FMR1基因CGG重复数与流产相关性研究

目的探讨脆性X智力低下1(FMR1)基因的(CGG)n重复序列在育龄女性中的分布以及(CGG)n重复数与流产之间的相关性。方法选取2018年4月至2021年3月就诊于大兴人民医院的2038例孕妇作为研究对象,根据是否有自然流产史分为正常妊娠组(对照组,988例)和流产组(1050例),再根据自然流产次数将流产组分为自然流产(1次)组(520例)和复发性流产(RSA)组(530例)。通过三引物荧光定量PCR技术和毛细管电泳技术对血液样本中的FMR1基因CGG重复数进行检测,统计并分析各组FMR1基因CGG重复数分布情况。结果一般资料分析显示,各组平均年龄比较均无显著性差异(P>0.05)。PCR结果分析显示,流产患者FMR1基因灰区(CGG重复数=45~54)携带率高于正常妊娠组(0.95%vs.0.81%),但无显著性差异(P>0.05);流产组有4例FMR1基因前突变(CGG重复数=55~200)携带者,前突变携带率0.38%,而正常妊娠组无前突变携带者,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。比较正常妊娠组、自然流产(1次)组、RSA组3组FMR1基因CGG重复数分布情况,发现3组均无FMR1基因全突变(CGG重复数>200)携带者。关于FMR1基因灰区突变(CGG重复数=45~54)携带率的分析发现,RSA组(7例,1.32%)携带率最高,其次为正常妊娠组(8例,0.81%)和自然流产组(3例,0.58%),3组两两比较均有显著性差异(P<0.05)。关于前突变(CGG重复数=55~200)携带率分析发现,正常妊娠组无FMR1基因前突变携带者,自然流产有2例(0.38%)前突变携带者,RSA组有2例(0.38%)前突变携带者,两个流产亚组与正常妊娠组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论流产人群携带FMR1基因前突变和灰区概率较正常妊娠人群高,对该类人群进行FMR1基因检测在帮助医生指导前突变和灰区携带者的生育计划及产前诊断方面都具有非常深远的意义。

tRF-Pro-CGG对小鼠胰腺癌细胞生物学行为的影响及其分子机制

背景与目的:tRNA衍生的片段(tRNA-derived fragments,tRF)是一类长度为14~30 nt的小分子非编码RNA,其影响着恶性肿瘤的发展进程。本研究旨在探讨tRF-Pro-CGG对小鼠胰腺癌细胞生物学行为的影响及其可能的分子机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测tRFPro-CGG在小鼠胰腺癌细胞系pan02、LTPA,人胰腺癌细胞系Capan-2和正常胰腺细胞HPDE6-C7中的表达水平。通过慢病毒转染技术过表达pan02细胞及敲低LTPA细胞中tRF-Pro-CGG的表达,采用RTFQ-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测过表达和敲低效果。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖情况。采用transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。采用动物模型检测tRF-Pro-CGG对胰腺癌裸鼠移植瘤生长和转移的影响。采用H-E染色观察移植瘤的组织病理学结构。采用Western blot检测移植瘤组织中Ki-67增殖指数、转移相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达及磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号转导通路蛋白的表达及磷酸化情况。结果:小鼠胰腺癌细胞系pan02中tRF-Pro-CGG表达最低,在pan02细胞中转染tRF-Pro-CGG mimics后,tRF-Pro-CGG的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞迁移(P<0.001)和侵袭能力(P<0.001)显著降低,裸鼠移植瘤体积(P<0.01)和重量(P<0.001)均显著降低,裸鼠移植瘤组织中出现明显坏死和凋亡细胞;裸鼠移植瘤组织中Ki-67增殖指数和vimentin的表达显著降低(P<0.001),而E-cadherin的表达显著升高(P<0.001),PI3K、P-PI3K、AKT和P-AKT的表达显著降低(P<0.001),胰腺癌肝转移例数差异无统计学意义(P>0.05)。小鼠胰腺癌细胞系LTPA中tRF-Pro-CGG表达最高,在LTPA细胞中转染tRF-Pro-CGG inhibitor后,tRF-Pro-CGG的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),细胞增殖能力显著升高(P<0.01),细胞迁移(P<0.001)和侵袭能力(P<0.001)显著升高,裸鼠移植瘤体积(P<0.01)和重量(P<0.01)均显著升高,裸鼠移植瘤组织中出现少量的坏死及凋亡细胞;裸鼠移植瘤组织中Ki-67和vimentin的表达显著升高(P<0.001),而E-cadherin的表达显著降低(P<0.001),PI3K、P-PI3K、AKT和P-AKT的表达显著升高(P<0.001),胰腺癌肝转移例数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:过表达tRF-Pro-CGG可以抑制小鼠胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,抑制胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,下调Ki-67增殖指数、vimentin的表达水平和PI3K/AKT磷酸化水平。tRF-Pro-CGG可能通过调节PI3K/AKT信号转导通路抑制胰腺癌的发生、发展。

过表达microRNA-7通过下调CGG结合蛋白1的表达抑制人肺癌细胞生长

目的探讨过表达microRNA-7(miR-7)对人肺癌细胞体内外生长的作用和可能机制。方法利用真核表达载体pcDNA3.1(-)-pri-miR-7(p-miR-7),体外瞬时转染95D人肺癌细胞,MTT法和克隆形成实验检测95D细胞的增殖变化;免疫荧光技术检测95D细胞Ki-67和CGG结合蛋白(CGGBP1)的表达;建立人肺癌裸鼠肿瘤模型,肿瘤局部注射p-miR-7真核表达载体,测量肿瘤大小并观察小鼠生存时间;实时PCR检测肿瘤组织中miR-7表达水平;免疫组织化学技术检测组织中Ki-67和CGGBP1蛋白的表达。结果过表达miR-7可明显抑制肺癌细胞的体外增殖(P<0.05),Ki-67和CGGBP1的表达显著减少(P<0.05);体内实验结果显示,局部注射p-miR-7组中miR-7表达水平明显增加,同时荷瘤裸鼠的肿瘤生长缓慢,生存时间明显延长(P<0.05)。肿瘤组织中Ki-67和CGGBP1蛋白的表达量均显著减少(P<0.05)。结论过表达miR-7可显著抑制人肺癌细胞的体内外生长,可能与其下调肿瘤生长相关蛋白CGGBP1的表达有关。

FMR1基因CGG重复序列多态性与不明原因早期自然流产的相关性研究

目的探讨脆性X智力障碍基因1(FMR1)基因CGG重复序列与不明原因早期自然流产发病机制的相关性。方法收集2015年5月1日至2018年4月1日在北京妇产医院计划生育科就诊的难免流产或需行清宫操作的2 000例患者为自然流产组;同期在北京妇产医院产科就诊的1 480例顺利分娩女性为对照组。两组患者均于孕早期或孕中期抽取外周血,提取基因组DNA,应用FMR1基因Amplide X检测技术进行FMR1基因CGG重复序列数检测。比较两组CGG重复序列情况并加以分析。结果 (1)所有对象的FMR1基因检测未检出全突变病例;自然流产组中CGG重复最大频率等位基因n=30(32.95%),其后依次是29(31.15%)、36(15.60%)、31(5.85%);对照组CGG重复最大频率等位基因为n=30(33.24%),其后依次为29(25.47%)、36(14.73%)、31(8.38%)。自然流产组及对照组CGG重复位点均数比较无显著性差异[(29.33±5.19)vs.(28.73±6.37)](P>0.05)。(2)自然流产组FMR1基因中间型携带率为1∶222,对照组1∶247,组间比较无显著性差异(P>0.05)。自然流产组的脆性X综合征前突变携带频率(1∶400)显著高于对照组(1∶740)(P<0.05)。结论 FMR1基因CGG重复序列前突变与不明原因早期自然流产可能存在相关性。

不明原因复发性流产女性FMR1基因CGG重复序列多态性研究

目的探讨不明原因复发性流产女性脆性X智力障碍1(FMRl)基因CGG重复序列多态性分布特点。方法收集2018年1月1日至2019年12月31日在石家庄市第四医院复发性流产门诊就诊的具有不明原因复发性流产史的340例患者为研究组;同期在石家庄市第四医院妇科门诊就诊的340例年龄匹配的无流产史女性为对照组。抽取外周血,提取基因组DNA,应用荧光PCR-毛细管电泳法进行FMR1基因CGG重复序列数检测,比较两组的CGG重复序列情况并加以分析。结果两组均无全突变型携带者。研究组中CGG重复序列数最多者为29次(41.5%),其后依次是30次(38.8%)和36次(8.2%);对照组CGG重复序列数最多者为29次(43.2%),其后依次为30次(42.6%)和31次(2.9%)。研究组和对照组FMRl基因CGG重复序列数均数比较无显著性差异[(29.29±5.31)vs.(28.88±5.97)](P>0.05)。研究组FMRl基因中间型携带率显著高于对照组(2.35%vs.0.29%)(P<0.05),CGG重复≥35次的正常等位基因携带率显著高于对照组(10.29%vs.3.53%)(P<0.05)。结论FMRl基因CGG重复序列等位基因中间型以及较大的正常型与不明原因复发性流产可能存在相关性。

不同民族人群FMR1基因CGG重复序列检测与分析

目的检测和分析脆性X综合征致病基因FMR1 CGG重复序列在汉族和壮族人群中的多态性分布。方法采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对1060例汉族人（男280人，女780人）和283例壮族人（男85人，女198人）FMR1基因CGG重复序列进行分析，并用Southern印迹技术对结果进行了验证。结果汉族人群中共检测到33种等位基因，其中CGG重复序列范围为6～43，壮族人群共检测到27种等位基因，CGG重复序列范围为6～57，两类人群中最常见的等位基因分别为28和29。结论应用PCR扩增技术进行了FMR1基因的大面积筛查，中国汉族和壮族人群中FMR1基因CGG重复序列变异分布略有差异。

FMR-1基因中CGG重复序列扩增条件的优化

目的:优化PCR扩增条件,建立一种有效检测脆性X综合征的方法。方法:在常规PCR的基础上,采用耐高温酶替代法、碱基替代法,同时加入有机溶剂DMSO等,对表型正常的人群进行FMR1基因CGG重复序列检测。结果:改良PCR法可以提高G C富集区扩增效率,并取得了较好的效果。结论:建立了一种扩增FMR-1基因中CGG重复序列的可行方法。

中国CGG货币规则模型的建立及其实证研究

运用VAR模型经验估计中国的金融状况指数FCI,在此基础上将FCI指数作为目标和信息变量纳入CGG规则,运用GMM方法估计了中国的货币政策反应函数,发现FCI指数与短期利率在统计上存在正相关关系不够显著,货币政策不应直接对于资产价格作出反应;利率调节对CPI通胀率、产出缺口和金融形势的松紧变化均反应不足;特别是利率对金融形势松紧变化的调节不足,刺激了金融不平衡和资产价格过度波动的相互推动和累积,是经济不平稳发展的重要政策诱因。

CGG地震资料解释工作站的开发应用

CGG工作站是从法国引进的地震资料综合解释工作站，其功能相当完备。但在实际应用中尚存在一些问题，例如：成图系统一次只能生成一个图；数据存放格式占用磁盘空间太大；图头未加汉字，使用不方便；工作站的图形和图像功能的共享问题等。本文在这四个方面开发了Fastedit一次成图多幅；减少磁盘空间占用，提高成图速度；不改动原系统加汉字图名；微机与工作站图像共享等4项实用技术。经实际资料处理表明，其效果是比较好的。

CGG软件在煤矿地质勘探中的应用

在山东省阳谷—茌平煤田黑虎庙井田煤矿的煤层地质勘探工作中,采用了CGG软件,通过采集原始数据,经过计算机处理,结果确定了所分析的煤炭煤层地质情况,满足了勘探工作的需要。

脆性X智力低下基因(FMR-1)异常甲基化与(CGG)n重复序列的动态突变

脆性X综合征(Fra(x))是最常见的家族性智力低下综合征。细胞学上以遗传性Xq27.3脆性位点为特征。从该脆性位点上克隆到的脆性X智力低下基因(FMR-1)中有一段遗传不稳定的(CGG)n重复顺序。

人极低密度脂蛋白受体基因CGG重复序列多态性的检测

极低密度脂蛋向受体（ＶＬＤＬ－Ｒ）基因５＇非编码区起始密码子上游１９ｂｐ处存在ＣＧＧ三核苷酸重复序列。文献报道，一股正常人中该基因ＣＧＧ的重复次数为 ５～１１次，呈多态性分布，且有民族差异。目前尚无我国人群的资料。为了解中国汉族人群ＶＬＤＬ－Ｒ基因ＣＧＧ重复序列的分布情况，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、变性聚丙烯酸胺凝胶电泳和银染等技术，对湖北地区 １６０例正常汉族人的该重复序列进行了分析，共检出重复次数分别为５、８、９及１１的４种等位基因和５／５、５／８、８／８、８１９、９／９、５／９、８／１１及５／１１等八种基因型。ＶＬＤＬ－Ｒ基因ＣＧＧ重复序列在中国汉族人及其他国家人群中的分布不尽相同。

深圳市育龄女性FMR1基因CGG重复序列的多态性分析

目的通过对深圳市育龄女性进行脆性X智力低下1(FMR1)基因筛查,了解本市育龄女性FMR1基因(CGG)重复序列分布特征。方法采集100名育龄女性的外周血,提取基因组DNA,应用三引物PCR及毛细管电泳技术检测全血样本中FMR1基因CGG重复序列,并对检测结果进行统计分析。结果在78名具有自然流产史(15名)、复发性流产史(42名)和其他不良生育史(21名)的育龄女性中,FMR1等位基因1及等位基因2 CGG重复序列分布情况均无差异(P>0.05)。100名育龄女性FMR1基因CGG重复数范围为21~44,最常见CGG重复数为30和29,未检出突变基因携带者。结论不同地区、种族女性FMR1前突变基因携带率存在一定差异,但同一种族在不同地区携带率无差异。

脆性X综合征FMR—1基因CGG重复数变异的研究

采用PCR凝胶电泳法测定126条正常人群X染色体及来源于脆性X综合征家族的18条染色体的P(CGG)n重复数目。结果:①正常人群中,CGG重复数目最多为28,变动范围21～41(CGG)。FMR-1基因可稳定扩增,且后代受损程度不一。②脆性X家族中,母亲均为正常传递携带者,她们的前突变在卵子减数分裂过程中转变为全突变,从而导致了患病后代。脆性X综合征最罕见的遗传特点是存在正常传递男子,而且他的前突变可通过其女儿传至其孙子及曾孙。因此研究正常男、女性传递者具有临床价值。本方法简单、易行,可用于高危群体的筛查,同时也为遗传咨询和优生优育产前诊断提供依据。

不良孕产史孕妇FMR1基因CGG重复次数分布特征

目的:探究FMR1基因CGG重复次数与孕产妇不良孕产史关系,比较不良孕产史孕妇与正常孕妇FMR1基因(CGG)n重复数分布差异性。方法:收集2018年8月-2020年10月就诊于本院有不良孕产史的108例孕妇作为不良孕史组,无不良孕产史孕妇217例为对照组。收集两组孕妇外周静脉血全血磁珠DNA提取法提取基因组DNA,利用脆性X-FMR1基因AmplideX检测技术进行CGG重复序列数检测,比较分析CGG重复序列。结果:两组FMR1基因检测未检出全突变病例,CGG重复次数的变异范围为n=24~58,其中FMR1基因CGG重复等位基因杂合子数225例,占总数69.2%,最常见杂合子为30/29,占总等位基因中的11.4%;最大频率等位基因(CGG)n=30(30.1%),其次为37、31、29、36。正常范围(n=6~34)、正常范围高线(n=35~44次),两组(CGG)n重复数占比无差异(P>0.05);对照组FMR1基因灰区携带率为0.43%(1例),不良孕史组前突变携带率为0.93%(1例),两组存在差异(P<0.05)。结论:FMR1基因CGG重复序列前突变与孕妇不良孕产史可能存在相关性。

基于CGG规则的我国货币政策实施效果影响因素分析

从CGG货币规则基本理念入手,通过对影响我国货币政策实施效果的各因素进行因子分析,确定了能够体现所有原有变量信息的3大因子:FAC1政府税收及支出和货币供应量因子、FAC2利率及汇率因子、FAC3通货膨胀因子,并认为这3大因素是我国货币规则以及货币政策实施效果检验的基本要素。

CGG系统的三维叠后时间偏移-GTMIP在地震资料处理中的运用

在实现地震资料的全三维处理中，CGG系统的三维一步法叠后时间偏移发挥着至关重要的作用，本文通过理论结合实际生产的运用，加深对此偏移方法在速度场优化、关键参数试验及改善陡倾角成像等方面的认识。

用锦西焦加CGG针焦生产Ф450mm高功率石墨电极

分析了锦西焦与CGG油系针状焦的特性;以锦西焦为主加CGG油系针状焦为原料,生产Ф450mm高功率石墨电极,并对其生产过程中的工艺进行控制。结果表明:用锦西焦为主加CGG油系针状焦生产Ф450mm高功率石墨电极是完全可行的。

GEOVECIEUR (CGG 注册商标)工业标准超级向量计算机地震软件系统

早在1983年,CGG 就选择了 CRAY 超级向量计算机做地震资料处理。这一领先决策的主要原因是处理的要求日益复杂,数据量愈来愈大以及3D 地震的迅速增长。为此,我们开发了GEOVECTEUR,地球物理界首创的独特的可移植的2D和3D 地震软件系统。当代高水平程序 CGG 研究开发部开发了运用复杂算法的程序,如3D-DMO、3D 折射静校正、完全叠前偏移、一步法3D 时间、深度偏移等,现已投入正常运行。

新生儿脆性X综合征筛查对本地区CGG重复数情况分析

目的对新生儿进行脆性X综合征的筛查,统计FMR1基因CGG不同重复数的分布情况。方法采集共992名新生儿的脐带血,提取DNA用于脆性X综合征检测。采用CGG重复区域全长PCR扩增及重复引物PCR的方法扩增样本,并通过毛细管电泳平台进行分型检测。综合两种体系的结果计算样本的CGG重复数。结果992名新生儿脆性X综合征筛查筛查中一次成功检出986例,包括野生型984例、中间型1例、全突变1例。野生型中最常见的CGG重复数为29与30,另外发现了较高频率的36重复。不同重复数的分布在性别间差异无统计学意义(P=0.415)。结论通过全长扩增加重复引物扩增的方法可以有效、准确检测出FMR1基因CGG重复数,结合两种方法的结果计算样本的CGG重复数,提高了检测的灵敏度并实现了CGG重复数的准确判读。此检测体系操作较为简便,检测准确,适合用于新生儿脆性X综合征筛查。