甜椒叶绿体小分子量热激蛋白(CaHSP26)对大肠杆菌抗氧化能力的影响

旨在探讨大肠杆菌中CaHSP26基因的异源表达对原核生物抗氧化能力的影响。通过构建CaHSP26基因原核表达载体pET30-CaHSP26,经不同浓度过氧化氢处理后,分析大肠杆菌菌种存活率及抗氧化能力。结果表明,与转空载体pET-30a(+)的对照大肠杆菌菌株P30相比,过量表达CaHSP26提高了转基因的大肠杆菌菌株P750过氧化氢胁迫下的存活率,降低了MDA的产生,CaHSP26的表达可以提高原核生物抗氧化能力。试验初步证实超表达CaHSP26的转基因烟草生长势明显高于对照,为今后研究植物中CaHSP26抗氧化能力的作用机理提供依据。

叶绿体小分子量热激蛋白与植物光系统保护研究进展

对叶绿体小分子量热激蛋白的研究进行了简要的回顾和总结。详细介绍了植物遇到冷、热胁迫时,叶绿体小分子量热激蛋白对光合系统的保护;初步分析了叶绿体小分子量热激蛋白与植物的耐热性和耐冷性关系及其潜在的作用方式。

番茄叶绿体小分子热激蛋白多克隆抗体的制备

目的为深入研究叶绿体sHSP的功能,构建有效的原核表达体系,制备高特异性的叶绿体sHSP的多克隆抗体。方法将PCR方法得到的番茄叶绿体小分子热激蛋白基因(cpshsp)全长cDNA基因片段,克隆入融合表达载体pGEX6p-1中,在强启动子作用下在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中诱导表达,并将sHSP纯化产物免疫新西兰大白兔,western blot检测sHSP多克隆抗体。结果表达菌株经0.2 mmol/L IPTG诱导4h后,GST-CPsHSP形成包涵体,sHSP纯化产物免疫新西兰大白兔后得到叶绿体sHSP多克隆抗体,western blot检测表明该抗体的特异性和效价较好。结论构建的原核表达载体pGEX6p-1/cpshsp,在一定的诱导条件下,在DE3中得到稳定高效的融合表达,为制备叶绿体sHSP抗体提供足够的抗原,为进一步研究叶绿体sHSP的功能奠定了基础。

转匍匐翦股颖AsHSP26.8a拟南芥株系的光合作用研究

通过测定转匍匐翦股颖小热激蛋白基因AsHSP26.8a拟南芥株系的根长、植株质量、蒸腾速率、气孔导度、净光合速率以及PSⅡ光能转化效率,探讨AsHSP26.8a对拟南芥光合作用的影响,并进一步通过qRT-PCR分析了拟南芥内源光合相关基因(rbcL、psaA、psbA、psaE、clpP、rpoB、rpo A、accD)的表达情况来揭示AsHSP26.8a参与光合作用的调控途径。结果表明:与野生型相比,转基因拟南芥根长显著缩短,鲜质量和干质量下降;光合速率、蒸腾速率、气孔导度和PSⅡ光能转化效率均有所下降,光合相关基因的表达也有所下调。由此认为AsHSP26.8a抑制了转基因拟南芥光合相关基因的表达,使转基因拟南芥的光合作用减弱,从而进一步抑制了转基因拟南芥根系生长和干物质的积累。