circMTO1在肿瘤中的研究进展

恶性肿瘤是危及人类生命的主要疾病之一,有效筛查和早期诊断是临床上亟需解决的问题。环状RNA(circRNA)是一种新的内源性长链非编码RNA,具有一定的组织特异性、疾病特异性以及高度稳定性,可作为miRNA海绵体、靶向microRNAs分子、调节基因转录与表达等生物学功能在肿瘤发生、发展中发挥重要作用。近期研究表明,circMTO1的异常表达能通过多种机制及信号通路影响肿瘤细胞的活力、生长、凋亡和自噬,与肝癌、结直肠癌、宫颈癌等肿瘤的侵袭、转移及预后密切相关,有望成为肿瘤早期诊断及预测预后的一种新兴的生物标志物。本综述,我们对circMTO1在肿瘤中的生物学作用、可能调控机制以及与患者的临床病理、诊断和预后之间的关系等研究进展进行总结,挖掘其未来在肿瘤疾病防治中的潜在应用价值。

circMTO1表达与miR-3200/PEBP1轴的关系及其预测内镜黏膜下剥离术后复发的价值

目的研究circMTO1表达与miR-3200/磷脂酰乙醇胺结合蛋白1(PEBP1)轴的关系及其预测内镜黏膜下剥离术(ESD)后复发的价值。方法选择2015年1月-2018年7月在陆军军医大学第一附属医院(西南医院)接受ESD治疗的早期胃癌患者作为研究对象(早期胃癌组),另取同期经胃黏膜活检明确为正常胃黏膜的受试者作为对照组。检测两组circMTO1、miR-3200和PEBP1的表达水平,随访早期胃癌患者的无复发生存情况,并采用Kaplan-Meier曲线分析无复发生存率的差异。结果早期胃癌组circMTO1和PEBP1表达水平明显低于对照组,miR-3200表达水平明显高于对照组(P<0.05),且circMTO1与miR-3200呈负相关、与PEBP1呈正相关,miR-3200与PEBP1呈负相关;早期胃癌组中不同肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移情况和脉管癌栓情况的circMTO1、miR-3200和PEBP1表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);Kaplan-Meier曲线分析显示,circMTO1高表达的早期胃癌患者无复发生存率高于circMTO1低表达患者,miR-3200高表达的早期胃癌患者无复发生存率低于miR-3200低表达患者,PEBP1高表达的早期胃癌患者无复发生存率高于PEBP1低表达患者。结论早期胃癌中circMTO1低表达与病情恶化和ESD术后无复发生存时间缩短有关,靶向miR-3200/PEBP1轴可能是circMTO1参与早期胃癌发生发展的分子机制。

circMTO1调控Wnt/β-catenin抑制乳腺癌细胞增殖和转移能力的机制研究

目的研究环状RNA MTO1(circMTO1)对乳腺癌细胞增殖和转移的影响及其可能机制。方法收集102例浸润性乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织,选用乳腺癌细胞系MDA-MB-231、HCC-70、MCF-7和人乳腺正常细胞系MCF-10A,采用荧光定量PCR(qPCR)检测circMTO1在乳腺癌组织和细胞系中的表达水平。分别构建circMTO1过表达和circMTO1敲减质粒转染乳腺癌细胞系,分为NC组、oe-circMTO1组和sh-circMTO1组,qPCR检测转染效果。MTS实验检测各组细胞增殖能力,Transwell实验检测各组细胞转移能力。TOP/FOP荧光素酶实验检测各组细胞Wnt/β-catenin信号通路活性,Western blot检测各组细胞Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt3a、β-catenin、cMyc、Cyclin D1和基质金属蛋白酶7(MMP7)的表达。结果与癌旁组织和人正常乳腺细胞系相比,circMTO1在乳腺癌组织和乳腺癌细胞系中的相对表达量降低(P<0.05)。有淋巴结转移和TNM分期为Ⅲ期的乳腺癌患者组织中circMTO1的相对表达水平较低(P<0.05)。与NC组相比,oe-circMTO1组circMTO1相对表达量增加,细胞的增殖、转移能力以及Wnt/β-catenin信号通路活性减弱,Wnt3a、β-catenin、cMyc、Cyclin D1和MMP7蛋白表达水平降低(P<0.05);shcircMTO1组circMTO1相对表达量降低,细胞的增殖、转移能力以及Wnt/β-catenin信号通路活性增强,Wnt3a、β-catenin、cMyc、Cyclin D1和MMP7蛋白表达水平增加(P<0.05)。结论circMTO1在乳腺癌细胞中呈低表达,circMTO1通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活性,从而抑制乳腺癌细胞的增殖和转移能力。

circMTO1靶向miR-384减轻氯氮平致大鼠原代肝细胞损伤的机制研究

目的 探讨环状RNA(circRNA)circMTO1对氯氮平致大鼠原代肝细胞损伤的影响及分子机制。方法 将大鼠原代肝细胞随机分为对照组、氯氮平组、氯氮平+pcDNA3.1组、氯氮平+pcDNA3.1-circMTO1组、氯氮平+miR-NC组、氯氮平+miR-384组和氯氮平+pcDNA3.1-circMTO1+miR-384组。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验检测细胞存活率,实时荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测circMTO1和miR-384表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,TUNEL染色检测细胞凋亡指数,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,双荧光素酶报告实验验证circMTO1与miR-384的靶向关系。结果 对照组、氯氮平组、氯氮平+pcDNA3.1组、氯氮平+pcDNA3.1-circMTO1组、氯氮平+miR-NC组、氯氮平+miR-384组和氯氮平+pcDNA3.1-circMTO1+miR-384组大鼠原代肝细胞存活率依次为100.00%±5.37%、53.09%±8.71%、58.71%±9.26%、80.25%±12.71%、56.07%±8.02%、39.01%±5.64%、61.24%±8.35%,凋亡率依次为5.53%±0.93%、37.26%±6.20%、41.18%±5.60%、19.87%±3.03%、38.96%±5.02%、53.24%±6.01%和32.69%±4.17%。与对照组比较,氯氮平组大鼠原代肝细胞存活率和circMTO1表达水平明显降低,miR-384表达水平、凋亡率、凋亡指数、ALT和AST水平明显增加(P<0.05)。与氯氮平组比较,氯氮平+pcDNA3.1-circMTO1组大鼠原代肝细胞存活率和circMTO1表达水平明显增加,miR-384表达水平、凋亡率、凋亡指数、ALT和AST水平明显降低(P<0.05)。与氯氮平组比较,氯氮平+miR-384组大鼠原代肝细胞存活率明显降低,miR-384表达水平、凋亡率、凋亡指数、ALT和AST水平明显增加(P<0.05)。与氯氮平+pcDNA3.1-circMTO1组比较,氯氮平+pcDNA3.1-circMTO1+miR-384组大鼠原代肝细胞存活率明显降低,miR-384表达水平、凋亡率、凋亡指数、ALT和AST水平明显增加(P<0.05)。与氯氮平+miR-384组比较,氯氮平+pcDNA3.1-circMTO1+miR-384组大鼠原代肝细胞circMTO1表达水平、细胞存活率明显增加,miR-384表达水平、凋亡率、凋亡指数、ALT和AST水平明显降低(P<0.05)。circMTO1靶向负调控miR-384的表达。结论 circMTO1可减轻氯氮平致大鼠原代肝细胞损伤,其机制可能与circMTO1靶向负调控miR-384的表达有关。