天水小陇山红豆杉(Taxus chinensis(Pilg.) Rehd)林土壤真菌多样性及其与生态因子的相关性

采用GPS系统采集了天水小陇山红豆杉林9块样地的土样,用稀释平板法对该区域真菌进行分离计数,进一步鉴定到属,并分析了真菌数量和类群与土壤养分、水分和pH等生态因子的相关性.结果表明,该区域土壤真菌数量和类群组成存在较大的空间变异,土壤真菌优势菌群的构成有相似性,青霉属、毛霉属为所有样地的优势菌群.真菌多样性分析表明,小陇山红豆杉物种多样性较丰富,不同样地多样性指数差异明显.土壤真菌总数、类群和多样性与土壤生态因子间的相关性分析表明,真菌总数与土壤pH呈显著负相关(R=-0.796),与水分和有机质呈显著正相关;Shannon-Wiener指数与土壤有机质呈显著正相关;各属与土壤生态因子呈现不同的相关性.

红豆杉种子发育及幼苗生长动态

对红豆杉〔Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｐｉｌｇｅｒ）Ｒｅｈｄ．〕种子发育及１～５年生实生苗生长动态进行了观测，在秦岭山区，红豆杉成年树３～５月开花，５～９月胚珠逐渐发育，９月下旬种子成熟。实生苗在２龄内地上部生长缓慢，根系生长迅速；自第３年起地上部生长旺盛，地下部则稳定生长。文中就红豆杉人工育苗及家化栽培的问题进行了讨论。

中国红豆杉中主要紫杉烷类物质的分布研究

对中国红豆杉[Taxus chinensis(Pilg.)Rehd.]中的紫杉烷类化合物紫杉醇及两种重要前体巴卡亭III(B III)和10-脱乙酰巴卡亭III(10-DAB)的分布进行了研究.结果表明,紫杉醇的含量在同一棵树中的分布依主干皮、根皮、侧枝树皮、种子、须根、嫩枝、叶的次序递减,并发现侧枝茎中紫杉醇在横截面方向呈梯度分布,且紫杉醇含量最高部位是在次生木质层.10-DAB和B III在叶中含量最高,在须根中含量最低,叶子中10-DAB的含量达0.02%～0.03%,高于B III的含量.在2～3 a生的小树枝、叶中未检测到紫杉烷类物质,提示其合成可能与植株发育有关.紫杉醇在30 a 树龄的当年生嫩叶中春季高于秋季,而10-DAB在当年生和多年生的叶中积累都较多,且秋季比春季含量高.

中国红豆杉叶浸膏中紫杉烷的分离纯化及成分鉴定

以中国红豆杉 [Taxuschinensis(Pilger)Rehd .]叶为原料 ,利用甲醇或乙醇为溶剂制备浸膏。甲醇浸膏中的浆果赤霉素Ⅲ和紫杉醇的含量高于乙醇浸膏。采用萃取和层析方法相结合的分离纯化工艺 ,从甲醇浸膏中获得 10个化合物纯品。利用NMR ,IR ,MS和HPLC等方法对其成分进行结构鉴定 ,确定 5个化合物分别为紫杉醇、1 乙酰基 5,7,10 去乙酰基浆果赤霉素I、浆果赤霉素Ⅲ、浆果赤霉素VI和 7,9,10 ,13 去乙酰基浆果赤霉素VI ,HPLC检测它们的纯度相应为 98.4 % ,98.7% ,99.1% ,99.6 5%和 92 .94 %。分离的紫杉醇和浆果赤霉素Ⅲ得率分别为 6 2 .6 %和 57.6 %。这些结果表明所建立的制备及分离纯化的工艺可用于红豆杉叶生产紫杉醇及其前体物。

红豆杉迁地保护中天然种群的形成

０年代自庐山植物园引种栽培于南京中山植物园的１１株红豆杉〔Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｐｉｌｇｅｒ）Ｒｅｈｄ．〕幼苗组成的栽培种群，在４０多年的迁地保护过程中，生长发育正常，且在邻近的自然生境中繁衍出一个含有４６１株幼苗及小树的天然红豆杉种群，树高１０～３４５ｃｍ，树龄１～１５年，主要散生于海拔３５～６０ｍ的山坡麻栎群落及山溪边的枫杨群落中。栽培种群中雌树５株，雄树６株，栽培红豆杉在３０年左右开花结实。该天然种群的形成过程是：红豆杉成熟种子被鸟类取食，其肉质假种皮被消化后，在鸟类的栖息范围内随着鸟粪被随机散布，经过生境选择、适应，于适宜的生境条件下萌发生长成幼苗及小树。此外，讨论了天然红豆杉种群的形成和发展，对于植物迁地保护研究与实践的重要意义。

红豆杉中二个新紫杉烷二萜化合物的分离与测定

从红豆杉Taxus chinensis(Pilger)Rehd。树皮中得到二个新的紫杉烷类化合物,它们的结构为1-羟基-7,9-二去乙酰基巴卡亭Ⅰ(1—hydroxy-7,9—dideacetyl—baccatin Ⅰ)和7,9-二去乙酰基巴卡亭Ⅵ(7,9-dideacetyl baccatin Ⅵ)

红豆杉的愈伤组织诱导及培养研究（初报）

以红豆杉雄球花、茎切段等为外植体诱导产生了愈伤组织。适宜愈伤组织诱导及其生长的培养基为１／２ＭＳ培养基附加２，４—Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ。在不同浓度激素配比的培养基上均未观察到愈伤组织发生再分化。

中国湖北红豆杉属一新变型

报道了红豆杉属1新变型——保康红豆杉[Taxus chinensis(Pilger)Rehd f.baokangsis Y.J.Fei]。该变型与原变种南方红豆杉[Taxus.chinensis(Pilger)Rehd.var.mairei(Lemee et Lévl.)Cheng et L.K.Fu]主要区别在于其雄株上有部分枝条发育成雌性枝条或雌雄球花在同一果枝上,呈现雌雄同株现象。凭证模式标本藏于武汉植物园标本馆(编号Y.J.Fei001,HIB)。

红豆杉育苗栽培及苗木生长动态

The seed of \%Taxus chinensis \%(Pilger) Rehd.\ has a long postmature duration only with the germination of 29.5%～37.5% after 40～70 d when its dormancy is relieved. The low limit of mean temperature for shooting is 15℃, the mean height of 1\|year\|old and 2\|years\|old seedlings is 8.12 cm and 16.10 cm respectively, mean basal diameter of 2\|years\|old seedling is 0.19 cm. Soft\|wood + 50 mg/kg ABT + sandy bed in spring and hard\|wood + 100 mg/kg NAA + sandy bed in autumn are the best treatments for cutting propagation, the survival rate of afforestation may reach 100%. Their mean height is 70.48 cm, basal diameter is 1.01 cm, and branch is 40～50 cm in second year for plantation.

HPLC测定比较曼地亚红豆杉和南方红豆杉不同部位的紫杉醇含量

目的:分析和比较曼地亚红豆杉和南方红豆杉不同部位的抗癌活性成分紫杉醇的含量。方法:利用85%乙醇提取和CH2Cl2萃取得到相关成分;通过高效液相色谱法进行了方法学研究并对紫杉醇含量进行了测定和比较。结果:得到了紫杉醇等相关成分,建立了一个简单而可靠的方法学研究,以此为基础,检测分析并比较了两种植物不同部位中紫杉醇的含量,其中以南方红豆杉的树叶中紫杉醇含量最高,达到了5.18×10-5(w/w)。结论:该方法能准确简便地提取红豆杉植物中的紫杉醇并分析其含量,可为合理开发红豆杉提供一定的科学依据。

基于ISSR标记的南方红豆杉野生种群和迁地保护种群的遗传多样性和遗传结构分析

采用ISSR标记方法,对南方红豆杉〔Taxus chinensis(Pilger)Rehd.var.mairei(Lemée et Lévl.)Cheng et L.K.Fu〕3个野生种群(包括江西黄港和黄沙种群以及福建枫溪种群)、2个迁地保护栽培种群及2个迁地保护衍生种群(均位于江苏南京中山植物园和江西庐山植物园)的遗传多样性和遗传结构进行了分析和比较。结果显示:用8个引物从南方红豆杉的基因组总DNA中共扩增出73条带,其中多态性条带62条。2个迁地保护衍生种群的多态性条带百分率(PPB)、Nei’s多样性指数(h)和Shannon信息指数(I)较高,3个野生种群的PPB、h和I值总体上居中,而2个迁地保护栽培种群的PPB、h和I值较低。合并后的迁地保护衍生种群以及野生种群均有较高的遗传多样性,二者的PPB、h和I值相近,分别为78.08%和82.19%、0.207 6和0.205 8、0.322 9和0.325 9;但二者的遗传结构存在差异,迁地保护衍生种群的遗传分化系数(GST)为0.068 9,明显低于野生种群(0.168 5)。合并后的迁地保护栽培种群的遗传多样性相对较低,PPB、h和I值分别为60.27%、0.180 7和0.275 2;而GST值最高(0.251 4),明显高于合并后的野生种群和迁地保护衍生种群。研究结果表明:在植物园次生林环境条件下,回归到自然生境下的南方红豆杉迁地保护衍生种群的遗传多样性趋于丰富并接近野生种群,从而证明了植物园在濒危植物迁地保护中具有以往未被认识到的巨大潜力。

红豆杉中紫杉烷类成分含量测定方法研究进展

紫杉醇是红豆杉(Taxus chinensis(Pilger)Rehd.)中一种优良的天然抗癌成分,但因其在红豆杉中的含量极少而不能得到广泛推广应用。紫杉烷类化合物作为合成紫杉醇的前体,近年来备受关注。对紫杉烷类化合物含量测定方法的研究进展进行了综述。

响应面法优化南方红豆杉叶总黄酮提取工艺研究

以南方红豆杉叶为材料,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法建立影响因素与响应值之间的数学模型,优化南方红豆杉叶中总黄酮超声辅助提取工艺条件。结果表明,最优提取条件为料液比1∶31(g/mL),提取时间57 min,乙醇浓度66%,超声辅助提取2次,南方红豆杉叶中总黄酮提取量为106.58 mg/g。该提取工艺稳定可行,适用于南方红豆杉叶中黄酮的提取。

中国红豆杉中多种紫杉烷同时检测的液质联用方法的建立

目的:建立能同时检测中国红豆杉中微量紫杉醇、10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DAB)、巴卡亭Ⅲ(B-Ⅲ)、巴卡亭Ⅵ(B-Ⅵ)和1-乙酰-5,7,10-去乙酰巴卡亭Ⅰ(DAB-Ⅰ)等多种紫杉烷的方法,了解该植物中重要紫杉烷的分布和代谢特征。方法:采用电喷雾质谱(ESI-MS)和多级离子阱技术摸索紫杉烷的加合离子峰和碎裂离子出现规律,利用反相高效液相色谱法同时测定植物样品中5种紫杉烷的含量。植物样品用液氮快速研磨,甲醇浸提,固相萃取方法制样。色谱柱为 HypersilODS C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-水(32:20:48),等度洗脱,流速为1mL·min^(-1),检测波长为227nm。结果:具有多个乙酰取代基的紫杉烷在 ESI-MS 正离子扫描时,产生强的铵加合离子峰,含羟基的紫杉烷易产生质子加合峰。最低检测限为0.5～1.5mg·L^(-1),紫杉醇在2.0～180mg·L^(-1)(r=0.9993),10-DAB 在2.0～166.0mg·L^(-1)(r=0.9975),B-Ⅲ在6～170mg·L^(-1)(r=0.9937),B-Ⅵ在7.0～200.0mg·L^(-1)(r=0.9921),DAB-Ⅰ在1.0～130mg·L^(-1)(r=0.9945)范围内具有良好的线性关系。紫杉醇回收率为98%±1.5%,日内 RSD 为1.8%,日间 RSD 为2.5%。结论:应用该方法测定了中国红豆杉不同组织中相应紫杉烷的含量,得到了良好的结果。

红豆杉细胞提取物抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

目的 研究红豆杉细胞提取物对肝癌细胞 SMMC- 772 1的生长抑制作用及其机制。方法 运用台盼蓝拒染法测定肿瘤细胞生长曲线 ,流式细胞仪和 Giem sa染色分析肿瘤细胞周期和细胞凋亡。结果 红豆杉细胞二氯甲烷提取物对肝癌细胞 SMMC- 772 1的生长有明显的抑制作用 ,流式细胞仪分析发现 G2 / M期肿瘤细胞数量增多 ,经 Giem sa染色发现肿瘤细胞有凋亡发生。结论 红豆杉细胞提取物可以通过诱导细胞发生凋亡而抑制肝癌细胞SMMC- 772

SPME-GC指纹图谱法鉴别北五味子和南五味子研究

采用顶空固相微萃取技术提取五味子药材中的挥发性成分,用毛细管色谱柱进行气相色谱分析,建立五味子药材的气相色谱指纹图谱,并用中药色谱指纹图谱相似度评价软件和SPSS软件进行相似度评价及聚类分析和判别分析,对南、北五味子进行鉴别。结果表明:南、北五味子的挥发性成分存在明显的差异,可以用于鉴别南、北五味子,能够建立稳定的判别分析模型;在7个产地中,不同产地的南五味子之间的相似度均大于0.95,不同产地的北五味子之间的相似度也均大于0.95,而南五味子与北五味子的相似度低于0.26;聚类分析法能够将南、北五味子各自聚成1类,对4个未知样品进行判别分析,正确率达到了100%。

粤北南方红豆杉HPLC指纹图谱研究

目的:建立粤北南方红豆杉不同采收季节、不同采收部位的HPLC指纹图谱分析方法,为南方红豆杉的综合利用提供科学依据。方法:采用超临界CO2萃取技术提取南方红豆杉有效部位,按HPLC法建立指纹图谱,使用指纹谱图相似度软件进行评价分析。结果:建立了粤北南方红豆杉指纹图谱,对不同采收季节、不同采收部位的12批南方红豆杉样品提取物进行了指纹图谱分析,得出主要共有峰相对保留时间、相对峰面积作为南方红豆杉指纹图谱相关技术参数。结论:南方红豆杉指纹图谱可用于评价其药材质量。

超临界CO_2流体萃取南方红豆杉叶中脂肪油的工艺研究及其成分分析

目的:研究超临界CO2流体萃取南方红豆杉叶中脂肪油的最佳工艺及其成分分析。方法:以南方红豆杉叶脂肪油萃取得率为评价指标,考察不同萃取压力、萃取温度、萃取时间对脂肪油萃取率的影响,并采用衍生化GC-MS法对南方红豆杉叶脂肪油进行成分分析。结果:超临界CO2萃取南方红豆杉叶脂肪油最终优化的萃取工艺为:CO2压缩泵频率为10 Hz,萃取压力为25 MPa,萃取温度为45℃,萃取时间为120 min,分离釜Ⅰ压力8.0 MPa、温度40℃,分离釜Ⅱ压力5.0 MPa、温度35℃。萃取得到的脂肪油经三氟化硼衍生化后,经GC-MS分析,共鉴定出了33种脂肪酸。结论:3种不同产地的南方红豆杉叶脂肪油的萃取率不同,且以无锡东港的萃取率最高为2.61%。对其成分的分析,不同产地和不同提取方法下主要脂肪酸种类基本一致,含量较低的脂肪酸种类差别较大。

红豆杉的生药学初探

采用分类学鉴定、经验鉴别、显微观察、显微化学、薄层层析、荧光分析等方法对红豆杉的原植物形态、性状及组织构造、粉末显微特征、理化特性进行研究 ,发现其韧皮纤维、韧皮射线、棕红色团块、淀粉粒和理化特性等是主要鉴别特征 ,为红豆杉的鉴别提供参考。

海拔对贵州雷公山地区南方红豆杉种群遗传多样性的影响

目的:应用SSR标记研究海拔对贵州雷公山地区南方红豆杉遗传多样性的影响。方法:经梯度PCR扩增从红豆杉、白云杉、日本柳杉SSR引物中筛选获得了条带清晰的21对SSR引物用于群体研究。结果:21对引物共扩增出42条条带,其中多态性条带35条,多态性条带百分率为83.3%;物种水平上Nei's基因多样性为0.2587,Shannon指数为0.4719,多态位点百分率为85.71%,基因流为1.1453。聚类分析显示在阈值为0.71时,不同海拔南方红豆杉种群之间出现遗传分化。结论:海拔高度与南方红豆杉种群的遗传分化呈负相关。