Bohai crude oil identification by gas chromatogram fingerprinting quantitative analysis coupled with cluster analysis

By gas chromatogram, six crude oils fingerprinting distributed in four oilfields and four oil platforms were analyzed and the corre- sponding normal paraffin hydrocarbon （ including pristane and phytane） concentration was obtained by the internal standard methed. The normal paraffin hydrocarbon distribution patterns of six crude oils were built and compared. The cluster analysis on the normal paraffin hydrocarbon concentration was conducted for classification and some ratios of oils were used for oils comparison. The results indicated： there was a clear difference within different crude oils in different oil fields and a small difference between the crude oils in the same oil platform. The normal paraffin hydrocarbon distribution pattern and ratios, as well as the cluster analysis on the nomad paraffin hydrocarbon concentration can have a better differentiation result for the crude oils with small difference than the original gas chromatogram.

HPLC Fingerprint Chromatogram of Tetracera asiatica Produced in Guangxi

[Objectives] To establish fingerprint chromatogram of Tetracera asiatica and provide basis for controlling and assessing the quality of Tetracera asiatica.[Methods] The high-performance liquid chromatography( HPLC) method was used. Phenomenex C18( 5 μm,4. 6 ×250 mm),acetonitrile-0. 1% phosphoric acid water,gradient elution,flow rate 1 m L/min,detection wavelength 214 nm,and column temperature 25 ℃. The fingerprint chromatogram of 10 batches of samples of Tetracera asiatica was determined for similarity comparison. [Results] It established HPLC fingerprint chromatogram of Tetracera asiatica produced in Guangxi,determined a total of 13 common fingerprint peaks. The similarity of 10 batches of Tetracera asiatica was > 0. 9.[Conclusions] The method is rapid and accurate and can provide references for assessing the quality of Tetracera asiatica.

三门峡多油分烟叶有机酸气相指纹图谱的建立

【目的】建立三门峡多油分烟叶的有机酸气相(GC)指纹图谱,明确多油分烟叶的质量特性,为多油分烟叶的质量评价提供参考。【方法】采用硫酸-甲醇法提取多油分烟叶有机酸,通过气相色谱进行分析,获取烟叶样品的色谱图,结合中药指纹图谱相似度评价软件建立多油分烟叶有机酸气相指纹图谱,并进行样品相似度评价;选取云南和湖北的多油分烟叶对所建立的对照图谱进行验证。【结果】三门峡多油分烟叶的指纹图谱有12个有机酸共有峰,分别为草酸、丙二酸、γ-戊酮酸、丁二酸、苹果酸、2,4-庚二烯酸、柠檬酸、十六酸、十七酸、油酸、亚油酸、十八酸。24批样品的有机酸图谱与对照指纹图谱的相似度在0.995~0.999,各批次间样品相似度较好。指纹图谱验证结果表明,三门峡多油分烟叶与云南、湖北等地烟叶之间差异较大。【结论】建立的三门峡多油分烟叶有机酸气相指纹图谱方法简便、可靠、专属性强。

HPLC图谱研究大黄“炒炭存性”

目的建立大黄HPLC指纹图谱,并根据主要成分峰面积的变化,分析不同炮制时间对大黄炭饮片质量的影响。方法采用Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为280 nm,柱温为35℃,建立HPLC指纹图谱;采用“中药色谱指纹相似度评价系统(2012版)”对不同产地的大黄样品图谱进行处理,并对不同炮制时间的大黄炭样品进行HPLC图谱的分析与对比。结果建立的大黄HPLC指纹图谱确定了18个共有峰,通过与对照品比对,指认了8个成分,分别为没食子酸、儿茶素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚和5-羟甲基糠醛;同时,通过HPLC色谱图的比对,发现了大黄炭生成了5个新成分,发现了大黄炭不同炮制时间,各成分的变化趋势。结论建立的大黄HPLC指纹图谱方法重现性好,稳定可行;大黄的“炒炭存性”HPLC色谱图研究,可为大黄炭饮片质量控制和评价提供参考。

鱼腥草挥发性成分“印迹模板”特征研究

目的通过对144批不同产地、不同采收时间鱼腥草根部挥发性成分“印迹模板”的定量分析,阐明其特征,为中药印迹质量评价提供理论参考和实验依据。方法采集全国不同产地不同采收期的鱼腥草,用水蒸气蒸馏法获取根部挥发油,通过GC-MS法获得指纹图谱并建立相应的成分数据库。对各批鱼腥草挥发性成分“印迹模板”进行定量表征,获得其分子连接性指数(molecular connectivity index,MCI)、物芯指数(core index,CI)、总量统计矩参数、信息熵、信息量等参数。结果各批样品化学成分种类、数目、含量有较大差异,各批样品间峰面积、信息量变化很大(RSD值分别为68.67%、79.72%),峰数变化较大(RSD值为22.03%);而信息熵、总量统计一阶矩、物芯指数(Xvp零阶、Xvp一阶、Xvp二阶)的变化不大(RSD值分别为16.17%、13.32%、5.46%、6.38%、6.03%)。结论鱼腥草生长过程中以“印迹模板”为中心修饰而成的具体成分及含量是随时随域变化,整体表现为“变”与“不变”规律,其印迹性质量评价可为中药更全面准确的质量控制提供新方法。

板青颗粒特征图谱及其质量相关性研究

本研究旨在开发一种用于检测板青颗粒中靛玉红含量的方法,并进行指纹图谱分析。采用高效液相色谱技术,色谱柱选用Eclipse Plus C_(18)柱(4.6 mm×250.0 mm,5μm),检测波长289 nm,以甲醇-水(77∶23)为流动相,等度洗脱,流速为0.8 mL/min,柱温30℃,进样量10μL。结果显示,在对靛玉红定性分析中线性关系良好(R^(2)=1.0000),平均回收率为98.07%,12批次样品中检测出共有峰7个,相似度为0.791~1.000。该方法操作简单、快捷,结果准确,可用于板青颗粒中靛玉红含量的测定及板青颗粒质量评价。

经典名方清金化痰汤基准样品HPLC指纹图谱及量值传递研究

基于建立的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱结合多指标成分含量的测定方法,研究了清金化痰汤(QJHTD)的量值传递规律。制备15批QJHTD基准样品,建立其HPLC指纹图谱并进行相似度评价,确定共有峰;对QJHTD基准样品中4种指标性成分(栀子苷、芒果苷、黄芩苷、甘草酸)进行含量测定,分析饮片-基准样品的量值传递规律。结果表明,15批QJHTD基准样品指纹图谱的相似度均大于0.98。标定了26个共有峰,并对各共有峰进行药材归属。指标性成分栀子苷、芒果苷、黄芩苷、甘草酸的含量分别为44.60~76.82mg·g^(-1)、98.04~145.25 mg·g^(-1)、46.82~75.64 mg·g^(-1)、81.60~126.63 mg·g^(-1),转移率分别为32.91%~62.42%、21.78%~35.93%、29.98%~57.12%、27.51%~49.34%。15批QJHTD基准样品的出膏率为16.98%~25.19%,平均出膏转移率为67.19%。结合指纹图谱、多成分含量测定以及出膏率,研究经典名方QJHTD基准样品的量值传递规律,可为后续制剂质量控制提供参考。

四妙勇安汤的高效液相色谱指纹图谱及含量测定

采用高效液相色谱法测定四妙勇安汤物质基准的指纹图谱及含量。使用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸为流动相,梯度洗脱,流量为0.8 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为25℃。建立15批四妙勇安汤物质基准的高效液相色谱指纹图谱,运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(国家药典委员会2012 A版)进行相似度评价,对共有峰进行药味归属,建立了绿原酸、哈巴苷、哈巴俄苷的含量测定方法。15批四妙勇安汤物质基准相似度均大于0.90,指纹图谱中含有11个共有峰,其中归属于金银花5个,玄参2个,当归2个,甘草2个。绿原酸、哈巴苷、哈巴俄苷平均质量分数分别为2.24%、0.59%、0.14%。建立的15批四妙勇安汤高效液相色谱指纹图谱精密度、稳定性良好,能够较好的反映其化学成分组成,可用于四妙勇安汤物质基准的质量控制与评价。

九味羌活丸UPLC指纹图谱的建立及化学模式识别

目的:建立九味羌活丸的超高效液相色谱(UPLC)指纹特征图谱并开展化学模式识别。方法:采用Waters Acquity UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%磷酸-乙腈进行梯度洗脱,进样量1μL,柱温为40℃,流速为0.35 mL·min^(-1),检测波长为254 nm。通过中药指纹图谱相似度分析软件及化学模式识别技术对12批九味羌活丸样品进行分析。结果:通过比对12批样品,识别出24个共有峰,建立九味羌活丸的UPLC指纹对照图谱并指认出其中13个成分;12批样品相似度均在0.90以上。聚类分析和主成分分析将12批样品分为3类,通过正交偏最小二乘法-判别分析推测其中2个成分是引起批间差异的关键因素,可作为本品的质量标志性组分。结论:建立的九味羌活丸UPLC指纹图谱能较为全面地评价本品的内在质量,同时结合化学模式识别分析可为九味羌活丸的质量标准制定提供参考依据。

Establishment of Specific Chromatogram of Spica Prunellae Formula Granules Based on Standard Decoction

[Objectives]This study aimed to establish HPLC chromatograms of decoction pieces,standard decoction and formula granules of Spica Prunellae.[Methods]The chromatographic conditions were as follows:column,SHISEIDO CAPCELL PAK C18 MGII column(4.6 mm×250 mm,5μm);mobile phase,acetonitrile-0.1%phosphoric acid;gradient elution;detection wavelength,280 nm;flow rate,1.0 mL/min;and column temperature,30℃.The correlation between the decoction pieces,standard decoction and formula granules of Spica Prunellae was analyzed by specific chromatograms.[Results]The fingerprint chromatograms of decoction pieces,standard decoction and formula granules of Spica Prunellae showed five common peaks,with good correlation.Among the five common peaks,four of them were tanshinol,protocatechuic acid,caffeic acid and rosmarinic acid.[Conclusions]The main chemical constituents of decoction pieces,standard decoction and formula granules of Spica Prunellae are basically the same.The HPLC specific chromatogram established can be used for the quality control of Spica Prunellae formula granules.

基于相似度评价大青龙汤遵古煎煮工艺研究

目的 在遵古的基础上结合现代技术,优化大青龙汤煎煮工艺,为中药经典方剂的研究提供参考。方法 以古籍记载方法制备标准图谱,通过测定指纹图谱相似度以及出膏率,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交设计试验,结合熵权法确定评价指标权重系数,进行综合评分,优化大青龙汤煎煮工艺参数并验证。结果 大青龙汤的最佳煎煮工艺为加6倍量水,煎煮1.5 h,煎煮2次,此工艺图谱与标准图谱相似度达到0.9以上。结论 基于相似度评价所得大青龙汤煎煮工艺操作简便,提取效率高,可为大青龙汤在遵古的前提下进行工业化提供理论基础。

含挥发油饮片草豆蔻标准汤剂的质量评价方法研究

本文制备草豆蔻饮片标准汤剂,并建立质量评价方法,按要求制备10批草豆蔻标准汤剂,测定山姜素、乔松素成分含量并计算转移率,测定挥发油含量并计算其转移率,测定出膏率,并建立标准汤剂HPLC指纹图谱分析方法。本文通过对10批标准草豆蔻汤剂进行测定,山姜素转移率为31.7%~56.3%,乔松素转移率为15.5%~35.6%,挥发油转移率为50.6%~79.2%,出膏率为8.8%~13.7%;指纹图谱中标定了8个共有峰,指认了其中4个峰,10批草豆蔻标准汤剂相似度均>0.9。本研究可为草豆蔻配方颗粒制备提供标准参考。

基于UPLC指纹图谱和含量测定法评价不同干燥温度对羌活药渣质量的影响

目的:建立UPLC指纹图谱和含量测定方法,评价不同干燥温度下羌活水提药渣的质量。方法:测定羌活药渣UPLC图谱以计算各共有峰的残存量,并结合聚类分析(CA)和主成分分析(PCA)优选最佳处理温度。建立含量测定方法以同时测得不同样品中羌活醇和异欧前胡素的含量。结果:CA和PCA得到相似的结论,将样品划分为三类。PCA综合评分表明60℃为样品的最适烘干条件,与含量测定结果一致。结论:本研究提供了稳定且具有专属性的指纹图谱和含量测定方法,并作为羌活药渣质量评价和后续开发的参考基础。

清开灵注射液HPLC/ELSD指纹图谱建立及质量相关性研究

运用高效液相色谱 /蒸发光散射检测器 (HPLC/ELSD)建立了复方清开灵注射液的指纹图谱。对其中7种有效成分进行了定量测定 ,方法学考察结果良好 ;通过指纹图谱相似度评价软件 ,对 1 0批清开灵注射液的HPLC/ELSD指纹图谱进行了相似度计算 ,结果表明 :1 0批样品相似度很好。该方法为中药质量控制提供了一种可以同时实现整体定性、指标成分定量且简便易行的方法模式。

山楂叶抗大鼠PMN呼吸爆发谱效关系研究

目的:研究山楂叶HPLC指纹图谱与其抗大鼠中性粒细胞(PMN)呼吸爆发活性之间的相互关系。方法:分别对不同种山楂叶HPLC指纹图谱的各指纹峰进行抗大鼠PMN呼吸爆发药效实验,建立各指纹峰峰面积与药效之间关系(峰效关系)的数学模型,再通过数学、化学计量学、计算机编程与模拟等手段将山楂叶的HPLC指纹图谱翻译成生物活性指纹图谱(包括药效指纹图谱和效价指纹图谱)。结果:建立了山楂叶抗大鼠PMN呼吸爆发谱效关系,利用该关系对14个山楂叶样品进行活性预测,其预测值与实际值呈显著正相关,r=0.968(P<0.01)。结论:建立了一种融化学分析与生物活性评价为一体的综合质量评价体系,为中药指纹图谱研究提供了一条新的思路。

混源天然气源岩贡献定量测试轻烃指纹技术

提出了混源天然气源岩贡献色谱轻烃指纹定量测试的理论测试方法及数学模拟计算方法,选择松辽盆地北部徐家围子断陷深层源岩和天然气样品进行实验验证。采用源岩吸附气和天然气轻烃指纹色谱检测方法,利用源岩吸附气中相邻或相近的结构和性质相似的轻烃分子化合物的比值参数,确定表征深层登娄库组、营城组、沙河子组和火石岭组、石炭-二叠系4套源岩的特征轻烃指纹参数,按不同混合配比模式获得地球化学模型参数,用智能神经网络学习算法训练建立源岩贡献测试模板,模拟计算了徐家围子断陷深层4套源岩分别对15个深层混源天然气样品的定量贡献。结果表明,不同地区或同一地区不同井及层段的天然气来源有差别,呈现主要来源于下伏气源岩和以垂向运移为主的源控型气藏特征,沙河子组和火石岭组、营城组、石炭一二叠系、登娄库组的源岩贡献平均分别为69.2%、16.2%、9.7%、4.8%。

不同生长时期罗汉果高效液相指纹图谱研究

探索罗汉果药材的质量变化规律,确定罗汉果的关键生长期与采收期,指导罗汉果GAP生产,同时为罗汉果药材建立一种更合理的质量控制方法。采用高效液相色谱法建立不同生长时期青皮果与长滩果的特征性化学成分指纹图谱,通过聚类分析以及对11个指标性成分的鉴定及峰面积变化分析,研究罗汉果生长过程中的质量变化情况。结果表明不同栽培品种罗汉果在生长过程中具有相似的化学成分变化规律,不同生长时期化学成分特征不同。中药化学成分色谱指纹图谱技术是一种全方位多角度控制中药质量方法,可以更有效地指导中药材规范化种植。

基于图论的色谱指纹图谱谱峰的全局匹配

以色谱工作站的积分数据为基础,定义了允许匹配峰组的域,提出了在域内根据色谱峰面积、保留时间计算各匹配峰组之间距离矩阵的公式,从而形成有向图。采用图论中的最短路径算法寻找可能的匹配峰组中的最佳匹配峰组。采用优化的匹配参数,对珍菊降压片、丹参提取物、柴胡皂苷提取物、人参皂苷提取物的HPLC谱图进行匹配并将有关结果与国家药典委员会推出的指纹图谱软件自动匹配结果作了比较。结果表明:本算法可最大程度地匹配可能的色谱峰并极少出现错配、漏配峰组,无需手动校正。

大黄药材蒽醌成分的HPLC指纹图谱研究

以大黄酚为参照物,利用高效液相色谱梯度洗脱,测定了10批大黄样品,建立以大黄药材蒽醌及衍生物成分为特征的指纹图谱,色谱柱为YMC-ODS-AQC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.2%磷酸水(B),检测波长270 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min,通过高压液相指纹色谱分析,鉴定了13个色谱峰的化学成分,找出24个共有峰,相似度均大于0.92。本文所建立的方法可作为大黄药材质量控制。

丹参制剂中丹参水溶性成分的指纹对照法质量分析

目的：建立指纹对照测定法以及定性和定量相似性评价体系，研究丹参及其复方制剂中的丹参水溶性成分，并用于评价中药制剂整体质量。方法：采用Lichrospher ODS-2（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，甲醇（A）-1．0％冰醋酸溶液（B）线性梯度程序洗脱：0min（25％A）～70min（75％A），流速为1．0mL／min，柱温30℃，检测波长254nm，建立丹参水溶性成分高效液相色谱指纹图谱。采用夹角余弦（Cosθ）法和相对欧氏距离（RED）法，分别从化学成分分布相似性和含量相似性两个方面评价不同丹参制剂与指纹对照品的相似程度。结果：丹参水溶性成分高效液相色谱指纹图谱中，以丹酚酸B为参照物峰，确定了16个指纹共有峰。不同厂家生产的丹参片剂定性相似度没有显著性差异，但定量相似度有较大差异。结论：高效液相色谱指纹图谱的同时定性和定量相似度分析可全面反映中药制剂的整体质量，可用于丹参制剂质量分析。