) Cancer Epigenetic Drugs HYPERMETHYLATION HYPOMETHYLATION
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数字PCR检测血浆游离DNA方法的建立及在结直肠癌中的初步应用 被引量:3
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作者 刘平 余玲玲 +3 位作者 王金丹 蔡锚 吴兆明 郑晓群 《医学研究杂志》 2018年第6期38-44,共7页
目的建立基于微滴式数字PCR(dd PCR)技术定量检测血浆游离DNA(cf-DNA)含量的方法,并探讨其在结直肠癌诊疗中的应用价值。方法设计β-actin特异性引物和探针,建立dd PCR检测cf-DNA绝对定量方法,根据不同浓度标准品验证该检测方法的敏感... 目的建立基于微滴式数字PCR(dd PCR)技术定量检测血浆游离DNA(cf-DNA)含量的方法,并探讨其在结直肠癌诊疗中的应用价值。方法设计β-actin特异性引物和探针,建立dd PCR检测cf-DNA绝对定量方法,根据不同浓度标准品验证该检测方法的敏感度、线性以及重复性。该法检测68例结直肠癌患者、33例结直肠良性肿瘤患者及60例健康对照者血浆cf-DNA水平,化学发光法检测其血清CEA、CA19-9水平,分析血浆cf-DNA水平与临床病理参数及血清CEA、CA19-9水平的关系,并用ROC曲线评估其诊断效能。结果本实验所建立的dd PCR方法能够检测低至10pg/μl的微量DNA模板,检测敏感度为0.29copies/μl;且在模板浓度为10pg/μl^10ng/μl的范围内线性良好(Y=-2.34+33.17X,R2=0.999);批内CV为9.85%,批间CV为11.04%。该法检测结直肠癌组、结直肠良性肿瘤组和健康对照组血浆cf-DNA水平分别为6700(3800~9925)、3100(2300~4000)、2500(1775~4000)copies/ml,结直肠癌组血浆cf-DNA水平显著高于结直肠良性肿瘤组(P=0.000)和健康对照组(P=0.000),而结直肠良性肿瘤组与健康对照组比较,差异无统计学意义(P=0.167)。结直肠癌患者血浆cfDNA水平在不同年龄、性别、肿瘤部位、分化程度、淋巴结转移以及肿瘤浸润程度间比较,差异均无统计学意义(P均>0.05),在TNM分期间差异有统计学意义(P<0.01)。结直肠癌患者血浆cf-DNA水平与CEA(r=0.210,P=0.099)和CA19-9(r=0.125,P=0.233)无相关性。ROC曲线结果显示,以5300copies/ml为cut off值,cf-DNA诊断结直肠癌ROC曲线下面积(AUC)、敏感度、特异性分别为0.931、73.3%和98.3%,高于CEA(0.762、51.7%、95.6%)和CA19-9(0.548、45.0%、82.0%)。结论建立了一种敏感、特异的dd PCR定量检测血浆cf-DNA的方法,有助于结直肠癌的辅助诊断及预后判断。 展开更多
关键词 ddPCR cf-dna 结直肠癌 CEA CA19-9
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游离中性粒细胞胞外诱捕网DNA的研究进展 被引量:7
14
作者 周剑涛 姚振国 丁海峰 《分子诊断与治疗杂志》 2013年第2期134-138,共5页
中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是先天抗微生物免疫的重要部分。NETs由中性粒细胞DNA、组蛋白和细胞质蛋白质构成。它对微生物是一种有效的防御机制,当缺乏有效抗衡调节时,它又能损伤组织。越来越多的证据表明NETs的动态水平是随着炎性过程... 中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)是先天抗微生物免疫的重要部分。NETs由中性粒细胞DNA、组蛋白和细胞质蛋白质构成。它对微生物是一种有效的防御机制,当缺乏有效抗衡调节时,它又能损伤组织。越来越多的证据表明NETs的动态水平是随着炎性过程,而不是随着组织损伤而变化。一种快速定量游离中性粒细胞胞外诱捕网DNA(cf-DNA/NETs)的方法已经建立,cf-DNA/NETs可能是用于诊断与预测炎症性疾病的新标志物。 展开更多
关键词 中性粒细胞 中性粒细胞胞外诱捕网 cf-dna NETS 炎症性疾病
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体外循环冠脉旁路术和双瓣替换术围术期血浆循环DNA变化及意义 被引量:2
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作者 黄晶 肖颖彬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1284-1287,共4页
目的研究体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)下心内直视手术患者围术期血浆循环DNA(circulatingcell-free DNA,cf-DNA)浓度变化及手术前后肝、肾功能和心肌功能的变化及其临床意义。方法收集2012年9月至12月在本院心血管外科CPB下行... 目的研究体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)下心内直视手术患者围术期血浆循环DNA(circulatingcell-free DNA,cf-DNA)浓度变化及手术前后肝、肾功能和心肌功能的变化及其临床意义。方法收集2012年9月至12月在本院心血管外科CPB下行心内直视手术的住院患者25例(男性13例,女性12例),冠状动脉粥样硬化性心脏病患者13例[行冠状动脉搭桥手术(coronary artery bypass graft,CABG),即CABG组];风湿性二尖瓣及主动脉瓣狭窄关闭不全患者12例[行二尖瓣及主动脉瓣双置换术(double valve replacement,DVR),即DVR组]。采集患者静脉血为标本,对肝肾功及心肌酶谱进行检测,并采用荧光定量PCR对血浆中cf-DNA进行相对定量检测。结果 CABG组和DVR组在术中cfDNA含量都随转流时间延长而增高,转流完毕时达到最高,术后48 h内逐步下降,但仍高于转流前。CABG组术后血浆cfDNA随时间下降比DVR组显著(P<0.05)。CABG组和DVR组术后24 h血浆cf-DNA变化与患者总胆红素及尿素氮的变化显著相关(P<0.01)。结论血浆cf-DNA在监测体外循环下患者机体受损程度以及预测肝肾并发症及预后方面可能具有重要意义。 展开更多
关键词 体外循环 血浆cf-dna 围术期
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胃蛋白酶原联合血浆游离DNA在早期诊断胃癌中的临床价值 被引量:2
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作者 杨华 侯静芳 《国际消化病杂志》 CAS 2018年第5期301-305,共5页
目的探讨胃蛋白酶原(PG)联合血浆游离DNA(cf-DNA)在早期诊断胃癌中的临床价值。方法回顾性分析西安市第一医院2015年2月至2017年2月收治的120例胃癌患者、98例胃溃疡患者、109例萎缩性胃炎患者、112例浅表性胃炎患者,另选择120名同期健... 目的探讨胃蛋白酶原(PG)联合血浆游离DNA(cf-DNA)在早期诊断胃癌中的临床价值。方法回顾性分析西安市第一医院2015年2月至2017年2月收治的120例胃癌患者、98例胃溃疡患者、109例萎缩性胃炎患者、112例浅表性胃炎患者,另选择120名同期健康体检者作为正常对照组,比较各组间PGⅠ、PGⅡ、PGR(PGⅠ/PGⅡ)及cf-DNA的差异,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析PGⅠ、PGⅡ、PGR、cf-DNA及联合检测早期诊断胃癌的价值。结果胃癌组PGⅠ、PGR明显低于其他各组,差异具有统计学意义(P<0.05),胃溃疡组、萎缩性胃炎组PGⅠ、PGR明显低于浅表性胃炎组、正常组,差异具有统计学意义(P<0.05)。5组的PGⅡ水平差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌组cf-DNA水平明显高于其他各组,差异具有统计学意义(P<0.05),胃溃疡组、浅表性胃炎组、萎缩性胃炎组、正常组cf-DNA水平的差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌转移组患者的PGⅠ、PGR明显低于非转移组患者,差异具有统计学意义(P<0.05),转移组患者cf-DNA水平明显高于非转移组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。PGⅠ、PGR、cf-DNA联合检测的敏感度为0.85,特异度为0.79,明显高于单项检测。联合检测的ROC曲线下面积为0.88,明显大于单项检测。结论 PGⅠ、PGR、cf-DNA联合检测早期诊断胃癌的敏感度和特异度较高,具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 胃蛋白酶原 血浆游离DNA 胃癌 临床价值
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优化样品留取方法可提高囊胚培养液中游离DNA整倍性的检测效率 被引量:2
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作者 黄锦 加加林 +2 位作者 党玉姣 乔杰 刘平 《中国生育健康杂志》 2022年第4期301-304,310,共5页
目的探讨利用囊胚培养液中游离DNA检测胚胎整倍性的样品留取优化方案。方法本研究共纳入239枚囊胚,所有的囊胚均来源于北京大学第三医院生殖中心胚胎植入前遗传学整倍体检测技术(PGT-A)周期。纳入患者的PGT-A指征为女方高龄(>38岁)... 目的探讨利用囊胚培养液中游离DNA检测胚胎整倍性的样品留取优化方案。方法本研究共纳入239枚囊胚,所有的囊胚均来源于北京大学第三医院生殖中心胚胎植入前遗传学整倍体检测技术(PGT-A)周期。纳入患者的PGT-A指征为女方高龄(>38岁)、复发性流产、反复着床失败。胚胎在D3天更换囊胚培养液,并采取单胚胎单独培养,收集可以PGT-A活检囊胚的培养液。收集方法根据是否胚胎打孔以及胚胎培养时长分为三个阶段。PGT-A囊胚活检的滋养层细胞采用SNP芯片检测整倍性;培养液游离DNA采用二代测序方法(NGS)进行无创胚胎染色体整倍性筛查(NiPGT-A);背靠背比较两者的结果,分析NiPGT-A方法的检出率、NiPGT-A结果与PGT-A结果倍性一致性、整倍体符合率、非整倍体符合率、颗粒细胞污染率等。共有56枚PGT-A整倍性胚胎移植,分析对应胚胎的NiPGT-A结果,统计临床妊娠结局。结果239枚囊胚中209枚囊胚有NiPGT-A结果,检出率为87.5%。随着采样方法的改进,NiPGT-A结果与PGT-A结果倍性一致性、整倍体符合率逐渐提高;颗粒细胞污染率逐渐降低。239枚胚胎中有56枚PGT-A整倍体的胚胎移植,23枚胚胎的结局为活产/持续妊娠。NiPGT-A没有结果的胚胎妊娠率较高(71.4%),高于NiPGT-A为整倍体或者非整倍体胚胎的临床妊娠结局(33.3%,40.9%)。结论囊胚培养液的样品留取方法对于NiPGT-A检测至关重要,推荐D3天再次去除颗粒细胞、采集D4-D5/6天囊胚培养液,而且不要针对胚胎进行打孔处理。 展开更多
关键词 囊胚 整倍性 无创胚胎染色体整倍性筛查 胚胎植入前遗传学筛查 游离DNA
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小鼠皮肤切创愈合过程中血清游离DNA的改变 被引量:1
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作者 徐冬冬 王韵 +1 位作者 章丽霞 杜冰 《华北理工大学学报(医学版)》 2019年第5期337-340,共4页
①目的检测皮肤切创愈合过程中血清游离DNA(cf-DNA)变化的时间规律性。②方法将健康小鼠40只随机分为8组:对照组、0.5小时组、1小时组、2小时组、24小时组、48小时组、4天组和16天组,每组5只小鼠。除对照组外,其余各组建立皮肤切创模型... ①目的检测皮肤切创愈合过程中血清游离DNA(cf-DNA)变化的时间规律性。②方法将健康小鼠40只随机分为8组:对照组、0.5小时组、1小时组、2小时组、24小时组、48小时组、4天组和16天组,每组5只小鼠。除对照组外,其余各组建立皮肤切创模型。通过内眦静脉采血后提取血清cf-DNA,随机选取3份DNA样本验证性扩增保守基因(β-actin)。采用荧光核酸蛋白测定仪对cf-DNA进行检测与定量,SPSS13.0统计分析软件对各组结果进行分析处理。③结果3份DNA样本均检测到清晰条带,且与β-actin阳性样本位置一致。与对照组相比,0.5小时、1小时和16天时相组cf-DNA含量无明显差异(P>0.05)。2小时、24小时、48小时和4天时相组血清cf-DNA含量明显升高(P<0.05),其中48小时组最高。④结论在皮肤创伤愈合过程中血清cf-DNA浓度变化具有一定的规律性及时间相关性,有望成为推断创口形成时间的生物学指标。 展开更多
关键词 损伤时间 游离DNA 创口愈合 皮肤切创
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循环游离DNA检测用血量的改进及其临床应用
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作者 王迪 刘慧颖 +2 位作者 阳振曦 张岳 车轶群 《标记免疫分析与临床》 CAS 2018年第10期1489-1494,共6页
目的从少量肿瘤患者血液中提取循环游离DNA (cfDNA)并检测其与肿瘤相关的基因突变。方法选用8例肿瘤患者血常规项目检测完成后剩余的EDTA抗凝全血,采用优化双离心法得到少量血浆并检测cfDNA浓度,对在检测范围内的标本进行建库和靶向外... 目的从少量肿瘤患者血液中提取循环游离DNA (cfDNA)并检测其与肿瘤相关的基因突变。方法选用8例肿瘤患者血常规项目检测完成后剩余的EDTA抗凝全血,采用优化双离心法得到少量血浆并检测cfDNA浓度,对在检测范围内的标本进行建库和靶向外显子捕获,采用Agilent 2100 bioanalyzer进行构建文库的质量检测,随后采用Hi Seq 3000 Sequencing System进行测序,对测序结果进行质量检测(GC Bias检测、Quality by Cycle检测和Insert Size检测),随后进行突变分析。结果通过优化双离心法可以从2mL血常规检测剩余血液中提取血浆,在这小于1mL的少量血浆中可以提取到浓度合格的cfDNA(11. 2~58. 3ng/μL),构建文库及测序结果均质量合格,并成功检测到cfDNA中肿瘤相关的的基因突变。结论可以从肿瘤患者血常规检测项目完成后的剩余血液中检测到cfDNA中的基因突变,大大方便了液体活检在肿瘤患者既往留存的血液标本和患者预后随访留取的血液样本中的应用,可以更好对肿瘤患者的基因谱变化进行动态监测及评估。 展开更多
关键词 cfDNA 全外显子组测序 基因突变
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ALU-PCR技术定量检测心肌梗死患者血浆游离DNA的含量
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作者 彭亮 娄晓丽 +3 位作者 唐亮 曹辉 牛继华 侯彦强 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2015年第4期345-348,共4页
目的:利用Alu-PCR对心肌梗死(MI)患者血浆中游离DNA(cf-DNA)含量进行检测,通过与健康人对比分析,探讨cf-DNA在心梗诊断中的应用及意义。方法收集120例急性心梗(发病后6 h内)以及60例健康志愿者的外周血浆样本,实时荧光定量PC... 目的:利用Alu-PCR对心肌梗死(MI)患者血浆中游离DNA(cf-DNA)含量进行检测,通过与健康人对比分析,探讨cf-DNA在心梗诊断中的应用及意义。方法收集120例急性心梗(发病后6 h内)以及60例健康志愿者的外周血浆样本,实时荧光定量PCR方法检测MI组、和健康对照组血浆DNA的含量,收集cTnI、MYO、CKMB、LDH等指标,比较分析血浆DNA水平与心梗临床相关性,并作受试者工作特性曲线(ROC)。结果各组血浆DNA浓度MI组和健康对照组血浆DNA含量取对数值后的分别为7.23±1.81(lg copies/ml)和3.79±0.75(lg copies/ml),差异有统计学意义(P〈0.05)。结论血浆cf-DNA具有作为新的心梗诊断标志物的临床应用价值。 展开更多
关键词 ALU-PCR技术 心肌梗死 cf-dna
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