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circPRKCI靶向miR-448对高脂高糖诱导胰岛β细胞损伤的影响
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作者 王梅 谭金枚 《河北医药》 CAS 2023年第20期3045-3049,3055,共6页
目的考察环状RNA(circRNA)circPRKCI是否靶向miR-448调节高脂高糖诱导的胰岛β细胞损伤。方法胰岛β细胞被分为Con组(正常对照,11.1 mmol/L葡萄糖)、Model组(高脂高糖模型,33.3 mmol/L葡萄糖+0.25 mmol/L棕榈酸)、Model+pcDNA组(高脂高... 目的考察环状RNA(circRNA)circPRKCI是否靶向miR-448调节高脂高糖诱导的胰岛β细胞损伤。方法胰岛β细胞被分为Con组(正常对照,11.1 mmol/L葡萄糖)、Model组(高脂高糖模型,33.3 mmol/L葡萄糖+0.25 mmol/L棕榈酸)、Model+pcDNA组(高脂高糖模型+转染pcDNA)、Model+pcDNA-circPRKCI组(高脂高糖模型+转染pcDNA-circPRKCI)、Model+anti-miR-NC组(高脂高糖模型+转染anti-miR-NC)、Model+anti-miR-488组(高脂高糖模型+转染anti-miR-488)、Model+pcDNA-circPRKCI+miR-NC组(高脂高糖模型+转染pcDNA-circPRKCI+miR-NC)、Model+pcDNA-circPRKCI+miR-448组(高脂高糖模型+转染pcDNA-circPRKCI+miR-448)。采用qRT-PCR检测circPRKCI、miR-448、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测活化-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cleaved-cysteinyl aspartate specific proteinase,cleaved-caspase)3和cleaved-caspase9蛋白表达。运用荧光素酶报告分析circPRKCI与miR-448的靶向结合。结果与Con组比较,Model组胰岛β细胞中circPRKCI表达量减少,miR-488表达量、凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达量、TNF-αmRNA和IL-1βmRNA表达量增加(P<0.05)。与Model+pcDNA组比较,Model+pcDNA-circPRKCI组胰岛β细胞中circPRKCI表达量增加,凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达量、TNF-αmRNA和IL-1βmRNA表达量减少(P<0.05)。circPRKCI靶向调控miR-448的表达。抑制miR-448表达后,Model+anti-miR-488组胰岛β细胞的miR-488表达量、凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白、TNF-αmRNA和IL-1βmRNA表达量均比Model+anti-miR-NC组降低(P<0.05)。上调miR-448表达后,Model+pcDNA-circPRKCI+miR-448组胰岛β细胞的miR-488表达量、凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白、TNF-αmRNA和IL-1βmRNA表达量均比Model+pcDNA-circPRKCI+miR-NC组提升(P<0.05)。结论circPRKCI通过靶向miR-448,减少细胞凋亡和炎性因子表达,从而保护高脂高糖诱导的胰岛β细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病 circprkci 胰岛Β细胞 miR-448 高脂高糖 凋亡 炎症
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circPRKCI靶向miR-217对缺氧/复氧诱导心肌细胞损伤的影响 被引量:2
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作者 刘颁 姜丕桥 +1 位作者 熊桂丽 焦奇 《中西医结合心脑血管病杂志》 2022年第4期632-637,共6页
目的探讨circPRKCI对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞氧化应激、凋亡的影响及其对miR-217的调控作用。方法采用H/R诱导大鼠心肌细胞H9c2建立细胞损伤模型,pcDNA、pcDNA-circPRKCI、anti-miR-NC、anti-miR-217、pcDNA-circPRKCI与miR-NC、p... 目的探讨circPRKCI对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞氧化应激、凋亡的影响及其对miR-217的调控作用。方法采用H/R诱导大鼠心肌细胞H9c2建立细胞损伤模型,pcDNA、pcDNA-circPRKCI、anti-miR-NC、anti-miR-217、pcDNA-circPRKCI与miR-NC、pcDNA-circPRKCI与miR-217 mimics分别转染至心肌细胞后进行H/R处理;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验检测circPRKCI、miR-217表达量;采用试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测circPRKCI与miR-217的靶向关系;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白表达量。结果H/R诱导的H9c2细胞中circPRKCI表达水平降低(P<0.05),miR-217、MDA、凋亡率及Bax蛋白水平升高(P<0.05),SOD、GSH-Px活性及Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05)。H/R诱导的H9c2细胞中转染pcDNA-circPRKCI或转染anti-miR-217后可降低MDA含量、凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.05),提高SOD、GSH-Px活性及Bcl-2蛋白水平(P<0.05)。双荧光素酶实验显示circPRKCI可靶向结合miR-217;miR-217过表达可逆转circPRKCI过表达对H/R诱导的H9c2细胞氧化应激及凋亡的作用。结论circPRKCI过表达通过下调miR-217表达抑制氧化应激及其诱导的细胞凋亡,从而减轻心肌细胞氧化损伤。 展开更多
关键词 心肌细胞 circprkci miR-217 缺氧/复氧 凋亡 氧化应激 实验研究
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Prognostic and clinical value of circPRKCI expression in diverse human cancers
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作者 Zhongyue Liu Xiaolei Ren +4 位作者 Zhimin Yang Lin Mei Wenyi Li Chao Tu Zhihong Li 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第2期152-161,共10页
Background:Highly expressed in various human cancers,circular RNA Protein Kinase C Iota(circPRKCI)has been reported to play an important role in cancer development and progression.Herein,we sought to reveal the progno... Background:Highly expressed in various human cancers,circular RNA Protein Kinase C Iota(circPRKCI)has been reported to play an important role in cancer development and progression.Herein,we sought to reveal the prognostic and clinical value of circPRKCI expression in diverse human cancers.Methods:We searched the Pubmed,Web of Science,and the Cochrane Library databases from inception until May 16,2021.The relationship between circPRKCI expression and cancer patients’survival,including overall survival(OS)and disease-free survival(DFS),was assessed by pooled hazard ratios(HR)with corresponding 95%confidence interval(CI).The correlation between circPRKCI expression and clinical outcomes was evaluated using odds ratios(OR)with corresponding 95%CI.The data were analyzed by STATA software(version 12.0)or Review Manager(RevMan 5.3).Results:A total of 15 studies with 1109 patients were incorporated into our meta-analysis.The results demonstrated that high circPRKCI expression was significantly related to poor OS(HR=1.96,95%CI:1.61,2.39,P<0.001)when compared with low circPRKCI expression in diverse human cancers.However,elevated circPRKCI expression was not associated with DFS(HR=1.34,95%CI:0.93,1.95,P=0.121).Furthermore,the patient with a higher circPRKCI expression was prone to have a larger tumor size,advanced clinical stage,and lymph node metastasis,but it was not significantly correlated with age,gender,and distant metastasis.Conclusion:Elevated circPRKCI expression was correlated with worse OS and unfavorable clinical features,suggesting a novel prognostic and predictive role of circPRKCI in diverse human cancers. 展开更多
关键词 circprkci Cancer PROGNOSIS Overall survival META-ANALYSIS Circular RNA Protein Kinase C Iota
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circPRKCI靶向miR-155-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2凋亡及氧化应激损伤的影响
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作者 王智峰 姜玫 +1 位作者 曹思明 朱峰 《解剖科学进展》 CAS 2023年第6期580-584,共5页
目的 探索circPRKCI靶向miR-155-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2凋亡及氧化应激损伤的影响。方法 根据细胞处理方法不同,将HK-2细胞分为正常糖(NG)组、高糖(HG)组、HG+pcDNA组、HG+pcDNA-circPRKCI组、HG+anti-miR-NC组、HG+miR-155-... 目的 探索circPRKCI靶向miR-155-5p对高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2凋亡及氧化应激损伤的影响。方法 根据细胞处理方法不同,将HK-2细胞分为正常糖(NG)组、高糖(HG)组、HG+pcDNA组、HG+pcDNA-circPRKCI组、HG+anti-miR-NC组、HG+miR-155-5p Inhibitor组、HG+pcDNA-circPRKCI+miR-155-5p mimic组。qRT-PCR分析circPRKCI和miR-155-5p相对水平;CCK-8法和流式细胞术分析HK-2的光密度(OD)值和凋亡率。试剂盒分析HK-2细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平。双荧光素酶报告实验确定circPRKCI和miR-155-5p的靶向关系。结果 高糖能降低HK-2细胞OD值、SOD活性、circPRKCI相对水平(P<0.05),增加凋亡率、MDA水平、miR-155-5p相对水平(P<0.05)。与过表达circPRKCI或抑制miR-155-5p能增加高糖诱导的HK-2细胞OD值、SOD活性(P<0.05),凋亡率、MDA水平(P<0.05)。circPRKCI与miR-155-5p直接特异性结合;过表达miR-155-5p可逆转circPRKCI对高糖诱导的HK-2凋亡和氧化应激的影响。结论 circPRKCI靶向miR-155-5p可抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2凋亡及氧化应激损伤。 展开更多
关键词 circprkci miR-155-5p 高糖 HK-2细胞 凋亡 氧化应激
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山姜素对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用机制 被引量:3
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作者 陈颖妹 翟任群 周菲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第18期2220-2225,共6页
目的:探讨山姜素对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的保护作用机制。方法:H/R诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞损伤模型,不同浓度山姜素处理H9C2细胞,pcDNA、pcDNA-circPRKCI转染H9C2细胞24 h后再进行H/R处理;si-NC、si-circPRKCI分别转... 目的:探讨山姜素对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞损伤的保护作用机制。方法:H/R诱导大鼠心肌细胞H9C2建立细胞损伤模型,不同浓度山姜素处理H9C2细胞,pcDNA、pcDNA-circPRKCI转染H9C2细胞24 h后再进行H/R处理;si-NC、si-circPRKCI分别转染H9C2细胞24 h后置于山姜素培养液中继续培养24 h,再进行H/R处理;试剂盒检测LDH、MDA、SOD水平;ELISA检测MPO、IL-1β、TNF-α水平;MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡率;化学发光法检测ATP含量;qRTPCR检测circPRKCI、miR-29b-3p表达;双荧光素酶报告基因实验检测circPRKCI与miR-29b-3p的靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:山姜素可降低H/R诱导的H9C2细胞LDH、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平、凋亡率和Bax蛋白水平(P<0.05),而增强SOD活性和提高细胞存活率、ATP含量及Bcl-2蛋白水平(P<0.05),提高circPRKCI表达(P<0.05),降低miR-29b-3p表达(P<0.05),且呈剂量依赖性。H/R诱导的H9C2细胞转染pcDNA-circPRKCI后,LDH、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平、凋亡率和Bax蛋白水平降低(P<0.05),SOD活性、Bcl-2蛋白水平、细胞存活率和ATP含量升高(P<0.05);circPRKCI可靶向调控miR-29b-3p表达;干扰circPRKCI表达部分逆转山姜素对H/R诱导的H9C2细胞氧化应激、炎症反应、增殖、凋亡及ATP含量的作用。结论:山姜素可通过调控circPRKCI/miR-29b-3p轴抑制细胞氧化应激、炎症反应、凋亡及促进细胞增殖进而减轻H/R诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 山姜素 缺氧/复氧 circprkci miR-29b-3p 心肌细胞H9C2
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