一株肉种鸡坦布苏病毒的分离鉴定及致病特点研究

2010年坦布苏病毒传入我国,对我国养鸭业造成损失。随后发现,此病毒也能够感染鸡群,对养鸡场生物安全形成威胁。本研究从发生不明原因产蛋率下降的肉种鸡中分离到一株坦布苏病毒HB20210株,发病鸡群主要剖检病变为卵泡膜出血和卵泡液化等生殖系统病变。将分离株接种到DF-1细胞和SPF鸡胚中,48 h后即可出现明显病变。动物试验结果表明,胸肌注射、颈部皮下注射和灌服的攻毒方式造成的病毒血症持续时间均为5 d。将分离株进行肉种鸡回归试验,卵泡会出现显著病变。E蛋白氨基酸同源性和进化树分析表明,分离株HB202010与活疫苗FX2010-180P株、灭活疫苗DF2株、HB株属于同一分支,均为中国分离株II分支,并且与灭活疫苗DF2株和HB株同源性最高,可达99.0%。HB20210株的分离鉴定为进一步探讨该病毒对种鸡产蛋性能的影响和完善种鸡场防控方法奠定了良好的基础。

Isolation and Identification of a Subgroup A Avian Leukosis Virus from Imported Meat-type Grand-parent Chickens

An exogenous avian leukosis virus (ALV) strain SDAU09C1 was isolated in DF-1 cells from one of 240 imported 1-day-old white meat-type grand parent breeder chicks. Inoculation of SDAU09C1 in ALV-free chickens induced antibody reactions specific to subgroup A or B. But gp85 amino acid sequence comparisons indicated that SDAU09C1 fell into subgroup A; it had homology of 88.8%-90.3% to 6 reference strains of subgroup A, much higher compared to other subgroups including subgroup B. This is the first report for ALV of subgroup A isolated from imported breeders.

2021年北京市种鸡场禽网状内皮组织增殖病和禽白血病监测

为了解北京市种鸡场禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV)的流行情况,采用ELISA方法,对2021年从9个区27个种鸡场采集的2660份血清和2660份蛋液样品分别进行了REV抗体和ALVp27抗原监测。监测结果显示:2021年北京市种鸡场的REV抗体和ALVp27抗原个体表观阳性率分别为33.83%和1.54%,真实阳性率分别为34.53%(95%CI:32.72%~36.33%)和1.57%(95%CI:1.10%~2.05%);群体表观阳性率分别为81.48%和29.63%,真实阳性率分别为83.14%和30.23%。除第四季度未检出REV抗体阳性外,其他季度均检出这2种病原,其中第三季度ALV个体阳性率最高(4.86%),与其他季度差异有统计学意义(P<0.05),第二季度REV个体阳性率最高(85.40%),不同季度间的REV个体阳性率差异显著(P<0.05)。祖代群和父母代群均检出REV抗体和ALVp27抗原阳性个体,且阳性率差异均有统计学意义(P<0.05)。结果表明,北京市种鸡场REV和ALV分布广泛,感染较严重,净化效果不佳,存在病原传播风险。结果提示,北京市各种鸡场应高度重视这两种疫病的防控,加快推进种群净化工作。本次监测结果为北京市REV和ALV的净化及其感染的防控提供了依据。

种蛋中内源性禽白血病病毒的检测和鉴定

某祖代种鸡群临床表现正常,在开产后用商品化禽白血病抗体检测试剂盒(ALV-Ab)和禽白血病抗原检测试剂盒检测发现血清抗体阳性率及蛋清抗原阳性率均显著高于正常水平,但对种蛋中抗原阳性的23只种鸡分别接种DF1细胞和SPF鸡胚来源的成纤维细胞(CEF)后均未分离到病毒。为探明该鸡群是否存在内源性禽白血病病毒(ALV—E)以及能否干扰商品化抗体检测试剂盒的结果判定,将23只种鸡所产种蛋分别孵化后逐一制备成CEF培养,盲传3代后检测到其中1只鸡的细胞培养上清抗原检测为阳性。从该细胞培养上清液提取RNA,RTPCR扩增其gp85基因,序列分析证明该检出病毒为E亚群ALV。将该E亚群ALV接种SPF鸡胚来源CEF后又可检出p27抗原,显示该内源性ALV具备传染性。同时,对该病毒gp85基因进行了原核表达,表达产物免疫鸡后部分鸡血清经ALV—Ab抗体检测试剂盒检测为阳性。本研究分离到1株对CEF具备传染性的内源性ALV-E,并证明其诱导产生的抗体能够干扰对外源性ALV的鉴别诊断,提示在进行临床类似情况的判定时要结合鸡群实际表现做全面分析。

蛋种鸡J亚群-禽白血病组织病理学与超微病理学研究

本研究旨在探讨蛋种鸡J亚群-禽白血病的发病机理。针对山东济宁某蛋种鸡场200日龄产蛋鸡的组织病料,分别进行组织病理学与超微病理学研究,检测禽白血病病毒(ALV-J)抗原与抗体,分离病毒,并对其进行单克隆抗体间接免疫荧光试验检测。患病鸡群出现渐进消瘦、瘫痪和最后死亡现象,全群死亡率达10%左右。病鸡的肝、脾等内脏器官明显肿大,表面可见大小不一的灰白色结节;其肾脏、脾脏、肺脏和肝脏等组织中有一定比例的胞质含红色嗜酸性颗粒的骨髓样细胞瘤细胞增生,也发现间质中淋巴细胞和成淋巴细胞浸润增生。同时在脾脏和法氏囊组织中均看到病毒颗粒,有囊膜,直径约100nm。病料中p27抗原和血清中抗体均呈阳性,并分离到ALV-J。以上结果提示该蛋种鸡群发生的肿瘤病是由ALV-J引起的。随着越来越多的禽白血病病例在蛋鸡中确诊,预示着我国蛋鸡业面临新的威胁,值得引起重视。

蛋种鸡小阶梯式本交笼养设备养殖成本与收益及其影响因素

基于中国农业大学某实验室研发的蛋种鸡小阶梯式本交笼养设备,于中国农业大学上庄实验站进行养殖试验,结合蛋种鸡养殖场的实地调研,预测万只鸡养殖规模的资本投入和收益情况。研究表明:使用该设备的万只鸡规模养殖在第一年即可获得收益,收益额为270 896元,此后每年的纯收益为1 173 974元。进一步探索增加蛋种鸡养殖经济效益的方法,提出对该设备的改进建议,为提高蛋种鸡养殖效益提供了理论依据。

华南某种鸡场禽白血病病毒感染对4种免疫抗体水平的影响

采用ELISA方法对华南某种鸡场4群种鸡直肠拭子进行禽白血病病毒p27(ALV-p27)抗原检测,同时采集相应种鸡血清样品并对新城疫(ND)、禽流感(AI)H5、H9亚型、减蛋综合征(EDS-76)、传染性支气管炎(IB)的免疫抗体水平进行检测,并按照相应标准计算对应免疫抗体合格率。结果表明:A、B、C、D群种鸡直肠拭子中ALV-p27抗原检出率分别为86%(12/14)、77%(23/30)、37%(11/30)和56%(10/18);与其它3群种鸡相比ALV-p27抗原检出率最高的A群种鸡其对应的ND、EDS-76、AIH5及H9亚型抗体水平最低,分别为7.26log2、4.74log2、7.32log2及6.21log2;ALV-p27抗原检出率最低的C群种鸡其AIVH5亚型及IB抗体水平最高,分别为8.65log2和7012log2,且C群与其它3群相比AIH5亚型、ND及IB抗体合格率/阳性率最高,分别为90%(18/20)、95%(19/20)和100%(20/20)。结果表明,ALV感染的严重程度与4种免疫抗体水平呈负相关。

二郎山山地鸡不同产蛋阶段对种蛋孵化效果的影响

为研究不同产蛋阶段对种蛋孵化效果的影响,实验选取二郎山山地鸡种鸡群4个不同产蛋阶段,分别收集种蛋孵化,测定孵化效果。结果表明:不同产蛋阶段的种蛋与其受精率、受精蛋孵化率和健雏率都有着密切的关系。以32周龄种蛋孵化效果最优,40周龄次之,再次为25周龄,最差为48周龄。研究结果表明产蛋阶段对种蛋孵化效果有重要的影响。

灭活蜂胶菌对种鸡大肠杆菌病的防治效果

河南某种鸡场饲养4.5万只种鸡,发生大肠杆菌病。从68只病死鸡脏器中分离到27株大肠杆菌,对其中10株大肠杆菌进行了鉴定和分型,结果表明：90.9%大肠杆菌为O78,9.1%大肠杆菌为O74。将O78、O74制成灭活蜂胶苗,免疫该场青年鸡,发现使用安全、效果好,免疫后的180 d保护率仍达到100%。免疫过的鸡群因大肠杆菌病的死亡率低于1%~5%,产蛋率平均高5%~10%。

葡萄籽粕替代玉米对种鸡产蛋高峰后期生产性能、鸡蛋品质及新城疫抗体水平的影响

试验旨在研究葡萄籽粕对种鸡产蛋高峰后期生产性能、鸡蛋品质及新城疫抗体水平的影响。选取产蛋率、体重相近,健康状态良好的64周龄罗曼灰父母代种鸡810只,随机分为6组,每组5个重复,每个重复27只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验组分别饲喂葡萄籽粕替代基础日粮中3%、4.5%、6%、7.5%、9%玉米的试验日粮(分别为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组)。预试期7 d,正试期30 d。探讨日粮中添加不同水平的葡萄籽粕对种鸡产蛋高峰后期生产性能、鸡蛋品质及新城疫抗体水平的影响及其作用机理。结果表明:葡萄籽粕能够明显抑制种鸡产蛋高峰后期生产性能降低,对于日均产蛋量,试验Ⅲ组极显著高于对照组(P<0.01),试验Ⅰ、Ⅱ组显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组产蛋率较对照组分别提高了12.38%、14.76%、18.09%(P<0.05),各试验组蛋鸡的日均采食量、料蛋比及破软蛋率与对照组相比差异不显著(P>0.05);葡萄籽粕处理组鸡蛋的哈氏单位、蛋黄重及蛋壳强度均高于对照组,但随葡萄籽粕添加量的增加没有表现出规律性变化;葡萄籽粕能够降低鸡蛋胆固醇含量(P<0.01);并能够提高种鸡新城疫HI抗体水平(P>0.05)。综上,在种鸡产蛋高峰后期日粮中以葡萄籽粕替代玉米,可提高种鸡生产性能和新城疫抗体效价,改善鸡蛋品质,降低鸡蛋中胆固醇含量,且以替代6%的玉米效果较好。

用PCR检测肉种鸡的鸡胚、雏鸡和子代肉鸡CAV和ALV

为了解CAV和ALV在不同阶段对肉鸡的感染情况,应用PCR方法,对山东省某3个中小型AA肉种鸡场的鸡胚、1日龄雏鸡和子代肉鸡中的CAV和ALV进行检测,试验直接采集样品的不同组织提取DNA,进行PCR扩增及PCR产物的克隆和序列测定。结果显示,被检的3个肉种鸡场及商品肉仔鸡均有这两种病毒的感染,其中CAV的阳性率24.22%;ALV的阳性率17.56%,两者共感染的阳性率8.89%。而且感染鸡各组织病毒含量也有差异,CAV以脾脏最多,ALV以肾脏最多。同时对肝脏进行细菌分离培养,并对40日龄子代商品肉鸡进行ND血凝抑制(HI)抗体效价检测,发现大肠杆菌等细菌感染阳性率较高,ND-HI抗体效价显著偏低。由此可见,鸡胚、雏鸡和子代肉鸡体内存在CAV、ALV的感染以及与细菌性疾病的共感染,造成机体免疫力下降。

应用PCR对来源于AA肉种鸡的鸡胚、雏鸡进行CAV和ALV检测

应用PCR方法,对来源于山东省3个不同AA肉种鸡场的鸡胚、1日龄雏鸡中的CAV和ALV进行检测,从而了解CAV和ALV在此阶段对肉鸡的感染情况。试验直接采集样品的肝脏、胸腺、骨髓、脾脏、肾脏、法氏囊等组织提取DNA,进行PCR扩增及PCR产物的克隆和序列测定。结果显示,被检的3个肉种鸡场均有这两种病毒的阳性检出,其中CAV的阳性率是20.18%;ALV的阳性率13.49%,二者共感染的阳性率是6.24%。而且感染鸡各组织含量也有所差异,其中CAV以脾脏的最多,ALV以肾脏最多。同时对肝脏进行细菌分离培养时发现存在大肠杆菌、沙门氏菌和霉形体的混合感染。由此可见,在鸡胚和雏鸡体内存在CAV、ALV的感染以及与细菌性疾病的共感染。

龙胆草醇提取物对肉种鸡后期生产性能、蛋品质、免疫功能和繁殖性能的影响

试验旨在考察龙胆草醇提取物对肉种鸡后期生产性能、蛋品质、免疫功能和繁殖性能的影响。试验随机选取360只50周龄健康肉种鸡,随机分成4组,每组6个重复,每个重复15只。对照组饲喂基础日粮,低、中、高剂量组分别在基础日粮中添加100、300、500 mg/kg龙胆草醇提取物,预试期7 d,正试期35 d。结果发现:(1)与对照组相比,龙胆草醇提取物低、中、高剂量组的产蛋率均显著提高(P<0.05),中、高剂量组的料蛋比显著降低(P<0.05),且以高剂量组对生产性能的影响最明显;(2)与对照组相比,饲料添加不同水平龙胆草醇提取物均对肉种鸡后期蛋品质的蛋黄颜色有不同程度的显著提升(P<0.05),同样以高剂量组最明显,蛋壳强度也随添加量的增加有提高趋势;(3)与对照组相比,饲料添加低剂量龙胆草醇提取物显著提高了免疫球蛋白A(IgA)含量(P<0.05),中、高剂量组IgA、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)均显著提升(P<0.05);(4)与对照组相比,低剂量组受精率、孵化率、健雏率有提升趋势,胚胎死亡率显著下降(P<0.05),中、高剂量组均有显著差异(P<0.05)。由此可见,饲料添加适宜水平的龙胆草醇提取物能够改善肉种鸡后期生产性能和养分利用率,提高蛋黄色泽,增强蛋品质,并且增强免疫功能和繁殖性能,以高剂量组效果最佳,值得进一步开发利用。

二郎山山地鸡品系间孵化效果的比较分析

为指导二郎山山地鸡品种选育,本试验选用SD02、SD03品系第2世代54个家系、2个批次的种蛋进行孵化试验,比较批次间、品系间和品系内家系间的种蛋孵化效果差异。结果显示,SD03的各家系入孵蛋数(47枚)显著高于SD02(40枚)(P<0.05),SD02各家系的健雏率(99.5%)显著高于SD03(98.4%)(P<0.05)。SD03的死精率和死胎率低于SD02,受精率、受精蛋孵化率高于SD02,但差异不显著(P>0.05)。第1批次的受精蛋孵化率和健雏率高于第2批次,死精率和死胎率低于第2批次(P<0.05)。试验表明孵化效果SD03优于SD02,第1批次好于第2批次;SD02品系内家系3、30和48与SD03品系内家系13和49的各孵化指标远低于相应的品系均值,家系选种时应避免选用上述家系种鸡。

肉种鸡共轭亚油酸(CLA)饲粮中添加不同比例的大豆油对其繁殖性能的影响

[目的]研究肉种鸡共轭亚油酸(CLA)饲粮中添加大豆油对其繁殖性能的影响,最终确定使CLA种蛋孵化率较好恢复的大豆油添加量。[方法]选36周龄健康肉种母鸡600只,种公鸡72只,分为6个组,每组设4个重复,每重复28只,其中母鸡25只,公鸡3只。第1组为对照组,饲喂普通饲粮,大豆添加量为0.5%,2~6组为试验组,饲喂分别补充0%、2%、4%、6%、8%大豆油的CLA饲粮(含0.5%CLA油),1~6组营养水平一致。测定种蛋的孵化率、蛋品质、蛋黄脂肪酸和抗氧化指标。[结果]2组受精蛋孵化能力基本丧失,种鸡CLA饲粮中补充不同比例的大豆油,受精蛋孵化率会有不同程度的改善,添加4%~5%的大豆油时,受精蛋孵化率能够较好恢复,大豆油的添加量为8%时,受精蛋孵化率并没有继续改善。各组的蛋品质没有显著差异(P>0.05)。种蛋的脂肪酸构成发生显著改变,2组的饱和脂肪酸含量显著大于1组(P<0.05),单不饱和脂肪酸含量显著低于1组(P<0.05),多不饱和脂肪酸含量与1组差异不显著(P>0.05),而C20∶4n6含量显著低于1组,CLA-C_9t_(11)、CLA-t_(10)c_(12)含量显著大于1组(P<0.05);3、4、5、6组(添加0.5%CLA油+不同比例的大豆油)的上述饱和脂肪酸含量低于2组,且随着大豆油添加比例的增加而逐渐降低,单不饱和脂肪含量变化规律不明显,多不饱和脂肪酸的含量逐渐增加。各组种蛋的抗氧化能力有显著差异,1组和4组总抗氧化能力显著高于其他组(P<0.05),相应,种蛋中的过氧化产物丙二醛(MDA)含量显著低于其他各组(P<0.05)。[结论]该研究中,种蛋的孵化率受种蛋中脂肪酸构成以及种蛋抗氧化能力的影响,添加适当的大豆油能调整种蛋脂肪酸的构成,从而使由CLA所致的种蛋孵化能力降低得到较好的恢复。

四川地区蛋鸡孵化场沙门氏菌调查

通过对四川不同地区的4个蛋种鸡孵化场进行沙门氏菌感染调查,发现4个蛋种鸡孵化场中弱雏身上的沙门氏菌分离率最高(分别为25.2%、0、13.7%、5.3%),对应孵化场提供的早期死亡雏鸡身上的沙门氏菌分离率也较高(分别为25.3%、7.8%、16.5%、8.6%)。选择19株沙门氏菌用21种抗生素进行耐药性检测,发现该菌只对头孢类部分药物及个别其他类别药物敏感,而对喹诺酮类、磺胺类、大环内酯类、氨基糖苷类的大部分药物耐药。表明对蛋种鸡孵化场沙门氏菌耐药性的控制迫在眉睫。

肉种鸡神经型大肠杆菌病病原的分离、鉴定及防治研究

本研究从病原学角度证实了神经型大肠杆菌（血清型O_(78)、O_(133)）在河北省的存在。1997年春河北省石家庄某大型肉鸡饲养场的肉种鸡发生一种传染病，经流行病学调查，临床观察，病理剖检、病原分离及鉴定等，初步诊断为大肠杆菌病。同时从病死鸡的脑膜分离到典型的大肠杆菌，人工回归雉鸡体试验，典型发病。最后确诊为由种鸡神经到大肠杆菌病。经血清学凝集试验鉴定分离菌为O_(78)血清型大肠杆菌和O_(133)血清型大肠杆菌，将分离菌灭活后制备的油佐剂灭活苗，具有良好的免疫原性。

蛋鸡良种在西藏的适应性试验

将海兰、罗曼两个品种父母代种鸡 ４００多只，引入海拔 ４０４０ ｍ的西藏自治区江孜县进行饲养试验。结果表明，海兰、罗曼均能很好适应高寒缺氧、恶劣多变的气候环境，并基本保持各自的品种特性；母鸡至２２周龄的累计成活率分别达到９３．１％和９０．０％，公鸡成活率达１００％，产蛋期平均蛋重，罗曼６４．７±４．５ ｇ，海兰６１．２±３，７ ｇ，蛋形、蛋壳品质等均正常。

浅谈种鸡场免疫程序的制定

通过对天津地区部分种鸡场疾病发生情况和免疫程序的调查，建议新城疫、禽霍乱、传染性支气管炎、传染性法氏囊病的免疫，采取弱毒疫苗和油乳剂灭活苗联合使用，其中传染性支气管炎由于血清型多、致肾病变病型多见，最好应用自场分离毒株制苗。传染性喉气管炎、鸡痘、禽传染性脑脊髓炎以活毒疫苗为主。减蛋综合症、大肠杆菌病主要用油乳剂灭活苗免疫。

文昌鸡种鸡粗蛋白质适宜需要量研究

为研究文昌鸡种鸡粗蛋白质适宜需要量,选取155日龄体重相近的健康种鸡135只,随机分成3个处理组,每个处理设3个重复,分别饲喂粗蛋白质(CP)水平为15%、16%、17%的日粮。试验期145 d。结果:①16% CP组产蛋率和平均蛋重都高于15% CP组和17% CP组,而采食量和料蛋比均低于15% CP组和17% CP组(P>0.05);②16% CP组的蛋形指数和蛋壳厚度都优于15% CP和17% CP组(P>0.05)。本研究表明:在代谢能为12.0 MJ/kg,粗蛋白水平为16%时,能够满足文昌鸡种鸡的营养需要。