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Sequence and phylogenetic analysis of chicken reoviruses in China
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作者 WEN Chu ZHONG Qi +6 位作者 ZHANG Jia-dong LU Jian-shan ZHANG Li-xin YUAN Xi-min GAN Meng-hou CAI Xue-peng ZHANG Guo-zhong 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第8期1846-1855,共10页
supported by the China Animal Disease Prevention and Control Center;the China Agriculture Research System Poultry-Related Science and Technology Innovation Team of Peking, China (CARS-PSTP)
关键词 avian reovirus chicken genome S1 homology phylogenetic analysis pathogenicity
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禽呼肠孤病毒在我国部分地区蛋鸡群中的血清流行率和风险因素分析 被引量:1
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作者 郑好 杨霞 +8 位作者 张素 赵一萌 汤君宇 高丽 曹红 马国明 王占新 郑世军 王永强 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期1-8,共8页
禽呼肠孤病毒(ARV)在我国流行范围较广,感染家禽后使其出现病毒性关节炎、生长不良和产蛋量下降等表现,对我国养禽业造成较严重的经济损失。为了解我国蛋鸡群中ARV的流行情况及存在的感染风险因素,本试验在2022年11月—2023年3月从北京... 禽呼肠孤病毒(ARV)在我国流行范围较广,感染家禽后使其出现病毒性关节炎、生长不良和产蛋量下降等表现,对我国养禽业造成较严重的经济损失。为了解我国蛋鸡群中ARV的流行情况及存在的感染风险因素,本试验在2022年11月—2023年3月从北京、天津、河北、山东、河南、江苏、陕西、湖北和重庆9个省市的45个蛋鸡养殖场(其中包括祖代蛋鸡群、父母代蛋鸡群和商品代蛋鸡群),收集共计45份调查问卷和968份血清样本。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的ARV抗体,并结合调查问卷,采用单因素分析和逻辑回归分析方法找到蛋鸡出现ARV感染症状的风险因素。ELISA检测结果显示,968份血清样本中检出阳性863份,阳性率为89.15%(95%CI:87.0%~91.0%);单因素分析结果显示,全进全出饲养模式下的蛋鸡出现ARV感染症状的概率显著低于区域性全进全出饲养模式或不同日龄、不同批次混养饲养模式下的蛋鸡,且具有较强程度的关联(P<0.05,0.1<OR<0.3);生物安全防控严格的大、中型规模化养殖场(5万只以上)的蛋鸡出现ARV感染症状的概率显著低于生物安全防控存在不足的小型养殖场(2万~5万只)的蛋鸡,且具有较强程度的关联(P<0.05,0.1<OR<0.3);员工不注意对鸡舍消毒的养殖场饲养的蛋鸡出现ARV感染症状的概率显著高于员工对鸡舍具有较强或一般消毒意识的养殖场饲养的蛋鸡,具有中等程度的关联(P<0.05,1.5<OR<3.0)。综上所述,饲养模式、养殖场规模和员工对鸡舍的消毒意识可能是产蛋鸡群感染ARV的风险因素。 展开更多
关键词 蛋鸡 禽呼肠孤病毒(ARV) 抗体检测 风险因素
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我国白羽肉用型鸡群中CAV、REV和REOV感染状况的血清学调查 被引量:53
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作者 崔治中 孟珊珊 +1 位作者 姜世金 魏建萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期152-157,共6页
为了解鸡传染性贫血病毒(CAV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)和呼肠孤病毒(REOV)在我国白羽肉用型鸡中的感染状态,在2003—2004年,检测了来自5省市8个公司不同年龄鸡群血清样品中3种病毒抗体的存在状况。结果表明,在送检的75个... 为了解鸡传染性贫血病毒(CAV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)和呼肠孤病毒(REOV)在我国白羽肉用型鸡中的感染状态,在2003—2004年,检测了来自5省市8个公司不同年龄鸡群血清样品中3种病毒抗体的存在状况。结果表明,在送检的75个鸡群中,对CAV、REV和REOV呈现抗体阳性的鸡群分别有64个(85.3%)、36个(48%)和74个(96%)。在总共检测的1764份血清样品中,对这3种病毒的平均抗体阳性率分别为51.4%、9.8%和75.1%。在1日龄雏鸡,对CAV和REOV的平均母源抗体阳性率可达100%和81.1%,但对REV只有7.4%。抗体阳性率随年龄变化的动态分析表明,对REV和REOV的母源抗体在出壳后2~3周内消失,而对CAV的母源抗体则可持续3~4周。对CAV和REOV的抗体从5周龄起再次出现,到20周龄时,所有送检鸡群全部阳性,平均阳性率在90%以上。有近一半送检鸡群对REV呈现抗体阳性,抗体阳性率普遍较低,即使在达到开产年龄后,仍还有很高比例鸡为抗体阴性,即对REV仍为易感鸡。研究表明,我国多数鸡群中都同时存在着这3种病毒的感染,但它们在感染的程度和动态等流行病学特点上显著不同,应根据鸡群中抗体的阳性率分别采取不同的措施。 展开更多
关键词 传染性贫血病毒 禽网状内皮增生病病毒 鸡呼肠孤病毒 血清抗体 流行病学调查 白羽肉鸡
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Circulation of Immunosuppressive Viruses and Avian Encephalomyelitis Virus in Backyard Chicken Flocks 被引量:1
4
作者 Priscila de Castro Almeida Pricila Ribeiro Silva Borges +6 位作者 Priscilla K.Koerich Roberta Torres de Melo Igor Alves Batista Eliane Pereira Mendonca Rogério Reis Silva Lillian Karla Silva Belchiolina Beatriz Fonseca 《Advances in Microbiology》 2020年第5期203-213,共11页
The objective of this study was to evaluate the circulation of Chicken Anemia Virus (CAV), Infectious Bursal Disease Virus (IBDV), Avian Reovirus (ARV) and Avian Encephalomyelitis virus (AEV) in properties of backyard... The objective of this study was to evaluate the circulation of Chicken Anemia Virus (CAV), Infectious Bursal Disease Virus (IBDV), Avian Reovirus (ARV) and Avian Encephalomyelitis virus (AEV) in properties of backyard chickens and carry out an epidemiological analysis. We evaluated 200 samples of chickens from 19 backyard chicken property. Only one property (P10) did not present serological titers for the diseases evaluated. This property is close to industrial farms as well as the other properties, however, P10 remained a few years without the breeding of chicks and these were the first poultry to be housed on site. This reinforces the importance of the fallow period for poultry production. The prevalence of virus-seroreactive birds was 78% (156/200), 64.5% (129/200), 78% (156/200), 78% (156/200) for CAV, IBDV, ARV and, EA, respectively. All the free-range farms studied are within a radius of 500 meters to 6 Km away from some establishments of industrial poultry. There was a correlation between serological titers for CAV and the frequency of disease in poultry (r = 0.6178). In places where birds are frequently sick, 30.76% reported that the disease occurs in chicks, 30.76% in broilers, 23.07% in broiler chickens and 7.69% in birds of all ages. Birds get sick more often in the summer period. The owners reported that the most common signs of disease were respiratory signs (snoring and nasal discharge) (46.15%), diarrhea (30.76%), and paralysis of wings and/or paws (38.46%). There was a correlation between the presence of untreated water in the property and serological titers for ARV (r = 0.5576). This report draws attention not only to high serological prevalence for the viruses studied but also important epidemiological aspects of backyard chicken diseases that may indirectly influence the industrial production. 展开更多
关键词 chicken Anemia Virus Infectious Bursal Disease Virus Avian reovirus EPIDEMIOLOGY
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一株基因Ⅴ型鸡呼肠孤病毒的分离与鉴定
5
作者 吴琼 姜晓宁 +6 位作者 崔依同 张树辉 常林 吴凤明 徐鑫 唐熠 刁有祥 《中国家禽》 北大核心 2023年第7期46-53,共8页
为确定山东省某商品肉鸡场发病病原,掌握其遗传进化特征,研究通过采集发病鸡场患鸡肌腱进行病原分离,经RT-PCR、序列分析等方法进行鉴定。结果显示:从发病鸡群中分离到一株呼肠孤病毒,该分离株(YT株)与ARV基因V型参考株K100557处同一进... 为确定山东省某商品肉鸡场发病病原,掌握其遗传进化特征,研究通过采集发病鸡场患鸡肌腱进行病原分离,经RT-PCR、序列分析等方法进行鉴定。结果显示:从发病鸡群中分离到一株呼肠孤病毒,该分离株(YT株)与ARV基因V型参考株K100557处同一进化分支,核苷酸和氨基酸相似性达96.0%,氨基酸序列仅存在13个突变位点;而与疫苗株S1133的核苷酸和氨基酸相似性仅为54.4%和49.2%,氨基酸序列存在167个突变位点。研究表明该鸡场发病病原为基因V型鸡呼肠孤病毒,为制定综合防控措施提供参考。 展开更多
关键词 肉鸡 呼肠孤病毒 分离 鉴定
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禽网状内皮组织增生病病毒和呼肠孤病毒感染SPF鸡对IFN-γ产生的影响 被引量:3
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作者 郑玉姝 赵宏坤 +4 位作者 崔治中 赵朴 李宏梅 刘翠艳 李培庆 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期232-234,238,共4页
1日龄SPF鸡分别接种禽网状内皮组织增生病病毒(REV)、禽呼肠孤病毒(ARV)和REV+ARV,于感染后3、5、46 d采集脾细胞做脾淋巴细胞培养并采用双抗体夹心ELISA法检测IFN-γ水平。结果表明,与对照相比,鸡感染REV后脾淋巴细胞IFN-γ的分泌水平... 1日龄SPF鸡分别接种禽网状内皮组织增生病病毒(REV)、禽呼肠孤病毒(ARV)和REV+ARV,于感染后3、5、46 d采集脾细胞做脾淋巴细胞培养并采用双抗体夹心ELISA法检测IFN-γ水平。结果表明,与对照相比,鸡感染REV后脾淋巴细胞IFN-γ的分泌水平显著升高。感染后5 d,REV单独感染引起IFN-γ8倍的增长,达到峰值,然后逐渐下降。ARV单独感染引起IFN-γ2倍的增长。REV和ARV共感染鸡脾淋巴细胞IFN-γ的分泌量增长了3倍。至感染后46 d,共感染和REV单独感染的IFN-γ水平与对照组相比仍然差异显著,ARV单独感染与对照组相比差异不再显著。 展开更多
关键词 IFN-Γ 禽呼肠孤病毒 禽网状内皮组织增生病病毒 SPF鸡
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鸭呼肠孤病毒人工感染SPF鸡胚的病理学研究 被引量:3
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作者 刘晓丽 刘婷 +4 位作者 刘波 程国富 谷长勤 张万坡 胡薛英 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第14期2844-2849,共6页
【目的】前人研究表明禽呼肠孤病毒可以经卵垂直传播,禽呼肠孤病毒能引起雏禽的病毒性关节炎、呼吸道和肠道疾病、肝炎、心肌炎、免疫抑制等。以实验室分离的鸭呼肠孤病毒HP080421株为研究对象,该毒株引起病变主要以鸭软脚为主要临床特... 【目的】前人研究表明禽呼肠孤病毒可以经卵垂直传播,禽呼肠孤病毒能引起雏禽的病毒性关节炎、呼吸道和肠道疾病、肝炎、心肌炎、免疫抑制等。以实验室分离的鸭呼肠孤病毒HP080421株为研究对象,该毒株引起病变主要以鸭软脚为主要临床特征,病鸭肝脏和脾脏表面有大量的白色坏死灶、肾脏肿大、出血为主要病变特点。鸭呼肠孤病毒对鸡胚的致病性研究,旨在通过雏鸡的病理变化特点,探讨所分离的HP080421鸭呼肠孤病毒株是否也可感染鸡群,为鸡场鸭呼肠孤病毒感染的防控提供理论依据。【方法】运用华中农业大学兽医病理学实验室分离鉴定的HP080421株鸭呼肠孤病毒通过尿囊腔接种SPF鸡胚,建立SPF鸡胚鸭呼肠孤病毒感染模型,培养鸡胚至雏鸡出壳,运用临床观察、病理剖检、H.E染色和免疫组织化学染色等病理组织学检查方法,对鸭呼肠孤病毒感染SPF鸡胚进行病理学研究和致病性分析。【结果】研究发现病毒感染鸡胚孵化培养至22—23日龄均啄壳,但不能自主出壳,需人工剥壳。病理剖检可见雏鸡的肝脏、脾脏肿胀质脆,表面及实质分布有黄白色坏死灶;脑部组织肿胀,并可见出血点和出血斑。H.E染色的组织病理学观察可见接毒组雏鸡肝脏、脾脏的坏死灶周围有大量淋巴细胞浸润;法氏囊的滤泡髓质部和胸腺的髓质部淋巴细胞减少、缺失;脑、肺脏、肾脏存在不同程度的淤血、出血和水肿;免疫组织化学染色结果表明:病毒阳性信号主要分布于肝脏、脾脏、肺脏和法氏囊等器官,并且位于上皮细胞和巨噬细胞的细胞质和胞核内。【结论】鸭呼肠孤病毒株HP080421能够在SPF鸡胚中复制增殖,并使雏鸡主要器官发生明显的病理变化,病理变化主要集中在肝脏和淋巴器官,因此鸭呼肠孤病毒可通过垂直传播感染鸡群,还可导致雏鸡免疫抑制。本研究通过SPF鸡胚鸭呼肠孤病毒感染模型,阐述了鸭呼肠孤病毒感染鸡群的可能性,因此在实际养殖过程中,养殖户要防止鸭呼肠孤病毒对鸡胚的污染,切断传播途径,以达到预防鸡群感染鸭呼肠孤病毒的目的。 展开更多
关键词 鸭呼肠孤病毒 SPF鸡胚 病理剖检 免疫器官 H.E染色
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从关节炎病鸡分离出一株禽呼肠孤病毒 被引量:3
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作者 陈士友 陈溥言 蔡宝祥 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期87-91,共5页
从患关节炎病鸡肠道组织内分离到一株禽呼肠孤病毒(ARV),定名为 NAU-8902.该病毒能在鸡胚卵黄囊内繁殖并致死鸡胚.鸡胚毒适应鸡胚肝细胞(CELi)和鸡胚成纤维细胞(CEF)后,产生以合胞体为特征的细胞病变,分离毒 CEF-2代的 TCID_(50)为10^(-... 从患关节炎病鸡肠道组织内分离到一株禽呼肠孤病毒(ARV),定名为 NAU-8902.该病毒能在鸡胚卵黄囊内繁殖并致死鸡胚.鸡胚毒适应鸡胚肝细胞(CELi)和鸡胚成纤维细胞(CEF)后,产生以合胞体为特征的细胞病变,分离毒 CEF-2代的 TCID_(50)为10^(-7.39)/0.1ml.电镜观察,病毒具有双层衣壳,20面体对称,直径50~65nm,无囊膜.血清学试验证明,病鸡体内含有禽呼肠孤病毒抗体,聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,病毒基因组由10个节段组成,带形与参考株(ARV FDO 株)相似,呈3-3-1-3分布.将适应细胞后的分离毒回归1日龄 SPF 雏鸡,复制出病毒性关节炎.结果表明,先将病料接种于鸡胚卵黄囊,然后适应 CELi,最后在 CEF 细胞上传代,是一种适宜的分离 ARV 的方法. 展开更多
关键词 病毒性 关节炎 禽呼肠孤病毒
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ICR小鼠感染呼肠孤病毒Ⅲ型的实验研究 被引量:2
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作者 罗银珠 张钰 +8 位作者 何丽芳 黄碧洪 吴瑞可 闵凡贵 潘金春 袁文 王静 郭鹏举 黄韧 《实验动物与比较医学》 CAS 2017年第3期198-203,共6页
目的利用呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo-3)感染ICR小鼠,分析小鼠的临床体征、靶器官病毒载量及血清抗体水平的动态变化。方法通过动物体内适应试验增强病毒毒力,利用尾静脉注射与腹腔注射途径建立系统性感染ICR小鼠模型,观察动物临床体征,于感染0d... 目的利用呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo-3)感染ICR小鼠,分析小鼠的临床体征、靶器官病毒载量及血清抗体水平的动态变化。方法通过动物体内适应试验增强病毒毒力,利用尾静脉注射与腹腔注射途径建立系统性感染ICR小鼠模型,观察动物临床体征,于感染0d、4 d、7 d、18 d、25 d、35 d、72 d、129 d分别采集小鼠(2~3只小鼠)血液并剖检。47 d、81 d、103 d随机对3只小鼠进行血液采集跟踪。采用实时qPCR方法检测靶器官病毒核酸量,ELISA方法检测血清抗体水平。结果病毒经过4次小鼠体内适应其毒力明显增强。小鼠攻毒后6 d、7 d、9 d、10 d、11d、16d出现死亡,实时qPCR结果显示,肝脏病毒载量最高,其次是心、脾、肺。多数器官病毒载量峰值出现在6~11 d,129 d后,多数靶器官检测阴性。血清抗体最早在18 d达到阳性,25 d达到峰值,并维持高抗体水平至试验结束。结论小鼠体内适应方法可以明显增强Reo-3毒力,该病毒感染可引起小鼠多器官炎症反应,并导致小鼠死亡。本研究为该病毒模型建立及致病机理研究提供了参考数据。 展开更多
关键词 呼肠孤病毒Ⅲ型(reo-3) 感染 临床研究 呼吸道肠道病
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一株分离自外观正常鸡胚的禽呼肠孤病毒的鉴定 被引量:1
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作者 陈士友 陈溥言 蔡宝祥 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期243-247,共5页
从外观正常的鸡胚体内分离到一株病毒,其在鸡胚原代成纤维细胞上繁殖产生稳定的以合胞体为特征的CPE;病毒呈二十面体对称,无囊膜,有双层衣壳,直径为50~60nm;SDS-PAGE显示病毒基因组分为10个片段,呈3—3—1—3分布,与禽呼肠孤病毒(ARVS)... 从外观正常的鸡胚体内分离到一株病毒,其在鸡胚原代成纤维细胞上繁殖产生稳定的以合胞体为特征的CPE;病毒呈二十面体对称,无囊膜,有双层衣壳,直径为50~60nm;SDS-PAGE显示病毒基因组分为10个片段,呈3—3—1—3分布,与禽呼肠孤病毒(ARVS)FDO株基本相同。以上资料说明,鸡胚所带病毒为一株ARVS,其在CEF-2代上的TCID_(50)为10^(-6.16)/0.1ml。 展开更多
关键词 鸡胚 禽呼肠孤 鉴定
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禽呼肠孤病毒感染SPF鸡后免疫器官中IL-18的定量检测 被引量:1
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作者 张昆丽 谢芝勋 +6 位作者 黄莉 谢丽基 刘家波 邓显文 谢志勤 范晴 罗思思 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期166-169,共4页
【目的】掌握禽呼肠孤病毒(ARV)感染SPF鸡后免疫器官中白细胞介素18(IL-18)的相对动态转录时相,为揭示ARV的致病机制奠定基础。【方法】利用鸡IL-18实时荧光定量PCR检测分析ARV感染对SPF鸡免疫器官中IL-18m RNA动态转录水平的影响。【... 【目的】掌握禽呼肠孤病毒(ARV)感染SPF鸡后免疫器官中白细胞介素18(IL-18)的相对动态转录时相,为揭示ARV的致病机制奠定基础。【方法】利用鸡IL-18实时荧光定量PCR检测分析ARV感染对SPF鸡免疫器官中IL-18m RNA动态转录水平的影响。【结果】SPF鸡感染ARV后,免疫器官发育不良,其脾脏、胸腺、法氏囊重量均低于对照组。与对照组相比,除感染后21 d的胸腺、法氏囊和35 d的脾脏、胸腺中IL-18表达下调外,其他时间点免疫器官中的IL-18均表达上调,且都在ARV感染后第1 d达峰值,上调倍数分别为3.59(脾脏)、7.99(胸腺)和8.35(法氏囊)倍。【结论】ARV感染可导致IL-18转录时相发生变化,推断IL-18与ARV对免疫器官的损伤与免疫抑制相关。 展开更多
关键词 禽呼肠孤病毒 SPF鸡 IL-18 转录水平 实时荧光定量PCR
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三种小鼠RNA病毒样品储运条件对核酸检测的影响 被引量:1
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作者 李欣悦 佟巍 +3 位作者 张丽芳 阮研硕 丛日旭 向志光 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期98-102,共5页
目的分析实验动物小鼠三种肠道病毒MHV、Reo-3、MNV生物样品的储运条件对病原核酸检测结果的影响。方法将MHV、Reo-3、MNV三种RNA病毒与小鼠盲肠内容物混合制备参考品;保存剂包括RNA提取试剂裂解液(Buffer AVL)及生理盐水,存储温度为4... 目的分析实验动物小鼠三种肠道病毒MHV、Reo-3、MNV生物样品的储运条件对病原核酸检测结果的影响。方法将MHV、Reo-3、MNV三种RNA病毒与小鼠盲肠内容物混合制备参考品;保存剂包括RNA提取试剂裂解液(Buffer AVL)及生理盐水,存储温度为4℃及室温(22℃~25℃);在保存1、2、3、7、14 d时间点提取各样品核酸,采用实时荧光定量PCR方法检测病毒样品量的变化。结果生理盐水作为保存剂核酸样品检出量低于RNA提取试剂裂解液组,且检出量下降明显;Buffer AVL组样品储于4℃条件的样品检出量优于室温25℃的条件;4℃-buffer AVL组的三种病毒参考品在3 d时间点的病毒检出量在50%以上,在7 d时间点仍有检出,但14 d时已检测不到。结论三种小鼠RNA病毒样品储运条件优选使用RNA提取试剂裂解液,并在低温条件下储运,最好在3 d内完成核酸检测。 展开更多
关键词 MHV reo-3 MNV 实时荧光定量PCR 储运
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禽呼肠孤病毒感染对SPF鸡跗关节细胞因子mRNA转录的影响 被引量:4
13
作者 张昆丽 谢芝勋 +6 位作者 黄莉 谢丽基 刘加波 邓显文 谢志勤 范晴 罗思思 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1505-1511,共7页
禽呼肠孤病毒(ARV)是威胁全球肉鸡生产的重要致病性病原之一,感染后引起鸡的病毒性关节炎和免疫抑制等,给全球肉鸡产业带来重大的经济损失。本研究用ARV标准强毒株S1133经足垫注射感染7日龄SPF鸡,在感染后1、7、14、21、28、35d分别采... 禽呼肠孤病毒(ARV)是威胁全球肉鸡生产的重要致病性病原之一,感染后引起鸡的病毒性关节炎和免疫抑制等,给全球肉鸡产业带来重大的经济损失。本研究用ARV标准强毒株S1133经足垫注射感染7日龄SPF鸡,在感染后1、7、14、21、28、35d分别采集对照组和试验组各3只SPF鸡跗关节,并测定IL-1β、IL-6、IL-17、IFN-γ和TNF-α基因的相对转录动态,初步探讨ARV感染对鸡跗关节中上述细胞因子mRNA转录时相的影响,为阐明ARV感染的致病机制研究奠定基础。结果表明,ARV感染可引起跗关节中上述细胞因子在不同时间点相对转录量上调,且在整个感染过程中具有持续性上调趋势,其中感染21、28、35d后,IL-1β、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α的相对转录量与对照组相比显著上调(P<0.01),且IL-1β、IL-6、IL-17、IFN-γ呈逐渐上调趋势,表明IL-1β、IL-6、IL-17、IFN-γ、TNF-α参与了ARV感染对鸡跗关节的损伤过程,本研究结果为进一步阐明禽呼肠孤病毒的致病机理奠定了基础。 展开更多
关键词 禽呼肠孤病毒 SPF鸡 细胞因子 跗关节 荧光定量PCR
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实时荧光定量PCR技术在SPF鸡四种垂直传播疾病监测中的应用 被引量:1
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作者 王静 陈冬妮 +4 位作者 欧芷华 袁文 邓庆丽 陆勇军 张钰 《中国比较医学杂志》 2012年第8期6-14,共9页
目的探讨荧光定量PCR检测技术对SPF鸡四种垂直传播病毒的检测应用。方法采集60份SPF鸡及70份普通鸡群蛋清、泄殖腔试子样品,提取样品核酸,分别进行ARV、REV、CAV、ALV四种病毒实时荧光定量PCR检测,根据标准曲线及溶解曲线分析判读样品... 目的探讨荧光定量PCR检测技术对SPF鸡四种垂直传播病毒的检测应用。方法采集60份SPF鸡及70份普通鸡群蛋清、泄殖腔试子样品,提取样品核酸,分别进行ARV、REV、CAV、ALV四种病毒实时荧光定量PCR检测,根据标准曲线及溶解曲线分析判读样品病毒拷贝数。结果 SPF鸡ALV 2份阳性,检出率3.3%,其余病毒检测均为阴性;普通鸡样品REV检测2份阳性,检出率2.9%,ALV 10份阳性,检出率14.3%。结论荧光定量PCR检测方法最低可检测到100个拷贝核酸,检测灵敏度较高,有望应用于SPF鸡临床样品的病原检测。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 禽网状内皮增生症病毒 鸡传染性贫血病毒 禽白血病病毒 禽呼肠孤病毒 SPF鸡
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呼肠孤病毒在鸡传染性腺胃炎病例中存在情况的研究 被引量:5
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作者 沈美艳 张广斌 +2 位作者 李久庆 牛钟相 朱瑞良 《家畜生态学报》 2006年第6期112-114,119,共4页
腺胃肿大为鸡传染性腺胃炎的主要特征,我国多个地区有该病发生,本研究用ELISA双抗体夹心法检测采集于山东省青岛、枣庄、泰安等地区鸡传染性腺胃炎腺胃样品中的呼肠孤病毒抗原,结果上述地区检测阳性率分别在75%、60%、50%,表明上述地区... 腺胃肿大为鸡传染性腺胃炎的主要特征,我国多个地区有该病发生,本研究用ELISA双抗体夹心法检测采集于山东省青岛、枣庄、泰安等地区鸡传染性腺胃炎腺胃样品中的呼肠孤病毒抗原,结果上述地区检测阳性率分别在75%、60%、50%,表明上述地区发生的传染性腺胃炎病鸡腺胃中存在呼肠孤病毒。 展开更多
关键词 传染性腺胃炎 呼肠孤病毒 ELISA
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鸡病毒性关节炎病毒的分离与鉴定 被引量:1
16
作者 陈立宽 辛朝安 +5 位作者 黄伟明 王恒栋 卓金换 庄琰 朱广勤 李建全 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期346-350,共5页
从疑似鸡病毒性关节炎的自然病鸡中,分离到一株病毒(VAV-1)。将VAV-1接种鸡胚卵黄囊,可使鸡胚死亡,胚体出血呈紫红色。该病毒可在鸡胚成纤维(CEF)、幼鸡肾(CK)、绿猴肾(Vero)和幼仓鼠肾(BHK-21)等细胞上增殖,引起细胞病变(CPE)。幼鸡人... 从疑似鸡病毒性关节炎的自然病鸡中,分离到一株病毒(VAV-1)。将VAV-1接种鸡胚卵黄囊,可使鸡胚死亡,胚体出血呈紫红色。该病毒可在鸡胚成纤维(CEF)、幼鸡肾(CK)、绿猴肾(Vero)和幼仓鼠肾(BHK-21)等细胞上增殖,引起细胞病变(CPE)。幼鸡人工感染VAV-1后,可从发病鸡分离到相似病毒。病毒抵抗乙醚、氯仿、pH3、3%甲醛溶液和胰蛋白酶,60℃6小时病毒未完全灭活。为双链RNA病毒.电镜观察,病毒颗粒呈球形或近似六角形,有双层衣壳,外径63~75nm。琼脂凝胶沉淀(AGP)试验,出现禽呼肠孤病毒(ARV)特异性交叉反应,证明分离病毒VAV-1株为ARV。 展开更多
关键词 鸡关节炎 禽呼肠孤病毒
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肉鸡呼肠孤病毒的分离鉴定及致病性研究 被引量:6
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作者 张玉杰 刘东 +6 位作者 刘红祥 宫晓 李陆梅 赵子曈 邹敏 范根成 杜元钊 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2020年第4期41-48,55,共9页
【目的】从临床发病的疑似感染鸡呼肠孤病毒的白羽肉鸡病料中分离鉴定获得1株鸡源呼肠孤病毒SD18,对SD18株进行致病性及传播特性研究,为该病毒的深入研究和综合防治奠定基础。【方法】无菌采集疑似感染鸡呼肠孤病毒发病鸡跗关节处的肌... 【目的】从临床发病的疑似感染鸡呼肠孤病毒的白羽肉鸡病料中分离鉴定获得1株鸡源呼肠孤病毒SD18,对SD18株进行致病性及传播特性研究,为该病毒的深入研究和综合防治奠定基础。【方法】无菌采集疑似感染鸡呼肠孤病毒发病鸡跗关节处的肌腱和渗出物,分离病原物,在LMH细胞上培养,并连续盲传3代,经无菌生理盐水倍比稀释,采用Reed-Muench法测定病毒鸡胚半数致死量(ELD 50)和组织细胞半数感染量(TCID 50);对分离毒株进行理化特性和血凝特性测定;利用设计的鸡呼肠孤病毒L1和S1基因特异性引物,对提取的病毒总RNA进行RT-PCR扩增,经PCR鉴定为阳性的菌落进行基因测序以及核苷酸同源性比对和系统遗传进化分析;用该分离株病毒对SPF鸡和白羽肉鸡进行动物回归试验,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定攻毒后的SPF鸡血清中呼肠孤病毒抗体滴度。【结果】从疑似感染鸡呼肠孤病毒发病鸡跗关节处的肌腱和渗出物中分离获得1株鸡源呼肠孤病毒SD18,其ELD 50为10-6.5/0.1 mL,TCID 50为10-7.36/0.1 mL。RT-PCR结果显示,目的基因片段长度分别为1100,750,265 bp,依次为鸡呼肠孤病毒的S1、σC和L1基因片段。核苷酸同源性比对结果显示,该分离株SD18与Ⅴ群鸡源呼肠孤病毒TW-918(台湾株)的S1基因序列同源性达92.7%,与Ⅰ群鸡病毒性关节炎疫苗S1133株的同源性仅为59.0%。核酸序列遗传进化分析表明,该分离株SD18与Ⅴ群鸡源呼肠孤病毒TW-918(台湾株)处于同一进化分支上,与Ⅰ群鸡源呼肠孤病毒S1133株处于不同的进化分支上,说明新分离的肉鸡呼肠孤病毒SD18株属于基因Ⅴ群,可能是Ⅰ群经典鸡源呼肠孤病毒S1133株的变异毒株。SPF鸡和白羽肉鸡回归试验表明,SD18株病毒能够引起鸡病毒性关节炎,与临床发病一致,并能水平传播。接种试验表明,病毒SD18能致死鸡胚,打开死亡鸡胚可见其绒毛尿囊膜增厚、尿酸盐沉积、胚体出血等症状,符合呼肠孤病毒的致病特点。【结论】该分离株SD18为新型肉鸡呼肠孤病毒,能够引起鸡发生病毒性关节炎。 展开更多
关键词 鸡呼肠孤病毒 病毒分离鉴定 病毒致病性
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鸡细小病毒与禽呼肠病毒二重PCR检测方法的建立 被引量:9
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作者 奉彬 谢芝勋 +10 位作者 邓显文 张艳芳 黄娇玲 王盛 范晴 谢志勤 黄莉 谢丽基 曾婷婷 罗思思 刘加波 《动物医学进展》 北大核心 2016年第11期14-18,共5页
建立可同时检测鸡细小病毒(Chicken parvovirus,ChPV)与禽呼肠病毒(Avian reovirus,ARV)的二重PCR方法,为防控ChPV与ARV提供技术支撑。根据鸡细小病毒NS1基因和禽呼肠病毒σC基因的保守序列,设计合成两对引物用于检测ChPV和ARV,通过优... 建立可同时检测鸡细小病毒(Chicken parvovirus,ChPV)与禽呼肠病毒(Avian reovirus,ARV)的二重PCR方法,为防控ChPV与ARV提供技术支撑。根据鸡细小病毒NS1基因和禽呼肠病毒σC基因的保守序列,设计合成两对引物用于检测ChPV和ARV,通过优化二重PCR的反应体系,特异性、敏感性试验评价建立的ChPV与ARV二重PCR。优化后的二重PCR反应体系为:2×PCR Mix 12.5μL,其中ChPV与ARV的上、下游引物各1.0μL,混合模板2.0μL,ddH2O补足25μL;最佳的反应程序为:95℃5min;95℃1min,56.1℃1min,72℃1min,35个循环;最后72℃延伸10min。结果显示,建立的二重PCR能够同时扩增出204bp ChPV和405bp ARV片段;该方法对ChPV与ARV的检测敏感性分别达到58fg和53fg,但对鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒、马立克病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡传染性支气管炎病毒等病原体均无特异性扩增,对ChPV与ARV混合感染的临床阳性病料的检测结果与各病毒单项PCR检测结果符合率为94%以上。建立的二重PCR可用于ChPV与ARV感染的快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 鸡细小病毒 禽呼肠病毒 二重PCR 特异性 敏感性
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禽呼肠孤病毒感染对SPF鸡外周血淋巴细胞中天然免疫相关基因转录的影响 被引量:9
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作者 黄莉 谢芝勋 +9 位作者 蓝元喜 谢丽基 邓显文 范晴 罗思思 谢志勤 黄娇玲 张艳芳 王盛 曾婷婷 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期116-123,共8页
为了明确禽呼肠孤病毒(avian reovirus,ARV)感染对宿主天然免疫应答的影响,利用实时荧光定量PCR方法检测ARV感染SPF鸡后外周血淋巴细胞中天然免疫相关基因,包括Toll样受体(TLRs)、MDA5、IPS-1、IRF-3、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFITM3、... 为了明确禽呼肠孤病毒(avian reovirus,ARV)感染对宿主天然免疫应答的影响,利用实时荧光定量PCR方法检测ARV感染SPF鸡后外周血淋巴细胞中天然免疫相关基因,包括Toll样受体(TLRs)、MDA5、IPS-1、IRF-3、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFITM3、Mx1和OASL等基因在感染后0、12h以及1、2、3、5和7d的转录水平变化。结果表明,ARV感染SPF鸡后7d以内,外周血淋巴细胞中TLR3和TLR21的mRNA转录水平显著降低(P<0.05或P<0.01);而TLR7和MDA5的mRNA转录水平则在整个试验过程中显著升高,分别在7dpi和1dpi达到峰值(P<0.05或P<0.01)。IPS-1的mRNA转录被抑制;IRF-3则呈显著转录上调趋势;IFN-α、IFN-β和IFN-γ均表达上调,分别在2~3dpi达到峰值(P<0.05或P<0.01)。IFITM3、Mx1、OASL的mRNA转录水平也显著升高,均在3dpi达到峰值(P<0.01)。试验结果表明ARV在感染早期能够显著性引起TLR7、MDA5、IRF3、IFN-α、IFN-β、IFN-γ、IFITM3、Mx1和OASL的转录上调,抑制TLR3、TLR21和IPS-1的转录,为进一步阐释ARV的分子致病机制和免疫应答机制奠定了基础。 展开更多
关键词 禽呼肠孤病毒 天然免疫相关基因 SPF鸡外周血淋巴细胞
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禽呼肠病毒感染鸡胚成纤维细胞后Toll样受体mRNA转录水平的动态变化 被引量:4
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作者 蓝元喜 谢芝勋 +9 位作者 黄莉 谢丽基 邓显文 范晴 罗思思 谢志勤 黄娇玲 张艳芳 王盛 曾婷婷 《动物医学进展》 北大核心 2016年第9期1-5,共5页
为分析禽呼肠病毒(ARV)标准毒株S1133株感染鸡胚成纤维细胞(CEF)后对相关鸡Toll样受体(ChTLRs)mRNA转录水平的影响作用,利用实时荧光定量PCR,测定和分析ARV-S1133感染CEF后ARV结构蛋白σC和ChTLRs的mRNA转录水平变化情况。结果表明,ARV-... 为分析禽呼肠病毒(ARV)标准毒株S1133株感染鸡胚成纤维细胞(CEF)后对相关鸡Toll样受体(ChTLRs)mRNA转录水平的影响作用,利用实时荧光定量PCR,测定和分析ARV-S1133感染CEF后ARV结构蛋白σC和ChTLRs的mRNA转录水平变化情况。结果表明,ARV-S1133感染CEF 10h后,ARVσC蛋白的mRNA相对表达量开始迅速上升,在48h达到峰值;同时,感染CEF中的ChTLR3、ChTLR5、ChTLR7、ChTLR15和ChTLR21mRNA表达量发生显著变化,在感染72h内各个受体的mRNA表达量呈波浪式变化。5个不同滴度的ARV感染CEF 24 h后,ChTLR3、ChTLR5、ChTLR7、ChTLR15、ChTLR21mRNA转录水平与病毒滴度均呈正线性相关。上述结果表明,ARV感染后可诱导CEF ChTLR3、ChTLR5、ChTLR7、ChTLR15、ChTLR21的mRNA转录水平发生变化,可能与禽呼肠病毒的复制和致病机制相关。 展开更多
关键词 禽呼肠病毒 鸡Toll样受体 实时荧光定量PCR 转录水平
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