环状RNA circ-Foxo3模拟物转染对人食管癌细胞株TE-13增殖、凋亡、放射敏感性的影响

目的观察环状RNA circ-Foxo3模拟物(circ-Foxo3 mimics)对人食管鳞癌细胞株TE-13增殖、凋亡、放射敏感性的影响,并探讨其机制。方法体外培养人食管鳞癌细胞株TE-13,将circ-Foxo3 mimics和NC转染至TE-13细胞中培养(分别计为过表达组、NC组)。采用qRT-PCR法检测TE-13细胞circ-Foxo3,CCK8实验检测两组细胞OD值,流式细胞术检测两组细胞凋亡率,克隆形成实验检测两组细胞放射敏感性;Western blotting法检测两组细胞PTEN蛋白。结果 TE-13细胞转染前后circ-Foxo3相对表达量分别为0. 05±0. 01、3. 99±0. 17,转染前后比较,P<0. 05。过表达组0、24、48、72、96 h OD值分别为0. 20±0. 00、0. 32±0. 02、0. 46±0. 03、0. 74±0. 02、1. 26±0. 01,NC组分别为0. 20±0. 00、0. 45±0. 03、0. 72±0. 02、1. 35±0. 03、2. 18±0. 01,两组比较(除0 h外),P均<0. 05。过表达组照射前后细胞凋亡率分别为4. 83±0. 85、11. 67±0. 47,NC组分别为0. 37±0. 06、5. 17±0. 25,两组同组照射前后及两组治疗后比较,P均<0. 05。过表达组0、2、4、6、8 Gy细胞存活分数分别为0. 20±0. 00、0. 83±0. 04、0. 67±0. 01、0. 50±0. 03、0. 31±0. 01,NC组分别为0. 20±0. 00、0. 91±0. 02、0. 84±0. 01、0. 65±0. 02、0. 52±0. 02,两组比较(除0 Gy外),P均<0. 05。过表达组照射前后PTEN蛋白条带灰度值分别为0. 71±0. 02、0. 87±0. 01,NC组分别为0. 53±0. 04、0. 55±0. 04,两组同组照射前后及两组治疗后比较,P均<0. 05。结论 circ-Foxo3mimics转染能抑制细胞增殖,促进凋亡,增加了细胞对放射的敏感性,机制可能与circ-Foxo3上调PTEN蛋白表达有关。

双（6－氧－间－羧基苯磺酰基）β－CD·Fe^（3＋）模拟过氧化物酶的酶促反应动力学

模拟过氧化物酶，采用愈创木酚法，求得了双６－氧－间－羧基苯磺酰基β－ＣＤ·Ｆｅ~３＋配合物（以下简称“模拟酶”）的酶促反应动力学曲线，所得曲线符合米氏方程（Ｍｉｃｈａｃｌｉｓ－ＭｅｎｔｅｎＥｑｕａ－ｔｉｏｎ）；采取米氏方程的双倒数方程（ＬｉｎｅｗｅａｖｅｒＢｕｒｋＥｑｕａｔｉｏｎ）作图，求得了模拟酶的特征常数Ｋｍ值（米氏常数）；在反应中，发现此模拟酶对底物Ｈ２Ｏ２具有较大亲合力，形成了“酶－底”复合物，由此求得模拟酶的反应机制．在相同实验条件下，分别测了两个参照物：ＦｅＣｌ３和双６－氧－间－羧基苯磺酰基β－ＣＤ对此反应的催化能力，作用不太明显．

聚乙烯亚胺介导miR-2861模拟物转染MC3T3-E1细胞的体外成骨分化

目的:通过非病毒载体聚乙烯亚胺(PEI)介导miRNA-2861(miR-2861)模拟物转染MC3T3-E1细胞系,探讨miR-2861/PEI复合物在前成骨细胞中的转染效率及其对细胞增殖和成骨向分化的影响。方法:将适量的PEI分别与miR-2861和阴性对照(NC)以元素N/P=10的比例混合形成基因/载体复合物。将miR-2861/PEI复合物作为实验组,NC/PEI复合物作为阴性对照组以排除人工合成的双链基因对成骨作用的干扰。采用MTT法筛选PEI复合miR-2861模拟物的最佳使用浓度;应用荧光成像和茎环法RT-PCR技术分别检测10、30、50和100nmol·L^(-1) miR/PEI复合物对MC3T3细胞的瞬时转染效率和miR-2861的表达情况;采用qRT-PCR技术和茜素红染色检测用选定浓度瞬时转染miR-2861/PEI复合物作用下MC3T3细胞的成骨能力。结果:与空白对照组比较,100nmol·L^(-1) miR-2861/PEI复合物作用72h时MC3T3细胞增殖率明显下降(P<0.05)。随转染浓度增加,miR-2861/PEI复合物在MC3T3细胞中的转染效率逐渐升高。茜素红染色及定量分析,实验组诱导21d后出现较多的钙盐沉积结节,而空白对照组和阴性对照组均较少。结论:以PEI作为载体可使miR-2861模拟物有效转染MC3T3-E1细胞并在细胞中高表达,miR-2861模拟物具有一定的促MC3T3-E1细胞成骨向分化的作用。

脉冲磁场去除钢中Al_(2)O_(3)夹杂物的研究

为了探究脉冲磁场对钢中Al_(2)O_(3)夹杂物的去除效果,使用中频感应炉进行了熔炼实验。利用COMSOL多物理场软件对脉冲磁场作用下钢液流场和不同尺寸夹杂物的去除行为进行了数值模拟,将数值模拟与实验结果相结合,探讨了脉冲磁场作用对钢中Al_(2)O_(3)夹杂物的去除机制。实验发现,施加脉冲磁场处理后,钢中Al_(2)O_(3)夹杂物整体含量减少,小尺寸的Al_(2)O_(3)夹杂物数量百分比降低,大尺寸的Al_(2)O_(3)夹杂物数量百分比有所增加,表明施加脉冲磁场促进了Al_(2)O_(3)夹杂物的去除和碰撞长大。数值模拟结果表明,施加脉冲磁场处理时,钢液中形成上下双环流,促进了夹杂物的去除,且夹杂物尺寸越大,去除效率越高;同时,夹杂物大部分被分离至壁面,与实验观察结果一致。

3D打印个体化椎弓根导板研制及模拟置钉的准确性

背景:手术精准度是外科手术成功的一项保证,以往椎弓根置钉过程在很大程度上凭借术者经验置钉,存在较大的主观性,不可避免地造成一定的误置率。3D打印技术辅助椎弓根置钉使得置钉过程具有可预见性,使手术个体化、精确化、简单化,有望得到广泛的推广应用。目的:设计3D打印的个体化椎弓根导板,体外模拟置钉,探讨其在椎体椎弓根置钉术中的可行性。方法:选择河北省人民医院2016年4至7月收治的11例腰椎退行性病变患者的腰椎薄层CT扫描数据,三维重建每例患者的L1、L3及L5三个椎体。根据1例患者的腰椎CT数据先行预实验:按照术中置钉原则计算机设计钉道进钉位置、方向,反复验证及调整,设计出"最佳"导板模型;然后体外模拟置钉,并电锯剖开验证置钉效果。结果与结论:(1)实验共应用椎弓根导板30个,置钉60枚,模拟置钉过程顺利,导板贴服良好,未出现椎弓根螺钉穿破椎弓根皮质,螺钉位置准确可靠,效果良好;(2)置钉前后左侧椎弓根进钉的水平面角度及矢状面角度变化差异均无显著性意义(P>0.05),右侧椎弓根进钉的水平面角度及矢状面角度变化差异亦无显著性意义(P>0.05);(3)结果表明,实验设计出的椎弓根导板置钉准确,模拟置钉前后进钉方向变化无明显差异,证实了3D打印个体化椎弓根导板的置钉可行性,但尚需进一步临床验证。

铜配合物的分子几何结构模拟方法研究

对比和评价了用分子力学MM+法和半经验PM3法模拟23个铜配合物分子几何结构的结果.MM+法对四配位配合物的几何模拟结构与晶体结构差别大而不适于模拟这类分子,其可以模拟五配位三元配合物,预计这种配合物Cu—N键和Cu—O键的偏差将分别高达(9.45±0.062)%和(18.2±0.110)%.PM3方法可以较好地模拟所考察的各种类型铜配合物,预计四配位配合物的Cu—N键和Cu—O键的偏差分别为(3.26±0.023)%和(2.77±0.023)%.而3+1+1型配合物的该偏差分别为(5.18±0.032)%和(4.31±0.037)%.

异双核配合物CuZnTS·CH_3OH的合成和晶体结构

合成并表征了异双核配合物 Cu Zn TS·CH3OH[TS为二 (3 -羧基水杨醛 )缩 -1 ,3 -丙二胺 ]。晶体结构分析表明此配合物属三斜晶系 ,空间群为 P1 ,晶格参数为 a=0 .9440 3 (1 9) nm,b=1 .1 5 91 (2 ) nm,c=0 .91 3 2 2 (1 8) nm ,α=91 .0 9(3 )°,β=97.0 6(3 )°,γ=75 .0 6(3 )°,Z=2。最终一致性因子 R1 =0 .0 499,w R2 =0 .1 3 1 8。异双核 Cu Zn TS· CH3OH配合物中的 2个金属原子通过酚氧原子桥联在一起 ;铜原子与 2个氮原子、2个酚氧原子和 1个甲醇分子配位形成变形的四方锥结构 ;锌原子与 2个酚氧和 2个端基羧氧配位 ,并与相邻分子中的 1个端基羧氧原子存在弱的配位相互作用 ,锌原子也处于变形四方锥几何构型之中。结合晶体结构对配合物做了电化学性质研究。

一维链状高价锰配合物[Mn_2(C_7H_4O_3)_4(CH_3OH)_2]·4H_2O_2CH_3OH的合成与结构

合成了一维链状高价锰配合物[Mn2(C7H4O3)4(CH3OH)2]4H2O2CH3OH,并对其进行了IR、X-射线衍射、UV-Vis和TG-DSC等表征。单晶衍射结果表明,该配合物晶体属三斜晶型,空间群P?晶胞参数a=7.653(5),b=10.486(7),c=12.943(8),=103.24(1),?=104.55(1),?=110.11(1),V=885.4(9)3,Z=1。UV-Vis光谱在547nm有一个吸收峰,相应于Mn(Ⅳ)的d-d电子跃迁光谱。

二维聚合物[MnNa(Salicylate)_2(CH_3OH)(H_2O)]_n·0.5nH_2O的合成、晶体结构与活性研究

In this paper, a novel polymeric complex [MnNa（Salicylate）2（CH3OH）（H2O）]n·0.5nH2O was obtained and characterized by IR spectra, elemental analysis and single crystal X-ray diffraction. The titled complex is crystallized in triclinic system, space group P1 with a=0.763 82（15） nm, b= 1.037 1（2） nm, c=1.290 9（3） nm, α= 103.59（3）°, β=104.65（3）°, γ=109.50（3）°, V=0.873 6（3） nm 3, Z=2, Dc=1.556 Mg/m 3, Mr=409.20, μ=0.823 mm -1, F（000）=418, R=0.0614, wR= 0.147 6. The activity in catalyzing the superoxygen anionic free radical dismutation was determinated.

1,1,1-三[3-(2-苯并咪唑基)-2-氧杂丙基]丙烷镍配合物合成及结构测定

合成了一个新的三脚架结构配体及其镍配合物的晶体 .该晶体属单斜晶系 ,P2 1 n空间群 ,a =1.2 15 1(4)nm ,b=1.5 5 35 (5 )nm ,c =2 .174 0 (7)nm ,β =90 .5 5 1(18)°,V =4 .10 3(2 )nm3,Z =4 ,Mr =834.0 3,R =0 .0 5 5 6 ,wR =0 .12 5 6 ,μ =0 .5 4 1mm- 1 ,F(0 0 0 ) =175 8.配合物中Ni与配体的三个N和三个O构成六配位变形八面体结构 .晶体中存在着分子间氢键 。

单核镍(Ⅱ)配合物[Ni(IDB)_2][C_6H_4(OH)COO].ClO_4.CH_3CH_2OH.H_2O的合成和晶体结构

标题配合物是由三齿配体N, N-二(2-苯并咪唑亚甲基)胺(IDB)、Ni(ClO4)2·6H2O与水杨酸钠在乙醇溶液中反应得到的紫色晶体。用X-射线衍射测定了其单晶结构。结果表明,该晶体属三斜晶系,P 空间群,化学式:C41H43ClN10NiO9,Mr = 914.01,a = 11.010(2),b = 13.800(3),c = 15.550(3) 牛 = 100.75(3),?= 102.97(3), = 107.56(3)? V = 2111.3(7) ?,Z = 2,F(000) = 952,Dc = 1.438 g/cm3,(MoK) = 0.591 mm-1,8215个独立可观测点(I>2(I))。最终偏离因子R(I>2(I)):R = 0.0591, wR = 0.1325;R(全部数据): R = 0.1302,wR = 0.1572。结构分析表明,镍(Ⅱ)分别与2个IDB配体中的苯并咪唑的4个氮和胺基的2个氮配位形成畸变的八面体构型。

咪唑桥连双核铜SOD模拟物的电子结构及催化活性的理论研究

利用半经验PM3和密度泛函B3LYP方法研究了β环糊精咪唑桥连双核铜SOD模拟物({[Cu(L).(H2O)(β-CD)]2(im)}3+)、模拟物的衍生物及模拟物与底物分子结合的复合物分子的电子结构,运用自然键轨道(NBO)方法对该体系的电荷分布及成键特征进行了分析.计算结果表明,该模拟物中核心Cu离子与配体H2O分子的结合较弱,在进行超氧阴离子自由基催化反应中可被其它配体所取代.胍基的存在使得超氧化物歧化酶中Cu所带的正电荷增多,而有利于催化反应的进行.与其它配位原子相比,与两个五元环连接的N原子与Cu配位能力相对下降,这也将有利于提高Cu离子与底物的结合能力.由于自由基分子形式,使得超氧化物歧化酶模拟物与反应底物(O.2-)在酸性条件下结合后的络合物中五重态构型比相应的单重态构型更加稳定.同时双核之间的咪唑桥环也对稳定该模拟物的构型起到了一定的作用.

Fe2O3纳米管的模拟酶活性研究及在H2O2检测中的应用

合成了一种具有过氧化物酶活性的新型铁系纳米材料,通过XPS、TEM确定合成的纳米材料为Fe2O3纳米管,可以催化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)的氧化,在pH 3.5的醋酸盐缓冲液中形成蓝色产物。研究发现,Fe2O3纳米管的催化机理与乒乓机理相符,而模拟过氧化物酶的性能完全由Fe2O3纳米管而不是浸出液中的金属离子引起。建立了一种比色测定水中过氧化氢的方法。652 nm处吸光度的变化与H2O2浓度在1.07×10-6~1.00×10-4 mol/L范围内有良好的线性关系,检出限为3.22×10-7 mol/L。可为进一步发展基于纳米材料的模拟酶的应用提供参考。

元宝山露天煤矿3号排土场边坡变形模拟分析

为了更好地评价元宝山露天煤矿3号排土场边坡稳定性,采用FLAC3D软件系统模拟了排弃物荷载作用下的边坡变形特征。结果表明,在排弃物荷载作用下,排弃物受拉剪破坏,粉土和粉质黏土弱层主要受剪切破坏;排弃物在滑坡推力挤压、剪切作用下发生变形、破坏;排土场边坡沿基底粉土、粉质黏土弱层滑移,滑移面为圆弧(排弃物)-平面(粉质黏土、粉土切层)组合。模拟结果为排土场边坡稳定性评价模型的建立提供了依据。

北京市城近郊区光化学烟雾模拟研究

利用EKMA(Empirical Kinetic Modeling Approach)-经验动力学模拟方法及其内置的CB-IV化学反应机理对2000年夏季北京市近郊区光化学污染进行研究,得到了前体物VOC、NOx与O3之间的非线性关系,即EKMA曲线。模拟过程中对前体物VOC、NOx和CO的逐时排放进行两种假定,排放1:假定逐时排放量为全天排放的24 h平均值;排放2:假定来自流动源的排放量与机动车流量线性相关,其他源的排放仍遵循排放1的假定。同时,对混合层以上的污染物浓度进行了6种情况的敏感性检验。结果表明,混合层以上的污染物浓度变化对O3模拟值影响不大,当混合层以上污染物浓度设置为它们在300 m处初始浓度的10%以下时,O3最大小时浓度模拟值与实测值的偏差都较小,O3模拟值与实测值吻合较好的点均落在EKMA脊线的左侧或者脊线上,说明O3模拟值与前体物VOC逐时排放的变化密切相关。敏感性实验表明VOC排放量减半引起O3模拟值降低16%左右,而NOx排放量减半只引起O3模拟值下降8%,说明影响北京地区光化学烟雾产生的主要前体物是VOC。

基于3D打印技术构建个体化椎间孔镜穿刺导向器的设计与应用

背景:椎间孔镜手术频繁的术前透视定位对于医患而言都是有害的,因此应尽量减少或避免术前透视次数。目的:利用3D打印技术构建出一种新型个体化椎间孔镜技术穿刺定位导向器,初步探索其临床应用的可行性,以及其对椎间孔镜手术穿刺准确性、手术时间、透视次数的影响。方法:根据患者术前CT扫描数据,利用Mimics软件建模,模拟手术时工作通道的方向和位置,测量出工作通道的角度,旁开距离等数据,根据这些数据利用建模软件构建出个体化的穿刺定位导向器,之后采用3D打印技术打印出导向器。回顾性分析接受椎间孔镜下髓核摘除术的患者45例,其中导向器组22例使用导向器定位穿刺,传统组23例采用传统方法穿刺。记录并比较2组患者手术时间、穿刺次数、透视次数、目测类比评分和日本骨科协会评分的差异。结果与结论:(1)穿刺次数方面,导向器组(1.27±0.63)次,传统组(3.69±0.70)次,2组间差异有显著性意义(P<0.001);(2)透视次数方面,导向器组(11.59±2.04)次,传统组(20.39±1.80)次,2组间差异有显著性意义(P<0.001);(3)手术时间方面,导向器组(75.44±11.89)min,传统组(87.39±12.51)min,2组间差异有显著性意义(P=0.001)。(4)在临床疗效方面,术前、术后1 d、3个月、6个月腰痛及下肢痛目测类比评分和日本骨科协会评分差异并无显著性意义;(5)结果提示,利用3D打印技术可以根据患者的影像学资料构建出个体化的椎间孔镜穿刺定位导向器,此种导向器可以提高椎间孔镜术中穿刺的准确性,有效减少透视次数和穿刺次数,具备一定的临床应用可行性。

MiR-199a-3p对大鼠肝细胞增殖的抑制作用

目的探讨miR-199a-3p对体外培养SD大鼠BRL-3A增殖的影响.方法人工合成miR-199a-3p模拟物、miR-199a-3p阻遏物及其各自阴性对照载体,分别转染BRL-3A肝细胞,转染后12 h、24 h、48 h和72h,应用定量PCR分析细胞中Cyclin D1和PCNA mRNA表达水平,免疫组化方法观测Cyclin D1和PCNA阳性细胞比率,流式细胞仪检测细胞各周期比例和CCK 8法检测细胞增殖.实验分4组:mimics组,mi-nc组,inhibitors组和in-nc组.结果转染后24 h、48 h、72 h,inhibitors组肝细胞Cyclin D1和PCNA mRNA表达水平较in-nc组显著增多(P<0.05),而mimics组肝细胞Cyclin D1和PCNA mRNA表达水平较mi-nc组显著降低(P<0.05).inhibitors组肝细胞Cyclin D1和PCNA阳性细胞比率均高于mi-nc组(P<0.05),而mimics组肝细胞Cyclin D1和PCNA阳性细胞比率均低于mi-nc组(P<0.05).inhibitorss组肝细胞G0/G1期细胞比例明显低于in-nc组(P<0.05),而mimics组肝细胞G0/G1期细胞比例明显高于mi-nc组(P<0.05).同时,inhibitors组肝细胞S期细胞比例明显低于mi-nc组(P<0.05)和in-nc组(P<0.05).inhibitors组肝细胞增殖能力明显高于in-nc组(P<0.05),mimics组肝细胞增殖能力明显低于mi-nc组(P<0.05).结论 miR-199a-3p能够延长大鼠BRL-3A肝细胞周期和抑制肝细胞增殖,其作用可能与抑制Cyclin D1和PCNA的表达有关.

细胞色素P450 BM3催化正十六烷动力学计算

细胞色素P450BM3作为烷烃羟基化酶,能催化正链烷烃,已被广发研究和应用。利用动力学模拟软件对BM3酶与烷烃底物复合物进行构象、酶的活性位点以及结合能的预测,并通过模拟水以及离子环境下对复合物的影响,从能量及构象位移的角度阐述BM3酶与底物结合的机理,从而用分子动力学观点来解释细胞色素P450催化烷烃机理。用Autodock等软件将BM3与十六烷对接,发现底物C16与铁原子间距为7.57?,并发现与底物结合的活性位点关键残基:ALA330,ALA74,SER72,GLN73,ALA328,LEU188,LEU437。经Gromacs动力学模拟步长为1ns,温度在298K,压力为常压1.0,复合物结合稳定。

远源细粒辫状河心滩坝演化与河流分叉的交互沉积过程:现代沉积启示与数值模拟分析

远源细粒辫状河广泛发育于河流的中下游,其形成的致密储层是深入挖潜油气面临的挑战。结合现代远源细粒辫状河演变的遥感记录影像,运用基于泥沙水动力学的沉积过程数值模拟软件Delft3D正演远源细粒辫状河的生长演化过程,并探讨物源供给对远源细粒辫状河形态的影响,深入剖析和解释远源细粒辫状河心滩坝演化与河流分叉的交互作用和沉积过程,并进行了现代沉积验证。研究表明:①河道沿下游方向由窄变宽是触发远源细粒辫状河形成的主要地形条件。河流流速和河岸牢固程度是决定河流宽度的重要因素。②远源细粒辫状河心滩坝演化与河流分叉的交互沉积过程是心滩坝泥沙与河流流水交互作用的沉积演化过程。心滩坝泥沙与河流流水交互作用具体包括泥沙在河流中的沉积作用和河流对泥沙的侵蚀作用。③远源细粒辫状河心滩坝演化与河流分叉的交互沉积过程包括3种:河道内心滩坝加积导致河流分叉、心滩坝与河岸分离导致河流分叉、心滩坝的局部冲裂分解导致河流分叉。该研究丰富了远源细粒辫状河沉积理论,并且有助于分析远源细粒辫状河沉积相的储层空间展布规律并应用于油气的深入勘探开发。

气相色谱-质谱法测定食品接触材料及制品中2,2,4,4-四甲基-1,3-环丁二醇迁移量

目的建立气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)测定食品接触材料及制品中2,2,4,4-四甲基-1,3-环丁二醇迁移量的分析方法。方法样品采用食品模拟物4%乙酸和95%乙醇浸泡。水基模拟物(4%乙酸)经过乙腈萃取,油脂类模拟物(95%乙醇)旋转蒸干,正己烷定容,用HP-5 MS(30 m×0.25 mm,0.25μm)色谱柱分离后,用气相色谱-质谱法检测,外标法定量。结果本方法检出限0.005 mg/kg;在0.1~2.0 mg/L范围内线性良好,r^2=0.9991;加标浓度为0.1 mg/kg与0.5 mg/kg时,回收率在80.7%~93.7%之间,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)在2.82%~6.22%之间。结论本方法灵敏度高、检测速度快、准确率高,能用于食品接触材料及制品中2,2,4,4-四甲基-1,3-环丁二醇迁移量的测定。