胡子鲶鱼皮酸溶性胶原蛋白的理化性质研究

为提高水产加工副产品的高值化利用,本文以资源丰富且相对集中的一种淡水产品加工下脚料-胡子鲶鱼皮为原料,在4℃条件下,利用酸提法从鲶鱼皮中提取酸溶性胶原蛋白(ASC),并对其进行相应的理化性质研究。通过测定羟脯氨酸含量得出了该鱼皮胶原蛋白的提取率(20.32%),氨基酸组成分析得到含量最丰富的氨基酸是甘氨酸(32.59%)表明样品符合Ⅰ型胶原蛋白的氨基酸特点。SDS-PAGE电泳和紫外分析图谱表明样品为Ⅰ型胶原蛋白,且样品提取纯度较好。傅里叶变换红外光谱(FT-IR)表明该酸溶性胶原蛋白保留了天然的三螺旋结构。热变性温度(Td,26℃)和热收缩温度(Ts,53.01℃)的测定结果均显示,这种鲶鱼皮酸溶性胶原蛋白的热稳定性低于哺乳动物。X-射线衍射图谱显示了胶原蛋白分子的内部结构特点。

不同部位鲽鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取及其特性

以新鲜的鲽鱼黑皮和白皮为研究对象,从其中提取酸溶性胶原蛋白(acid-soluble collagens,ASC),并对其理化性质和乳化活性及乳化稳定性进行比较研究,为鲽鱼皮的开发利用提供一定的理论依据。通过傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)技术和扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)初步研究了黑皮和白皮ASC的结构特征;同时对其溶解性、流变学特性、等电点、乳化活性指数(emulsifying activity index,EAI)及乳化稳定性指数(emulsifying stability index,ESI)进行了研究。FTIR扫描结果表明,黑皮和白皮ASC都存在酰胺A、酰胺B、酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ、酰胺Ⅲ,均保持了胶原蛋白三维螺旋结构的完整性;SEM观察结果表明,黑皮和白皮ASC均呈现多空的网络结构,且分布比较均匀,说明酸法提取胶原蛋白的过程基本上保留了胶原纤维原有的空间网状结构。EAI及ESI结果表明,黑皮ASC的EAI明显低于白皮ASC(P<0.05),分别为(2.60±0.53)、(7.30±0.41)m^2/g,而黑皮ASC的ESI明显高于白皮ASC(P<0.05),分别为(49.12±5.18)、(27.56±4.91)min。以上结果显示,从黑皮和白皮中提取的ASC的理化性质和功能特性存在一定的差异。

斑点叉尾鮰鱼皮胶原蛋白的理化特征研究

选用斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)鱼皮为材料,用乙酸和乙酸-胃蛋白酶,分别提取鱼皮中的酸溶性胶原蛋白(acid-solubilise collagen,ASC)和酶溶性胶原蛋白(pepsin-solubilise collagen,PSC),并对其理化性质特征进行研究。研究发现,提取得到的ASC纯度高达93.11%,PSC纯度高达93.46%;紫外吸收分析表明,ASC和PSC的吸收峰值均在233nm处;蛋白图谱中两种胶原蛋白均由两种不同的α链(α1)2α2组成,具备I型胶原蛋白的特征;ASC和PSC的傅里叶红外图谱相似,具有完整的三螺旋结构;ASC的变性温度为34.2℃,PSC的变性温度为33.9℃。

鮰鱼鱼皮胶原的提取及性质研究

利用醋酸及胃蛋白酶从鮰鱼鱼皮中提取了胶原,并对其物理与化学特性进行了探讨研究。结果表明:提取的胶原属于典型的Ⅰ型胶原,胶原的三股螺旋分子组成为[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ)。氨基酸组成及变性温度的分析说明提取的鮰鱼皮胶原由于其自身亚氨基酸含量的特征,使得它的稳定性远远高于其他鱼类的皮胶原,但仍然比大多数哺乳类动物皮胶原稳定性要弱。紫外扫描光谱、傅立叶红外光谱及圆二色性研究结果证明提取的胶原三股螺旋结构保持完整。

乌贼皮胶原蛋白的提取及结构表征

为了充分利用乌贼加工废弃物,分析了乌贼皮的基本组成成分,优化了从乌贼皮中提取胶原蛋白的工艺条件,并利用SDS-PAGE垂直电泳、紫外扫描和傅里叶变换红外光谱对所提取的胶原蛋白进行了结构表征。结果表明,乌贼皮中含有大量胶原蛋白,可作为胶原蛋白来源的补充。采用酸酶复合提取胶原蛋白的最佳条件为:酒石酸浓度为0.1 mol/L,胃蛋白酶添加量为1400 U/g,料液比为1∶20(m∶V,原料),4℃提取18 h,提取率为12.08%。SDS-PAGE垂直电泳、紫外扫描和傅里叶变换红外光谱的结果表明,采用酸酶复合法从乌贼皮中提取的胶原蛋白为Ⅰ型胶原蛋白,保持了完整的三螺旋结构。

选择不同提取剂制备斑点叉尾鮰鱼皮胶原蛋白的研究

选择不同提取剂对斑点叉尾鮰鱼皮胶原蛋白进行制备,并对胶原蛋白进行了部分定性研究。实验结果表明,4℃条件下,鮰鱼鱼皮先用0.1mol/LNaOH浸泡6h再用2.5%NaCl浸泡6h,比单独或同时使用NaOH、NaCl能更好的去除杂蛋白,用10%的异丙醇溶液去除脂肪,用0.1mol/L柠檬酸浸提3d能较好的提取胶原蛋白,无色无味,提取率可达34.67%。获得的胶原蛋白中甘氨酸含量丰富,质量分数为21.19%,其变性温度为50.2℃。SDS-PAGE实验结果表明,提取的鮰鱼皮酸溶胶原具有较高的纯度,含有两条α链,β链含量较高。鱼皮胶原蛋白溶液具有较高的黏度,且随着蛋白浓度的增大而增大。

斑点叉尾鮰鱼骨胶原蛋白的提取与特性研究

选择不同提取剂对斑点叉尾鮰鱼骨胶原蛋白进行提取,并对胶原蛋白进行了部分定性研究。实验结果表明,在4℃条件下,鮰鱼鱼骨先用0.1mol/L的NaOH浸泡6h,再用2.5%NaCl浸泡6h,比单独或同时使用NaOH、NaCl能更好地去除杂蛋白,用10%的异丙醇溶液去除脂肪,0.1mol/L的柠檬酸浸提3d能较好地提取胶原蛋白,无色无味,提取率可达11.87%。粗提液再经盐析、透析,可得到纯度较高的胶原蛋白制品。鱼骨胶原蛋白溶液的粘度随着蛋白浓度的增大而增大,其变性温度为33.9℃。SDS-PAGE实验结果表明,提取的鮰鱼骨胶原具有较高的纯度,含有两条α链,β链含量较高。

乳酸提取鮰鱼皮胶原蛋白工艺优化

以斑点叉尾鮰鱼皮为实验材料,选用乳酸从中提取胶原蛋白。通过单因素试验分别考察pH值、料液比和时间3个参数对胶原蛋白提取率的影响,在此基础上,利用Box-Benhnken中心组合试验设计和响应面分析法对乳酸提取鮰鱼皮胶原蛋白条件进行优化。结果表明,乳酸提取鮰鱼皮胶原蛋白的优化工艺为pH2.3、料液比1:60(g/mL)、时间46h,在此条件下鮰鱼皮胶原蛋白的提取率达到46.28%。

斑点叉尾鱼骨制取胶原蛋白和骨粉的试验研究

鱼骨中蛋白质的存在会影响骨钙的吸收,将鱼骨中的蛋白提取出来加以利用,钙质保留在骨中,既充分利用了鱼骨中的蛋白质成分,又使高钙成分利于吸收,可以实现资源利用的"零废弃"。试验在4℃条件下,斑点叉尾(长吻,Ictalurus punctatus)鱼骨先用0.1mol.L-1的NaOH浸泡6h,再用2.5%NaCl浸泡6h去除杂蛋白,用10%的异丙醇溶液去除脂肪,0.1mol.L-1的柠檬酸浸提3d能较好的提取胶原蛋白,无色无味,提取率可达11.87%。粗提液再经盐析、透析可得到纯度较高的胶原蛋白制品。鱼骨胶原蛋白溶液的粘度随着蛋白浓度的增大而增大,其变性温度为33.9℃。SDS-PAGE试验结果表明,提取的鱼骨胶原具有较高的纯度,含有2条α链,β链含量较高。提取胶原后的鱼骨粉钙含量可达60%,作为钙添加剂加到饼干中,不会对饼干的口感和味道造成显著性差异,是良好的钙添加剂,可用于食品再加工。

鮰鱼鱼皮胶原的提取新工艺研究

研究了醋酸溶液溶胀鮰鱼鱼皮对鱼皮中胶原提取率的影响,发现先用0.5mol/L醋酸溶胀鱼皮6h,再经组织捣碎机打浆后用稀醋酸溶解,最后用碱液中和沉淀得到粗胶原,胶原提取率可以达到92%,提取工艺简单,提取率高,耗时短。采用五种蛋白酶对提取的粗胶原进行水解以除去其中的杂蛋白,其中胰蛋白酶效果较好,除杂率为60%以上。研究了水洗法对粗胶原的脱盐效果,所提取胶原的SDS-PAGE显示其α链没有在提取过程中发生降解,胶原的圆二色光谱与X-射线衍射结果表明所提取胶原基本保持了完整的三股螺旋结构,没有发生变性。

超声波辅助提取骆驼皮胶原蛋白的工艺及结构表征

以骆驼皮为原料,研究超声波辅助提取胶原蛋白的最优工艺,并对提取得到的胶原蛋白进行表征。以胶原蛋白的提取率为指标,探讨酶添加量、料液比、超声波功率、超声波处理时间及总提取时间5个因素对骆驼皮胶原蛋白的影响,确定超声波功率后,在单因素实验的基础上,结合响应曲面分析法得到最佳提取条件为:酶添加量4.5%、料液比1∶23、超声波处理时间20 min、总提取时间51 h,胶原蛋白的实际提取率为(41.99±1.57)%。SDS-PAGE图谱上呈现3条I型胶原蛋白的特征条带,通过紫外光谱分析推断为典型I型胶原蛋白,经红外光谱分析证实胶原蛋白具有完整的三螺旋结构,扫描电子显微镜观察发现提取的胶原蛋白呈相互缠绕的纤维状结构。测定pH 2~9胶原蛋白的Zeta电位,在此范围电位值呈下降趋势,并确定其等电点为6.7。

牛蛙皮中未变性Ⅰ型胶原蛋白的提取及性能表征

观察了胶原蛋白在牛蛙皮肤组织中的分布形态。分别采用酸法和酸酶法提取得到酸溶胶原(ASC)和酶溶胶原(PSC)。理化性质分析结果表明:所提取得到的胶原为未变性Ⅰ型胶原;紫外吸收峰在233 nm处;ASC的变性温度(32.60℃)高于PSC的变性温度(32.22℃),而ASC的等电点(6.79)低于PSC的等电点(7.15);牛蛙皮胶原的氨基酸组分中,亚氨基酸的含量较牛皮的低,较鱼皮的高,同时,牛蛙皮胶原中含有牛皮胶原中没有的半胱氨酸。

基于超细粉碎技术的鱼鱼皮胶原热稳定性研究

利用醋酸及胃蛋白酶从经过超细粉碎的鮰鱼鱼皮中提取了胶原,并对其热稳定性进行了研究。通过差示量热扫描分析测定其变性温度和收缩温度,并将鱼皮胶原在变性温度和收缩温度下处理1h,在4℃下复性24h,后通过圆二色谱分析、傅立叶红外扫描分析和SDS-PAGE凝胶电泳分析其复性情况。结果表明:胶原蛋白的变性温度为36℃,收缩温度为65℃;SDS-PAGE凝胶电泳图谱表明所提取的胶原具备Ⅰ型胶原的特征;热处理后的胶原蛋白发生了一定程度的变性,且结构不能完全恢复;65℃处理比36℃处理的胶原蛋白复性效果好。本研究可为斑点鮰鱼鱼皮胶原的应用提供理论依据。

鲢鱼皮胶原蛋白的提取及性质分析

通过热水浸提,醋酸酸提及胃蛋白酶促提从鲢鱼皮中提取得到水溶性胶原蛋白(RSC),酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并分析其部分性质。鲢鱼皮中RSC,ASC和PSC的得率以湿基计分别为13.2%,11.8%和13.6%;RSC,ASC和PSC的紫外光谱分析表明,其最大吸收峰都接近231 nm,但在280 nm处的吸收很小;傅立叶变换红外光谱结果表明鲢鱼皮胶原蛋白具有特殊的三螺旋结构;SDS-PAGE电泳图谱显示鲢鱼皮胶原蛋白有两条α链(α1和α2)和β链,表明该胶原为典型的I型胶原蛋白;鲢鱼皮RSC,ASC和PSC热变性温度分别为27.1℃,31.3℃和30.5℃。这些结果为进一步研究提供了理论依据。

伊水大鲵皮中胶原蛋白的提取及性质研究

伊水大鲵是指生活在伊河水系的大鲵,于2015年8月获批农业部农产品地理标识。为合理开发伊水大鲵产品,以0.5 mol/L的乙酸作为提取溶液,分别以木瓜蛋白酶(加酶量0.5%)、胃蛋白酶(加酶量198 U/g)作为提取用酶,液料比值15 m L/g,水解时间29 h,在4℃条件下对经过预处理的伊水大鲵皮中的胶原蛋白进行提取,提取率分别为12.42%和44.43%。2种方法提取的胶原蛋白的紫外最大吸收峰分别位于233 nm和232 nm处,符合胶原蛋白的紫外吸收特征。2种方法提取的胶原蛋白氨基酸组成分析表明,木瓜蛋白酶和胃蛋白酶提取的胶原蛋白的氨基酸组成相似,其中甘氨酸含量最高,谷氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸的含量较高,木瓜蛋白酶提取的胶原蛋白以胱氨酸的含量最低;胃蛋白酶提取的胶原蛋白以酪氨酸的含量最低。

秘鲁鱿鱼皮酸溶性胶原蛋白的分离及特征分析

以秘鲁鱿鱼皮真皮为原料提取酸溶性胶原蛋白(ASC)并对其性质进行研究。结果表明,秘鲁鱿鱼皮真皮ASC的羟脯氨酸含量为8.03%;SDS-PAGE分析表明其为I型胶原蛋白,至少含有2类亚基(α1和α2);紫外(UV)扫描光谱最大吸收波长为228 nm;红外(FTIR)光谱分析表明分子中存在三螺旋结构;热变性温度为32.0℃,比其他水产鱼类皮肤ASC高;相对溶解度p H2.0时最大,p H6.0时最小,分别为100%和8.57%;盐浓度达到2.0%以上时,相对溶解度迅速下降至4.23%。秘鲁鱿鱼皮可以作为一种提取酸溶性胶原蛋白的原料。

鮟鱇鱼皮中胶原蛋白的提取及性质研究

采用0.5mol/L醋酸提取,结合NaCl沉淀法从鮟鱇鱼皮中提取酸溶性胶原蛋白(ASC),并对鮟鱇鱼皮胶原蛋白与Sigma公司的牛跟腱Ⅰ型胶原蛋白(BATC)进行比较,探讨二者在热变性温度、溶解度、黏度及氨基酸组成等方面的差异。SDS-PAGE结果显示ASC有2条α链(α1和α2链)、β链和γ链,表明该胶原为典型的Ⅰ型胶原蛋白。DSC分析显示两种胶原的热变性温度分别为22.09℃和38.13℃。氨基酸组成分析结果是亚氨基酸含量ASC低于BATC,分别为14.69%和21.59%;甘氨酸含量相近,分别占所有氨基酸总数的40.05%和38.97%。溶解度结果显示ASC和BATC分别在pH3和pH4时达到最大值,在pH7时两者都呈现最小溶解度;NaCl含量对两者溶解度的影响相同,当其含量低于2%时对溶解度的影响不明显,而随着NaCl含量的增加,溶解度迅速下降。