HPLC-MS/MS法同时测定清开灵口服液中7种成分的含量

目的 建立高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定清开灵口服液中7种成分含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×10 mm,1.7μm);以含10 mmol·L^(-1)乙酸铵和0.1%甲酸的水溶液(A)及甲醇(B)为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正、负离子多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果 腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸质量浓度分别在0.100 4~3.213、0.784 5~8.982、0.998~3.194、0.622 5~19.92、25.05~300.6、2.513~30.15和7.775~93.30μg·m L^(-1)范围内与峰面积呈良好线性关系(r≥0.999 0);平均回收率(n=6)分别为100.9%、98.74%、101.2%、100.2%、100.8%、99.97%和98.94%,RSD分别为1.58%、0.59%、1.78%、1.25%、0.65%、1.69%和1.07%。15批样品中腺苷、绿原酸、咖啡酸、栀子苷、黄芩苷、猪去氧胆酸和胆酸的含量范围分别为0.12~0.18、0.19~0.24、0.06~0.09、0.34~0.37、4.54~4.85、0.49~0.67和1.82~2.19 mg·m L^(-1)。15批样品测定结果较为接近。结论 该方法具有良好的灵敏度、准确性和重复性,可为清开灵口服液的质量控制和后续研究提供参考及数据支持。

不同厂家八宝惊风散中人工牛黄胆汁酸类活性成分的含量测定及差异分析

目的建立同时测定八宝惊风散中人工牛黄有效成分(胆酸、猪去氧胆酸和牛磺胆酸钠)含量的方法,比较不同厂家样品中3个成分的含量差异。方法采用超高效液相串联质谱法测定3个厂家9批八宝惊风散中胆酸、猪去氧胆酸和牛磺胆酸钠的含量,色谱柱为Phenomenex Luna®C18,流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.5 mL/min,柱温为40℃,进样量为2μL。质谱采用负离子单四极杆模式,胆酸、猪去氧胆酸和牛磺胆酸钠的m/z分别为407.2、392.2、514.2。以3个成分的含量为指标,对9批样品进行聚类分析和主成分分析。结果胆酸、猪去氧胆酸和牛磺胆酸钠的线性范围分别为5.48~548.40、5.38~538.40、4.74~474.05 ng/mL(r≥0.9993);精密度、重复性、稳定性(24 h)的RSD均不高于3.7%(n=6),平均回收率分别为103.3%、103.3%、101.6%,RSD分别为3.3%、3.4%、4.2%(n=6)。9批样品中胆酸、猪去氧胆酸、牛磺胆酸钠的含量分别为0.702~1.711、0.599~2.049、0.664~1.752 mg/g。A厂家样品中3个成分的平均含量较高,批间差异最小;C厂家样品中3个成分的平均含量最低,批间差异较大。聚类分析基本可以区分不同厂家的样品;以主成分综合得分为指标进行聚类分析,结果与含量聚类分析结果基本一致。结论成功建立了同时测定八宝惊风散中人工牛黄3个胆汁酸类有效成分含量的方法。各厂家样品中3个成分的含量存在较大差异。

HPLC-ELSD法测定消痔灵片中胆酸的含量

目的:建立 HPLC-ELSD 法测定消痔灵片中胆酸含量。方法:以 HiQ-sil C_(18)(4.6mm×250mm,5μm)为分析柱,甲醇-水(75:25),冰醋酸调 pH 至3.1为流动相,流速为1.0mL·min^(-1),用蒸发光散射检测器检测,采用外标法定量测定。结果:胆酸在1.45～7.24μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9995);平均回收率为99.72%,RSD 为2.8%(n=5)。结论:该方法简便、准确,可作为消痔灵片的含量测定方法。

蛇胆糖浆口服液中胆酸的含量测定

本文用无水乙醇，氯仿除去蛇胆糖浆口服液中的糖份和其它干扰物质，提取出胆酸，用浓硫酸氧化法显色，用分光光度法测定蛇胆糖浆口服液中胆酸的含量。线性范围为０～２４μｇ／ｍｌ，回收率为９９．９３％，相对标准偏差为０．４１％。本法简便快速，灵敏度高，重现性好。

HPLC法测定珍龙醒脑胶囊中胆酸的含量

目的:建立珍龙醒脑胶囊人工牛黄的胆酸的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以流动相甲醇-1%冰醋酸水溶液(75∶25)进行含量测定。结果:胆酸的含量在26l^260μg/ml范围内线性关系良好,相关系数R=0.9994,平均回收率为98.22%。结论:该方法简单、准确,可用于珍龙醒脑胶囊的质量控制。

核磁共振波谱法测定胆酸甲酯的含量

采用核磁共振波谱法测定胆酸甲酯的含量。以顺丁烯二酸为内标，氘代二甲基亚砜和重水为溶剂，测试温度为298K，脉冲宽度为8μs，弛豫时间为50S，扫描次数为16次。δ6．28为顺丁烯二酸的定量峰，δ3．79和δ0．59为胆酸甲酯的定量峰，以两个定量峰试验结果的平均值计算胆酸甲酯的含量。顺丁烯二酸与胆酸甲酯的定量峰不受其他信号干扰，顺丁烯二酸与胆酸甲酯的质量比在0．208-1．03范围内呈线性。胆酸甲酯的绝对含量测定结果为99．4％，测定值的相对标准偏差（n=6）为0．33％。

浙贝乙素胆酸盐中浙贝乙素和胆酸的含量测定

目的建立浙贝乙素胆酸盐中浙贝乙素和胆酸的含量测定方法。方法以甲醇-乙酸铵(0.1 mol.L-1)-三乙胺-冰乙酸(78∶22∶0.2∶0.03)为流动相,C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,流速为1 mL.min-1;蒸发光散射检测器检测(漂移管温度72.1℃,氮气流速2 mL.min-1)。结果浙贝乙素胆酸盐中浙贝乙素和胆酸分别在50.4～151.1μg.mL-1(r=0.999 6,n=5)、50.5～151.4μg.mL-1(r=0.999 9,n=5)内峰面积与浓度呈良好线性关系;平均回收率分别为99.17%(RSD=0.62%)和99.37%(RSD=0.63%)。结论该方法测定浙贝乙素胆酸盐中的浙贝乙素和胆酸含量简便,可靠,重复性好。

复方黄栌口服液对家兔胆汁流量及胆汁成分的影响

目的:观察复方黄栌口服液对家兔胆汁流量及胆汁成分的影响。方法:将50只健康新西兰白兔按照随机数字表法分为空白组、护肝宁片组、复方黄栌口服液大剂量组、复方黄栌口服液中剂量组和复方黄栌口服液小剂量组,每组各10只。护肝宁片组给予护肝宁片混悬液22 g·L-1灌胃,复方黄栌口服液大剂量组、复方黄栌口服液中剂量组和复方黄栌口服液小剂量组分别给予5 m L·kg-1、2. 5 m L·kg-1、1. 25 m L·kg-1复方黄栌口服液纯水稀释后灌胃,空白组灌胃等剂量的纯水。采用胆管引流法计算各组家兔的胆汁流量,并分别测定胆汁中主要成分的含量。结果:与空白组比较,复方黄栌口服液大剂量组、中剂量组、小剂量组和护肝宁片组可显著增加家兔胆汁量(P <0. 05)。复方黄栌口服液大剂量组、中剂量组、小剂量组均可明显提高家兔胆汁中胆酸含量(P <0. 05),并显著降低胆汁中胆固醇及胆红素含量(P <0. 05),且以复方黄栌口服液大剂量组的效果较好。与空白组比较,复方黄栌口服液大剂量组、中剂量组、小剂量组和护肝宁片组可显著升高胆汁中胆酸含量;复方黄栌口服液大剂量组、中剂量组和护肝宁片组可显著降低胆汁中胆红素、胆固醇的含量(P <0. 01);复方黄栌口服液小剂量组对胆汁中胆红素、胆固醇含量仅有降低趋势,与空白组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:复方黄栌口服液可显著增加麻醉家兔胆汁的流量,并能明显增加排出胆汁中胆酸含量,降低胆固醇及胆红素含量。

HPLC法测定牛黄渗透泵片中胆酸含量

目的:采用HPLC法测定自制牛黄渗透泵片中胆酸含量。方法:用冰醋酸溶解自制牛黄渗透泵片,经硫酸-水混合溶液70℃水浴处理后,采用HPLC法测定,色谱条件:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,乙腈-0.15%磷酸水溶液(40∶60)为流动相,检测波长为387nm。结果:胆酸在48μg/mL^240μg/mL(r=0.999 2,n=3)浓度范围内呈良好线性关系,平均回收率为99.60%,RSD=0.87%。结论:该方法可用于测定牛黄渗透泵片中胆酸含量,快速简便,准确有效。

蒸发光散射检测器-高效液相色谱法测定小儿化毒胶囊中胆酸和猪去氧胆酸含量

目的建立同时测定小儿化毒胶囊中胆酸含量和猪去氧胆酸的蒸发光散射检测器-高效液相色谱(ELSD-HPLC)法。方法色谱柱采用Waters Symmetry C_(18)柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),流动相为乙腈-0. 1%冰醋酸溶液(40∶60),流速为1 mL/min,柱温为35℃,检测器为ELSD,漂移管温度为98℃,空气流速为3. 0 m L/min。结果胆酸进样量在1. 068～10. 680μg范围内其与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=1. 46 X+5. 83(r=0. 999),平均加样回收率为99. 81%,RSD为2. 46%(n=6);猪去氧胆酸进样量在1. 121～11. 210μg范围内其与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=1. 46 X+5. 68(r=0. 999),平均加样回收率为101. 40%,RSD为2. 91%(n=6)。结论该方法科学、简便、专属性较强,可有效控制该制剂中人工牛黄的质量。

HPLC法测定胆酸和猪去氧胆酸的含量

目的：建立胆酸和猪去氧胆酸的含量测定方法。方法：采用HPLC—UV法，色谱柱为Diamonsil—C18（4．6mm×150mm，5μm），流动相为乙腈-水，磷酸（35：65：0．1），检测波长为192nm，柱温25℃，流速1．5mL·min^-1。结果：胆酸、猪去氧胆酸分别在3．154～31．540μg和1．927～19．266μg线性关系良好，相关系数分别为r=0．9995和r=0．9992．平均加样回收率分别为98．98％（RSD为0．42％）和98．29％（RSD为0．61％）。结论：方法准确可靠、重复性好，可用于胆酸和猪去氧胆酸的质量控制。

清开灵软胶囊中胆酸和猪去氧胆酸的含量测定

目的建立清开灵软胶囊中胆酸和猪去氧胆酸的高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)含量测定方法。方法采用ShiseidoCapcell MGⅡC18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-乙腈-0.5%冰醋酸溶液(49∶20∶31)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,蒸发光散射检测器,漂移管温度为108℃,载气流速为2.8 L/min。结果胆酸和猪去氧胆酸的进样量分别在2.338～18.704μg(r=0.999 4)和2.018～16.141μg(r=0.999 5)范围内与各自的峰面积积分值呈良好的对数线性关系,平均回收率分别为98.51%和98.01%,RSD分别为0.74%和0.72%(n=9)。结论所用方法简便、准确、分离效果好,适用于该制剂的质量控制。

基于近红外光谱和中红外光谱技术的金振口服液中间体含量预测模型研究

目的 采用近红外光谱(near-infrared spectroscopy,NIRS)、中红外光谱(mid-infrared spectroscopy,MIRS)技术,实现对金振口服液(Jinzhen Oral Liquid,JOL)矿、植物药浸膏中黄芩苷、汉黄芩苷、甘草酸、没食子酸和固含量5个指标和人工牛黄浸膏中猪去氧胆酸、胆酸和固含量3个指标的含量预测,建立预测模型。方法 收集矿、植物药、人工牛黄2种浸膏样本,采集NIRS、MIRS并测定各指标含量。优选最佳光谱预处理方法和特征波段,融合光谱数据,采用偏最小二乘(partial least square,PLS)法建立8个指标的含量预测模型,并比较其性能,选出最优的含量预测模型。结果 NIRS技术对黄芩苷、汉黄芩苷、甘草酸、猪去氧胆酸、人工牛黄固含量的预测效果较好,预测相对偏差(relative standard error of prediction,RSEP)均低于8%,故选用NIRS模型作为这5个指标的最佳模型;没食子酸、胆酸和矿、植物药固含量的融合光谱数据模型预测效果较好,RSEP值均低于6%,故选用融合模型作为这3个指标的最佳模型。结论 基于NIRS和MIRS技术建立的模型,可用于JOL浸膏中8个指标的快速检测,方法操作简单、结果可靠。

UHPLC-MS/MS法同时测定牛黄蛇胆川贝液中22个胆酸成分

目的:建立同时测定牛黄蛇胆川贝液中22个胆酸成分(甘氨熊脱氧胆酸、甘氨猪胆酸、牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-二羟基胆烷酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、3α-羟基-7-酮基-5β-胆烷酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、12-酮脱氧胆酸、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、甘氨石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸)的超高效液相色谱-串联质谱联用(UPLC-MS/MS)方法。方法:样品采用甲醇超声提取;以Thermo Fisher Scientfic Bremen HYPERSIL GOLD(100 mm×2.1 mm, 1.9μm)为色谱柱,0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min^(-1),柱温为40℃,进样量为2μL;质谱采用加热电喷雾离子源(HESI),负离子模式和平行反应监测(PRM)模式,喷雾电压为3.0 kV (-)。结果:所建方法在一定范围内均呈现良好线性关系(r≥0.999 4);精密度、重复性良好,供试样品在48 h内稳定性良好,加样回收率在94.9%~105.2%,RSD为0.50%~5.2%。含量测定结果表明牛黄蛇胆川贝液中牛磺胆酸、胆酸、猪胆酸、甘氨胆酸、猪去氧胆酸含量较高,且不同厂家之间含量存在较大差异,聚类分析可分为3类。统计发现,Ⅱ类中的牛磺胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、3α-羟基-7-酮基-5β-胆烷酸、12-酮脱氧胆酸、胆酸含量明显高于类别Ⅱ、Ⅲ,类别Ⅲ中猪胆酸含量明显高于类别Ⅰ和Ⅱ。结论:本方法便捷、高效、准确、灵敏,可用于牛黄蛇胆川贝液中22个胆酸成分的测定。

清开灵系列品种中胆酸和猪去氧胆酸的通用检测定方法研究

目的:建立一个通用检测方法测定清开灵系列品种中胆酸和猪去氧胆酸的含量。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%乙酸溶液(40:60,V/V),流速为0.8mL·min-1,蒸发光散射检测器的漂移管温度为110℃,N2流速为2.0mL·min-1,进样量为5～25μL。结果:胆酸和猪去氧胆酸的进样量均在0.5～3.5μg(r=0.9999或0.9998)范围内与各自峰面积积分值呈良好的对数线性关系;不同剂型清开灵系列品种中胆酸的平均加样回收率在93.8%～99.5%之间,RSD在0.8%～4.6%之间(n=6);猪去氧胆酸的平均加样回收率在95.9%～105.6%之间,RSD在0.9%～4.9%之间(n=6)。结论:该方法简便、准确、分离效果好、专属性强,可作为清开灵系列品种的通用检测方法。