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Transplantation of human placental chorionic plate-derived mesenchymal stem cells for repair of neurological damage in neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy
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作者 Lulu Xue Ruolan Du +8 位作者 Ning Bi Qiuxia Xiao Yifei Sun Ruize Niu Yaxin Tan Li Chen Jia Liu Tinghua Wang Liulin Xiong 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2024年第9期2027-2035,共9页
Neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy is often associated with permanent cerebral palsy,neurosensory impairments,and cognitive deficits,and there is no effective treatment for complications related to hypoxic-ische... Neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy is often associated with permanent cerebral palsy,neurosensory impairments,and cognitive deficits,and there is no effective treatment for complications related to hypoxic-ischemic encephalopathy.The therapeutic potential of human placental chorionic plate-derived mesenchymal stem cells for various diseases has been explored.However,the potential use of human placental chorionic plate-derived mesenchymal stem cells for the treatment of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy has not yet been investigated.In this study,we injected human placental chorionic plate-derived mesenchymal stem cells into the lateral ventricle of a neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy rat model and observed significant improvements in both cognitive and motor function.Protein chip analysis showed that interleukin-3 expression was significantly elevated in neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy model rats.Following transplantation of human placental chorionic plate-derived mesenchymal stem cells,interleukin-3 expression was downregulated.To further investigate the role of interleukin-3 in neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy,we established an in vitro SH-SY5Y cell model of hypoxic-ischemic injury through oxygen-glucose deprivation and silenced interleukin-3 expression using small interfering RNA.We found that the activity and proliferation of SH-SY5Y cells subjected to oxygen-glucose deprivation were further suppressed by interleukin-3 knockdown.Furthermore,interleukin-3 knockout exacerbated neuronal damage and cognitive and motor function impairment in rat models of hypoxic-ischemic encephalopathy.The findings suggest that transplantation of hpcMSCs ameliorated behavioral impairments in a rat model of hypoxic-ischemic encephalopathy,and this effect was mediated by interleukin-3-dependent neurological function. 展开更多
关键词 behavioral evaluations gene knockout human neuroblastoma cells(SH-SY5Y) human placental chorionic derived mesenchymal stem cells INTERLEUKIN-3 neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy nerve injury oxygen-glucose deprivation protein chip small interfering RNA
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Mesenchymal stromal cells from human perinatal tissues: From biology to cell therapy 被引量:16
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作者 Karen Bieback Irena Brinkmann 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2010年第4期81-92,共12页
Cell-based regenerative medicine is of growing interest in biomedical research. The role of stem cells in this context is under intense scrutiny and may help to define principles of organ regeneration and develop inno... Cell-based regenerative medicine is of growing interest in biomedical research. The role of stem cells in this context is under intense scrutiny and may help to define principles of organ regeneration and develop innovative therapeutics for organ failure. Utilizing stem and progenitor cells for organ replacement has been conducted for many years when performing hematopoietic stem cell transplantation. Since the first successful transplantation of umbilical cord blood to treat hematological malignancies, non-hematopoietic stem and progenitor cell populations have recently been identified within umbilical cord blood and other perinatal and fetal tissues. A cell population entitled mesenchymal stromal cells (MSCs) emerged as one of the most intensely studied as it subsumes a variety of capacities: MSCs can differentiate into various subtypes of the mesodermal lineage, they secrete a large array of trophic factors suitable of recruiting endogenous repair processes and they are immunomodulatory.Focusing on perinatal tissues to isolate MSCs, we will discuss some of the challenges associated with these cell types concentrating on concepts of isolation and expansion, the comparison with cells derived from other tissue sources, regarding phenotype and differentiation capacity and finally their therapeutic potential. 展开更多
关键词 mesenchymal STROMAL cells Umbilical CORD CORD blood Regenerative medicine cell therapy stem cells AMNION chorion PERINATAL Discarded tissue Fetal membranes
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绒毛间充质干细胞对滋养细胞增殖和自噬的影响
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作者 侯蕾 刘世国 +3 位作者 张妍 高国强 初怡静 叶元华 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2023年第1期87-92,共6页
目的探讨人胎盘绒毛间充质干细胞(CV-MSC)对滋养细胞增殖和自噬的影响。方法在低氧条件下应用CV-MSC条件培养液处理HTR-8和JEG-3滋养细胞株。应用CCK-8试剂盒检测滋养细胞的增殖能力,采用免疫荧光法检测自噬蛋白LC-3B在滋养细胞内的表达... 目的探讨人胎盘绒毛间充质干细胞(CV-MSC)对滋养细胞增殖和自噬的影响。方法在低氧条件下应用CV-MSC条件培养液处理HTR-8和JEG-3滋养细胞株。应用CCK-8试剂盒检测滋养细胞的增殖能力,采用免疫荧光法检测自噬蛋白LC-3B在滋养细胞内的表达,采用蛋白印迹法(Western blot)检测滋养细胞内自噬相关蛋白LC-3B、BECN1和P62的表达水平,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测滋养细胞内Cludin-11(CLDN11)以及雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关基因mTOR、S6K1的mRNA表达水平,采用Western blot检测滋养细胞内CLDN11、mTOR、S6K1的蛋白表达水平及磷酸化程度。结果与低氧组相比,低氧+CV-MSC条件培养液处理组HTR-8和JEG-3滋养细胞增殖的吸光度值显著增高(F=51.9、26.9,P<0.05),CLDN11、mTOR、S6K1的mRNA及蛋白表达水平显著降低(F=3.9~9.1,P<0.01),LC-3B、BECN1蛋白表达水平增加,P62蛋白表达水平降低。结论低氧条件下CV-MSC可以通过抑制CLDN11表达、失活mTOR通路、增强细胞自噬促进滋养细胞的增殖。 展开更多
关键词 绒毛膜绒毛 间质干细胞 壳牢素类 mTOR调节相关蛋白 细胞增殖 自噬
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人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养:组织块法的优化 被引量:1
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作者 金宇林 吴洁莹 +9 位作者 陆琰 陈劲松 李发涛 唐婕 刘东 梁绮华 李焱 汤雪薇 谢闺娥 吴韶清 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第21期3388-3393,共6页
背景:关于人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养方法的研究很多,但是如何简便、快捷获得大量原代培养间充质干细胞的问题尚未解决。目的:探讨优化人胎盘绒毛膜间充质干细胞体外分离培养组织块法的最佳方法。方法:无菌条件下,取正常足月剖... 背景:关于人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养方法的研究很多,但是如何简便、快捷获得大量原代培养间充质干细胞的问题尚未解决。目的:探讨优化人胎盘绒毛膜间充质干细胞体外分离培养组织块法的最佳方法。方法:无菌条件下,取正常足月剖宫产胎盘绒毛膜,用匀浆器处理组织块,采用组织块法贴壁分离培养人胎盘绒毛膜间充质干细胞,经初次培养的组织块进行再次接种培养。结果与结论:用电动匀浆器处理人胎盘绒毛膜省时省力,组织分散度和去除红细胞效果好。初次培养和再次培养获得细胞的平均时间分别为(17.73±1.14)d和(10.03±1.30)d。每个Φ100 mm培养皿获得的原代细胞分别为(6.97±0.98)×10~5个和(13.82±1.44)×10~5个。获得的贴壁细胞呈典型的成纤维细胞形态,呈平行或漩涡状生长,高表达CD90、CD73、CD105,而CD45、CD34、CD14、CD19、HLA-DR为阴性。细胞可向成骨、成脂方向诱导分化。结果表明优化的方法能够简便、快捷地处理人胎盘绒毛膜组织,获得大量的原代间充质干细胞。 展开更多
关键词 胎盘 绒毛膜 间质干细胞 细胞培养技术 组织工程 干细胞 培养 间充质干细胞 细胞培养 组织块法 优化 匀浆器 国家自然科学基金
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低温冻存对人绒毛膜来源的间充质干细胞多向分化潜能的影响 被引量:1
5
作者 陈霞 尹晓娟 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期1733-1735,F0003,共4页
目的探讨低温保存对人绒毛膜来源的间充质干细胞(hCDMSC)体外生长特性和多向分化潜能的影响,验证冻存后hCDMSC作为组织工程种子细胞的可行性。方法用胶原酶和胰蛋白酶法消化胎盘组织基蜕膜,传代培养,取第4代细胞置于液氮深低温(-196℃)... 目的探讨低温保存对人绒毛膜来源的间充质干细胞(hCDMSC)体外生长特性和多向分化潜能的影响,验证冻存后hCDMSC作为组织工程种子细胞的可行性。方法用胶原酶和胰蛋白酶法消化胎盘组织基蜕膜,传代培养,取第4代细胞置于液氮深低温(-196℃)条件下冻存3个月后复苏,采用MTT法测定复苏hCDMSC的增殖活性,茜素红和油红O染色检测其成骨、成脂诱导分化情况。未经低温保存的hCDMSC作为对照。结果低温保存复苏后的hCDMSC增殖活性、多向诱导分化能力与未冻存细胞比较,差异无统计学意义,细胞的茜素红和油红O染色呈阳性反应。结论低温保存对hCDMSC体外生长能力和多向诱导分化能力没有影响,冻存后hCDMSC可以作为组织工程的种子细胞。 展开更多
关键词 间质干细胞 绒毛膜绒毛取样 低温保存 细胞分化 细胞增殖
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胶原海绵促进人绒毛膜来源间充质干细胞向血管内皮细胞分化的研究 被引量:1
6
作者 苗宗宁 孙鸿丽 薛一峰 《生物医学工程研究》 2019年第1期99-104,共6页
探索人绒毛膜来源间充质干细胞与胶原海绵的生物相容性及复合培养向血管内皮细胞分化。应用IV型胶原酶消化的方法,从胎盘组织中分离人绒毛膜间充质细胞,培养第2代细胞,进行内皮诱导后,种植于Matrigel基质胶并观察成管情况;细胞与胶原海... 探索人绒毛膜来源间充质干细胞与胶原海绵的生物相容性及复合培养向血管内皮细胞分化。应用IV型胶原酶消化的方法,从胎盘组织中分离人绒毛膜间充质细胞,培养第2代细胞,进行内皮诱导后,种植于Matrigel基质胶并观察成管情况;细胞与胶原海绵复合培养,通过HE染色以及免疫荧光染色,鉴定CD31和vWF的表达。人绒毛膜间充质干细胞向血管内皮定向诱导2周后,形态由长梭形、旋涡状生长逐步变为圆形、铺路石状,免疫荧光染色结果显示CD31和vWF阳性表达;种植于Matrigel胶12 h后表现出成管功能,与胶原海绵复合培养,经HE染色,可见细胞分布于材料内部,免疫荧光染色可见CD31和vWF阳性表达细胞。人绒毛膜间充质干细胞具有定向诱导分化为血管内皮细胞的潜能,胶原海绵具有良好的生物相容性,可以作为组织工程研究的支架材料。 展开更多
关键词 胶原海绵 绒毛膜 间充质干细胞 血管内皮细胞 分化
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人绒毛膜来源间充质干细胞体外成血管能力探讨
7
作者 钱锦 彭海林 黄颖 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2019年第5期6-11,共6页
目的探讨体外分离培养人绒毛膜来源间充质干细胞的方法,评价诱导的间充质干细胞分化为血管内皮细胞及体外成血管的可行性。方法从人胎盘绒毛膜组织中分离间充质干细胞及培养,采用流式细胞术检测细胞表面抗原表达;培养第2代细胞进行血管... 目的探讨体外分离培养人绒毛膜来源间充质干细胞的方法,评价诱导的间充质干细胞分化为血管内皮细胞及体外成血管的可行性。方法从人胎盘绒毛膜组织中分离间充质干细胞及培养,采用流式细胞术检测细胞表面抗原表达;培养第2代细胞进行血管内皮细胞分化诱导,2周后采用免疫荧光染色法鉴定Matrigel基质胶中CD31和vWF的表达。结果从人胎盘绒毛膜组织中分离培养的细胞表达CD73、CD90和CD105,不表达CD34和HLA-DR。人绒毛膜间充质干细胞向血管内皮细胞定向诱导2周后,形态由长梭状逐步变为圆形、铺路石状,并在Matrigel基质胶上培养12 h后有管腔样结构形成,免疫荧光染色显示管腔样结构的细胞表达血管内皮细胞表面标记物CD31和vWF因子。结论胎盘绒毛膜可用于分离培养间充质干细胞,培养的细胞具有诱导分化为血管内皮细胞的潜能。 展开更多
关键词 绒毛膜 间充质干细胞 血管内皮细胞
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人脐带、胎盘绒毛膜来源间充质干细胞的生物学特性比较研究 被引量:10
8
作者 韩之波 杨舟鑫 +6 位作者 池颖 王有为 王涛 及月茹 杨萍 孟磊 韩忠朝 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期692-696,共5页
由于组织来源和增殖能力的优势,与骨髓间充质干细胞(MSC)相比,脐带和胎盘来源的MSC更具有临床应用前景,但脐带和胎盘来源MSC的生物学特性是否有差异值得进一步研究。本研究比较人脐带、胎盘绒毛膜来源MSC的生物学特性。将胎盘、脐带冲... 由于组织来源和增殖能力的优势,与骨髓间充质干细胞(MSC)相比,脐带和胎盘来源的MSC更具有临床应用前景,但脐带和胎盘来源MSC的生物学特性是否有差异值得进一步研究。本研究比较人脐带、胎盘绒毛膜来源MSC的生物学特性。将胎盘、脐带冲洗干净后,通过酶消化法分离脐带、胎盘来源的MSC。通过短串联重复序列分析(STR)检测细胞是否均来源于胎儿组织,用MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术分析细胞表型,使用不同的诱导分化培养液检测其多向分化的能力。将MSC与植物血凝素刺激的外周血单个核细胞共培养,用酶联免疫吸附试验检测上清γ-干扰素的水平。结果表明,STR分析证实所得到的细胞均来源于胎儿组织,这两种细胞生长呈典型的成纤维细胞形态;细胞表达常见的MSC表面标记CD90、CD73、CD105、CD44,不表达CD45,CD11b和CD34;在不同的条件培养液培养下,细胞均可向成骨、成脂方向分化,但在成脂分化方面,绒毛膜来源MSC能形成更大的脂滴。结论:所得到的细胞均为MSC,均能抑制植物血凝素刺激的人外周血单个核细胞分泌γ-干扰素,且绒毛膜来源的MSC具有更强的抑制能力。这使得绒毛膜来源的MSC在治疗自身免疫系统疾病方面可能具有更大的优势。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 绒毛膜间充质干细胞 生物学特性 免疫调节
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三种人胎盘组织来源间充质干细胞的生物学特性 被引量:3
9
作者 王留娣 刘威 +3 位作者 谢园园 高天芸 黄霏霏 王斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第9期1377-1383,共7页
背景:胎盘组织结构复杂,包括胎儿侧的羊膜、绒毛膜以及母体侧的蜕膜等。尽管一些文献已经报道这3种组织来源间充质干细胞具有一些共有的生物学特性,但是对于来自同一胎盘不同组织来源间充质干细胞是否存在不同的生物学特性,目前仍缺乏... 背景:胎盘组织结构复杂,包括胎儿侧的羊膜、绒毛膜以及母体侧的蜕膜等。尽管一些文献已经报道这3种组织来源间充质干细胞具有一些共有的生物学特性,但是对于来自同一胎盘不同组织来源间充质干细胞是否存在不同的生物学特性,目前仍缺乏定量的研究分析。目的:探讨人胎盘不同组织来源间充质干细胞的生物学特性,包括分化潜能和免疫调节功能。方法:利用酶消化法从1例男婴胎盘组织分离羊膜来源间充质干细胞、绒毛膜来源间充质干细胞和蜕膜来源间充质干细胞。系统性研究这3种间充质干细胞的生物学特性,包括细胞形态、表面标志物表达、核型分析、成脂、成骨分化能力以及调节性T细胞的增殖能力。结果与结论:(1)3种细胞均呈成纤维细胞形态,均表达间充质干细胞的表面标志物:高表达CD73、CD90和CD105,低表达CD14、CD19、CD34、CD45和HLA-DR;(2)羊膜、绒毛膜间充质干细胞核型与胎儿相同,蜕膜间充质干细胞核型与母体相同;(3)3种间充质干细胞成脂分化能力存在显著性差异,依次为蜕膜间充质干细胞>绒毛膜间充质干细胞>羊膜间充质干细胞(P <0.05);相反,羊膜间充质干细胞的成骨分化能力明显高于蜕膜间充质干细胞(P <0.05);(4)羊膜间充质干细胞和绒毛膜间充质干细胞促进调节性T细胞增殖的能力显著高于蜕膜间充质干细胞;(5)结果表明,人胎盘羊膜、绒毛膜、蜕膜组织来源间充质干细胞具有不同的核型、成脂、成骨分化潜能和免疫调节能力,为不同种子细胞治疗相关疾病达到最佳效果提供了一定的参考。 展开更多
关键词 胎盘组织 间充质干细胞 羊膜 绒毛膜 蜕膜 羊膜间充质干细胞 绒毛膜间充质干细胞 蜕膜间充质干细胞 国家自然科学基金 胎盘 间质干细胞 免疫调节 细胞分化 组织工程
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长期体外扩增降低胎盘绒毛膜间充质干细胞的免疫调节功能 被引量:1
10
作者 杨舟鑫 及月茹 +3 位作者 韩之波 王有为 孟磊 韩忠朝 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1552-1556,共5页
本研究主要探讨长期体外培养的胎盘绒毛膜间充质干细胞的各项生物学活性和免疫调节功能的变化。显微镜检观察比较第3代和第9代胎盘绒毛膜的形态,用流式细胞术分析它们的免疫表型。把第3代和第9代CV-MSC与PHA活化的PBMNC共培养,ELISA方... 本研究主要探讨长期体外培养的胎盘绒毛膜间充质干细胞的各项生物学活性和免疫调节功能的变化。显微镜检观察比较第3代和第9代胎盘绒毛膜的形态,用流式细胞术分析它们的免疫表型。把第3代和第9代CV-MSC与PHA活化的PBMNC共培养,ELISA方法检测其IFN-γ的分泌水平。实时定量PCR的方法检测CV-MSC细胞中COX-2,HGF和HLA-G的表达。结果显示:经过长期传代后,虽然CV-MSC的基本细胞形态和大部分表面标记如CD31,CD34,CD44,CD45,CD62L,CD73,CD90,CD105,CD117,CD151,CD235a,CD271和HLA-DR等都没有明显的变化,但其表面CD49d表达明显上调,长期传代后其免疫调节功能明显下降,免疫调节相关的分子COX-2和HGF的表达也略有下调,而HLA-G表达并未明显的变化。结论:长期体外扩增改变CV-MSC的CD49d的表达,并降低CV-MSC的免疫调节功能。 展开更多
关键词 长期培养 胎盘绒毛膜间充质干细胞 免疫调节
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基于细胞生物学方法比较5种不同组织来源间充质干细胞的特征 被引量:7
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作者 刘超 张丽君 +7 位作者 陶昊 杜心洁 王芮 李文菁 丁淑梅 王怡 姜磊 黄玉香 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第33期5334-5340,共7页
背景:间充质干细胞的来源以及分离方法越来越多样,充分认识到这些间充质干细胞的异同,将有助于间充质干细胞在临床中更加合理规范的应用。目的:比较不同组织来源间充质干细胞的生物学特征。方法:采集剖宫产产妇在生育后脱落的脐带、胎... 背景:间充质干细胞的来源以及分离方法越来越多样,充分认识到这些间充质干细胞的异同,将有助于间充质干细胞在临床中更加合理规范的应用。目的:比较不同组织来源间充质干细胞的生物学特征。方法:采集剖宫产产妇在生育后脱落的脐带、胎盘以及部分脂肪组织,采用胰酶消化法或组织块贴壁法培养出底蜕膜间充质干细胞、绒毛膜间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、脐带胎盘连接处间充质干细胞、脐带间充质干细胞,所用的干细胞培养基有3 种:含胎牛血清的干细胞培养基、含脐血裂解物的干细胞培养基、含无血清添加物的干细胞培养基。检测不同培养条件下的细胞直径、表面标志物以及多向分化能力,检索GEO数据库分析不同间充质干细胞的基因表达情况。结果与结论:①不同培养条件影响细胞大小和细胞周期,其中无血清培养体系培养的间充质干细胞直径偏小,而脐血裂解物干细胞培养基能够增加胎盘源间充质干细胞的直径;②5 种间充质干细胞有类似的表面标志物,都具有成骨、成软骨和成脂肪分化能力,其中脂肪间充质干细胞成脂肪分化能力更强;③脂肪间充质干细胞相比于与其他4 种干细胞在基因表达上存在较大差异,具有更复杂细胞基质成分。 展开更多
关键词 间充质干细胞 组织块培养法 胰酶消化法 脐带胎盘连接处间充质干细胞 脐带间充质干细胞 脂肪间充质干细胞 底蜕膜间充质干细胞 绒毛膜间充质干细胞
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低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNA筛选 被引量:1
12
作者 孙逊沙 吴洁莹 +6 位作者 陈劲松 陆琰 喻秋霞 李茹 王丹 李焱 吴韶清 《中国医药导报》 CAS 2018年第18期9-11,共3页
目的探讨环状RNA在人胎盘绒毛膜间充质干细胞低氧预处理和常氧培养中表达谱的差异。方法利用芯片技术检测3例低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞及其相应对照的常氧培养细胞的环状RNA表达,分析两者差异表达的环状RNA及其结合mi RNA。... 目的探讨环状RNA在人胎盘绒毛膜间充质干细胞低氧预处理和常氧培养中表达谱的差异。方法利用芯片技术检测3例低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞及其相应对照的常氧培养细胞的环状RNA表达,分析两者差异表达的环状RNA及其结合mi RNA。结果在检测的13 617条环状RNA中,有分析结果的环状RNA12 114条,低氧和常氧培养人胎盘间充质干细胞差异表达环状RNA共102条,其中低氧中表达上调的85条,下调的17条(倍数变化>1.5倍且P<0.05),而表达差异倍数变化大于2倍以上的环状RNA有27条,且均为上调表达。每个环状RNA预测到5个结合mi RNA。结论低氧预处理使得人胎盘绒毛膜间充质干细胞的环状RNA表达谱发生了显著变化,这些环状RNA可能和低氧预处理有关。 展开更多
关键词 低氧 人胎盘绒毛膜间充质干细胞 环状RNA 表达谱
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胎盘绒毛间充质干细胞在大鼠急性心肌梗死修复中的作用 被引量:1
13
作者 马榕 姚玲玉 +8 位作者 吴昱成 尹大猛 王石鸣 蒋东 刘磊 尤欣然 郑世营 李芳 陈永珍 《南通大学学报(医学版)》 2015年第6期491-494,484,共4页
目的 :观察胎盘绒毛膜间充质干细胞(placenta chorionic mesenchymal stem cells,PCMSCs)改善大鼠心功能的效果,进一步研究其作用机制。方法:选取剖宫产足月胎儿的胎盘,分离培养PCMSCs细胞,流式细胞仪检测PCMSCs细胞表型、特异性染色检... 目的 :观察胎盘绒毛膜间充质干细胞(placenta chorionic mesenchymal stem cells,PCMSCs)改善大鼠心功能的效果,进一步研究其作用机制。方法:选取剖宫产足月胎儿的胎盘,分离培养PCMSCs细胞,流式细胞仪检测PCMSCs细胞表型、特异性染色检测PCMSCs三系分化潜能及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)受体1(kinase insert domain-containing receptor,KDR)的表达。建立大鼠心肌梗死模型,建模成功2周后,开胸在心室壁梗死区及边缘区行细胞移植。实验动物随机分为3组:A组(对照组),B组[骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)移植组],C组(PCMSCs移植组)。细胞移植4周后,超声心动图检查大鼠心脏功能的改善情况、荧光显微镜观察移植细胞的存活情况。结果:流式细胞检测表明,培养的第3代PCMSCs高表达CD73、CD90、CD105以及KDR,不表达血系细胞标志CD14、CD34、CD45、HLA-DR;三系分化潜能实验表明PCMSCs具有和BMSCs相似的分化潜能;向内皮细胞诱导后PCMSCs表达内皮细胞的标志分子CD31;免疫荧光显微镜观察显示细胞移植4周后,局部心梗区仍有GFP+PCMSCs细胞存活;心超结果提示PCMSCs移植组心功能明显改善,与其余两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PCMSCs移植对大鼠急性心肌梗死后心功能恢复效果显著。 展开更多
关键词 胎盘绒毛膜间充质干细胞 心肌梗死 细胞移植 修复 大鼠
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hCMSC体外培养的优化及生物学特性的初步分析
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作者 徐小霞 李芳 +3 位作者 苗宗宁 孙静 许云云 张学光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1009-1013,1018,共6页
目的:探索从人胎盘绒毛组织体外分离培养获得间充质干细胞(hCMSC)和hCMSC体外有效扩增的方法,并对hCMSC生物学特性作初步分析。方法:免疫组织化学染色确定胎盘绒毛组织中间充质干细胞的组织分布,选取相应的绒毛组织和采用Ⅳ型胶原酶消化... 目的:探索从人胎盘绒毛组织体外分离培养获得间充质干细胞(hCMSC)和hCMSC体外有效扩增的方法,并对hCMSC生物学特性作初步分析。方法:免疫组织化学染色确定胎盘绒毛组织中间充质干细胞的组织分布,选取相应的绒毛组织和采用Ⅳ型胶原酶消化法,获得细胞悬液,进行原代传代培养;流式细胞术检测细胞表面标志,采用细胞计数和MTT法分析细胞的增殖;叔丁对甲氧酚(Butylated hydroxyanisole,BHA)和DMSO联合诱导hCMSC向神经元样细胞分化;RT-PCR分析flt3基因表达。结果:免疫组织化学染色结果显示,胎盘绒毛中轴血管周围富有CD105、CD90阳性的间充质干细胞,采用机械分离和Ⅳ型酶消化法获取绒毛层富含hCMSC的组织细胞;bFGF是良好的hCMSC体外增殖因子,而FL对人胎盘绒毛层间充质干细胞具有更明显的促增殖作用;体外扩增的hCMSC高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD14、CD34、CD45、HLA-DR,以及免疫负性调控分子PDL-1呈现表达,并且具有向神经元样细胞分化的潜能。结论:胎盘绒毛组织中存在低免疫原性的间充质干细胞,bFGF和FL(flt3 ligand)能有效促进胎盘绒毛层间充质干细胞体外增殖且保持其分化潜能。 展开更多
关键词 胎盘绒毛 间充质干细胞 培养条件 FL
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基于转录组数据探讨不同组织来源的间充质干细胞的生物学异质性
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作者 王丽波 丁凯 +4 位作者 娄云云 慈小燕 张英驰 李虹 闫凤英 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第6期1259-1266,共8页
目的基于转录组数据探讨脂肪组织(AD)、胎盘绒毛膜(HC)、胎盘羊膜(HA)和脐带(UC)来源的间充质干细胞(MSCs)的生物学异质性。方法从人AD、HC、HA和UC中分离MSCs,流式细胞术检测细胞表面阳性标志物(CD73、CD90、CD105)和阴性标志物(CD14、... 目的基于转录组数据探讨脂肪组织(AD)、胎盘绒毛膜(HC)、胎盘羊膜(HA)和脐带(UC)来源的间充质干细胞(MSCs)的生物学异质性。方法从人AD、HC、HA和UC中分离MSCs,流式细胞术检测细胞表面阳性标志物(CD73、CD90、CD105)和阴性标志物(CD14、CD34、CD45、CD79a、HLA-DR)的表达,改良版茜素红染色、油红O染色、阿利辛蓝染色检测细胞的三系分化能力;Trizol法提取细胞总RNA,用于转录组测序,应用GFOLD(1.1.4)进行差异基因表达分析;使用DAVID数据库对差异表达的基因进行基因本体(GO)功能富集分析。结果P2代的不同来源的MSCs,CD73、CD90、CD105均为阳性表达,CD14、CD34、CD45、CD79a、HLA-DR均为阴性表达,培养的MSCs均具有三系分化能力。新生儿来源的MSCs(HA、HC和UC)相关性大于成人来源的MSCs(AD),在功能富集分析中,与来源于AD的MSCs相比,HA和UC来源的MSCs表现出更优异的增殖能力。来源于AD的MSCs有更好的分化潜力以及促进血管生成能力,而来源于UC的MSCs支持神经元的发育并分泌可以调节免疫环境的趋化因子和抗炎因子。结论不同来源的MSCs具有不同的生物学特征,提示不同来源的MSCs可能具有不同临床应用的最佳选择。 展开更多
关键词 间充质干细胞 胎盘绒毛膜 胎盘羊膜 脐带 脂肪 转录组
原文传递
无血清培养对人绒毛膜来源间充质干细胞免疫活性的影响
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作者 薛一峰 黄建荣 +1 位作者 苗宗宁 孙鸿丽 《国际免疫学杂志》 CAS 2016年第6期551-555,共5页
目的 评价人绒毛膜来源间充质干细胞(MSCs)在无血清培养体系中的免疫活性,探索干细胞安全的应用于临床的条件.方法 应用无血清与含10%胎牛血清培养基培养人绒毛膜来源MSCs,比较两种培养条件下培养细胞的形态、免疫表型、分化潜能及... 目的 评价人绒毛膜来源间充质干细胞(MSCs)在无血清培养体系中的免疫活性,探索干细胞安全的应用于临床的条件.方法 应用无血清与含10%胎牛血清培养基培养人绒毛膜来源MSCs,比较两种培养条件下培养细胞的形态、免疫表型、分化潜能及对混合淋巴细胞反应的抑制作用等生物学特性.结果 两种方法培养的细胞形态相似,表达CD73、CD90、CD105,不表达CD34、人类白细胞抗原(HLA)-DR;具有多向分化潜能,同样能明显抑制混合淋巴细胞反应体系中淋巴细胞的增殖,抑制率与加入的干细胞数量成正比,可以减少混合淋巴细胞反应中白细胞介素2、γ-干扰素的分泌.结论 人绒毛膜来源间充质干细胞经无血清培养后仍保持原有的细胞形态、免疫表型、多向分化等生物学特性,没有改变免疫学活性.无血清培养可取代有血清培养用于细胞培养,避免经有血清培养的干细胞移植等临床应用研究引起的免疫原性反应及人畜共患病. 展开更多
关键词 无血清培养 人绒毛膜来源间充质干细胞 免疫活性
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胎盘各组织来源间充质干细胞生物学特性比较 被引量:3
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作者 马树立 李芳 +4 位作者 徐彪 梁含思 孙青 秦明德 张学光 《国际免疫学杂志》 CAS 2013年第5期397-401,共5页
目的 分析比较胎盘不同组织来源间充质干细胞(MSCs)的生物学特性及其分化潜能.方法 建立羊膜间充质(AMSCs)、绒毛膜间充质(CMSCs)体外扩增体系,流式细胞仪分析两群MSCs细胞表型,免疫组织化学染色观察绒毛膜中CMSCs分布及负性共刺... 目的 分析比较胎盘不同组织来源间充质干细胞(MSCs)的生物学特性及其分化潜能.方法 建立羊膜间充质(AMSCs)、绒毛膜间充质(CMSCs)体外扩增体系,流式细胞仪分析两群MSCs细胞表型,免疫组织化学染色观察绒毛膜中CMSCs分布及负性共刺激分子程序性死亡配体-1(PD-L1)表达,将两群MSCs分别向神经元诱导,RT-PCR检测诱导前后不同神经特异性蛋白的表达情况.结果 AMSCs与CMSCs均高表达CD90、CD73和CD105,不表达CD14、CD34、CD45和HLA-DR.与此同时,CMSCs表达协同刺激分子PD-L1,而AMSCs不表达;AMSCs本身表达Musashi-1、Nestin、β-tubulinⅢ和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP),诱导后较易出现神经丝蛋白(NF)的表达;绒毛膜中可见CD90、CD166及PD-L1阳性表达的CMSCs紧贴滋养细胞分布.结论 AMSCs具有良好的神经生物学特性,在特定条件下较CMSCs更易于向神经元或神经胶质细胞分化,CMSCs则是作为研究MSCs免疫调节机制理想的细胞来源. 展开更多
关键词 羊膜间充质干细胞 绒毛膜间充质干细胞 程序性死亡配体-1 神经特异性蛋白
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人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养方法研究
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作者 陈凤 卿玲 +2 位作者 崔璐 王淼 王菲 《重庆医学》 CAS 2022年第1期122-126,共5页
目的比较不同方法分离培养人胎盘绒毛膜间充质干细胞(MSC)的差异,并鉴定其生物学特性。方法选取健康孕妇胎盘绒毛膜组织分别采用组织块贴壁法、胶原酶消化法、胰酶消化法进行分离培养,流式细胞仪分析细胞表面标志物的表达,台盼蓝染色计... 目的比较不同方法分离培养人胎盘绒毛膜间充质干细胞(MSC)的差异,并鉴定其生物学特性。方法选取健康孕妇胎盘绒毛膜组织分别采用组织块贴壁法、胶原酶消化法、胰酶消化法进行分离培养,流式细胞仪分析细胞表面标志物的表达,台盼蓝染色计数方法绘制细胞生长曲线并计算群体倍增时间,逆转录聚合酶链反应和成脂诱导分化试剂盒分别检测细胞多能性相关基因及分化潜能。结果胶原酶消化法原代培养周期均明显短于组织块贴壁法和胰酶消化法,培养相同时间内获得的活细胞数量均明显高于组织块贴壁法和胰酶消化法,差异均有统计学意义(P<0.05);3种方法来源细胞均表达MSC表面标志物——CD44、CD105,不表达造血细胞表面标志物——CD34、CD45;3种方法来源细胞生长曲线均呈“S”形,第4代细胞群体倍增时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);3种方法获得细胞均表达多能性相关基因——Oct4、Nanog,且具有成脂分化能力。结论组织块贴壁法、胶原酶消化法、胰酶消化法均可分离培养获得绒毛膜MSC,但结合培养时间及细胞纯度等因素认为,胶原酶消化法更具有优势。 展开更多
关键词 胎盘绒毛膜间充质干细胞 组织块贴壁 胶原酶 胰酶 生物学特性
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人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人滋养层细胞的作用
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作者 张珦 李惠 +3 位作者 章宜芬 范竞 李长印 蔡金洋 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第7期1253-1258,共6页
目的:探讨人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞凋亡的影响。方法:通过CCK8细胞活力检测试剂盒测定白藜芦醇及其与人脐带间充质干细胞条件培养基共同处理人绒毛膜外滋养层细胞HTR8后对细胞增殖及活性的影响... 目的:探讨人脐带间充质干细胞条件培养基联合白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞凋亡的影响。方法:通过CCK8细胞活力检测试剂盒测定白藜芦醇及其与人脐带间充质干细胞条件培养基共同处理人绒毛膜外滋养层细胞HTR8后对细胞增殖及活性的影响;细胞迁移试验检测白藜芦醇和人脐带间充质干细胞条件培养基对细胞迁移能力的影响;显微镜观察细胞形态,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测白藜芦醇和人脐带间充质干细胞条件培养基对细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2以及迁移相关蛋白MMP-9表达的影响。结果:白藜芦醇能够抑制HTR8细胞增殖,抑制细胞迁移及MMP-9蛋白的表达,改变Bax和Bcl-2蛋白表达诱导细胞凋亡的作用。而人脐带间充质干细胞条件培养基能够逆转白藜芦醇对细胞的抑制作用。结论:人脐带间充质干细胞条件培养基能够通过调控Bax、Bcl-2、MMP-9的蛋白表达逆转白藜芦醇对人绒毛膜外滋养层细胞的抑制作用。人脐带间充质干细胞条件培养基可作为潜在的治疗人绒毛膜外滋养层细胞功能障碍的临床手段,孕妇需要小心使用白藜芦醇。 展开更多
关键词 白藜芦醇 人脐带间充质干细胞条件培养基 人绒毛膜外滋养层细胞 细胞迁移 细胞凋亡
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