circRNF20/miR-766-5p/MTHFR轴对乳腺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探究circRNF20在乳腺癌(BC)中的表达及对BC细胞恶性生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法BC细胞系分为:Control组(空白对照)、Si-NC组(阴性对照)、Si-circRNF20组(转染体外靶向敲低circRNF20的siRNA)、Si-circRNF20+in-miR-766-5p组(共转染体外靶向敲低circRNF20的siRNA和miR-766-5p抑制物)和Si-circRNF20+5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)组(共转染体外靶向敲低circRNF20的siRNA和重组pcDNA的MTHFR过表达质粒)。qRT-PCR、Western blot或免疫组化检测circRNF20、miR-766-5p和MTHFR表达。采用CCK-8和集落形成检测细胞增殖;采用划痕愈合和Transwell实验评估细胞迁移和侵袭;采用流式细胞术检测细胞凋亡。双荧光素酶分析circRNF20、miR-766-5p和MTHFR之间的作用关系。建立异种移植小鼠模型,分析circRNF20对体内异种肿瘤生长的影响。结果circRNF20和MTHFR在BC中高表达,miR-766-5p低表达(P<0.05)。敲低circRNF20可明显抑制BC细胞活力、集落形成数量、迁移和侵袭能力(P<0.05),加速细胞凋亡(P<0.05);抑制miR-766-5p表达或上调MTHFR可明显削弱敲低circRNF20对BC细胞恶性行为的抑制作用(P<0.05)。miR-766-5p与circRNF20和MTHFR均存在靶向关系(P<0.05)。circRNF20的敲低抑制了体内异种移植肿瘤的生长(P<0.05)。结论敲低circRNF20通过上调miR-766-5p并抑制MTHFR的表达,从而抑制BC细胞恶性生物学行为。