采用体外微核试验检测某电子烟液的遗传毒性

目的:根据《OECD 487化学品测试方法 体外哺乳动物细胞微核试验》进行试验,检测某电子烟液诱发体外培养的哺乳动物细胞微核形成的能力,以评价其是否属于致突变物。方法:本研究的受试物终浓度分别为1.25、2.50和5.00μL/mL。同时设立溶剂对照组和阳性对照组。试验组和对照组均设2个平行样。在有代谢活化系统(+S9)和无代谢活化系统(-S9)条件下,使培养的中国仓鼠肺细胞(CHL)暴露于电子烟液中,分别染毒4和24 h,收获细胞,低渗固定,经吖啶橙染色后,于荧光显微镜下观察。每个剂量组选2 000个双核细胞进行分析,统计各组细胞微核率。结果:电子烟液在1.25、2.50和5.00μL/mL剂量下,无代谢活化系统短时处理组(4 h,-S9)细胞微核率分别为2.50‰、1.50‰及1.50‰,有代谢活化系统短时处理组(4 h,+S9)细胞微核率分别为1.50‰、2.00‰及1.00‰,无代谢活化系统连续处理组(24 h,-S9)细胞微核率分别为1.50‰、1.00‰及1.00‰,与溶剂对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在本实验条件下,该电子烟液在1.25~5μL/mL浓度范围内,对CHL细胞无致突变作用。

八氯二丙醚对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

目的 研究八氯二丙醚 (S2 )对中国仓鼠肺细胞 (CHL)染色体畸变作用。方法 测定S2 对CHL细胞的半数抑制浓度 (IC50 ) ,根据IC50 设立不同剂量组 ,进行正式试验 ,分别观察 2 4h ,4 8h及加S9后的染色体畸变情况 ,根据标准进行结果判定。结果 染毒 2 4h为可疑阳性反应 ,染毒 4 8h以及加入活化系统染毒 6h为阳性反应。结论 S2 可引起CHL细胞染色体产生畸变作用。

硫芥诱导小鼠染色体畸变和微核形成作用的研究

目的 研究硫芥对中国仓鼠肺成纤维细胞 (chinesehamsterfibroblastcellline ,CHL)染色体的诱变作用及对小鼠骨髓微核率的影响。方法 培养CHL细胞 (±S9) ,以不同浓度硫芥处理 2 4h后常规方法制备染色体 ,观察畸变类型并计算畸变率。KM小白鼠皮下注射硫芥染毒 ,2 4h后处死动物 ,取双侧股骨 ,行骨髓涂片和姬姆萨染色 ,计数含微核嗜多染红细胞(polychromaticerythrocyte ,PCE)数。结果 硫芥处理的CHL细胞染色体畸变率显著增加 ,出现裂隙、断裂、缺失、多倍体等多种类型畸变 ,并呈量效依赖趋势。S9不影响硫芥诱导的CHL细胞染色体畸变形式和畸变率。与对照组比较 ,注射硫芥小鼠骨髓PCE微核率显著增加 (P <0 .0 1) ,硫芥剂量越大 ,微核形成率越高。结论 硫芥能直接诱发细胞染色体损伤。

白芍总甙致突变研究

以鼠伤寒沙门氏菌Ames试验,中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变试验和ICR小鼠骨髓微核试临,检验白芍总甙的遗传毒性。药物浓度为每皿1～10000μg时Ames试验无论代谢活化与否结果均为阴性。药物在12.3～111.1μg/ml时对CHL细胞呈现可疑染色体畸变;加入代谢活化系统,高至333.3μg/mlCHL细胞的染色体畸变率仍在正常范围内。微核试验结果阴性。

亚硝酸钠对中国仓鼠肺细胞染色体畸变率的影响

[目的]研究亚硝酸钠(NaNO2)致中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变的作用。[方法]测定NaNO2对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式实验,分别观察不加及加S9后的染色体畸变情况,根据标准进行结果判定。[结果]NaNO2染毒在不加S9时,128、12.8和1.28μg/ml3个剂量组的染色体畸变率均﹥5%而≤10%,为可疑阳性,而高剂量组(1.28mg/ml)畸变率﹥10%而﹤20%,为阳性反应。NaNO2染毒在加入活化系统S9后,各剂量组引起CHL细胞染色体畸变率在12.8和1.28μg/ml2个剂量组的染色体畸变率均﹥5%而≤10%,为可疑阳性,而中(128μg/ml)和高(1.28mg/ml)剂量组畸变率均﹥10%而﹤20%,为阳性反应。[结论]NaNO2在1.28mg/ml剂量下可引起CHL细胞染色体畸变率增高。

高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

目的研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定。结果染毒6 h,24 h及加S9后染毒6h染色体畸变为阴性。结论高纯度大豆卵磷脂不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用。

司氟沙星CHL细胞体外染色体畸变试验

目的:检测司氟沙星对CHL细胞染色体致畸变作用。方法:用体外方法检测司氟沙星在23.63～189.00μg·mL^(-1)浓度范围内,代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)CHL 细胞的染色体畸变率。结果:司氟沙星的代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)的染色体畸变率均低干5%。结论:司氟沙星对CHL 细胞染色体畸变实验结果为阴性。

抗生素89-07的细胞染色体畸变

用中国仓鼠肺细胞（ＣＨＬ）染色体畸变试验评价抗生素８９－０７的诱变能力，实验包括加和不加代谢活化系统２部分，实验浓度为３、６、１２ｇ／Ｌ，其结果为阴性。

HBsAg重组DNA转化中国地鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶阴性突变株的细胞染色体变化及致瘤性

整合了含乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因和dhfr基因的CHO-dhfr^-细胞,其染色体的畸变率和畸变类型都比亲代CHO-dhfr^-细胞高。但转化前后两系细胞的重要特性都未发生变异,即两者的染色体总数无差别,都是20条。两系细胞株接种裸鼠,均未发现有致瘤性。

甲基丙烯酸环氧丙酯的遗传毒性评价

目的:观察甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱发体外培养的中国仓鼠肺细胞(V79)微核发生变化情况,对其遗传毒性进行评价。方法:分别采用不同浓度(2.25、4.5、9.0、18.0、36.0μg/mL)的GMA染毒V79细胞,设置空白对照组和DMSO溶剂对照组,其中染毒3 h处理组分别在加和不加体外活化系统(S9)条件下进行,染毒24 h处理组在不加S9条件下进行。分别计算细胞复制指数和微核细胞率。结果:GMA的浓度在2.25~36.0μg/mL范围内,无S9的条件下,与空白对照组和DMSO溶剂对照组相比,GMA染毒3和24 h组的V79细胞复制指数均无明显变化,但微核细胞率明显升高,并呈浓度-效应关系;在有S9的条件下染毒3 h,各剂量组的GMA诱发微核细胞率的差异均无统计学意义。结论:在2.25~36.0μg/mL浓度范围,GMA可致V79细胞的微核率升高,表明GMA可诱发遗传物质损伤,具有遗传毒性。

利用中国仓鼠肺细胞体外微核试验评价三七提取液的遗传毒性

目的:评价传统中药三七提取液的遗传毒性.方法:采用体外胞质分裂阻断微核法检测三七提取液在加与不加代谢活化系统S9的两种条件下对中国仓鼠肺细胞微核率的影响,三七提取液的制备采用乙醇反复浸提法.根据中性红摄取法细胞毒性测定试验的结果,微核试验设3个三七染毒浓度组(0.625、1.250、2.500 mg/mL)、阳性对照组(+S9条件下为20μg/mL环磷酰胺,-S9条件下为1μg/mL丝裂霉素C)和阴性对照组(MEM培养基).结果:三七提取液2.500 mg/mL浓度组,中性红摄取法细胞毒性测定试验中,吸光度值较阴性对照组显著降低(P<0.05),细胞存活率为80.3%;三七提取液0.625、1.250、2.500 mg/mL浓度组CHL细胞的微核率,在+S9条件下分别为17‰、16‰、16‰,在-S9条件下分别为17‰、15‰、16‰.与阴性对照组(+S916‰、-S915‰)比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:在本研究条件下,体外微核试验结果表明,三七提取液不具有遗传毒性.

地红霉素对中国仓鼠肺细胞体外染色体畸变的影响

目的:检测地红霉素对中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)染色体致畸变的影响。方法:用体外方法检测地红霉素在12.50～50.0μg·mL^(-1)浓度范围内,代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)CHL细胞的染色体畸变率。结果:地红霉素的代谢活化组(含S_9mix)及非活化组(不含S_9mix)的染色体畸变率均低于3%。结论:地红霉素对CHL细胞染色体畸变实验结果为阴性。

灭螺增效剂B002致突变的实验研究

本文进行了灭螺增效剂B002的Ames试验、微核试验、染色体畸变试验。实验结果表明，对TA97、TA98、TA100和TA102无诱变作用，微核试验及中国仓鼠肺细胞（CHL）染色体畸变试验均为阴性。

医用硅橡胶致突变研究

本文报道了中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变相应用Bt DR标记的姐妹染色单体互换(SCE),检测医用硅橡胶致突变作用。硅橡胶Eagle浸出液,剂量为400mg/ml、200mg/ml和100mg/ml;硅橡胶生理盐水浸出液,剂量为60mg/ml、40mg/ml及长×宽×厚为2.5cm×3cm×0.05cm共2块硅橡胶置于CHL细胞培养液内。结果表明,细胞与检测物接触时间,不论24h或48h,除400mg/ml组的染色体畸变为可疑阳性结果,畸变类型以断裂为主外,其它剂量组均为阴性结果。SCE法检测结果表明,除400mg/ml Eagle浸出液与正常对照的26h平均值为4.36±1.92;48h平均值为7.10±2.28相比较,有比较显著性差异(P<0.05)外,其它剂量组均为无统计学意义(P<0.05)。

甲磺酸丹诺沙星诱发中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验

采用体外培养中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)对喹诺酮类新药甲磺酸丹诺沙星(Danofloxacinmesylate)的诱变性进行了检测,旨在对该药的遗传毒性作出评价,为安全用药提供数据。结果表明:加或不加代谢活化系统S9,甲磺酸丹诺沙星对CHL细胞未见致染色体畸变作用。

美洲商陆致中国仓鼠肺细胞染色体畸变实验研究

目的探讨美洲商陆对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体的畸变作用。方法四唑盐(MTT)比色法(吸光度490 nm)测定美洲商陆抑制50%CHL细胞生长的浓度(IC50)。确定IC50为染色体畸变试验CHL细胞暴露于受试物的高剂量组,下设100. 0、40. 0、8. 0、1. 6μg/m L共4个剂量组,按常规方法进行CHL细胞染色体畸变试验。在加入与不加入代谢活化系统的条件下,观察CHL细胞暴露于受试物6、24 h CHL细胞染色体数目及结构的变化,进行染色体畸变分析。结果在加入与不加入代谢活化系统的条件下,CHL细胞暴露于受试物6、24 h,美洲商陆的终浓度在200. 0～1. 6μg/m L,CHL细胞染色体畸变率与溶剂对照组(灭菌水和二甲基亚砜)相比无显著差异(P> 0. 05);与阳性对照组相比,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论在本试验条件下,美洲商陆不诱发中国仓鼠肺细胞染色体结构畸变。

体外染色体畸变试验染色体标本制备的质量控制

目的探讨体外染色体畸变试验染色体制备过程的影响因素及质量控制,总结分析体外染色体标本成功制备方法及要点。方法选用中国仓鼠肺细胞(CHL)进行细胞培养及染色体制备,阳性诱变剂选用丝裂霉素和环磷酰胺,经过常规低渗、固定、滴片,最后镜检阅片。结果 CHL染色体畸变试验,丝裂霉素、环磷酰胺处理后染色体畸变率显著增高,均>20%;而阴性对照组在有和无代谢活化系统两种测试条件下,染色体结构畸变率均小于5%。所制备的染色体分散良好,长短适中,成功率较高。结论影响体外染色体畸变试验细胞染色体标本制备的因素很多,每一个步骤都很关键,必须严格按照操作规程,掌握每一个步骤的原理,细致、耐心、科学地操作,才能制备出好的标本。

人参皂苷Rd对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

目的研究人参皂苷Rd致中国仓鼠肺细胞(Chinesehamster lungcells,CHL)染色体畸变的作用。方法细胞计数法测定人参皂苷Rd对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行染色体畸变试验,分别观察人参皂苷Rd染毒6、24h及加S9后染毒6h CHL细胞染色体的数目及结构变化,进行染色体畸变分析。结果人参皂苷Rd染毒6、24h及加S9后染毒6h CHL细胞染色体畸变为阴性。结论在本试验条件下,人参皂苷Rd不能引起CHL细胞染色体产生畸变。

人参皂苷Rb_2致中国仓鼠肺细胞染色体畸变的作用

目的:研究人参皂苷Rb_2致中国仓鼠肺细胞(Chinese hamster lung cells,CHL)染色体畸变的作用。方法:细胞计数法测定人参皂苷Rb_2对CHL细胞的半数抑制浓度(50%inhibition concentration,IC_(50)),根据IC_(50)设立不同剂量组,进行CHL细胞染色体畸变试验,分别观察人参皂苷Rb_2染毒6、24 h及加S9后染毒6 h CHL细胞染色体的数目及结构变化,进行染色体畸变分析。结果:人参皂苷Rb_2染毒6、24 h及加S9后染毒6 h CHL细胞染色体畸变均为阴性。结论:在本试验条件下,人参皂苷Rb_2未引起CHL细胞染色体产生畸变。

采用体外染色体畸变试验检测锐钛型纳米二氧化钛的遗传毒性

目的:按《OECD化学品测试准则473:体外哺乳动物染色体畸变测试》的要求进行试验,检测锐钛型纳米二氧化钛诱发体外培养的哺乳动物细胞染色体畸变的能力,以评价其是否属于致突变物。方法:试验组受试物终浓度分别设置为0.0078、0.0312、0.125、0.5和2 mg/mL,同时设立溶剂对照组和阳性对照组。试验分为有代谢活化系统短时处理组(+S9,4 h)、无代谢活化系统短时处理组(-S9,4 h)和无代谢活化系统连续处理组(-S9,24 h)3种处理方式,将培养的中国仓鼠肺细胞(CHL)暴露于锐钛型纳米二氧化钛混悬液中,染毒相应时间后收获细胞,经低渗固定后,制片并染色。每个浓度组选取300个分散良好的中期分裂相细胞进行染色体畸变分析。结果:锐钛型纳米二氧化钛在0.0078、0.0312、0.125、0.5和2 mg/mL浓度下,无代谢活化系统短时处理组不含裂隙的染色体畸变率分别为1.67%、1.33%、2.00%、1.00%和2.33%,有代谢活化系统短时处理组不含裂隙的染色体畸变率分别为1.33%、1.33%、2.00%、1.67%和2.00%,无代谢活化系统连续处理组不含裂隙的染色体畸变率分别为1.33%、1.67%、2.00%、1.67%和2.33%,与溶剂对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在本实验条件下,锐钛型纳米二氧化钛在0.0078~2 mg/mL浓度范围内,对CHL细胞染色体无致畸作用。