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基于ciRS-7/miR-7/FAK通路研究掌叶半夏水提物对宫颈癌的抑制作用 被引量:1
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作者 王明喜 张丽霞 +1 位作者 王长平 朱前勇 《中医学报》 CAS 2022年第6期1278-1283,共6页
目的:探讨掌叶半夏水提物(pinellia extract,PE)通过调节小脑变性相关蛋白1反义转录物(circular RNA sponge for microRNA-7,ciRS-7)/microRNA-7(miR-7)/着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)通路对宫颈癌细胞的抑制作用。方法:体外培... 目的:探讨掌叶半夏水提物(pinellia extract,PE)通过调节小脑变性相关蛋白1反义转录物(circular RNA sponge for microRNA-7,ciRS-7)/microRNA-7(miR-7)/着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)通路对宫颈癌细胞的抑制作用。方法:体外培养人宫颈癌细胞(HeLa),分为HeLa细胞对照组和HeLa细胞PE干预组(0.15 g·L^(-1)),Transwell小室实验检测HeLa细胞侵袭及迁移能力。18只雌性BALB/c-nu裸小鼠随机分为正常对照组、皮下移植瘤模型组和PE干预组,每组6只。取对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞,调整密度为1×10^(7) mL^(-1),除正常组外,其余组裸小鼠颈背部皮下注射接种人宫颈癌HeLa细胞0.2 mL建立移植瘤模型。当瘤体直径大约5 mm时,PE干预组裸鼠腹腔注射PE 10 mg·kg^(-1),其余组给予同等体积的生理盐水,每天1次,连续3周。检测小鼠的肿瘤体积,并计算抑瘤率;RT-qPCR法检测各组小鼠肿瘤组织中ciRS-7 mRNA及miR-7 mRNA的表达水平;Western Blot法检测各组小鼠肿瘤组织中FAK及p-FAK的蛋白表达水平。结果:与HeLa细胞对照组比较,HeLa细胞PE干预组HeLa细胞侵袭及迁移数目显著降低(P<0.01)。与正常对照组比较,皮下移植瘤模型组小鼠ciRS-7 mRNA、FAK蛋白表达水平显著升高(P<0.05),miR-7 mRNA、p-FAK蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与皮下移植瘤模型组比较,PE干预组荷瘤裸鼠肿瘤体积明显变小(P<0.01),肿瘤质量明显降低(P<0.01),ciRS-7 mRNA、FAK蛋白表达水平显著降低(P<0.05),miR-7 mRNA、p-FAK蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:PE可抑制宫颈癌HeLa细胞的侵袭及迁移,并抑制宫颈癌肿瘤的生长,其机制可能与调节ciRS-7/miR-7/FAK信号通路有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 掌叶半夏水提物 cirs-7/mir-7/fak通路 小鼠
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沉默ciRS-7通过靶向miR-944逆转胃癌细胞顺铂耐药性机制 被引量:1
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作者 魏文娥 郭翠萍 +1 位作者 刁银卓 骆玉霜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1325-1332,共8页
目的 探讨沉默环状RNA(circRNA)ciRS-7对胃癌细胞顺铂耐药性的影响及相关机制。方法 构建顺铂耐药胃癌细胞HGC-27/DDP,沉默ciRS-7并用顺铂处理HGC-27/DDP细胞后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7、微小RNA-944(miR-944)表达水平,... 目的 探讨沉默环状RNA(circRNA)ciRS-7对胃癌细胞顺铂耐药性的影响及相关机制。方法 构建顺铂耐药胃癌细胞HGC-27/DDP,沉默ciRS-7并用顺铂处理HGC-27/DDP细胞后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7、微小RNA-944(miR-944)表达水平,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率、克隆形成实验检测克隆形成数,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,双荧光素酶实验验证ciRS-7与miR-944的靶向关系。结果 ciRS-7在顺铂耐药胃癌组织和细胞中高表达,miR-944在顺铂耐药胃癌组织和细胞中低表达,沉默ciRS-7明显降低顺铂处理的HGC-27/DDP细胞存活率、克隆形成数、cyclinD1、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平,明显增加顺铂处理的HGC-27/DDP细胞ciRS-7、凋亡率、凋亡指数、Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平,ciRS-7靶向抑制miR-944的表达。结论 沉默ciRS-7可逆转胃癌细胞对顺铂的耐药性,其机制可能与沉默ciRS-7可促进miR-944的表达有关。 展开更多
关键词 cirs-7 mir-944 胃癌 顺铂耐药性 增殖 凋亡
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miR-216a对重症急性胰腺炎腺泡损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1 通路的影响
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作者 薛冰 赵春艳 +1 位作者 郭中霞 王志兵 《肝胆外科杂志》 2023年第1期57-61,共5页
目的探索miR-216a对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)腺泡细胞损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1通路的影响.方法将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组.Co... 目的探索miR-216a对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)腺泡细胞损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1通路的影响.方法将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组.Con组不做任何处理,其余各组采用雨蛙肽(10 nmol/L)联合脂多糖(lipo poly saccharide,LPS)(10 mg/L)处理大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J构建SAP细胞模型,anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组分别转染anti-miR-NC、anti-miR-216a、miR-NC、miR-216a mimics.酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组细胞中miR-216a及P2X7、NLRP3、caspase-1 mRNA相对表达量;Western blot法检测各组细胞中P2X7、NLRP3、Caspase-1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cellymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved cysteinyl aspartate specific protease-3,Cleaved caspase-3)蛋白表达情况.结果各组细胞中IL-6、TNF-α含量比较,Con组<anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05).各组细胞凋亡率和Bax蛋白、Cleaved caspase-3蛋白相对表达量比较,Con组<Sch+miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<anti-miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05);各组细胞Bcl-2蛋白相对表达量比较,anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组<Con组,差异有统计学意义(P<0.05).各组细胞中miR-216a和P2X7、NLRP3、Caspase-1 mRNA及其蛋白相对表达量比较,Con组<anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05).结论miR-216a可通过抑制P2X7-NLRP3/caspase-1信号通路减轻SAP腺泡细胞炎症,并诱导细胞凋亡,从而减轻SAP腺泡损伤. 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎(SAP) 腺泡细胞损伤 mir-216a P2X7-NLRP3/caspase-1通路
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lncRNA DLEU2/miR-455-3p/OTUD7B轴通过PI3K/AKT信号通路促进宫颈癌恶性发展 被引量:2
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作者 冯钰玲 顾燕楠 +1 位作者 凌剑梅 丁易钤 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第14期2614-2623,共10页
目的:探讨长链非编码RNA DLEU2(lncRNA DLEU2,DLEU2)对宫颈癌恶性发展的影响。方法:利用TCGA数据库和qRT-PCR分析DLEU2在宫颈癌组织和细胞系中的表达。采用CCK-8、Western blotting、免疫荧光、细胞划痕、Transwell和TUNEL实验检测干扰D... 目的:探讨长链非编码RNA DLEU2(lncRNA DLEU2,DLEU2)对宫颈癌恶性发展的影响。方法:利用TCGA数据库和qRT-PCR分析DLEU2在宫颈癌组织和细胞系中的表达。采用CCK-8、Western blotting、免疫荧光、细胞划痕、Transwell和TUNEL实验检测干扰DLEU2(sh-DLEU2)对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析DLEU2和miR-455-3p的靶基因,评估miR-455-3p inhibitor/mimic对宫颈癌细胞生长和PI3K/AKT信号通路的影响。裸鼠荷瘤实验检测干扰DLEU2后对瘤体体内生长的影响。结果:宫颈癌组织和细胞系中DLEU2表达显著上调(P<0.01)。sh-DLEU2可抑制Hela和SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.001)。DLEU2与miR-455-3p相结合,OTUD7B为miR-455-3p的靶基因。miR-455-3p inhibitor促进细胞恶性发展并激活PI3K/AKT信号通路,而sh-DLEU2可逆转其作用(P<0.01);miR-455-3p mimic也可部分逆转Oe-OTUD7B对细胞的作用(P<0.01)。此外,sh-DLEU2抑制了裸鼠荷瘤组织的生长(P<0.01)。结论:DLEU2通过miR-455-3p/OTUD7B轴激活PI3K/AKT信号通路促进宫颈癌的恶性发展。 展开更多
关键词 宫颈癌 DLEU2 mir-455-3p OTUD7B PI3K/AKT信号通路
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基于ciRs-7/miR-7信号通路探讨中医药调控缺血缺氧微环境延缓干细胞衰老的作用机制 被引量:2
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作者 王诗琦 惠小珊 +2 位作者 安兰花 袁书章 张金生 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第13期2087-2092,共6页
背景:干细胞衰老是机体衰老的一部分,通过细胞外信号通路调控缺血缺氧微环境,可能是延缓干细胞衰老的重要方法。目的:整理与剖析近年来基于细胞外信号通路与缺血缺氧微环境的关系,探索延缓干细胞衰老的机制与方法。方法:以“ciRs-7/miR-... 背景:干细胞衰老是机体衰老的一部分,通过细胞外信号通路调控缺血缺氧微环境,可能是延缓干细胞衰老的重要方法。目的:整理与剖析近年来基于细胞外信号通路与缺血缺氧微环境的关系,探索延缓干细胞衰老的机制与方法。方法:以“ciRs-7/miR-7,stem cell,ischemia-hypoxia microenvironment,aging”或“ciRs-7/miR-7,干细胞,缺血缺氧微环境,衰老”为主题检索词,检索中国期刊全文数据库、PubMed、万方数据库,纳入ciRs-7/miR-7信号通路、缺血缺氧微环境对干细胞衰老影响的相关文章,检索时间范围为1978-2021年,最终选择56篇文献进行综述。结果与结论:缺血缺氧微环境下干细胞的增殖、分化、自噬水平下降,干细胞衰老进程加速。干细胞老化是导致机体衰老的重要原因,通过调控细胞外信号通路、ciRs-7/miR-7信号轴延缓干细胞衰老可能成为抗衰防衰的新思路。 展开更多
关键词 干细胞 衰老 cirs-7 mir-7 缺血 缺氧 综述
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miR-153-3p靶向KLF7基因调控IL-6/STAT3通路抑制食管癌细胞的增殖和转移的机制研究 被引量:2
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作者 赵亚培 张向苗 王秋冬 《实用癌症杂志》 2023年第5期708-712,共5页
目的探讨miR-153-3p对食管癌细胞增殖和转移的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-153-3p和Kruppel样因子7(KLF7)mRNA表达水平;蛋白质印迹(Western Blot)法检测KLF7、磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)、信... 目的探讨miR-153-3p对食管癌细胞增殖和转移的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-153-3p和Kruppel样因子7(KLF7)mRNA表达水平;蛋白质印迹(Western Blot)法检测KLF7、磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)的表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;ELISA检测白细胞介素(IL-6)的表达;双荧光素酶报告基因检测KLF7和miR-153-3p的靶向。结果与正常食管上皮细胞HEEC相比,食管癌细胞EC9706、Eca-109、EC-1、TE-1中KLF7表达水平升高,miR-153-3p表达水平下降。过表达miR-153-3p和沉默KLF7可降低细胞活性和迁移、侵袭数量,降低p-STAT3表达水平,抑制IL-6的分泌。miR-153-3p靶向KLF7,上调KLF7能部分恢复miR-153-3p对EC9706细胞增殖、迁移、侵袭的作用。结论上调miR-153-3p可以靶向KLF7参与调节IL-6/STAT3通路抑制食管癌细胞增殖和转移。 展开更多
关键词 mir-153-3p KLF7 IL-6/STAT3通路 食管癌 增殖 迁移 侵袭
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miR-7-5p和miR-152-3p联合调控Wnt/β-catenin通路对乳腺癌细胞上皮-间质转化及化疗耐药的影响 被引量:12
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作者 李娜 张哲莹 +5 位作者 朱会芳 贺国洋 韩正华 原志庆 王凡平 王明永 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期765-770,共6页
目的探讨miR-7-5p和miR-152-3p协同抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)进程及紫杉醇耐药的分子机制。方法采用生物信息学软件预测miR-7-5p和miR-152-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因检测两者与TCF4的... 目的探讨miR-7-5p和miR-152-3p协同抑制乳腺癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)进程及紫杉醇耐药的分子机制。方法采用生物信息学软件预测miR-7-5p和miR-152-3p的靶基因,双荧光素酶报告基因检测两者与TCF4的靶向关系;Western blot法检测各组细胞中Wnt/β-catenin信号通路关键调控因子β-catenin及TCF4蛋白的表达;在转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics基础上给予Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl处理后,Western blot法检测MCF-7/TAX细胞中β-catenin、TCF4和EMT相关蛋白(E-cadherin、vimentin)的表达,Transwell小室实验检测MCF-7/TAX细胞侵袭和迁移能力;MTT实验检测激活Wnt/β-catenin信号通路对MCF-7/TAX细胞紫杉醇耐药性的影响。结果TCF43′UTR区域存在能够与miR-7-5p及miR-152-3p互补的结合位点;转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics后可使TCF4野生型(TCF4-WT)报告基因载体的荧光素酶活性较NC组明显降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与NC组相比,转染miR-7-5p mimics和miR-152-3p mimics后各组紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞中β-catenin和TCF4蛋白的表达水平明显降低(P<0.05),且两者共同转染后MCF-7/TAX细胞中β-catenin和TCF4蛋白的表达水平较miR-7-5p组或miR-152-3p组进一步降低(P<0.05)。Western blot结果显示,LiCl处理后MCF-7/TAX细胞中β-catenin、TCF4和vimentin蛋白表达水平明显升高,而E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。Transwell小室结果显示,LiCl处理后MCF-7/TAX细胞侵袭和迁移能力明显增强(P<0.05)。MTT结果显示,不同浓度紫杉醇作用下,miR-7-5p+LiCl组细胞增殖活力较miR-7-5p组明显升高;同时miR-152-3p+LiCl组和miR-7-5p/152-3p+LiCl组细胞的增殖活力较NC组均明显升高(P<0.05)。结论TCF4是miR-7-5p和miR-152-3p的共同靶标。miR-7-5p和miR-152-3p可共同抑制MCF-7/TAX细胞中Wnt/β-catenin信号通路的活化。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 WNT/Β-CATENIN信号通路 mir-7-5p mir-152-3p 上皮-间质转化 耐药性
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脑胶质瘤中miR-7与EGFR/PI3K信号通路相关基因蛋白表达的关系 被引量:4
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作者 刘亮洪 张洪云 +2 位作者 刘晓智 张立东 姜忠敏 《山东医药》 CAS 2014年第27期1-3,共3页
目的观察脑胶质瘤组织、U251细胞中miR-7、EGFR/PI3K信号通路相关基因蛋白(EGFR、PI3K和AKT2)的表达关系。方法 42例脑胶质瘤患者,手术切除取肿瘤组织,其中8例选取癌旁正常脑组织。培养脑胶质瘤U251细胞,分为空白对照组(仅加入脂质体)... 目的观察脑胶质瘤组织、U251细胞中miR-7、EGFR/PI3K信号通路相关基因蛋白(EGFR、PI3K和AKT2)的表达关系。方法 42例脑胶质瘤患者,手术切除取肿瘤组织,其中8例选取癌旁正常脑组织。培养脑胶质瘤U251细胞,分为空白对照组(仅加入脂质体)、无义序列组(加入无义序列和脂质体)、miR-7转染组(转染miR-7基因片段)。采用RT-PCR法检测脑胶质瘤组织、各组U251细胞中的miR-7;免疫组化法检测胶质瘤组织中的EGFR、PI3K和AKT蛋白,RT-PCR和Western blotting法分别检测各组U251细胞EGFR、PI3K、AKT2 mRNA和蛋白。结果脑胶质瘤和正常脑组织中的miR-7 mRNA表达分别为1.47±0.27和3.47±0.15,两者比较,P<0.05。随着脑胶质瘤WHO级别的增加,miR-7表达逐渐减少,EGFR、PI3K和AKT2表达增加(P均<0.05)。脑胶质瘤组织中miR-7与EGFR、PI3K、pAKT表达呈负相关(r分别为-0.754、-0.528、-0.467,P均<0.05)。U251细胞转染miR-7后EGFR、PI3K和AKT表达降低(P均<0.05)。结论脑胶质瘤组织中miR-7表达减少,与EGFR/PI3K通路成员表达呈负相关;U251细胞转染miR-7后EGFR、PI3K和AKT表达降低。EGFR/PI3K通路可能是miR-7调控胶质瘤发生发展的重要机制之一。 展开更多
关键词 脑肿瘤 胶质瘤 EGFR PI3K信号通路 mir-7基因
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环状RNA ciRS-7靶向miR-219a-5p影响微小隐孢子虫体外增殖的机制 被引量:2
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作者 尹艳玲 黄爽 +5 位作者 姚倩 吴江平 郭浩晨 杨新 宋军科 赵光辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期3989-3999,共11页
旨在探究环状RNA ciRS-7靶向miR-219a-5p影响微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)在HCT-8细胞中增殖的作用机制。以C.parvum感染HCT-8细胞为研究模型,利用Western blot检测HCT-8细胞中的自噬蛋白LC3B-II和p62的表达情况;利用qRT-PCR... 旨在探究环状RNA ciRS-7靶向miR-219a-5p影响微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)在HCT-8细胞中增殖的作用机制。以C.parvum感染HCT-8细胞为研究模型,利用Western blot检测HCT-8细胞中的自噬蛋白LC3B-II和p62的表达情况;利用qRT-PCR和双荧光素酶报告基因试验检测和验证ciRS-7与miR-219a-5p的靶向关系,利用qRT-PCR检测HCT-8细胞中C.parvum的荷虫量(C.parvum hsp70基因的mRNA水平)。结果显示:C.parvum感染诱导HCT-8细胞中LC3B-II和p62的蛋白质表达水平在感染后8、12、24、36和48 h显著上调;过表达ciRS-7显著抑制了C.parvum感染细胞中LC3B-II的蛋白质表达水平,但升高了p62的蛋白质表达水平,而干扰ciRS-7表达的作用相反;C.parvum感染诱导HCT-8细胞中miR-219a-5p的显著下调表达,且ciRS-7可靶向调节miR-219a-5p的表达;miR-219a-5p mimics显著增加了C.parvum感染细胞中LC3B-II的蛋白质表达水平,但降低了p62的蛋白质表达水平,而miR-219a-5p inhibitor的作用相反;miR-219a-5p mimics可逆转过表达ciRS-7对C.parvum感染细胞中LC3B-II蛋白质表达的抑制和p62蛋白质表达的促进作用;miR-219a-5p mimics显著抑制了感染细胞中C.parvum hsp70基因的mRNA表达水平,而miR-219a-5p inhibitor的作用相反;miR-219a-5p mimics逆转了过表达ciRS-7对感染细胞中C.parvum hsp70基因的mRNA表达水平的上调作用。ciRS-7通过靶向miR-219a-5p抑制C.parvum感染诱发的HCT-8细胞自噬,进而促进C.parvum在HCT-8细胞中的增殖。 展开更多
关键词 微小隐孢子虫 circRNA cirs-7/mir-219a-5p轴 自噬 增殖
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Circular RNA ciRS-7 promotes the proliferation and metastasis of pancreatic cancer by regulating miR-7-mediated EGFR/STAT3 signaling pathway 被引量:26
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作者 Lei Liu Fu-Bao Liu +5 位作者 Mei Huang Kun Xie Qing-Song Xie Chen-Hai Liu Min-Jing Shen Qiang Huang 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期580-586,共7页
Background: Pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC) is the most deadly type of tumor, and its pathogenesis remains unknown. Circular RNAs(circRNAs) may be functional and bind to micro RNAs and consequently, influence t... Background: Pancreatic ductal adenocarcinoma(PDAC) is the most deadly type of tumor, and its pathogenesis remains unknown. Circular RNAs(circRNAs) may be functional and bind to micro RNAs and consequently, influence the activity of targeted mRNAs. Recent researches indicate that one circRNA, ciRS-7, acts as a sponge of miR-7 and thus, inhibits its activity. It is well known that miR-7 is a cancer suppressor in many cancers. However, the relationship between ciRS-7 and miR-7, and the role of ciRS-7 in PDAC, remains to be elucidated. Methods: miR-7 and ciRS-7 expression in 41 pairs of PDAC tumors and their paracancerous tissues were detected by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction(qRT-PCR). The relationships between their expression levels and clinicopathological features in PDAC tissues were assessed. The relationship between miR-7 and ciRS-7 was also assessed by Spearman’s correlation. We also used cell lines to evaluate the role of ciRS-7 in cell line behavior. The ciRS-7 interfere RNA(si RNA) and its empty vector were transfected into PDAC cells. PDAC cells proliferation and invasion abilities were detected by MTT assay and invasion analysis. The expression of proteins was assessed by Western blotting. Results: ciRS-7 expression was significantly higher in PDAC tissues than paracancerous tissues( P = 0.002). However, miR-7 expression showed the opposite trend( P = 0.048). Moreover, ciRS-7 expression was inversely correlated with miR-7 in PDAC( r s =-0.353, P = 0.023). ciRS-7 expression was also significantly elevated in venous invasion(3.72 ± 2.93 vs. 2.14 ± 1.26;P = 0.028) and lymph node metastasis(4.19 ± 2.75 vs. 2.32 ± 1.90;P = 0.016) in PDAC patients. Furthermore, ciRS-7 knockdown suppressed cell proliferation and invasion of PDAC cells( P < 0.05), and the downregulation of ciRS-7 resulted in miR-7 overexpression and subsequent inhibition of epidermal growth factor receptor(EGFR) and signal transducer and activator of transcription 3(STAT3). Conclusions: Circular RNA ciRS-7 plays an oncogene role in PDAC, partly by targeting miR-7 and regulating the EGFR/STAT3 signaling pathway. 展开更多
关键词 cirs-7 mir-7 EGFR/STAT3 pathway PDAC
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miR-223靶向Fbxw7基因并通过Notch通路抑制结肠癌细胞凋亡 被引量:2
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作者 马藤 李晓花 +9 位作者 丁演鹂 赵新龙 孙嘉禾 曾凤 段菊凤 苗嘉仪 吴炅臻 赵越 刘龙 杨靖 《湖北医药学院学报》 CAS 2020年第5期443-446,共4页
目的:探讨miR-223抑制抑癌基因Fbxw7对结肠癌生物学特征的影响及其调控机理。方法:检测结肠癌组织中miR-223及FBXW7的表达含量,在人结肠癌细胞HCT116中转染特异性miR-223 Mimics及inhibitor,采用荧光定量PCR检测细胞中miR-223、Fbxw7的m... 目的:探讨miR-223抑制抑癌基因Fbxw7对结肠癌生物学特征的影响及其调控机理。方法:检测结肠癌组织中miR-223及FBXW7的表达含量,在人结肠癌细胞HCT116中转染特异性miR-223 Mimics及inhibitor,采用荧光定量PCR检测细胞中miR-223、Fbxw7的mRNA水平,鉴定细胞活性及凋亡情况。通过siRNA沉默HCT116中的FBXW7和Notch1分子,用Western blot鉴定沉默效率以及Notch信号通路下游的RBPjk蛋白水平,通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:结肠癌组织中miR-223含量升高,FBXW7水平降低;HCT116细胞中miR-223抑制Fbxw7的表达,影响结肠癌细胞的活性和凋亡;而抑制Notch通路后细胞凋亡率下降。结论:miR-223抑制Fbxw7的表达,并通过Notch通路抑制结直肠癌细胞的凋亡,初步验证了miR-223-FBXW7-Notch信号轴在结直肠癌中的作用。 展开更多
关键词 mir-223 FBXW7 结肠癌 细胞凋亡 NOTCH通路
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ciRS-7和miR-7在结直肠腺瘤和腺瘤癌变组织中的表达及相关关系 被引量:1
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作者 谭嘉圣 李伊倩 +1 位作者 张宝庭 陈毅斌 《当代临床医刊》 2022年第2期3-4,共2页
目的探究ciRS-7和miR-7在结直肠腺瘤和腺瘤癌变组织中的表达及相关关系.方法选入我院2019年7月至2021年6月收治的结直肠腺瘤和结直肠腺癌患者各30例,采集病变组织标本,经荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7和miR-7,比较结直肠腺瘤和结直肠... 目的探究ciRS-7和miR-7在结直肠腺瘤和腺瘤癌变组织中的表达及相关关系.方法选入我院2019年7月至2021年6月收治的结直肠腺瘤和结直肠腺癌患者各30例,采集病变组织标本,经荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7和miR-7,比较结直肠腺瘤和结直肠腺癌的ciRS-7和miR-7水平,分析二者间的关系.结果结直肠腺癌ciRS-7的表达水平高于结直肠腺瘤,miR-7表达水平低于结直肠腺瘤(P<0.05).结直肠腺瘤病变组织中,ciRS-7和miR-7呈明显负相关(P<0.05);结直肠腺癌病变组织中,ciRS-7和miR-7呈明显负相关(P<0.05).结论结直肠腺癌病变组织ciRS-7表达高于结直肠腺瘤病变组织,miR-7表达低于结直肠腺瘤病变组织,二者呈负相关. 展开更多
关键词 结直肠腺瘤 腺瘤癌变组织 cirs-7 mir-7 相关关系
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miR-7抑制喉鳞癌Hep-2细胞增殖及迁移的研究 被引量:9
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作者 徐瑶 欧阳学农 +2 位作者 陈曦 赵忠全 綦晓艳 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2015年第3期193-197,共5页
目的探讨上调microRNA-7(miR-7)表达对喉鳞癌Hep-2细胞增殖与迁移的作用及可能机制。方法通过脂质体转染miR-7模拟物(miR-7 mimics)及随机序列(miR-Scramble),将喉鳞癌Hep-2细胞分成miR-7组、Scramble组和空白对照(Mock)组,实时定量PCR(... 目的探讨上调microRNA-7(miR-7)表达对喉鳞癌Hep-2细胞增殖与迁移的作用及可能机制。方法通过脂质体转染miR-7模拟物(miR-7 mimics)及随机序列(miR-Scramble),将喉鳞癌Hep-2细胞分成miR-7组、Scramble组和空白对照(Mock)组,实时定量PCR(qPCR)检测转染48 h后各组细胞中miR-7表达,CCK-8法检测转染48 h后的各组细胞的增殖抑制情况,Transwell试验观察转染24 h后细胞迁移能力,qPCR及Western blotting检测PI3K(p110)、AKT及pAKT的mRNA和蛋白表达情况。结果 miR-7组Hep-2细胞转染miR-7 mimics后miR-7表达水平明显上调,与其余两组比较差异有统计学意义(P<0.01);与Scramble组和Mock组相比,miR-7组Hep-2细胞的增殖抑制率升高,迁移能力降低,且PI3K、AKT及p AKT的mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。结论上调喉鳞癌Hep-2细胞中miR-7表达能够抑制肿瘤细胞的增殖与迁移,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 mir-7 喉癌 细胞增殖 细胞迁移 PI3K/AKT信号通路
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过表达miR-7对结肠癌HCT-116细胞生物学行为的影响 被引量:1
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作者 马利 熊兵红 +2 位作者 黄卫 罗华友 王昆华 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第2期115-120,共6页
目的探讨上调microRNA-7(miR-7)表达对结肠癌HCT-116细胞生物学行为的影响及可能机制。方法 HCT-116转染后分成miR-7 mimics组、Scramble(阴性对照)组和空白对照组。实时荧光定量PCR(RT-Fq-PCR)检测转染48 h后各组细胞中miR-7表达水平,C... 目的探讨上调microRNA-7(miR-7)表达对结肠癌HCT-116细胞生物学行为的影响及可能机制。方法 HCT-116转染后分成miR-7 mimics组、Scramble(阴性对照)组和空白对照组。实时荧光定量PCR(RT-Fq-PCR)检测转染48 h后各组细胞中miR-7表达水平,CCK-8法检测转染72 h后各组细胞的增殖抑制情况,Transwell实验观察转染24 h后细胞侵袭能力,流式细胞仪行细胞周期和细胞凋亡检测。Western blot检测PI3K(p110)、p-Akt及p-mTOR的蛋白表达。结果 miR-7 mimics组miR-7表达水平明显上调,与其余两组比较差异有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组和空白对照组相比,miR-7 mimics组细胞增殖抑制率升高,侵袭能力降低,细胞周期分析提示G0/G1期的细胞比例增高,S期细胞明显减少,细胞凋亡率明显增加,且PI3K、p-Akt及p-mTOR的蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论上调结肠癌HCT-116细胞中miR-7表达能抑制肿瘤细胞的增殖与侵袭,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 mir-7 结肠癌 细胞增殖 凋亡 PI3K/AKT信号通路
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miR-7-5p在三阴性乳腺癌中的作用及其机制 被引量:1
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作者 李鹍鹏 刘平贤 +1 位作者 杜新峰 张浩 《广东医学》 CAS 2022年第12期1477-1484,共8页
目的探讨miR-7-5p通过磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K-Akt-mTOR)信号通路对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移及血管生成的影响。方法利用qRT-PCR检测TNBC组织、癌旁正常组织以及TNBC细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-... 目的探讨miR-7-5p通过磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K-Akt-mTOR)信号通路对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、迁移及血管生成的影响。方法利用qRT-PCR检测TNBC组织、癌旁正常组织以及TNBC细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-361和MDA-MB-468)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)中miR-7-5p表达水平。将MDA-MB-468细胞随机分为空白对照组、模拟物对照组、miR-7-5p模拟物组、抑制剂对照组、miR-7-5p抑制剂组、miR-7-5p模拟物+pcDNA组和miR-7-5p模拟物+pcDNA-PIK3CD组。CCK-8检测细胞活力;Transwell检测细胞迁移能力;血管拟态实验分析细胞血管生成能力;双荧光素酶实验证实miR-7-5p与PIK3CD的靶向关系;Western blot检测细胞中PIK3CD、血管内皮生长因子(VEGF)、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达。结果miR-7-5p在TNBC组织和细胞系中下调表达(P<0.05)。上调miR-7-5p,细胞活力下降,迁移细胞数减少,血管拟态形成指数及VEGF、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR下降(P<0.05);下调miR-7-5p,细胞活力明显升高,迁移细胞数增加,血管拟态形成指数及蛋白VEGF表达增加(P<0.05)。miR-7-5p直接靶向负调控PIK3CD蛋白表达。PIK3CD过表达可逆转miR-7-5p对细胞增殖、迁移、血管生成和PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平的抑制作用。结论miR-7-5p通过靶向下调PIK3CD蛋白表达,抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路激活,进而降低TNBC细胞增殖、迁移及血管生成能力。 展开更多
关键词 mir-7-5p 磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 三阴性乳腺癌 增殖 迁移 血管生成
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miR-452-5p靶向SOX7促进食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭及EMT 被引量:5
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作者 尹情 韩俊淑 +5 位作者 董稚明 郭炜 沈素朋 梁佳 路军涛 郭艳丽 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期294-300,共7页
目的:检测miR-452-5p在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达,并探讨其异常表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响及其分子机制。方法:收集2012年3月至2015年12月在河北医科大学第四医院就诊的86名ESCC患者的癌组织样本和对... 目的:检测miR-452-5p在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达,并探讨其异常表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响及其分子机制。方法:收集2012年3月至2015年12月在河北医科大学第四医院就诊的86名ESCC患者的癌组织样本和对应的癌旁组织,用qPCR法检测miR-452-5p及其他相关基因在ESCC组织和细胞中的表达;向KYSE-150细胞中分别转染miR-452-5p mimic或pcDNA3.1-SOX7构建过表达的细胞株。分析miR-452-5p表达与ESCC病理特征和患者5年OS的关系。用MTS、Tanswell法检测miR-452-5p过表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响;用双荧光素酶报告基因实验及TOP/FOP报告基因系统检测miR-452-5p与SRY盒转录因子(SOX7)3’UTR区的结合作用及对Wnt/β-catenin通路活化水平的影响。结果:miR-452-5p在ESCC组织中呈明显高表达(P<0.01),并与ESCC患者的淋巴结转移、TNM分期及5年OS密切相关(均P<0.01)。miR-452-5p过表达明显促进食管癌KYSE-150细胞的增殖、侵袭能力及EMT进程(P<0.05或P<0.01)。SOX7是miR-452-5p的直接靶基因,miR-452-5p通过对SOX7的负向调控影响了Wnt通路活化水平(P<0.05或P<0.01),同时,miR-452-5p表达也受Wnt通路活化水平的影响(P<0.05或P<0.01),其可能为Wnt通路下游靶基因。结论:miR-452-5p通过miR-452-5p/SOX7/Wnt/miR-452-5p正反馈环路提高Wnt/β-catenin通路活化水平,进而促进ESCC KYSE-150细胞的增殖、侵袭能力及EMT进程,miR-452-5p有望成为ESCC患者靶向治疗的潜在靶点及预后评估的新型分子标志物。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 KYSE-150细胞 mir-452-5p SRY盒转录因子7 WNT/Β-CATENIN信号通路
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miR-7在结直肠癌中的研究进展 被引量:1
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作者 罗雨 秦安成 +1 位作者 黄海 钱伟峰 《医学综述》 2019年第14期2740-2745,共6页
miR-7正常表达在正常细胞和器官的生长、发育以及分化中发挥重要作用。在多种肿瘤细胞中,miR-7的表达下调,充当抑癌基因的角色。miR-7作为一种抑癌基因在多种肿瘤的发生和发展中发挥作用,与肿瘤增殖、迁移及侵袭等行为密切相关。miR-7... miR-7正常表达在正常细胞和器官的生长、发育以及分化中发挥重要作用。在多种肿瘤细胞中,miR-7的表达下调,充当抑癌基因的角色。miR-7作为一种抑癌基因在多种肿瘤的发生和发展中发挥作用,与肿瘤增殖、迁移及侵袭等行为密切相关。miR-7的表达受细胞内多种信号通路的调控,如Yin Yang 1、Paired box 6、TYRO3等,通过调控与miR-7相关的信号通路可为结直肠癌的诊治提供新思路。miR-7具有良好的临床应用前景,可为将来更好地治疗结直肠癌提供新途径。 展开更多
关键词 结直肠癌 mir-7 信号通路 抑癌基因 治疗靶点
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松果菊苷调控miR-485-5p/TRIM7信号通路对胶质母细胞瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响机制研究
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作者 向城卫 陈星宇 +2 位作者 刘应刚 石海平 李维民 《中国临床神经科学》 2024年第2期139-147,共9页
目的探讨松果菊苷(ECH)调控miR-485-5p/三重基序蛋白7(TRIM7)信号通路对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法qRT-PCR检测GBM细胞中miR-485-5p表达水平;筛选最佳干预细胞系(U251细胞),以不同浓度ECH(0、1、5、10、20μmol... 目的探讨松果菊苷(ECH)调控miR-485-5p/三重基序蛋白7(TRIM7)信号通路对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法qRT-PCR检测GBM细胞中miR-485-5p表达水平;筛选最佳干预细胞系(U251细胞),以不同浓度ECH(0、1、5、10、20μmol·L-1)干预,MTT法检测各GBM细胞增殖情况;将U251细胞分为对照组(正常培养)、ECH组(10μmol·L-1)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)、miR-485-5p inhibitor组(转染miR-485-5p inhibitor),检测细胞中miR-485-5p的表达水平;Edu染色、Transwell小室和流式细胞仪分别检测细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡;Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、TRIM7、E-cadherin、vimentin表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-485-5p和TRIM7的靶向关系。小鼠体内肿瘤形成实验验证ECH对GBM肿瘤生长及miR-485-5p/TRIM7的影响。结果miR-485-5p在GBM细胞中表达水平降低(P<0.05);ECH显著抑制U251细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡;降低U251细胞中PCNA、MMP-2、TRIM7、vimentin蛋白水平,升高E-cadherin蛋白水平(均P<0.05);抑制miR-485-5p表达可逆转ECH对U251细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用以及对凋亡的促进作用(均P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-485-5p靶向调控TRIM7的表达(P<0.05);体内实验显示ECH可降低移植瘤质量和体积及TRIM7、Ki-67蛋白表达水平,增高移植瘤中miR-485-5p水平(P<0.05)。结论ECH可抑制GBM细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡,可能与调控miR-485-5p/TRIM7信号通路有关。 展开更多
关键词 松果菊苷 mir-485-5p/TRIM7信号通路 胶质母细胞瘤 增殖 凋亡 迁移
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miR-139-5p靶向SLC39A7基因通过Wnt/β-catenin信号抑制肾癌细胞周期和增殖 被引量:2
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作者 石涛 高艳 +3 位作者 凡磊 周本正 丁志勇 张大虎 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期3063-3068,共6页
目的 研究miR-139-5p对肾癌(RC)细胞周期和增殖的影响和潜在机制。方法 以正常肾小管上皮细胞HK-2为对照,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹检测RC细胞系A498、786-O和SN12C-PM6中miR-139-5p和SLC39A7的表达;在786-O细... 目的 研究miR-139-5p对肾癌(RC)细胞周期和增殖的影响和潜在机制。方法 以正常肾小管上皮细胞HK-2为对照,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western印迹检测RC细胞系A498、786-O和SN12C-PM6中miR-139-5p和SLC39A7的表达;在786-O细胞中高表达miR-139-5p和敲减SLC39A7,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、CyclinE和β-catenin蛋白表达水平,CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞存活率和细胞周期,双荧光素酶报告系统验证miR-139-5p和SLC39A7的关系。结果 与NC组和miR-con组相比,miR-139-5p组miR-139-5p表达量显著上升(P<0.05),细胞存活率显著降低(P<0.05),CyclinD1和CyclinE表达量均显著降低(P<0.05),G0/G1期和G2/M期细胞百分比显著升高(P<0.05),S期细胞百分比显著降低(P<0.05)。与NC组和si-con组相比,si-SLC39A7组786-O细胞中SLC39A7、CyclinD1和CyclinE表达量显著下降(P<0.05),细胞存活率显著降低(P<0.05),G0/G1期和G2/M期细胞百分比显著升高(P<0.05),S期细胞百分比显著降低(P<0.05)。与miR-con组相比,miR-139-5p组WT-SLC39A7的萤火虫荧光素酶相对活性显著下降(P<0.05)。与miR-con组SLC39A7蛋白表达量相比,过表达miR-139-5p组显著下降(P<0.05);与anti-miR-con组SLC39A7表达量相比,anti-miR-139-5p表达组显著上升(P<0.05)。与miR-con组SLC39A7水平相比,过表达miR-139-5p可抑制786-O细胞中SLC39A7表达(P<0.05)。与miR-139-5p+pcDNA-con组相比,miR-139-5p+pcDNA-SLC39A7组的SLC39A7、CyclinD1和CyclinE表达量显著升高(P<0.05),细胞存活率显著升高(P<0.05),G0/G1期和G2/M期细胞百分比显著降低(P<0.05),S期细胞百分比显著升高(P<0.05)。与miR-con组786-O细胞中β-catenin表达水平相比,过表达miR-139-5p组显著降低(P<0.05);与miR-139-5p+pcDNA-con组786-O细胞中β-catenin表达相比,miR-139-5p+pcDNA-SLC39A7组显著升高(P<0.05)。结论 miR-139-5p靶向SLC39A7可能通过Wnt/β-catenin信号通路调控RC细胞周期和增殖。miR-139-5p是RC的潜在分子靶点。 展开更多
关键词 肾癌 mir-139-5p SLC39A7 增殖 细胞周期 WNT/Β-CATENIN信号通路
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miR-34a通过Notch信号通路影响乳腺癌细胞的生物学行为 被引量:2
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作者 王雷 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期61-65,共5页
目的探讨miR-34a通过Notch信号通路影响乳腺癌细胞的生物学行为。方法乳腺癌细胞MCF-7分为miR-34a及Control组,分别利用脂质体转染miR-34a mimics及miR-34a NC,RT-PCR法检测细胞中miR-34a表达,MTT、Hoechst染色及transwell法分别检测细... 目的探讨miR-34a通过Notch信号通路影响乳腺癌细胞的生物学行为。方法乳腺癌细胞MCF-7分为miR-34a及Control组,分别利用脂质体转染miR-34a mimics及miR-34a NC,RT-PCR法检测细胞中miR-34a表达,MTT、Hoechst染色及transwell法分别检测细胞活力、凋亡及侵袭情况;western blot检测细胞中Notch1,Notch2,Dll1及Jagged-1蛋白表达情况。结果与Control组比较,miR-34 mimics组中miR-34a表达量上调,细胞皱缩,变圆变亮,细胞活力降低(P<0.01),细胞凋亡率显著提高(P<0.01),细胞侵袭数目减少(P<0.01),Notch1,Notch2,Dll1及Jagged-1蛋白表达量都显著降低(P<0.01)。结论 miR-34a mimics通过抑制Notch信号通路进而诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡并抑制其侵袭。 展开更多
关键词 mir-34A NOTCH信号通路 乳腺癌细胞MCF-7 apoptosis 侵袭
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