circ-E2F3促进宫颈癌细胞增殖的机制研究

目的研究circ-E2F3通过抑制miR-296-5p影响宫颈癌进展的作用机制。方法采用qRT-PCR检测宫颈癌组织和癌旁组织中circ-E2F3的表达量,筛选宫颈癌细胞系,通过qRT-PCR检测宫颈癌细胞系和正常宫颈黏膜上皮细胞中circ-E2F3的表达量。采用CCK-8检测细胞活力,通过检索数据库筛查circ-E2F3可能的分子机制,并通过双荧光素酶分析、qRT-PCR等方法证实其调控机制。结果circ-E2F3在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系CaSki中表达上调。体外实验证实circ-E2F3能促进宫颈癌细胞增殖;体内实验证实circ-E2F3通过抑制miR296-5p促进肿瘤细胞生长。结论circ-E2F3通过抑制miR-296-5p在宫颈癌的进展中发挥重要作用,高表达的circ-E2F3可能是判断宫颈癌进展的重要指标。

circ-MTHFD1L促进胰腺导管腺癌进展的作用机制

目的 探讨circ-MTHFD1L在胰腺导管腺癌(PDAC)进展中的作用,并分析其与miR-217与E2F3的相互调控关系,为PDAC的标志物选择和靶向疗法提供依据。方法 利用Arraystar Human circRNAs微阵列分析法分析20例PDAC组织和癌旁组织中差异表达的circRNAs。通过qRT-PCR检测circ-MTHFD1L在PDAC组织样本和癌旁组织样本中的表达水平。TCGA数据库的数据用于分析PDAC患者的总体生存数据。采用MTT细胞增殖实验、流式细胞术凋亡实验、Transwell迁移侵袭实验研究不同转染组的细胞增殖、凋亡和侵袭。在体内裸鼠的肿瘤形成试验中研究肿瘤发展的速度。此外,采用双荧光素酶报告基因检测和蛋白质印迹检测证明了circ-MTHFD1L与miR-217和E2F3之间的靶向关系。结果 通过微阵列数据分析筛选circ-MTHFD1L在肿瘤组织中的差异最为显著作为进一步研究的目标分子。与癌旁组织相比,circ-MTHFD1L在PDAC组织中的表达水平显著升高(P<0.05)。当circ-MTHFD1L被敲低时,PDAC细胞的增殖、迁移和侵袭能力将被抑制,细胞凋亡率显著升高且差异均具有统计学意义(P<0.05)。同时,在胰腺癌细胞PANC-1中,过表达miR-217或沉默circ-MTHFD1L,E2F3蛋白表达水平降低(P<0.05),而且通过双荧光素酶报告基因实验验证了CIRC-MTHFD1L与miR-217和E2F3之间的靶向关系。结论 Circ-MTHFD1L可通过抑制miR-217表达水平并增强E2F3蛋白表达水平促进PDAC细胞的进展。