本研究设计了10种植物病毒和各种对照的探针,将探针固定在醛基化玻璃片基上制备基因芯片。用常规的Trizol法提取植物总RNA,根据病毒的外壳蛋白基因或复制酶基因设计特异性引物,经RT—PCR扩增相应区段并用Cy3-dCTP进行标记。将标记的...本研究设计了10种植物病毒和各种对照的探针,将探针固定在醛基化玻璃片基上制备基因芯片。用常规的Trizol法提取植物总RNA,根据病毒的外壳蛋白基因或复制酶基因设计特异性引物,经RT—PCR扩增相应区段并用Cy3-dCTP进行标记。将标记的PCR产物与芯片杂交,扫描仪对杂交结果扫描,GenePix Pro 4.0软件对杂交图像进行分析。结果表明,该芯片可以从病毒感染样本中检测到特异性识别信号,检测灵敏度比RT—PCR高10-100倍,所以,基因芯片能对植物病毒作出快速、准确的检测。展开更多
文摘本研究设计了10种植物病毒和各种对照的探针,将探针固定在醛基化玻璃片基上制备基因芯片。用常规的Trizol法提取植物总RNA,根据病毒的外壳蛋白基因或复制酶基因设计特异性引物,经RT—PCR扩增相应区段并用Cy3-dCTP进行标记。将标记的PCR产物与芯片杂交,扫描仪对杂交结果扫描,GenePix Pro 4.0软件对杂交图像进行分析。结果表明,该芯片可以从病毒感染样本中检测到特异性识别信号,检测灵敏度比RT—PCR高10-100倍,所以,基因芯片能对植物病毒作出快速、准确的检测。