circSLCO1B3在三阴乳腺癌脑转移中的作用及其调控机制

目的探讨circSLCO1B3在三阴乳腺癌(TNBC)脑转移中的作用及其可能的调控机制。方法采用qRT-PCR实验检测circSLCO1B3在乳腺癌细胞系中的表达。采用过表达质粒上调TNBC子代脑转移细胞231Br中circSLCO1B3的表达,设为circSLCOB3-OE组(转染对照质粒的为circCTR-OE组),采用Transwell侵袭实验检测circSLCO1B3对231Br细胞侵袭能力的影响。经小鼠左心室注射231Br细胞,构建体内脑转移模型,检测circSLCO1B3对TNBC脑转移能力的影响。通过CircInteractome及TargetScan在线软件分别预测与circSLCO1B3结合的miRNA及miRNA下游靶基因,并使用双荧光素酶报告基因和qRT-PCR、Western blotting实验验证其调控关系。结果相对正常乳腺上皮细胞,circSLCO1B3在TNBC细胞系中均显著下调,且在TNBC子代脑转移细胞231Br中下调最为显著(P<0.05)。与circCTR-OE组比较,circSLCOB3-OE组231Br细胞的侵袭能力、脑转移结节数目均显著降低(P均<0.05)。与细胞核比较,circSLCO1B3在细胞质中的相对含量高(P<0.05)。与野生型circSLCO1B3+miR-NC共转染组相比,野生型circSLCO1B3+miR-155组的相对荧光酶活性显著降低(P<0.05);与circCTR-OE组相比,circSLCO1B3-OE组miR-155的相对表达量显著降低(P<0.05)。与野生型PTEN+miR-NC共转染组相比,野生型PTEN+miR-155组的相对荧光酶活性显著降低(P<0.05)。与转染miR-NC相比,转染miR-155细胞PTEN mRNA的相对表达量显著降低(P<0.05)。与circCTR-OE组比较,circSLCOB3-OE组PTEN mRNA的相对表达量及PTEN蛋白表达显著增加,而与circSLCOB3-OE组比较,circSLCOB3-OE+miR-155组PTEN的表达则显著降低(P均<0.05)。结论circSLCO1B3通过吸附miR-155,上调PTEN蛋白的表达,进而抑制TNBC脑转移。