chi-miR-128-3p和chi-miR-218对Nr1d2基因的靶向调控研究

为了探究chi-miR-128-3p和chi-miR-218对钟基因Nr1d2的靶向调控关系,以psiCHECK TM-2为载体,构建了野生型和突变型载体,转染293A细胞系,并通过双荧光素酶系统检测,chi-miR-218 mimics能使野生型荧光素酶活性极显著下降,而对突变型荧光素酶活性无影响,说明chi-miR-218靶向Nr1d2基因。该结果对研究受环境影响的生物节律如毛囊发育等现象的机制具有重要意义。

三阴性乳腺癌患者术前血清miR-218表达水平与术后生存的关系

目的研究三阴性乳腺癌患者术前血清miR-218表达水平及术后生存情况,并分析两者间的关系。方法回顾性分析2021年1月至2022年12月期间焦作市人民医院收治的88例三阴性乳腺癌患者(观察组)的临床资料和术后生存情况,另选取60例经体检合格的健康女性作为对照组。采集三阴性乳腺癌患者术前血清和健康体检者血清并检测其miR-218表达水平;比较不同血清miR-218表达水平三阴性乳腺癌患者的临床病理特征;术后对观察组患者进行1年的随访,采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同血清miR-218水平三阴性乳腺癌患者术后的生存情况;采用多因素Cox模型分析三阴性乳腺癌患者术后预后不良的影响因素。结果观察组患者的血清miR-218水平为1.98±0.69,明显低于对照组的3.24±0.93,差异有统计学意义(P<0.05);三阴性乳腺癌患者的年龄、月经状态、分化程度、淋巴结转移、组织学分级等病理特征不会影响患者血清miR-218水平(P>0.05),其血清miR-218水平仅与患者的肿瘤直径和TNM分期有关(P<0.05);三阴性乳腺癌患者术前血清miR-218高水平组1年累计生存率为95.65%(44/46),明显高于血清miR-218低水平组的78.57%(33/42),差异有统计学意义(P<0.05);多因素Cox回归分析结果显示,三阴性乳腺癌患者术前血清miR-218水平、淋巴结转移、TNM分期均是其术后预后的独立危险因素(P<0.05)。结论采用术前血清miR-218表达水平预测三阴性乳腺癌患者的生存情况具有很好的效能,且操作过程更加简便,具有临床应用价值。

江苏省夏玉米新品种苏科玉218选育研究

苏科玉218是由江苏省农业科学院粮食作物研究所以自育系JS151040为母本,自育系JS161133为父本杂交选育而成的玉米新品种。该品种丰产稳产性好,抗逆能力强,籽粒品质优良。于2020和2021年参加江苏省夏播区域试验,两年平均产量7849.7 kg/hm^(2),比对照郑单958平均增产12.3%。2022年参加江苏省夏播生产试验,平均产量7714.4 kg/hm^(2),比对照郑单958增产3.8%。2023年通过江苏省农作物品种审定委员会审定,适宜在江苏省北部夏玉米播种区域种植推广。

miR-218-5p靶向PDE7A调节人非小细胞肺癌A549细胞的糖酵解

目的:探究miR-218-5p靶向磷酸二酯酶7A(PDE7A)调节人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞糖酵解过程的机制。方法:常规培养A549细胞,用Lipo3000将miR-218-5pmimic、mimic-NC、PDE7A过表达质粒(PDE7A-oe)和PDE7A对照质粒(PDE7A-NC)转染A549细胞,记为miR-218-5pmimic组、mimic-NC组、PDE7A-oe组和PDE7A-NC组。qPCR法验证转染效率,WB法检测糖酵解关键酶蛋白的表达,葡萄糖测定法和乳酸生成测定法检测各转染组A549细胞中2脱氧葡萄糖和乳酸含量,双萤光素酶报告基因实验验证miR-218-5p与PDE7A靶向结合关系,用TCGA数据库数据分析PDE7AmRNA在肺癌组织中的表达水平。结果:在A549细胞中成功地过表达了miR-218-5p(P<0.01)。过表达miR-218-5p均能显著抑制A549细胞中PDE7A、HK2、PKM2蛋白的表达(均P<0.01)、葡萄糖摄取量和乳酸生成量(均P<0.01)。过表达PDE7A均可显著促进A549细胞中PDE7A、HK2、PKM2蛋白的表达(均P<0.01),以及葡萄糖摄取量和乳酸生成量(均P<0.01)。A549细胞中miR-218-5p可与PDE7AmRNA的3´-UTR直接结合。数据库数据分析结果显示,PDE7AmRNA在肺鳞状细胞癌组织中呈高表达(P<0.01)。结论:miR-218-5p靶向PDE7A调控A549细胞中HK2和PKM2的表达水平,进而抑制糖酵解过程,miR-218-5p/PDE7A可能是NSCLC临床诊断和治疗的潜在靶点。

癌组织miR-218联合ASF1B预测前列腺癌根治术后复发的价值

目的探讨癌组织微小RNA-218(miR-218)联合组蛋白伴侣抗沉默功能蛋白1B(ASF1B)预测前列腺癌根治术后患者复发的价值。方法前瞻性选取2021年1月至2023年5月新乡医学院第一附属医院收治的252例前列腺癌患者作为研究对象,所有患者均实施前列腺癌根治术,术后接受为期1年的随访,根据术后1年复发情况分为复发组50例和未复发组202例。比较癌组织、癌旁组织及两组患者癌组织miR-218、ASF1B m RNA表达水平。采用多因素Logistic回归分析癌组织miR-218、ASF1B m RNA对术后复发风险的影响;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析癌组织miR-218、ASF1B m RNA表达水平联合预测术后复发风险的价值。结果癌组织miR-218表达水平为0.47±0.13,明显低于癌旁组织的0.86±0.21,而癌组织ASF1B mRNA表达水平为1.54±0.49,明显高于癌旁组织的1.05±0.18,差异均有统计学意义(P<0.05);复发组患者癌组织的miR-218表达水平为0.25±0.08,明显低于未复发组的0.52±0.17,而ASF1B m RNA表达水平为2.03±0.66,明显高于未复发组的1.42±0.46,差异均有统计学意义(P<0.05);经多因素Logistic回归分析结果显示,校正了术后病理分期、术前PSA、术后切缘阳性后,癌组织miR-218、ASF1B mRNA仍是术后复发的独立相关影响因素(P<0.05);经ROC分析结果显示,癌组织miR-218、ASF1B m RNA及联合检测预测术后复发的ROC曲线下面积(AUC)为0.803、0.824、0.936,联合检测的AUC大于miR-218、ASF1B mRNA,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论癌组织miR-218、ASF1B m RNA表达与前列腺癌根治术后复发风险独立相关,联合检测抑癌因子miR-218和促癌因子ASF1B m RNA能提高对患者术后复发的预测价值,为前列腺癌根治术后分层管理、治疗决策等提供重要的参考依据。

CircBICD2调节miR-218-5p/RhoA轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的:探讨环状RNA(CircRNA)·BICD2调节miR-218-5p/Ras同源基因家族成员A·(RhoA)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法:qRT-PCR、Western·blot分别检测OSCC组织、癌旁组织、人口腔上皮细胞系HOEC及OSCC细胞系HSC-4、CAL-27、SCC-15中Circ·BICD2、miR-218-5p表达及Rho·A蛋白表达;将SCC-15细胞分为Ct组(A,未转染对照)、si-NC组(B)、si-Circ·BICD2组(C)、miR-NC组(D)、miR-218-5p组(E)、si-Circ·BICD2+anti-NC组(F)、si-Circ·BICD2+anti-miR-218-5p组(G),qRT-PCR检测细胞中Circ·BICD2、miR-218-5p表达;·CCK-8法和平板克隆实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;·Western·blot检测Rho·A、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin表达;双荧光素酶验证Circ·BICD2与miR-218-5p、miR-218-5p与Rho·A的关系。结果:在OSCC组织和细胞中,Circ·BICD2、Rho·A蛋白高表达,miR-218-5p低表达,在SCC-15细胞中miR-218-5p相对表达量最低,Circ·BICD2表达及Rho·A蛋白相对表达量最高(P<0.05)。后续实验取SCC-15细胞为研究对象;与B组比较,C组Circ·BICD2、Rho·A蛋白表达降低,miR-218-5p表达升高(P<0.05);与D组比较,E组miR-218-5p表达上调,Rho·A蛋白表达下调(P<0.05);与C组、F组相比,G组miR-218-5p表达降低,Rho·A蛋白表达升高(P<0.05)。下调Circ·BICD2或过表达miR-218-5p均可抑制SCC-15细胞增殖和EMT,促进细胞凋亡;下调miR-218-5p减弱了沉默Circ·BICD2对SCC-15细胞增殖、EMT的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用;·Circ·BICD2靶向调控miR-218-5p/Rho·A轴。结论:沉默Circ·BICD2可能通过上调miR-218-5p来抑制Rho·A表达,抑制SCC-15细胞增殖、EMT,促进细胞凋亡。

血清miR-218-5p、LncRNA OIP5-AS1在急性呼吸窘迫综合征患儿中表达及临床预后预测效能分析

目的探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患儿血清长链非编码RNA OIP5-AS1(LncRNA OIP5-AS1)、微小RNA-218-5p(miR-218-5p)表达情况及二者在临床预后预测中的价值。方法回顾性选择2020年7月至2022年2月秦皇岛市第一医院收治的104例ARDS患儿为ARDS组。根据氧合指数(PaO_(2)/FiO_(2))将ARDS患儿分为重度亚组(PaO_(2)/FiO_(2)≤100 mmHg,n=32)、中度亚组(100 mmHg<PaO_(2)/FiO_(2)≤200 mmHg,n=38)、轻度亚组(200 mmHg<PaO_(2)/FiO_(2)≤300 mmHg,n=34)。根据ARDS患儿28 d院内死亡情况将其分为存活亚组(n=74)和死亡亚组(n=30)。另选择同期于本院进行健康体检的98例儿童作为对照组。比较各组血清LncRNA OIP5-AS1、miR-218-5p表达水平;收集患儿性别、年龄、气道峰值压、通气时间、入住ICU时间、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、动脉血氧分压(PaO_(2))、入院急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、入院序贯器官功能衰竭评分(SOFA)、平均气道压、潮气量、白蛋白等资料。采用Pearson相关分析ARDS死亡患儿中血清LncRNA OIP5-AS1与miR-218-5p表达水平的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA OIP5-AS1、miR-218-5p表达水平对ARDS患儿预后的预测价值;采用Logistic回归分析影响ARDS患儿死亡的因素。结果ARDS组血清LncRNA OIP5-AS1为2.04±0.38,显著高于对照组(1.01±0.21),miR-218-5p为0.45±0.16,显著低于对照组(1.02±0.20),差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组、轻度亚组、中度亚组、重度亚组ARDS患儿血清LncRNA OIP5-AS1表达水平依次升高,miR-218-5p表达水平依次降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡亚组血清LncRNA OIP5-AS1表达水平及入院APACHEⅡ评分、入院SOFA、平均气道压、潮气量均高于存活亚组,miR-218-5p表达水平及PaO_(2)、白蛋白均低于存活亚组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ARDS死亡患儿中血清LncRNA OIP5-AS1与miR-218-5p表达水平呈负相关(r=-0.503,P<0.05)。血清LncRNA OIP5-AS1、miR-218-5p及二者联合预测ARDS患儿死亡的曲线下面积分别为0.852、0.812、0.904。LncRNA OIP5-AS1是ARDS患儿死亡的独立危险因素(P<0.05),miR-218-5p是ARDS患儿死亡的保护因素(P<0.05)。结论ARDS患儿血清LncRNA OIP5-AS1>2.04,miR-218-5p<0.39,均与病情严重程度及预后不良有关。

前列腺癌患者miRNA-218表达水平与临床-病理特征及预后的关系

目的探讨前列腺癌患者微小RNA(miRNA)-218表达水平与临床-病理特征及预后的相关性。方法选取2019年1月至12月于新乡医学院第一附属医院泌尿外科就诊的98例前列腺癌患者(前列腺癌组)、40例前列腺增生患者(前列腺增生组)及40例健康体检者(对照组)作为研究对象,分析并比较三组miRNA-218表达水平的差异。单因素分析前列腺癌患者miRNA-218表达水平与临床-病理特征的关系。对所有患者随访12~36个月,其中发生骨转移、远处转移及局部复发定义为预后不良,前列腺癌患者预后不良的影响因素采用Logistic回归分析,miRNA-218表达水平预测前列腺癌预后不良的效能采用受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果对照组、前列腺增生组和前列腺癌组miRNA-218表达水平依次为4.03±0.46、3.99±0.65和2.75±0.32,三组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);前列腺癌组miRNA-218表达水平显著低于对照组和前列腺增生组,差异具有统计学意义(P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、Gleason评分≥8分的前列腺癌患者miRNA-218表达水平分别低于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、Gleason评分<8分患者(P<0.05)。经随访,患者发生骨转移19例,局部复发31例,远处转移26例。与前列腺癌无骨转移、无局部复发及无远处转移患者比较,miRNA-218表达水平在有骨转移、存在局部复发及远处转移患者中显著降低(P<0.05)。Logistic回归分析证实,TNM分期(OR=1.393)和Gleason评分(OR=1.555)是影响前列腺癌患者预后不良的危险因素,miRNA-218表达水平(OR=0.654)是前列腺癌患者预后不良的保护因素。ROC曲线显示,miRNA-218表达水平预测前列腺癌患者出现预后不良的AUC为0.874,当截断值为2.82,诊断灵敏度和特异度分别95.33%和94.12%。结论miRNA-218在前列腺癌患者血浆中低表达可能与前列腺癌的发生发展及预后有关,有望成为预测前列腺癌预后的生物学标志物。

miRNA-218、miRNA-21在Hp感染相关胃癌组织中的表达及临床意义

目的探究微小RNA-218(miR-218)、miR-21在幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染相关胃癌组织中的表达及临床意义。方法选取接受手术切除的胃癌患者104例,分析miR-218和miR-21表达与Hp感染胃癌患者临床病理因素及术后复发的关系。结果Hp阳性组患者胃癌组织中miR-218水平低于Hp阴性组,miR-21水平、2年复发率高于Hp阴性组(P均<0.05);Hp感染胃癌患者胃癌组织中miR-218水平低于癌旁组织,miR-21水平高于癌旁组织(P均<0.05);miR-218和miR-21表达与患者分化程度、TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及无疾病进展生存率相关,对术后2年复发情况具有较高的预测价值。结论miR-218和miR-21水平在Hp感染和无Hp感染的胃癌患者中存在差异表达,其异常表达与Hp感染胃癌患者临床病理因素及预后存在关联。

CircRASSF2靶向miR-218-5p调控胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的研究

背景胃癌是常见的消化道肿瘤,具有较高的发病率和死亡率.环状RNAs(circular RNAs,circRNAs)被认为是多种人类癌症进展的关键调控子,包括胃癌.研究显示circRASSF2作为促癌因子调控癌症进程.然而其在胃癌进展中的作用及潜在分子机制尚不清楚.目的探讨circRASSF2影响胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的分子机制.方法用实时荧光定量PCR分析胃癌组织、癌旁组织及GES-1、HGC-27和AGS细胞中circRASSF2和miR-218-5p的表达;双荧光素酶报告实验分析靶向关系;将HGC-27和AGS细胞分为si-circRASSF2组、si-NC组、miR-218-5p mimic组、miR-NC组、si-circRASSF2+anti-miR-NC组、si-circRASSF2+miR-218-5p Inhibitor组;3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐检测细胞抑制率;克隆形成实验检测克隆形成数;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell检测细胞迁移数.结果胃癌组织中circRASSF2表达上升,miR-218-5p表达下降,且二者表达呈负相关(P<0.05);在胃癌HGC-27和AGS细胞中,circRASSF2表达上调,而miR-218-5p表达下调(P<0.05).circRASSF2靶向调控miR-218-5p;敲低circRASSF2或过表达miR-218-5p促进HGC-27和AGS细胞抑制率和凋亡率,而降低克隆形成数和迁移细胞数(P<0.05).下调miR-218-5p可逆转circRASSF2敲低对细胞增殖、迁移、凋亡的影响.结论circRASSF2通过靶向miR-218-5p加速胃癌细胞增殖、迁移、抑制凋亡.

miR-218-5p调控安哥拉兔毛囊毛乳头细胞增殖的研究

本文旨在探讨miRNA-218-5p对兔毛乳头细胞毛囊发育相关基因的影响,为研究家兔毛囊发育中的作用机制提供理论依据。用酶消化法分离兔毛乳头细胞,用MSCM培养基培养毛乳头细胞。将培养的毛乳头细胞分为4组,分别转染miR-218-5p mimics、miR-218-5p mimics NC、miR-218-5p inhibitor、miR-218-5p inhibitor NC。培养48 h后,收集细胞。使用RNA提取试剂盒提取各组RNA,使用RT-qPCR检测各组miR-218-5p的mRNA表达水平和毛囊生长发育相关基因表达水平。使用CCK-8检测各组细胞增殖情况。结果发现,在兔DPCs(Dermal Papilla Cells)中过表达miR-218-5p能够显著上调毛囊生长发育相关基因如CCND1、CTNNB1、LEF1的mRNA表达水平,显著下调TGF-β1、BMP4的mRNA表达水平;敲减miR-218-5p能够显著下调毛囊生长发育相关基因如CCND1、CTNNB1、LEF1的mRNA表达水平,显著上调TGF-β1、BMP4的mRNA表达水平。过表达miR-218-5p后,极显著上调了毛乳头细胞的增殖。敲减miR-218-5p后,极显著下调了毛乳头细胞的增殖。本研究发现,miR-218-5p能上调家兔毛囊生长发育相关基因CCND1、CTNNB1、LEF1的表达水平,下调TGF-β1、BMP4的表达水平,同时具有促进毛乳头细胞增殖的功能。

血清miR-126、miR-204-5p、miR-218水平与妊娠期高血压患者病情及妊娠结局的相关性分析

目的:分析血清微小-RNA-126(miR-126)、微小-RNA-204-5p(miR-204-5p)、微小-RNA-218(miR-218)水平与妊娠期高血压(HDCP)患者病情及妊娠结局的相关性。方法:选取2022年10月-2024年1月于本院分娩的73例HDCP患者为观察组,另选取同期73例健康体检者为对照组。比较两组、不同病情程度及妊娠结局患者血清miR-126、miR-204-5p、miR-218水平,分析其与病情程度、妊娠结局的相关性及联合预测价值。结果:观察组血清miR-126、miR-204-5p水平高于对照组,miR-218水平低于对照组(P<0.05);子痫前期及子痫患者血清miR-126、miR-204-5p水平高于单纯HDCP患者,miR-218水平低于单纯HDCP患者(P<0.05);不良患者血清miR-126、miR-204-5p水平高于良好患者,miR-218水平低于良好患者(P<0.05);血清miR-126、miR-204-5p水平与病情程度、妊娠结局呈正相关,miR-218水平与病情程度、妊娠结局呈负相关(P<0.05);血清miR-126、miR-204-5p、miR-218水平联合预测的AUC为0.837,最佳敏感度、特异度为84.91%、85.00%(P<0.05)。结论:血清miR-126、miR-204-5p、miR-218水平与HDCP患者病情程度、妊娠结局关系密切,可作为临床评估病情、预测妊娠结局的参考指标。

MicroRNA-218、microRNA-193b在宫颈癌组织中的表达及与化疗耐药性的关系

目的 探讨microRNA-218(miR-218)、microRNA-193b(miR-193b)在宫颈癌组织中的表达及其与化疗耐药性的关系。方法 选取2018年1月-2023年1月成都医学院第一附属医院收治的101例行手术治疗的宫颈癌患者。患者均行紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂药物敏感性试验,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-218、miR-193b表达情况。比较癌组织、癌旁组织中miR-218、miR-193b表达情况,统计化疗药物耐药情况,分析宫颈癌组织中miR-218、miR-193b的表达与化疗耐药性的关系。结果 癌组织中miR-218相对表达量低于癌旁组织(P <0.05),miR-193b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05)。宫颈癌患者行体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂的耐药率分别为38.61%、46.53%、48.51%、26.73%和40.59%。宫颈鳞癌与宫颈腺癌患者对体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂耐药率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。耐药患者癌组织中miR-218相对表达量均低于敏感患者,miR-193b相对表达量均高于敏感患者(P <0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,miR-218、miR-193b及两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性的敏感性分别为74.51%(95%CI:0.601,0.852)、70.59%(95%CI:0.560,0.821)、82.35%(95%CI:0.686,0.911),特异性分别为74.00%(95%CI:0.594,0.849)、78.00%(95%CI:0.637,0.880)、90.00%(95%CI:0.774,0.963),曲线下面积分别为0.754(95%CI:0.661,0.847)、0.743(95%CI:0.643,0.843)、0.890(95%CI:0.824,0.956)。结论 宫颈癌组织中miR-218表达低于癌旁组织、miR-193b表达高于癌旁组织,miR-218、miR-193b的表达水平与宫颈癌患者化疗耐药性有关,两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性效能良好。

非小细胞肺癌组织中lncRNA MNX1-AS1、miR-218-5p的表达及临床意义

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中长链非编码RNA(LncRNA)MNX1-AS1、微RNA(miR)-218-5p表达及临床意义。方法选取2015年1月至2017年1月湖北省中医院诊治的120例NSCLC患者,取术中获取的NSCLC组织和癌旁组织,应用荧光定量PCR检测LncRNA MNX1-AS1、miR-218-5p表达。分析NSCLC组织中LncRNA MNX1-AS1与miR-218-5p的相关性及与临床病理特征的关系。以LncRNA MNX1-AS1、miR-218-5p相对表达量的均值(2.321、1.213)为界分为高、低表达组,分析其对NSCLC患者生存预后的影响。结果NSCLC组织中LncRNA MNX1-AS1表达高于癌旁组织,miR-218-5p表达低于癌旁组织(P<0.05)。LncRNA MNX1-AS1与miR-218-5p呈负相关(r=-0.561,P<0.01)。不同淋巴结转移、肿瘤分期患者LncRNA MNX1-AS1、miR-218-5p表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。LncRNA MNX1-AS1高表达组生存曲线低于LncRNA MNX1-AS1低表达组,miR-218-5p低表达组生存曲线低于miR-218-5p高表达组(P<0.05)。结论NSCLC组织中LncRNA MNX1-AS1表达升高,miR-218-5p表达降低,两者与患者预后不良有关,可能作为预后评估指标。

长链非编码RNA MALAT1靶向miR-218对卵巢癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响及其作用机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)MALAT1靶向miR-218对卵巢癌细胞系OVCAR3增殖、侵袭及凋亡的影响及作用机制。方法应用实时PCR检测lncRNA MALAT1和miR-218在人卵巢癌细胞系(OVCAR3)和正常人卵巢上皮细胞系(HOSE)中的表达。利用脂质体转染法将无意义序列阴性对照(si-NC)组、MALAT1干扰序列(si-MALAT1)组以及si-MALAT1+miR-218抑制剂组分别转染卵巢癌细胞,MTT法检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,Transwell实验检测各组细胞侵袭情况。生物信息学分析及双荧光素酶报告基因实验验证MALAT1和miR-218的靶向关系。实时PCR检测各组OVCAR3细胞中MALAT1、miR-218的表达;Western blotting检测各组OVCAR3细胞中Runx2的表达。结果与人正常卵巢上皮细胞比较,卵巢癌OVCAR3细胞中MALAT1表达升高(P<0.05),miR-218表达下降(P<0.05)。与si-NC组比较,si-MALAT1组OVCAR3细胞的增殖和侵袭能力下降,凋亡率升高(均P<0.05)。与si-MALAT组比较,si-MALAT1+miR-218抑制剂组OVCAR3细胞的增殖和侵袭能力升高,凋亡率下降(均P<0.05)。与si-NC组比较,si-MALAT1组OVCAR3细胞中miR-218表达升高(P<0.05)。生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验结果显示MALAT1可以靶向调控miR-218。Western blotting结果显示,与si-NC组比较,si-MALAT1组Runx2蛋白表达降低(P<0.05),与si-MALAT1组比较,si-MALAT1+miR-218抑制剂组Runx2蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论lncRNA MALAT1在卵巢癌细胞中高表达,抑制MALAT1表达能够抑制卵巢癌OVCAR3细胞的增殖和侵袭,并促进OVCAR3细胞凋亡,其机制可能与通过miR-218调控Runx2蛋白表达有关。

miR-218-5p靶向TPX2调节p53通路影响肺腺癌恶性进展

背景与目的肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)是肺癌的一种主要亚型,其治疗与诊断依然是目前的研究热点。靶向Xklp2靶蛋白(targeting protein for Xenopus kinesin-like protein 2,TPX2)在多种癌细胞中高表达,可能与LUAD的发生发展相关。本研究旨在探究TPX2对LUAD细胞恶性进程的影响以及调控机制。方法通过生物信息学分析技术,对癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中LUAD组织中基因TPX2的表达情况进行分析。实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测人肺正常细胞系和人LUAD细胞系中TPX2和miR-218-5p的表达水平。蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞系中TPX2蛋白表达以及其对p53信号通路关键蛋白表达的影响。使用生物信息学预测并通过双荧光素酶报告基因检测验证TPX2与miR-218-5p的关系,细胞活力检测(cell counting kit-8,CCK-8)、细胞克隆形成、细胞划痕、Transwell实验、流式细胞术检测miR-218-5p和TPX2对LUAD细胞功能的影响。结果LUAD细胞中TPX2显著高表达,敲低TPX2可以抑制LUAD细胞的增殖、迁移、侵袭,促进凋亡并产生G_(2)/M期阻滞,并且促进p53信号通路关键蛋白的表达。miR-218-5p是TPX2的上游调控因子,可以抑制其表达。过表达miR-218-5p能消除TPX2高表达导致的恶性发展,抑制LUAD细胞的增殖、迁移等恶性进程以及促进p53信号通路。结论miR-218-5p靶向抑制TPX2表达,并通过p53发挥抑制LUAD细胞恶性发展的作用。

miRNA-218通过靶向BRD4对香烟烟雾提取物诱导的COPD气道上皮细胞凋亡的调控作用

目的探讨miR-218通过靶向BRD4对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的慢性阻塞性肺疾病(COPD)时气道上皮细胞凋亡的调控作用。方法将人肺支气管上皮细胞BEAS-2B分为正常对照(NC)组、CSE组、miR-NC+CSE组、miR-218+CSE组、si-NC+CSE组、si-BRD4+CSE组、miR-218+pcDNA-NC+CSE组和miR-218+pcDNA-BRD4+CSE组。通过对不同组细胞中miRNA、蛋白及炎症因子的检测和双荧光素酶报告基因实验共同验证miR-218对BRD4的靶向作用。结果与NC组比较,CSE组BEAS-2B细胞miR-218表达降低,细胞凋亡率、BRD4、Cleaved-caspase-3、IL-6和TGF-β1表达显著增加(均P<0.05)。与miR-NC+CS组比较,miR-218+CSE组BEAS-2B细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3、IL-6和TGF-β1表达显著降低(均P<0.05);与si-NC+CSE组比较,si-BRD4+CSE组上述指标表达显著降低(P<0.05);与miR-218+pcDNA-NC+CSE组比较,miR-218+pcDNA-BRD4+CSE组上述指标表达显著增加(P<0.05)。结论miR-218通过靶向BRD4可抑制CSE诱导的气道上皮细胞凋亡,miR-218可能是慢性阻塞性肺疾病的潜在治疗靶点。

玉米新品种通单218的选育及高产种植技术

通化市农业科学研究院玉米所以通696为母本、自选系通11211为父本杂交选育出丰产性强、品质优良、抗逆性好、适应性广的中晚熟玉米新品种通单218,2021年通过吉林省审定。该文阐述了此品种的选育过程及特征特性,介绍了配套高产种植技术要点,以确保高产、稳产。

肿瘤抑制因子microRNA-218对前列腺癌细胞恶性进展及肿瘤干细胞特性的调控作用

目的 探究miRNA-218(miR-218)在调节前列腺癌(PCa)细胞干性以及上皮-间质转化(EMT)方面的作用。方法 通过慢病毒转染构建稳定过表达miR-218的前列腺癌细胞系,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测前列腺癌细胞中miR-218的表达;Transwell迁移实验检测不同组细胞迁移能力;Western blot检测各组细胞中EMT相关蛋白的表达;集落形成和肿瘤成球实验检测不同组别肿瘤干细胞特征。结果 qPCR结果显示,miR-218的表达水平在前列腺癌细胞系LNCaP和C4-2中较BPH-1显著下调;Transwell迁移实验结果表明,miR-218可抑制前列腺癌细胞的迁移作用;Western blot结果显示,过表达miR-218后,EMT相关蛋白表达受到抑制;在集落形成和肿瘤成球实验中,过表达miR-218可显著抑制前列腺癌细胞的干性特征。结论 miR-218在PCa细胞系中表达下调,且能抑制PCa细胞迁移、EMT和肿瘤干细胞特性。

草鱼miR-218鉴定及其对鱼淋巴囊肿病毒中国株感染的调控作用

【目的】鉴定草鱼(Ctenopharyngodon idella)miR-218(cid-miR-218)家族成员,分析cid-miR-218在鱼淋巴囊肿病毒中国株(LCDV-cn)感染草鱼卵巢细胞系(Grass carp ovary cells,GCO)过程中的表达特性,探索cid-miR-218-5p对LCDV-cn感染的调控作用。【方法】从LCDV-cn感染的GCO细胞中,通过茎环RT-PCR获取cid-miR-218家族成员,并进行测序验证和生物信息学分析;用定量PCR分析cid-miR-218家族在LCDV-cn感染GCO过程中的表达;用生物信息学方法预测cid-miR-218家族的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因系统验证cid-miR-218-5p的靶基因;通过转染cid-miR-218-5p mimic和cid-miR-218-5p inhibitor上调和下调cid-miR-218-5p的表达,用定量PCR分析cid-miR-218-5p、靶基因il-10和LCDV-cn mcp基因的表达情况;应用GO和KEGG数据库,对cid-miR-218家族可能参与调控的信号通路进行富集分析。【结果】在LCDV-cn感染GCO过程中,鉴定到cid-miR-218-5p、cid-miR-218a、cid-miR-218b、cid-miR-218b-1和cid-miR-218b-2等5个cid-miR-218家族成员,其中cid-miR-218-5p的表达呈先升后降再上升的变化趋势,且差异表达最显著(P<0.05);经生物信息学分析预测,cid-miR-218家族成员有较多共同的潜在靶基因,il-10是共有的靶基因。经验证,pmirGLO-il-10重组质粒与家族成员代表cid-miR-218-5p结合后,其荧光素酶活性降低(P<0.05),证明il-10是cid-miR-218-5p的靶基因。cid-miR-218-5p过表达后,il-10与LCDV-cn mcp表达均显著下降(P<0.05),而抑制cid-miR-218-5p表达后,il-10与LCDV-cn mcp表达则显著上升(P<0.05)。预测表明cid-miR-218家族参与调控病毒感染致瘤相关信号通路。【结论】在LCDV-cn感染GCO过程中,cid-miR-218家族中cid-miR-218-5p起重要调控作用;cid-miR-218-5p负调控其靶基因il-10的表达,并负调控LCDV-cn mcp基因的表达;cid-miR-218-5p和IL-10对鱼淋巴囊肿病诊断和防控有潜在的临床应用价值。