Quality assessment of Chrysanthemum indicum Flower by simultaneous quantification of six major ingredients using a single reference standard combined with HPLC fingerprint analysis

Chrysanthemum indicum Flower is usually consumed as functional food. This paper described an improved total quality assessment method for Chrysanthemum indicum Flower by simultaneous quantitation using a single standard to determine multi-components method combined with high performance liquid chromatography fingerprint analysis. Six main components of Chrysanthemum indicum Flower including two flavonoids and four phenolic acids were simultaneously quantified using linarin as the internal reference standard. The method was fully validated with respect to linearity, precision, accuracy, robustness and stability.The validated method was successfully applied to the analysis of thirty three batches of Chrysanthemum indicum Flower samples. Under the same chromatographic conditions, fingerprint analysis in combination with Similarity analysis and principal component analysis was performed to identify the samples from different regions. In general, an effective assessment using a single standard to determinate multi-components method combined with fingerprint analysis make the reliable qualitation and quantitation analysis of Chrysanthemum indicum Flower available.

A New Compound from the Bud of Chrysanthemum indicum L.

A new bicyclic spiroketone was isolated from the bud of Chrysanthemum indicum L. The chemical structure was elucidated as （1R, 9S, 10S）-10-hydroxyl-8 （2＇, 4＇-diynehexylidene）- 9-isovaleryloxy-2, 7-dioxaspiro [5, 4] decane based on the X-ray crystallography.

基于肠道菌群-LPS/TLR4通路探讨野菊花提取物对“过食膏粱厚味”致高尿酸血症大鼠的作用

[目的]研究野菊花提取物(Chrysanthemi Indici Flos extract,CYM.E)对“过食膏粱厚味”致高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)大鼠的治疗作用及机制。[方法]将64只大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,别嘌醇10 mg·kg^(-1)组,苯溴马隆5 mg·kg^(-1)组,CYM.E15、30、60、90 mg·kg^(-1)组,每组8只。除正常对照组外,其余各组均灌胃脂肪乳剂,建立拟人“过食膏粱厚味”致HUA大鼠模型。实验期间测定血清尿酸(uric acid,UA)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-c)和低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-c)水平;酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法测定血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和血浆脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)法测定小肠中TNF-α、Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)的mRNA表达;免疫印迹法检测小肠中TLR4蛋白表达;应用16S rDNA测序技术,对肠道菌群进行操作分类单元(operational taxonomic units,OTU)分类,选择合适的OTU进行结构分析、LEfSe差异贡献分析等。[结果]CYM.E能显著降低模型大鼠血清UA、TC、LDL-c、IL-6和TNF-α水平;显著降低血浆LPS水平;同时显著下调小肠组织TNF-αmRNA、TLR4 mRNA表达和TLR4蛋白表达,改善肠道的微炎症状态;增加乳酸杆菌、双歧杆菌的丰度与种类,降低拟杆菌、大肠杆菌的丰度与种类。[结论]CYM.E具有降低血清UA水平、调节血脂、减低炎症损伤、减少LPS释放等作用,可能通过调节肠道微生态发挥作用。

野菊花提取物对慢性支气管炎大鼠血清和支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6含量及肺组织病理形态学的影响

目的研究野菊花提取物对慢性支气管炎(CB)大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、IL-6含量以及肺组织病理形态学的影响,探讨其治疗CB的机制。方法制备野菊花提取物;Wistar大鼠随机分为空白对照组,CB模型组,喘息灵对照组,野菊花提取物低、中、高剂量组;气管内注入脂多糖建立CB大鼠模型,药物干预后,ELISA法测定大鼠血清及BALF中TNF-α及IL-6含量,观察肺组织的病理形态学变化。结果模型组大鼠血清及BALF中TNF-α及IL-6含量较空白对照组明显升高,肺组织发生明显病理损伤,野菊花提取物可显著降低上述异常升高的指标、改善肺组织的病理损伤。结论降低CB大鼠体内TNF-α、IL-6含量,改善肺组织的病理损伤,可能是野菊花提取物减轻CB炎症效应机制之一。

中药野菊花提取物与抗菌药联合对产ESBLs大肠杆菌抑制效果研究

试验旨在探讨野菊花提取物与抗菌药联合作用对产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)大肠杆菌的体外抑制效果,为野菊花的进一步开发利用提供理论依据。采用2倍微量稀释法和中西药联合诱导传代法测定野菊花提取物、抗菌药及联合作用后的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)。结果显示,野菊花水提物对该耐药大肠杆菌的MIC值为250mg/mL,且在野菊花水提物亚抑菌浓度(1/2 MIC)作用下进行中西药联合传代,其与头孢曲松钠、头孢噻呋钠、头孢噻肟钠、氟苯尼考、痢菌净、阿米卡星、林可霉素7种抗菌药联合作用后,抗菌药的MIC值明显降低。表明野菊花水提物能够显著降低产ESBLs大肠杆菌对部分抗菌药的敏感性。

HPLC法测定野菊花中蒙花苷的含量

建立了HPLC法测定野菊花中蒙花苷含量的方法。采用AICHROMC18(2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm)色谱柱 ,以甲醇— 0 8%磷酸 (9∶7)为流动相 ,流速为 1 2ml·min- 1,检测波长为 32 6nm。蒙花苷在 0 0 4 3～ 2 16 μg的范围内具有良好的线性关系 ,相关系数为 0 9999,平均回收率为 98 9% (RSD为1 8% )。本方法操作简便 ,灵敏度高 ,结果准确可靠。

不同产地野菊花中黄酮类成分含量的HPLC分析

The content of linatin,luteolin,quercetin and apigenin in Dendranthema indicum(L.) Des Moul.flower from eleven locations was analyzed by HPLC.The results show that linatin and luteolin contents in samples are higher with a range of 0.0-13.3 and 0.5-2.1 mg·g-1,respectively,and suitable for quantitative determination,while apigenin and quercetin contents are trace and suitable for qualitative determination.The content of flavonoids is obviously affected by locations.No linatin is detected in samples from Jiangxi and Nanyang of He’nan.The content of linatin and luteolin is higher in samples from Chuzhou of Anhui,Nanjing of Jiangsu and Inner Mongolia.D.indicum flower from Chuzhou of Anhui is superior for having all four flavonoids and higher content of linatin and luteolin.

RP-HPLC测定野菊花及其叶中绿原酸的含量

目的检测湖南衡阳产野菊花和叶中绿原酸的含量。方法以70%的乙醇为溶剂,用超声法提取野菊花、叶中的绿原酸。以0.04%磷酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为327nm,RP-HPLC测定。结果野菊花中绿原酸含量为0.776%、野菊叶中绿原酸含量为1.894%。结论野菊叶中绿原酸的含量明显高于野菊花。

野菊花不同部位蒙花苷含量测定及HPLC指纹图谱研究

目的:测定野菊花花蕾、茎、叶三个部位的蒙花苷含量,并建立其HPLC指纹图谱。方法:采用RP-HPLC方法,色谱柱为Luna 5u C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脱,柱温为25℃,检测波长为326 nm。结果:不同产地野菊花花蕾中蒙花苷含量有较大差异;野菊花花蕾中蒙花苷含量最高,其次为茎、叶。此外,野菊花花蕾、茎、叶的HPLC图谱存在一定差异。结论:建议野菊花的花蕾、茎、叶分开使用,研究结果为合理开发利用野菊花药材资源提供了科学依据。

HPLC-DAD同时测定野菊不同部位8种活性成分的含量

目的建立同时测定中药野菊不同部位(花、叶、嫩茎、老茎)中绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷、蒙花苷和木犀草素含量的高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)方法。方法采用Thermo Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,柱温35℃,检测波长327 nm。结果绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷、蒙花苷和木犀草素进样量分别在0.031~0.620μg、0.009~0.180μg、0.016~0.320μg、0.081~1.620μg、0.021~0.420μg、0.011~0.220μg、0.152~3.040μg、0.017~0.340μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9999,0.9998,0.9997,0.9996,0.9995,0.9996,0.9997,0.9998。绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷、蒙花苷和木犀草素的平均加样回收率分别为98.29%,99.09%,99.03%,98.88%,99.22%,99.02%,98.38%,99.02%,RSD(n=6)分别为1.40%,1.05%,0.98%,1.18%,0.98%,0.91%,0.89%,1.26%。结论本法操作简便,准确性和重复性好,可用于中药野菊的质量控制,测定结果显示野菊不同部位有机酸和黄酮类活性成分含量差异较大。

基于UPLC的不同产地野菊花多组分定量分析

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定不同产地野菊花中绿原酸、木犀草苷、木犀草素、蒙花苷和芹菜素5个成分的含量,为野菊花的质量控制和评价提供依据。方法:采用ACQUITY UPLC CSH C18(150 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,柱温为(30±5)℃,进样体积为2μL,检测波长为326 nm,以乙腈-0.02%磷酸溶液为流动相梯度洗脱。结果:5个成分在相应的质量浓度范围内与峰面积的线性关系均良好(r≥0.9990),精密度、稳定性、重复性试验RSD均小于2.00%,39批次野菊花中绿原酸、木犀草苷、蒙花苷、木犀草素、芹菜素质量分数分别为0.30~5.40、0.10~2.80、0~15.40、0.60~11.90、0~1.10 mg·g^(-1)。结论:此方法方便、准确、稳定,可用于同时测定野菊花中5个成分的含量。

HPLC指纹图谱结合化学计量学评价不同规格野菊花药材质量

目的基于HPLC指纹图谱评价不同规格野菊花药材质量。方法按照野菊花药材直径大小,将野菊花分为a(直径0.1~0.3 cm)、b(直径0.3~0.5 cm)、c(直径0.5~1.0 cm)3种规格。建立基于HPLC的野菊花药材主要指标成分指纹图谱测定方法,结合相似度评价、聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)和方差分析等化学计量学方法对不同规格野菊花药材的指纹图谱信息进行分析。结果不同规格野菊花药材的指纹图谱之间存在明显差异,各主要特征峰的"峰面积/取样量"随着药材直径的增大呈下降趋势;聚类分析(CA)可将不同规格的野菊花药材分为2类;主成分分析(PCA)发现2个特征值大于1的主成分包含了原始数据96%的信息;方差分析结果表明不同规格野菊花药材的各主要特征峰之间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论野菊花药材的直径大小与化学成分间具有一定的相关性,本研究可为野菊花药材规格等级的划分及其质量控制提供参考。

基于CiteSpace的国内近30年野菊文献计量可视化分析

系统梳理野菊研究进展,明确野菊各领域研究现状和发展态势。以中国知网CNKI数据库收录的1994~2023年发表的野菊相关中文期刊文献为数据样本,结合CiteSpace软件,对文献年发表数量、所属学科、发表期刊、资金支持、研究作者和机构合作网络、关键词等进行动态、可视化分析。研究结果表明,近30年我国野菊研究经历了快速发展期和衰退期两个时期,对应的研究热点分别为临床应用和质量评价。高被引文献主要与野菊药理活性和进化育种相关,研究经费主要来自国家自然科学基金。发文机构和期刊主要集中于医药类和农学类,南京农业大学为主要研究机构,华润三九医药股份有限公司为研究最活跃的单位,发文量最多的作者是陈发棣,其次是郭巧生和韩正洲。

野菊中一个新的吉马烷型倍半萜

研究野菊Chrysanthemum indicum L.地上部分中萜类成分及其抗炎活性。采用MCI、ODS、SephadexLH-20凝胶柱色谱和pre-HPLC等方法分离纯化,再通过对其波谱数据分析鉴定化合物的结构。从野菊二氯甲烷提取物中分离纯化得到6个单体化合物,分别是chrygermalide A(1)、3β-hydroxy-oxo-7α,11β-germacra-4 Z,10(14)-diene-12,6α-olide(2)、deacetylherbolide A(3)、9β-hydroxy costunolide(4)、3β-hydroxycostunolide(5)、3β-hydroxy-11α,13-dihydrocos-tunolide(6)。其中化合物1为新化合物,2~6为首次从该属植物中分离得到。采用LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞的炎症模型测试了化合物1~6的抗炎活性,其NO抑制率IC 50值在17.9~33.9μmol/L之间。

野菊花中黄酮类物质的提取和鉴定

采用碱溶酸析法和微波间歇加热提取法,成功地提取了野菊花中黄酮类物质。经HCl-锌粉反应和红外光谱鉴定,提取物为黄酮类物质。同时,采用分光光度法,以芦丁标准品绘制标准曲线对野菊花中的总黄酮类物质进行了测定,其质量分数为2.290mg/g。并讨论了时间对测定方法的影响,结果表明,显色时间在40min内稳定。此结果为进一步开发利用野菊花这一天然的宝贵资源以及野菊花与黄酮类物质药效功能的综合利用提供了科学依据。

野菊花中性多糖CIP-C的分离纯化及结构解析

以野菊花为原材料,经热水提取、乙醇沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200凝胶柱层析分离纯化,得到1个水溶性的中性多糖CIP-C.采用GC-MS、部分酸水解及甲基化分析等对该多糖的结构进行了解析.结果表明,该多糖主要由D-Man,D-Glc和D-Gal组成,并含有少量的D-Fuc,L-Ara和D-Xyl,其主链由β(或α)-D-1,4-Man,β-D-1,6-Glc和β-D-1,4-Gal组成,而阿拉伯糖通过α-L-T-Araf和α-L-1,5-Araf连接形成阿拉伯聚糖支链或与β-D-1,4-Galp的O3位相连形成阿拉伯半乳聚糖支链.

野菊花不同提取物的红外光谱分析

利用红外光谱的宏观指纹特性,对野菊花不同溶剂提取物的红外光谱图和二阶导数红外光谱图进行了整体分析。可知,野菊花石油醚提取物主含长链脂肪酸(酯)、不饱和酮以及小分子萜类等低极性化合物,乙酸乙酯提取物主含萜类和黄酮类化合物,无水乙醇提取物主含黄酮及黄酮苷类化合物,95%乙醇提取物主含黄酮苷类化合物,去离子水提取物主含多糖及鞣质类等大极性成分。此外,与野菊花指标成分蒙花苷的红外光谱分析比较,可知野菊花无水乙醇提取物中所含有的黄酮量是最多的。因此,利用红外光谱法对中药提取物直接进行分析,可初步识别其主体成分,为下一步制定药效成分的提取方案和检测方法提供方向性参考。

野菊花茎叶挥发油的化学成分及其对植物病原真菌抑制作用

用水蒸气蒸馏法提取野菊花茎叶中的挥发油,采用GC-MS联用技术分析其挥发油中的化学成分,并用生长速率法检测其挥发油对5种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明,从野菊花茎叶挥发油中分离和鉴定出32种化合物,其挥发油对实验的植物病原真菌均有抑制作用,特别是对油菜菌核病菌的抑制作用更加显著,野菊花茎叶挥发油的浓度为500μg/mL时抑制率高达81.63%。

野菊花总黄酮的含量测定

对不同产地、不同加工方法的野菊花中总黄酮进行了含量测定和筛选研究 ,结果首选了湖北省麻城市采摘、烘干法加工的野菊花。并检测了其六批野菊花浸膏的总黄酮含量 ,结果均达 11%以上 ,符合质量要求。

芝麻不同抗旱基因型对花期干旱胁迫的生理响应机理

【目的】研究干旱胁迫对不同抗旱性芝麻品种叶片和根系生理生化特性的影响,分析不同基因型芝麻对花期干旱胁迫的生理响应差异,为芝麻抗旱性研究和改良提供理论参考。【方法】采用盆栽法,以抗旱品种金黄麻和干旱敏感品种竹山白为试验材料,在花期进行轻度(T1)、中度(T2)和重度(T3)干旱胁迫处理,以正常浇水为对照(CK),分别测定植株叶片和根系的丙二醛(MDA)、过氧化氢(H_2O_2)、脯氨酸(Pro)、可溶性糖(SS)、可溶性蛋白(SP)、游离氨基酸(AA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、还原型抗坏血酸(AsA)等含量,超氧化歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,分析干旱胁迫下2个基因型间生理响应机理的差异。【结果】干旱胁迫后,芝麻叶片中MDA、H_2O_2、Pro、SS、SP、GSH含量和SOD、POD、PAL酶活性以及根系中MDA、SS、SP、AA、GSH、AsA含量和CAT、PAL活性随着胁迫程度的不断加剧呈不断上升趋势,叶片中的AA、AsA含量和CAT活性以及根系中H_2O_2、Pro含量和SOD、POD活性随着胁迫程度的加剧呈先升后降趋势。相关分析结果显示,叶片中各项指标测定值与根系中指标值均呈正相关,品种抗旱性与膜脂过氧化伤害物质(MDA和H_2O_2)含量呈负相关,与部分渗透调节物质、防御系统物质含量和保护酶活性呈正相关。【结论】在花期干旱胁迫下,对2个不同基因型芝麻测定的12个生理生化指标均出现不同程度上升,响应差异较大,叶片大于根系。抗旱品种较干旱敏感品种表现为细胞膜脂过氧化伤害较轻,渗透调节物质积累量较多,保护酶(SOD和CAT)活性较强,抗氧化物质(GSH和AsA)含量较高。芝麻抗旱性生理机理表现为多方面的综合防御。