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SNP Analysis and Haplotype Identification in Chymotrypsin Inhibitor-2 (CI-2) Gene of Barley 被引量:1
1
作者 ZENG Xiang-hui WEI Yu-ming +2 位作者 JIANG Qian-tao QI Peng-fei ZHENG You-liang 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2009年第1期8-14,共7页
Barley chymotrypsin inhibitor-2 (CI-2) was considered to be a promising candidate for enhancing the nutritional value of other cereals by increasing its concentration as it is rich in lysine than any other storage p... Barley chymotrypsin inhibitor-2 (CI-2) was considered to be a promising candidate for enhancing the nutritional value of other cereals by increasing its concentration as it is rich in lysine than any other storage protein. Also, it was proposed that CI-2 might play an important role in the inhibition of proteolytic enzymes from pests or pathogens as CI-2 can strongly inhibit chymotrypsin and subtilisin. In this study, a total of 93 CI-2 gene sequences were isolated from wild and cultivated barley. 48 SNPs and 4 indels were detected across the entire sequences. The frequency of SNPs in the noncoding region (1 out of 9 bases) was slightly higher than that in the coding region (1 out of 10.7 bases). In all, 33.3% of the candidate cSNPs resulted in amino acid changes. As a total, the 24 cSNPs resulted in 15 amino acid changes. Ten distinguishable haplotypes were detected, among which 3 haplotypes were shared in the most barley accessions, whereas the rest of the haplotypes appeared at a lower frequency. In addition, three haplotypes (haplotype 4, 8, and 9) were unique for single accessions. These results suggested that low diversity at the CI-2 locus was detected among the cultivated and wild barley. 展开更多
关键词 BARLEY chymotrypsin inhibitor SNP HAPLOTYPE
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Chromosomal localization of silkworm (Bombyx mori) sericin gene 1 and chymotrypsin inhibitor 13 using fluorescence in situ hybridization 被引量:2
2
作者 Yutaka BANNO Hiroshi FUJII 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2008年第2期133-139,共7页
The chromosomal locations of two single-copy genes, Ser-1 and CI-13, in silkworm (Bombyx mori) were detected at the molecular cytogenetics level by fluorescence in situ hybridization in the study. The results showed t... The chromosomal locations of two single-copy genes, Ser-1 and CI-13, in silkworm (Bombyx mori) were detected at the molecular cytogenetics level by fluorescence in situ hybridization in the study. The results showed that Ser-1 is located near the distal end of the 11th linkage group, relatively at the 12.5±1.4 position in pachytene; and that CI-13 has been mapped near the distal end of the 2nd linkage group, relatively at the 8.2±1.2 position in pachytene. Furthermore, their location model map-FISH map on silkworm chromosome was drawn. The FISH technique and its application to silkworm are also discussed in this paper. 展开更多
关键词 Bombyx mori SERICIN GENE 1(Ser-1) chymotrypsin inhibitor 13 GENE (CI-13) fluorescence in SITU hybridization chromosome mapping
原文传递
剪叶及昆虫取食对兴安落叶松蛋白酶抑制剂的影响 被引量:25
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作者 王琪 严善春 +2 位作者 王艳军 张健 袁红娥 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期798-803,共6页
植物蛋白酶抑制剂是植物重要的防御物质之一。为了研究不同程度剪叶及昆虫取食诱导与兴安落叶松Larixgmelinii针叶内蛋白酶抑制剂活性变化的关系,分别以剪叶及落叶松毛虫Dendrolimus superans取食处理兴安落叶松幼苗,用紫外分光光度法... 植物蛋白酶抑制剂是植物重要的防御物质之一。为了研究不同程度剪叶及昆虫取食诱导与兴安落叶松Larixgmelinii针叶内蛋白酶抑制剂活性变化的关系,分别以剪叶及落叶松毛虫Dendrolimus superans取食处理兴安落叶松幼苗,用紫外分光光度法测定不同处理后针叶内胰蛋白酶抑制剂(TI)和胰凝乳蛋白酶抑制剂(CI)活性变化。结果表明:落叶松毛虫取食及剪叶可诱导兴安落叶松产生系统性防御反应,处理后的1~20天,苗木针叶内TI和CI两种抑制剂活性产生显著变化,诱导产生的TI和CI的活性与损伤程度无显著相关性。相同损伤程度下,虫害诱导的TI活性高于剪叶损伤诱导的活性,但二者差异不显著;3种取食程度诱导的CI活性,只在第5天同时显著高于剪叶损伤诱导的抑制剂的活性。由此可见,可以通过适当的损伤处理取得与昆虫取食相似的植物抗性反应,这为林木病虫防治提供了新的思路。 展开更多
关键词 兴安落叶松 落叶松毛虫 胰蛋白酶抑制剂 胰凝乳蛋白酶抑制剂 剪叶损伤 昆虫取食
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家蚕血液胰凝乳蛋白酶抑制剂的多态性分布 被引量:6
4
作者 李娟 赵萍 +3 位作者 代方银 孙全 夏庆友 向仲怀 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期550-555,共6页
家蚕Bombyxmori的胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsininhibitor,CI)在家蚕发育过程中发挥着重要作用,具有丰富的多态性。为了进一步研究家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂在群体水平上的多态性分布,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,调查了425个家蚕品... 家蚕Bombyxmori的胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsininhibitor,CI)在家蚕发育过程中发挥着重要作用,具有丰富的多态性。为了进一步研究家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂在群体水平上的多态性分布,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,调查了425个家蚕品系的血液胰凝乳蛋白酶抑制剂的分布情况。结果表明,基因IctA、IctD和IctE在所有家蚕品系中存在,暗示它们是家蚕正常生长发育必需的基因;相反,至少在9个家蚕品系中发现基因IctB和IctH都没有表达,而这些品系没有明显的生理缺陷。在中国品系和日本品系家蚕之间,胰凝乳蛋白酶抑制剂分布规律基本一致。对52个纯品系家蚕的胰凝乳蛋白酶抑制剂分布进行的聚类分析结果表明,胰凝乳蛋白酶抑制剂分布与其系统、眠性和化性都没有明显的相关性。所以家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂广泛存在于不同家蚕品系中,同时多态性的分布特征也表明其生理功能在进化过程中发生了明显的分化。 展开更多
关键词 家蚕 品系 血液 胰凝乳蛋白酶抑制剂 多态性分布
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机械损伤和茉莉酸甲酯对烟株蛋白酶抑制剂的诱导作用研究 被引量:7
5
作者 杨丽文 程新胜 +2 位作者 薛泽春 席征 张现 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2006年第6期33-37,共5页
为了进一步研究蛋白酶抑制剂对昆虫生长发育的影响,选取机械损伤和茉莉酸甲酯作为信号路径的激发子,研究了它们在不同条件下诱导烟株局部和系统性的胰蛋白酶抑制剂和胰凝乳蛋白酶抑制剂的表达。结果显示:机械损伤或茉莉酸甲酯处理后,烟... 为了进一步研究蛋白酶抑制剂对昆虫生长发育的影响,选取机械损伤和茉莉酸甲酯作为信号路径的激发子,研究了它们在不同条件下诱导烟株局部和系统性的胰蛋白酶抑制剂和胰凝乳蛋白酶抑制剂的表达。结果显示:机械损伤或茉莉酸甲酯处理后,烟株处理叶和系统叶中胰蛋白酶抑制剂和胰凝乳蛋白酶抑制剂含量都有不同程度升高;施用2.4mmol/L茉莉酸甲酯时两者的增加量最为显著;机械损伤能明显抑制2.4mmol/L茉莉酸甲酯的诱导作用,对1.2mmol/L茉莉酸甲酯具有协同作用。 展开更多
关键词 机械损伤 茉莉酸甲酯 胰蛋白酶抑制剂 胰凝乳蛋白酶抑制剂 抗虫性
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胰凝乳蛋白酶抑制剂在蓖麻蚕主要组织中的分布及血液中的含量和活性 被引量:1
6
作者 赵萍 张艳 +5 位作者 钟晓武 王凌燕 谭祥 董照明 莫现会 夏庆友 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期138-147,共10页
【目的】蓖麻蚕Samia cynthia ricini属于鳞翅目昆虫,其体内存在的胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsin inhibitor,CI)对蓖麻蚕的正常生长发育和自身防御能力有重要的作用。获得蓖麻蚕的CI种类分布信息,以及研究各种CI的功能,可以为鳞翅目... 【目的】蓖麻蚕Samia cynthia ricini属于鳞翅目昆虫,其体内存在的胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsin inhibitor,CI)对蓖麻蚕的正常生长发育和自身防御能力有重要的作用。获得蓖麻蚕的CI种类分布信息,以及研究各种CI的功能,可以为鳞翅目害虫的生物防治提供理论依据。【方法】本实验通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)和CI活性染色技术,对18个蓖麻蚕品系的主要组织器官中胰凝乳蛋白酶抑制剂的多态性分布进行了调查,并对各品系血液中的蛋白含量和CI活性进行了测定。【结果】在p H 8.6电泳下,各品系血液中共检测到7条CI活性带,在p H4.0电泳下,各品系血液中可检测到3条CI活性带;血液中的CI含量从5龄第3天幼虫期到化蛹当天一直维持着很高的含量;头、体壁和脂肪体中的CI都不如血液中的CI含量高,而丝腺中未检测到任何CI。【结论】与家蚕Bombyx mori血液中的含量相比,蓖麻蚕血液中的CI含量更高,CI种类多态性分布不仅体现在不同品系的同一组织,还体现在同一品系的不同组织。 展开更多
关键词 蓖麻蚕 家蚕 组织器官 胰凝乳蛋白酶抑制剂 比活性
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胰凝乳蛋白酶短肽抑制剂的筛选和活性分析 被引量:1
7
作者 刘莹 张姝 +3 位作者 李天羽 范洪宽 周慧 李惟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期296-299,共4页
报道了一种从噬菌体肽库中筛选胰凝乳蛋白酶短肽抑制剂的新方法.在通常的亲和富集筛选的基础上,利用胰凝乳蛋白酶自身的水解活力切割掉结合的底物噬菌体,再经抑制活力分析得到抑制性噬菌体克隆.这样筛得的噬菌体克隆具有明显的胰凝... 报道了一种从噬菌体肽库中筛选胰凝乳蛋白酶短肽抑制剂的新方法.在通常的亲和富集筛选的基础上,利用胰凝乳蛋白酶自身的水解活力切割掉结合的底物噬菌体,再经抑制活力分析得到抑制性噬菌体克隆.这样筛得的噬菌体克隆具有明显的胰凝乳蛋白酶结合活力和抑制活力,DNA序列分析发现其保守序列为(S/T)RVPR(R/H).按此序列化学合成的短肽Ac-ASRVPRRG-NH2、Ac-ASRVPRHG-NH2同样表现出对胰凝乳蛋白酶的抑制作用. 展开更多
关键词 胰凝乳蛋白酶 抑制剂 肽库 噬菌体 筛选
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尖细金线蛭蛋白水解酶抑制剂的分离纯化 被引量:2
8
作者 张维强 朴钟泽 +3 位作者 张旭 赵宏杰 刘俊云 牛景 《西北农业学报》 CAS CSCD 1998年第2期91-93,共3页
用丙酮沉淀、超滤、SephadexG-100凝胶过滤等方法提纯尖细金线蛭蛋白水解酶抑制剂。结果表明,20%浓度丙酮沉淀的提取液对胰蛋白酶有抑制作用。20%~80%浓度的丙酮提取液对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶及弹性蛋白酶的... 用丙酮沉淀、超滤、SephadexG-100凝胶过滤等方法提纯尖细金线蛭蛋白水解酶抑制剂。结果表明,20%浓度丙酮沉淀的提取液对胰蛋白酶有抑制作用。20%~80%浓度的丙酮提取液对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶及弹性蛋白酶的抑制特性基本相同;与20%浓度丙酮提取液对胰蛋白酶的抑制特性不同。 展开更多
关键词 水蛭 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 抑制剂 分离
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竞争性抑制剂对反胶团萃取过程中α胰凝乳蛋白酶活力的稳定作用 被引量:2
9
作者 刘俊果 沈睿 +2 位作者 邢建民 阳承利 刘会洲 《过程工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期260-264,共5页
研究了竞争性抑制剂苯基硼酸对α胰凝乳蛋白酶反胶团萃取过程的影响及对酶活力的稳定作用.研究发现,向AOT/isooctane反胶团中添加一定量的苯基硼酸,萃取率会略有增加,反萃取率则无显著变化.酶活力的回收率显著提高,酶活力对萃取和反萃... 研究了竞争性抑制剂苯基硼酸对α胰凝乳蛋白酶反胶团萃取过程的影响及对酶活力的稳定作用.研究发现,向AOT/isooctane反胶团中添加一定量的苯基硼酸,萃取率会略有增加,反萃取率则无显著变化.酶活力的回收率显著提高,酶活力对萃取和反萃时间的耐受性显著增强.苯基硼酸和α胰凝乳蛋白酶之间的特异性亲和作用是产生这种影响的原因. 展开更多
关键词 反胶团萃取 竞争性抑制剂 α胰凝乳蛋白酶 苯基硼酸
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全自动生化分析仪测定血清乳酸脱氢酶同工酶I 被引量:1
10
作者 李国君 田亚平 董振南 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第2期187-190,共4页
应用α-糜蛋白酶和盐酸胍作为抑制剂选择性测定待测样品中乳酸脱氢酶同工酶I(LD-1).采用蛋白水解酶和抑制剂来破坏乳酸脱氢酶同工酶2~5(LD2~5)的活性,因此不需预处理待测样品,可直接用于自动生化分析仪.使用日立... 应用α-糜蛋白酶和盐酸胍作为抑制剂选择性测定待测样品中乳酸脱氢酶同工酶I(LD-1).采用蛋白水解酶和抑制剂来破坏乳酸脱氢酶同工酶2~5(LD2~5)的活性,因此不需预处理待测样品,可直接用于自动生化分析仪.使用日立7150分析仪建立了LD-1分析仪建立了LD-1测定参数,方法变异系数(CV)2.7%~4.4%;测得结果(y)与LD-1电泳方法(x)相关良好,y=0.967x-1.957,r=0.992(n=37);检测了197名健康男女血清样品,确定LD-1参考值范围为29.78~59.26U/L,±s=(44.58±7.39)U/L. 展开更多
关键词 乳酸脱氢酶 同功酶I 自动生化分析仪 血清诊断
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棉铃虫部分组织中蛋白酶抑制剂的调查与分析
11
作者 张艳 赵萍 +3 位作者 王凌燕 钟晓武 邹勇 衣启营 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期13-18,共6页
蛋白酶抑制剂在鳞翅目昆虫的生长、发育以及免疫过程中发挥了重要作用.该文采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-polyacrylamide gel electrophoresis Native-PAGE)结合胰凝乳蛋白酶抑制剂(Chymotrypsin inhibitor,CI)和胰蛋白酶... 蛋白酶抑制剂在鳞翅目昆虫的生长、发育以及免疫过程中发挥了重要作用.该文采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-polyacrylamide gel electrophoresis Native-PAGE)结合胰凝乳蛋白酶抑制剂(Chymotrypsin inhibitor,CI)和胰蛋白酶抑制剂(Trypsin inhibitor,TI)活性染色的方法,调查了棉铃虫部分组织中胰凝乳蛋白酶抑制剂和胰蛋白酶抑制剂的分布情况.结果表明:在碱性非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳下,血液中可检测到5条CI活性带,分别命名为H-CI1~H-CI5.同样能检测到几条迁移率很近且难以分开的TI活性带,而在头、丝腺、脂肪体、体壁、中肠和生殖腺等组织器官中没有检测到CI和TI活性带.在酸性非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳下,血液中检测到一条CI活性带,命名为H-CIb1;两条TI活性带,命名为H-TI1和H-TI2.其他组织与碱性电泳的结果一致,未检测到CI和TI的存在. 展开更多
关键词 棉铃虫 组织 胰凝乳蛋白酶抑制剂 胰蛋白酶抑制剂 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
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一个新的家蚕kunitz类型CI基因的克隆和序列分析
12
作者 赵萍 李娟 +2 位作者 林英 夏庆友 向仲怀 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期195-200,共6页
家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsin inhibitor,CI)的多个编码基因位于多个染色体位点上,是家蚕CI具有丰富多态性的原因之一。根据Gene Bank中登录的家蚕CI基因Sci-sb的mRNA,设计引物克隆了一个家蚕kunitz类型的CI基因,命名为CI-fb。C... 家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsin inhibitor,CI)的多个编码基因位于多个染色体位点上,是家蚕CI具有丰富多态性的原因之一。根据Gene Bank中登录的家蚕CI基因Sci-sb的mRNA,设计引物克隆了一个家蚕kunitz类型的CI基因,命名为CI-fb。CI-fb基因有3个外显子,开放阅读框长度为255 bp,编码85个氨基酸残基,具有一个典型的kunitz结构域。CI-fb基因与其他已知的kunitz类型的CI基因相比,在基因序列和结构、蛋白序列和结构上高度相似,但在已知的CI基因家族中序列最短。RT-PCR分析表明,CI-fb基因在家蚕的脂肪体、精巢、卵巢、马氏管、气管和中肠6个组织中表达,而在丝腺、血细胞和体壁中没有表达,是一个组织特异性表达的基因。研究结果为进一步研究家蚕CI的多态性和功能提供了新的线索。 展开更多
关键词 家蚕 胰凝乳蛋白酶抑制剂 基因克隆 CI-fo基因 组织表达
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家蚕CIb1基因启动子活性分析
13
作者 赵巧玲 唐顺明 +5 位作者 易咏竹 赵秀振 沈兴家 朱良均 张国政 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期477-481,共5页
用PCR方法从家蚕基因组DNA扩增了家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂b1基因(CIb1)4个不同长度的启动子片段,构建由其驱动的萤火虫荧光素酶基因报告质粒,在脂质体介导下转染家蚕BmN细胞,体外分析了该基因启动子的活性。结果表明,家蚕CIb1基因启动子... 用PCR方法从家蚕基因组DNA扩增了家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂b1基因(CIb1)4个不同长度的启动子片段,构建由其驱动的萤火虫荧光素酶基因报告质粒,在脂质体介导下转染家蚕BmN细胞,体外分析了该基因启动子的活性。结果表明,家蚕CIb1基因启动子在BmN细胞中有微弱的转录活性;野生型BmNPV感染能增强启动子活性;hr3增强的不同长度CIb1基因启动子片段的活性有显著差异,提示转录起始位点上游-74~-1nt包含了启动子的基本元件,而在-687~-465nt、-465~-317nt和-317~-74nt存在着主要的顺式元件。试验结果有助于阐明CIb1的表达调控机理和对家蚕天然性免疫的理解。 展开更多
关键词 家蚕 胰凝乳蛋白酶抑制剂 CIb1基因启动子 家蚕核型多角体病毒 同源重复区3
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家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂基因SCI-SB的原核表达、纯化及活性检测
14
作者 张苗 张耀洲 +2 位作者 张文波 金勇丰 蓝航莲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期268-272,共5页
为进一步研究家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂基因SCI-SB的功能和作用机理,利用RT-PCR技术,从家蚕总RNA中扩增到家蚕SCI-SB基因片段,构建了含有GST标签的融合表达质粒pGEX4T-1-SCI-SB。采用pGEX融合蛋白表达系统,在大肠杆菌BL21中得到以包涵体... 为进一步研究家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂基因SCI-SB的功能和作用机理,利用RT-PCR技术,从家蚕总RNA中扩增到家蚕SCI-SB基因片段,构建了含有GST标签的融合表达质粒pGEX4T-1-SCI-SB。采用pGEX融合蛋白表达系统,在大肠杆菌BL21中得到以包涵体形式存在的重组GST融合蛋白质,表达量可占菌体蛋白的15%。将包涵体变性、复性处理以后,进一步利用GSTTrapFF亲合层析一步获得了重组蛋白。将该重组蛋白免疫新西兰纯种大白兔,获得效价高的多克隆抗体。胰凝乳蛋白酶活性抑制实验结果表明该重组蛋白具有一定的酶活抑制作用。 展开更多
关键词 家蚕 胰凝乳蛋白酶抑制剂 原核表达
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马铃薯蛋白酶抑制因子特性的研究
15
作者 杜启艳 路淑霞 +3 位作者 常重杰 卢龙斗 李全福 朱命炜 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1998年第1期107-110,共4页
本文研究了马铃薯蛋白酶抑制因子的稳定性及其对胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的抑制能力,结果表明:该抑制因子对胰蛋白酶活性的抑制作用较弱,最大抑制程度为65%;对胰凝乳蛋白酶活性的抑制作用较强,抑制程度最高可达95%以上,并且... 本文研究了马铃薯蛋白酶抑制因子的稳定性及其对胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的抑制能力,结果表明:该抑制因子对胰蛋白酶活性的抑制作用较弱,最大抑制程度为65%;对胰凝乳蛋白酶活性的抑制作用较强,抑制程度最高可达95%以上,并且,它对pH及温度的变化均具有较强的稳定性. 展开更多
关键词 马铃薯 蛋白酶抑制因子 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶
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家蚕血液中胰凝乳蛋白酶抑制剂研究——品种间的多态型
16
作者 赵萍 夏庆友 《蚕学通讯》 2002年第3期6-9,共4页
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和胰凝乳蛋白酶抑制剂 (CI)活性染色 ,对 9个家蚕品种血液中CI种类的分布进行了调查。结果 :在碱性电泳条件下可检测出 12种以上的CI,品种间CI分布存在多态型 ,根据结果筛选出作为分离纯化家蚕胰凝乳蛋白酶抑制... 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和胰凝乳蛋白酶抑制剂 (CI)活性染色 ,对 9个家蚕品种血液中CI种类的分布进行了调查。结果 :在碱性电泳条件下可检测出 12种以上的CI,品种间CI分布存在多态型 ,根据结果筛选出作为分离纯化家蚕胰凝乳蛋白酶抑制剂的理想品种材料。 展开更多
关键词 家蚕 血液 胰凝乳蛋白酶抑制剂 品种 多态型
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蓖麻蚕血液胰凝乳蛋白酶抑制剂种类的调查 被引量:3
17
作者 赵秀振 赵巧玲 +4 位作者 唐顺明 沈兴家 徐安英 张国政 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期133-137,共5页
胰凝乳蛋白酶抑制剂(CI)为昆虫体内重要的调控因子,是昆虫体内免疫系统的重要组成部分。通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和活性染色方法,对20个蓖麻蚕品种血液CI的种类进行了调查。在碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳中检测到7种CI,定名为E-CI1、E-... 胰凝乳蛋白酶抑制剂(CI)为昆虫体内重要的调控因子,是昆虫体内免疫系统的重要组成部分。通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和活性染色方法,对20个蓖麻蚕品种血液CI的种类进行了调查。在碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳中检测到7种CI,定名为E-CI1、E-CI2、E-CI3、E-CI4、E-CI5、E-CI6、E-CI7;在酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳中检测到2种CI,定名为E-CIa、E-CIb。对同一蓖麻蚕品种不同发育时期血液CI的调查显示,CI 5的活性有随5龄期经过而递增的趋势。 展开更多
关键词 蓖麻蚕 血液 胰凝乳蛋白酶抑制剂 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
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菜青虫胰凝乳蛋白酶基因PrCT1的克隆及表达分析 被引量:2
18
作者 张娴 李超林 +3 位作者 郑乔木 严子成 廖海 周嘉裕 《河南农业科学》 北大核心 2019年第9期74-81,共8页
胰凝乳蛋白酶是昆虫的主要消化酶,可能参与多种消化以外的生理过程。为了解该蛋白质基因表达特性,基于菜青虫(Pieris rapae)转录组数据,克隆了1个菜青虫胰凝乳蛋白酶基因PrCT1并进行相关分析。该基因编码区全长861 bp,编码286个氨基酸,... 胰凝乳蛋白酶是昆虫的主要消化酶,可能参与多种消化以外的生理过程。为了解该蛋白质基因表达特性,基于菜青虫(Pieris rapae)转录组数据,克隆了1个菜青虫胰凝乳蛋白酶基因PrCT1并进行相关分析。该基因编码区全长861 bp,编码286个氨基酸,含有典型的丝氨酸蛋白酶催化三联体(H57、D102、S195),经丝氨酸蛋白酶底物特异性口袋分析,显示其属于胰凝乳蛋白酶。PrCT1与黑脉金斑蝶胰凝乳蛋白酶(GenBank登录号:OWR53227)同源性最高,达到49%,且亲缘关系最近。构建pET28a-PrCT1原核表达重组载体,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株进行原核诱导表达。结果发现,重组PrCT1蛋白以包涵体形式存在,分子质量为33.26 ku。利用实时荧光定量PCR检测菜青虫不同组织中PrCT1 mRNA表达及饥饿、决明胰蛋白酶抑制剂喂食处理后PrCT1 mRNA的表达情况显示,PrCT1基因主要在菜青虫的中肠中表达,且在饥饿、决明胰蛋白酶抑制剂喂食处理后表达水平均下调,推测PrCT1可能是菜青虫中肠中发挥食物消化作用的重要蛋白酶,且可能是重要的抗虫靶点。 展开更多
关键词 菜青虫 胰凝乳蛋白酶 克隆 原核表达 蛋白酶抑制剂 饥饿
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6个山黧豆品种的β-ODAP含量与蛋白酶抑制剂活性及其关系分析
19
作者 付筱 宋瑶瑶 +1 位作者 陈红 徐全乐 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1068-1075,共8页
山黧豆(Lathyrus spp.)种质资源评价与筛选长期聚焦于获得低β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionicacid,β-ODAP)含量或低蛋白酶抑制剂活性的品种。为了研究β-ODAP含量与蛋白酶抑制剂活性之间的潜在关系... 山黧豆(Lathyrus spp.)种质资源评价与筛选长期聚焦于获得低β-N-草酰-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-L-α,β-diaminopropionicacid,β-ODAP)含量或低蛋白酶抑制剂活性的品种。为了研究β-ODAP含量与蛋白酶抑制剂活性之间的潜在关系,该研究利用SDS-PAGE、酶活检测和相关性分析等方法对家山黧豆(L.sativus)、扁荚山黧豆(L.cicera)等6个山黧豆品种的蛋白酶抑制剂活性、β-ODAP含量及二者之间的关系进行了分析。结果表明:(1)不同山黧豆品种的醇溶蛋白和可溶蛋白电泳图谱呈现出显著的差异。(2)不同山黧豆种子的胰蛋白酶抑制剂活性介于100~190 TIU之间,胰凝乳蛋白酶抑制剂活性介于5~9 CIU之间。(3)β-ODAP含量与丝氨酸乙酰基转移酶活性的皮尔逊相关系数可达0.76,呈显著正相关关系。(4)山黧豆转录组数据(SRP145030)中的β-ODAP生物合成关键基因与Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(Bowman-Birk inhibitor, BBi)基因表达水平呈显著负相关关系。该研究结果为进一步探讨分析山黧豆β-ODAP和BBi生物合成的调控与平衡,改善山黧豆的含硫氨基酸水平等奠定了基础。 展开更多
关键词 山黧豆 抗营养因子 β-ODAP 胰蛋白酶抑制剂 胰凝乳蛋白酶抑制剂
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大豆蛋白酶抑制剂活性的测定 被引量:3
20
作者 高灵枝 《首都医学院学报》 1995年第1期36-41,共6页
在测定胰蛋白酶活性和胰凝乳蛋白酶活性的基础上建立了蛋白酶抑制剂活性测定的方法。并用此方法测定了3种蛋白酶抑制剂的活性,即CM-BBI、粗BBI和豆浆晶粗BBI,其活性(每mg抑制剂蛋白抑制酶的μg数)分别为16609... 在测定胰蛋白酶活性和胰凝乳蛋白酶活性的基础上建立了蛋白酶抑制剂活性测定的方法。并用此方法测定了3种蛋白酶抑制剂的活性,即CM-BBI、粗BBI和豆浆晶粗BBI,其活性(每mg抑制剂蛋白抑制酶的μg数)分别为16609、1441和220.6。为了衡量该法的可靠性,我们还测定了Sigma厂出产的胰蛋白酶抑制剂的活性,所得结果与该厂测定的结果一致。故可利用该法选择抗癌食物。 展开更多
关键词 蛋白酶抑制剂 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶
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