circNHSL1通过调控miR-125b-5p/HMGB3轴抑制人乳腺癌细胞系增殖及促凋亡

目的探讨circNHSL1调控miR-125b-5p/HMGB3轴对乳腺癌细胞生物行为的影响。方法将乳腺癌细胞系T47D分为si-NC组、si-circNHSL1组、miR-NC组、miR-125b-5p mimic组、si-circNHSL1+miR-125b-5p inhibitor组。RT-qPCR测定circNHSL1和miR-125b-5p在乳腺癌组织和癌旁组织中的表达。Western blot检测高迁移率族蛋白3(HMGB3)蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验确定circNHSL1与miR-125b-5p、miR-125b-5p与HMGB3之间的相互作用。CCK-8法检测增殖抑制率;集落形成实验检测集落形成数;流式细胞术检测凋亡率;Transwell实验检测迁移和侵袭细胞数。结果与癌旁组织比较,乳腺癌组织中circNHSL1和HMGB3表达升高(P<0.05),miR-125b-5p相对水平显著降低(P<0.05)。miR-125b-5p分别与circNHSL1、HMGB3直接结合。circNHSL1敲低下调T47D细胞中circNHSL1和HMGB3表达,上调miR-125b-5p表达(P<0.05);而miR-125b-5p mimic转染后上调miR-125b-5p表达,下调HMGB3表达(P<0.05);且miR-125b-5p inhibitor转染能够逆转circNHSL1沉默对miR-125b-5p以及HMGB3表达的影响。circNHSL1低表达或miR-125b-5p高表达增加T47D细胞抑制率、集落形成数以及细胞凋亡率,减少迁移数、侵袭数(P<0.05);且miR-125b-5p inhibitor的转染挽救circNHSL1沉默对细胞表型的影响(P<0.05)。结论干扰circNHSL1通过上调miR-125b-5p/HMGB3轴可促进乳腺癌细胞凋亡,抑制其增殖、迁移和侵袭。

环状RNA circNHSL1在小儿神经母细胞瘤中的表达及化疗耐受中的作用

目的:探讨环状RNA circNHSL1在小儿神经母细胞瘤中的表达及化疗耐受中的作用。方法:收集2016-2019年于我院就诊并接受手术联合阿霉素和顺铂化疗的神经母细胞瘤患儿60例,其中化疗敏感患儿35例,化疗耐受患儿25例。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测circNHSL1在神经母细胞瘤和化疗耐受患儿中的表达差异。构建人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的阿霉素耐药株,检测阿霉素耐药细胞的circNHSL1表达量。通过沉默circNHSL1,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞仪观察细胞增殖和凋亡情况。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白免疫印记法检测可能的转化生长因子-β(TGFβ)/Smad信号通路改变,并给予人重组TGF-β1进行回复实验,观察其在circNHSL1沉默细胞中的作用。结果:环状RNA circNHSL1在神经母细胞瘤中的表达高于正常组织(P<0.01),在化疗耐受患儿和耐药细胞株中的表达高于化疗敏感患儿(P<0.05)。在化疗耐受的细胞中,沉默circNHSL1细胞增殖活性降低,而凋亡率升高(P<0.01),TGF-β1分泌水平和表达量及其下游p-Smad2、p-Smad3表达量均降低(P<0.01)。再次给予人重组TGF-β1处理circNHSL1沉默的耐药细胞后,细胞增殖活性升高,而凋亡率降低,恢复耐药特性。结论:环状RNA circNHSL1在小儿神经母细胞瘤和化疗耐受组织中存在高表达,可通过激活TGF-β/Smad信号通路参与化疗耐受作用。