芦比替定通过circCCS靶向miR-1827抑制非小细胞肺癌H522细胞上皮间质转化的机制研究

目的探讨芦比替定(lurbinectedin,Lurb)通过环状RNA CCS(circCCS)靶向微小RNA 1827(microRNA-1827,miR-1827)抑制非小细胞肺癌H522细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的机制。方法实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测非小细胞肺癌组织及H522细胞中circCCS、miR-1827的表达。RIP及双荧光素酶实验验证circCCS和miR-1827的靶向关系。H522细胞分成对照组、Lurb组、Lurb+载体组、Lurb+circCCS组、Lurb+circCCS+miR-NC组和Lurb+circCCS+miR-1827组,噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹实验(Western blot)检测细胞中上皮型钙黏附素(E-cadherin)、神经型钙黏附素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达。结果与癌旁组织比较,非小细胞肺癌组织中circCCS表达增多,miR-1827表达减少(P<0.05)。与肺正常上皮细胞BEAS-2B比较,H522细胞中circCCS表达增多,miR-1827表达减少差异有统计学意义(P<0.05)。CircCCS和miR-1827具有靶向关系。与对照组比较,Lurb组H522细胞中circCCS表达水平、细胞存活率、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低,miR-1827表达水平、细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。与Lurb+载体组比较,Lurb+circCCS组H522细胞中细胞存活率、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低,细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。与Lurb+circCCS+miR-NC组比较,Lurb+circCCS+miR-1827组H522细胞中细胞存活率、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低,细胞凋亡率和E-cadherin蛋白表达水平升高差异有统计学意义(P<0.05)。结论Lurb通过circCCS促进miR-1827的表达抑制H522细胞EMT并诱导细胞凋亡。