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circ_0000376靶向miR-876-3p调控结肠癌细胞进程 被引量:1
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作者 熊隽禾 张力 +1 位作者 林圳滨 甘国莲 《解剖学研究》 CAS 2023年第2期114-119,138,共7页
目的 探讨circ_0000376对结肠癌细胞SW480迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制。方法 选取30例结肠癌组织及其相应的癌旁组织;体外培养SW480细胞,根据实际转染蛋白情况分别设si-NC组、si-circ_0000376组、miR-NC组、miR-876-3p组、si-ci... 目的 探讨circ_0000376对结肠癌细胞SW480迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制。方法 选取30例结肠癌组织及其相应的癌旁组织;体外培养SW480细胞,根据实际转染蛋白情况分别设si-NC组、si-circ_0000376组、miR-NC组、miR-876-3p组、si-circ_0000376和anti-miR-876-3p共转染组以及sicirc_0000376和anti-miR-NC共转染组。采取RT-qPCR检测circ_0000376和miR-876-3p的表达水平、Transwell检测细胞迁移和侵袭、流式细胞术检测细胞凋亡、Western blot检测相关蛋白的表达、双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000376和miR-876-3p的靶向关系。结果 结肠癌组织中circ_0000376较癌旁组织呈高表达(P<0.05),miR-876-3p较癌旁组织呈低表达(P<0.05);沉默circ_0000376或过表达miR-876-3p可有效降低癌细胞恶性行为活性,MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白也呈更低表达,细胞凋亡活性Bax蛋白呈明显高表达(P<0.05);circ_0000376靶向调控miR-876-3p表达(P<0.05),并发现使miR-876-3p呈现低表达会造成circ_0000376对SW480细胞迁移、侵袭和凋亡形成逆转作用(P<0.05)。结论 沉默circ_0000376可通过靶向上调miR-876-3p抑制SW480细胞迁移和侵袭,并促进凋亡。 展开更多
关键词 结肠癌 环状RNA circ_0000376 miR-876-3p SW480细胞株
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沉默circ_0000376对结直肠癌细胞SW1116生物学行为的影响 被引量:1
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作者 魏小宁 梁月祥 +1 位作者 尹秋实 林师佈 《现代消化及介入诊疗》 2022年第3期316-321,共6页
目的 探讨结直肠癌组织中环状RNA 0000376(circ_0000376)表达情况及circ_0000376对结直肠癌细胞SW1116生物学行为的影响和潜在机制。方法 实时定量PCR(RT-qPCR)分析21例结直肠癌组织和对应癌旁组织中circ_0000376和微小RNA-330-5p(miR-3... 目的 探讨结直肠癌组织中环状RNA 0000376(circ_0000376)表达情况及circ_0000376对结直肠癌细胞SW1116生物学行为的影响和潜在机制。方法 实时定量PCR(RT-qPCR)分析21例结直肠癌组织和对应癌旁组织中circ_0000376和微小RNA-330-5p(miR-330-5p)表达水平。分别转染circ_0000376小干扰RNA(si-circ_0000376)、miR-330-5p类似物(mimics)至SW1116细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和集落形成实验检测SW1116细胞增殖能力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭数量,流式细胞术分析细胞凋亡率。双荧光素酶实验和RT-qPCR验证circ_0000376对miR-330-5p表达的调控作用。结果 结直肠癌组织中circ_0000376表达量明显上调,而miR-330-5p表达量明显下调(P<0.05)。沉默circ_0000376或过表达miR-330-5p均可降低SW1116细胞活力、集落形成数、迁移距离以及细胞侵袭数量(P<0.05),增加细胞凋亡率(P<0.05)。miR-330-5p是circ_0000376的靶基因,沉默circ_0000376显著增加miR-330-5p表达量(P<0.05)。抑制miR-330-5p表达能够减弱沉默circ_0000376对SW1116细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响(P<0.05)。结论 结直肠癌组织中circ_0000376呈高表达,沉默circ_0000376通过上调miR-330-5p能够抑制结直肠癌细胞SW1116增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 circ_0000376 结直肠癌 细胞增殖 迁移 侵袭 凋亡 miR-330-5p
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土贝母苷甲通过调控circ_0000376/miR-203轴影响皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞恶性表型
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作者 王娟 肖春才 +1 位作者 屈小燕 张晨阳 《皮肤性病诊疗学杂志》 2021年第2期90-98,共9页
目的:探讨土贝母苷甲对皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞恶性表型的影响及可能机制。方法:将体外SCL-1细胞分为对照组、不同剂量(5、10、20μg/mL)土贝母苷甲组、si-NC组、si-circ_0000376组、土贝母苷甲+pcDNA组和土贝母苷甲+pcDNA-circ_000037... 目的:探讨土贝母苷甲对皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞恶性表型的影响及可能机制。方法:将体外SCL-1细胞分为对照组、不同剂量(5、10、20μg/mL)土贝母苷甲组、si-NC组、si-circ_0000376组、土贝母苷甲+pcDNA组和土贝母苷甲+pcDNA-circ_0000376组,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,Transwell检测细胞迁移和侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中Ki-67、MMP-2、MMP-9、Bcl-2和Bax蛋白表达,RT-qPCR检测circ_0000376和miR-203表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000376和miR-203调控关系。对照组与不同剂量土贝母苷甲组各检测指标比较用单因素方差分析;si-NC组与si-circ_0000376及土贝母苷甲+pcDNA组与土贝母苷甲+pcDNA-circ_0000376组各检测指标比较行独立样本t检验。结果:与对照组比较,土贝母苷甲组SCL-1细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达升高(F值分别为772.61、352.20、277.56,P值均<0.01),细胞迁移数、侵袭数及Ki-67、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白表达降低(F值分别为125.57、180.50、257.87、301.22、399.27、233.29,P值均<0.01),circ_0000376表达降低(F=205.36,P<0.01),miR-203表达升高(F=247.14,P<0.01),且呈剂量依赖性。与si-NC组比较,si-circ_0000376组SCL-1细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达升高(t值分别为36.78、21.56、25.20,P值均<0.01),细胞迁移数、侵袭数及Ki-67、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白表达降低(t值分别为16.00、17.79、21.73、21.02、21.62、19.68,P值均<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,circ_0000376靶向负调控miR-203。与土贝母苷甲+pcDNA组比较,土贝母苷甲+pcDNA-circ_0000376组SCL-1细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达降低(t值分别为35.31、19.65、19.55,P值均<0.01),细胞迁移数、侵袭数及Ki-67、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白表达升高(t值分别为12.27、21.37、24.15、23.40、23.48、22.28,P值均<0.01)。结论:土贝母苷甲可能通过调控circ_0000376/miR-203轴抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 土贝母苷甲 皮肤鳞状细胞癌 circ_0000376 miR-203 细胞增殖 迁移 侵袭 凋亡
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circ_0000592/miR-515-5p轴调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭
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作者 杨瑞玲 桑梅香 +1 位作者 耿翠芝 付俊勇 《蚌埠医学院学报》 CAS 2024年第8期992-997,共6页
目的:探讨circ_0000592/miR-515-5p轴对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:收集57例乳腺癌病人的癌组织和癌旁组织,qRT-PCR法检测组织中circ_0000592和miR-515-5p表达;体外培养人乳腺上皮细胞HMEpiC和乳腺癌MCF-7细胞,qRT-PCR法... 目的:探讨circ_0000592/miR-515-5p轴对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:收集57例乳腺癌病人的癌组织和癌旁组织,qRT-PCR法检测组织中circ_0000592和miR-515-5p表达;体外培养人乳腺上皮细胞HMEpiC和乳腺癌MCF-7细胞,qRT-PCR法检测细胞中circ_0000592和miR-515-5p表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000592和miR-515-5p的调控关系。转染circ_0000592小干扰RNA、或共转染circ_0000592小干扰RNA与miR-515-5p抑制剂至MCF-7细胞,CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell分别检测细胞存活率、克隆数、迁移数和侵袭数,蛋白质印迹法检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达。结果:乳腺癌组织中circ_0000592表达升高(P<0.05),miR-515-5p表达降低(P<0.05)。乳腺癌MCF-7细胞中circ_0000592表达较HMEpiC细胞升高(P<0.05),miR-515-5p表达较HMEpiC细胞降低(P<0.05)。circ_0000592在MCF-7细胞中靶向结合并负调控miR-515-5p。下调circ_0000592后,MCF-7细胞存活率、克隆数、迁移数、侵袭数及细胞中N-cadherin蛋白表达均降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01)。下调miR-515-5p部分减弱下调circ_0000592对MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的作用。结论:circ_0000592在乳腺癌组织及细胞中表达升高,其通过靶向负调控miR-515-5p促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 circ_0000592 miR-515-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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败酱草水提物通过调控circ_0000936/miR-665抑制胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭
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作者 张正平 李坤正 +3 位作者 吴彬杰 刘熹 巨虎 张晓璐 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第6期1017-1024,共8页
目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制。方法:收集2019年2月至2020年1月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665的表达量;Pear... 目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制。方法:收集2019年2月至2020年1月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中circ_0000936和miR-665表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞LN229,不同浓度的败酱草(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)处理LN229细胞,si-NC、si-circ_0000936分别转染至LN229细胞,pcDNA-circ_0000936转染至LN229细胞后加入2.0 mg/mL败酱草处理细胞;CCK-8、平板克隆形成实验、Transwell小室实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及凋亡能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000936与miR-665的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:胶质瘤组织中circ_0000936的表达量高于正常脑组织(P<0.05),而miR-665的表达量低于正常脑组织(P<0.05);circ_0000936和miR-665呈负相关(r=-0.980,P<0.001);败酱草能够以浓度依赖性方式降低细胞活力、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白水平和circ_0000936的表达量(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而凋亡率、Bax蛋白水平和miR-665的表达量升高(P<0.05);转染si-circ_0000936后miR-665的表达量升高(P<0.05),细胞活力、细胞克隆形成率和Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05);转染pcDNA-circ_0000936能够逆转败酱草对LN229细胞生物学行为的作用。结论:败酱草水提物可通过调控circ_0000936/miR-665诱导胶质瘤细胞凋亡,并阻碍增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 败酱草 胶质瘤 circ_0000936 miR-665 细胞增殖 迁移 侵袭
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circ_0114427靶向微小RNA-330-5p调控脂多糖诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎症反应
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作者 杨忠信 周冉 +4 位作者 黄智超 梅笑寒 李一锃 杨学峰 李晓宇 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第6期24-29,36,共7页
目的探讨circ_0114427对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的影响及其机制。方法体外培养人肺泡上皮细胞,分别转染si-circ_0114427、微小RNA(miR)-330-5p mimics或共转染si-circ_0114427与anti-miR-330-5p后,用10 mg/L LPS处理2... 目的探讨circ_0114427对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的影响及其机制。方法体外培养人肺泡上皮细胞,分别转染si-circ_0114427、微小RNA(miR)-330-5p mimics或共转染si-circ_0114427与anti-miR-330-5p后,用10 mg/L LPS处理24 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中circ_0114427和miR-330-5p表达量;采用蛋白免疫印迹评估活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase3)和活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(Cleaved-caspase9)蛋白水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达;采用流式细胞术分析细胞凋亡。采用双荧光素酶报告实验验证circ_0114427和miR-330-5p的互作关系。结果肺泡上皮细胞经LPS处理后,细胞中circ_0114427表达升高,miR-330-5p表达降低(P<0.05)。敲减circ_0114427或上调miR-330-5p可以抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡、Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9表达以及IL-6和TNF-α水平(P<0.05)。circ_0114427靶向结合并负调控miR-330-5p。miR-330-5p下调可以逆转circ_0114427敲低对LPS诱导的细胞凋亡和炎症的抑制作用。结论敲减circ_0114427可抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症,这可能与miR-330-5p上调有关。 展开更多
关键词 肺泡上皮细胞 circ_0114427 微小RNA-330-5p 细胞凋亡 炎症
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山羊环状RNA circ_0008219 SNPs位点与生产性能的关联分析 被引量:1
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作者 赵华 刘泽林 +3 位作者 杨娟 张年 刘静波 陶虎 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期153-160,共8页
实验旨在分析山羊环状RNA circ_0008219序列中单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位点与产羔、生长性状之间的关联性,为山羊分子育种提供新的遗传标记。选取波尔山羊、黑头羊和麻城黑山羊作为实验对象,利用SNaPshot分... 实验旨在分析山羊环状RNA circ_0008219序列中单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位点与产羔、生长性状之间的关联性,为山羊分子育种提供新的遗传标记。选取波尔山羊、黑头羊和麻城黑山羊作为实验对象,利用SNaPshot分型技术分析候选SNPs位点的遗传多样性,并对circ_0008219的SNPs位点与3个品种山羊的产羔性状和黑头羊的周岁生长性状进行关联分析。结果表明山羊circ_0008219中存在3个SNPs位点均具有多态性。卡方适应性检测结果表明,g.1082G>T、g.1310A>G在3个山羊群体中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),g.651G>A在波尔山羊和麻城黑山羊群体均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。黑头羊群体中,g.651G>A位点与山羊周岁体高存在相关;g.1082G>T与周岁体重、周岁体斜长、周岁胸围和管围性状存在相关。关联分析结果显示,g.651G>A位点与黑头羊总体产羔数显著关联,g.1082G>T位点与波尔山羊头胎产羔数极显著关联。连锁不平衡分析表明,在波尔山羊群体中,g.1082G>T和g.1310A>G位点之间处于强连锁平衡状态(D’=1,r^(2)=1);在黑头羊群体中,g.651G>A和g.1310A>G位点之间处于强连锁平衡状态(D’=1,r^(2)=1);在麻城黑山羊群体中,g.651G>A和g.1310A>G位点之间处于强连锁平衡状态(D’=0.917,r^(2)=1)。本研究筛选出3个SNPs位点即g.651G>A、g.1082G>T和g.1310A>G,可以作为山羊育种的潜在遗传标记,该研究结果为山羊品种培育提供了理论依据。 展开更多
关键词 circ_0008219 SNPS 山羊 繁殖性能 关联分析
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circ_1764的鉴定及其在鸡脂肪细胞分化中的功能预测
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作者 庄重 娄姬英 +8 位作者 杨婷 王来娣 江勇 王志秀 陈世豪 毕瑜林 陈国宏 常国斌 白皓 《中国家禽》 北大核心 2024年第8期14-21,共8页
为探究环状RNA circ_1764在鸡脂肪细胞分化中的重要作用,试验通过PCR扩增和RNase酶消化鉴定鸡circ_1764的存在特性,采用qRT-PCR技术检测circ_1764在鸡组织中的表达情况,利用Miranda、miRDB和Target Scan Human等网站预测鸡circ_1764的... 为探究环状RNA circ_1764在鸡脂肪细胞分化中的重要作用,试验通过PCR扩增和RNase酶消化鉴定鸡circ_1764的存在特性,采用qRT-PCR技术检测circ_1764在鸡组织中的表达情况,利用Miranda、miRDB和Target Scan Human等网站预测鸡circ_1764的调控网络,使用DAVID软件可视化预测靶基因的GO和KEGG富集通路,最后通过转染过表达circ_1764载体,验证生物信息学筛选出的调控网络的准确性。结果显示:鸡体内存在circ_1764,并主要在细胞质中表达,在鸡心脏、肝脏、胸腺和脂肪组织中高表达;circ_1764的预测靶miRNA主要为miR-7441-3p、miR-1656、miR-6578-3p、miR-7452-5p、miR-6645-5p、miR-6563-3p、miR-6607-5p和miR-6581-5p,并且circ_1764在DF-1细胞中过表达可以显著降低上述miRNA的表达;circ_1764靶基因主要集中在代谢、泛素介导的蛋白水解以及MAPK通路中。本研究验证了鸡circ_1764的存在,通过生物信息学预测了鸡circ_1764的调控网络,初步探究circ_1764通过吸附miR-1656、miR-6645-5p等miRNA调控靶基因进而影响鸡脂肪细胞分化的分子机制,为进一步阐明circ_1764调控鸡脂肪细胞分化的机理奠定了基础。 展开更多
关键词 脂肪细胞 circ_1764 鉴定 功能预测
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儿童难治性肺炎支原体肺炎的危险因素及其预测效能
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作者 穆世茵 邹映雪 +2 位作者 郭永盛 于玫 黄冰 《山东医药》 CAS 2024年第23期11-15,共5页
目的分析儿童难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)的危险因素,并探讨其预测价值。方法选择肺炎支原体肺炎(MPP)患儿244例,根据是否发展为RMPP,将其分为RMPP组47例及普通肺炎支原体肺炎(GMPP)组197例。比较两组的人口统计学信息(性别、年龄),临... 目的分析儿童难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)的危险因素,并探讨其预测价值。方法选择肺炎支原体肺炎(MPP)患儿244例,根据是否发展为RMPP,将其分为RMPP组47例及普通肺炎支原体肺炎(GMPP)组197例。比较两组的人口统计学信息(性别、年龄),临床表现及体征(热峰、热程、低氧血症、呼吸音减低、合并肺外并发症及塑形性支气管炎),入院24 h内首次实验室指标[血清circ_0054633、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NE)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板计数(PLT)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素6(IL-6)、乳酸脱氢酶(LDH)、铁蛋白(FER)、红细胞沉降速率(ESR)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、D-二聚体(D-D)],影像学特征(肺不张、胸腔积液)。将两组比较差异有统计学意义的因素进行多因素Logistic回归分析,绘制危险因素预测MPP进展为RMPP的受试者工作特征(ROC)曲线,分析其预测价值。结果两组性别、年龄、热峰及WBC、NE、PLT、CRP、PCT、ESR、ALT、CK-MB水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);RMPP组热程长于GMPP组,低氧血症、呼吸音减低、合并肺外并发症、塑形性支气管炎及肺不张、胸腔积液的比例均高于GMPP组,血清circ_0054633、NLR、IL-6、LDH、FER、D-D水平均高于GMPP组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,热程(OR=1.499,95%CI:1.243~1.808)、低氧血症(OR=10.638,95%CI:2.747~41.203)、合并肺外并发症(OR=2.948,95%CI:1.174~7.404)、血清circ_0054633(OR=6.283,95%CI:2.729~14.465)、血清IL-6(OR=1.018,95%CI:1.004~1.032)、肺不张(OR=3.157,95%CI:1.246~8.000)均是MPP进展为RMPP的独立影响因素(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,热程、血清circ_0054633、血清IL-6预测RMPP的临界值分别为9.50 d、3.12、25.98 pg/mL,此时预测RMPP的敏感度分别为76.6%、80.9%、66.0%,特异度分别为73.0%、69.4%、63.8%,曲线下面积分别为0.768、0.802、0.678(P均<0.05)。结论热程>9.50 d、低氧血症、合并肺外并发症、血清circ_0054633>3.12、血清IL-6>25.98 pg/mL及影像学特征存在肺不张均是MPP患儿进展为RMPP的危险因素,其中血清circ_0054633对于MPP进展为RMPP具有较好的预测价值。 展开更多
关键词 难治性肺炎支原体肺炎 circ_0054633 热程 白细胞介素6 儿童
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circ_0068655通过吸附miR-498促进心肌细胞HCM凋亡
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作者 崔冰 柴巧英 +4 位作者 李鑫平 王丹丹 陈兰兰 韩继如 张海军 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第4期539-543,573,共6页
目的探讨环状RNA(circRNA)_0068655对心肌细胞HCM凋亡的影响。方法12只雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)和心肌梗死组(MI组),qRT-PCR检测两组心肌组织中circ_0068655和miR-498表达水平,Western blotting检测两组心肌组织中凋亡相关蛋... 目的探讨环状RNA(circRNA)_0068655对心肌细胞HCM凋亡的影响。方法12只雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组)和心肌梗死组(MI组),qRT-PCR检测两组心肌组织中circ_0068655和miR-498表达水平,Western blotting检测两组心肌组织中凋亡相关蛋白的表达。将HCM分为空白对照组、circ_0068655敲低组(sh-circ_0068655组),circ_0068655过表达组、低氧刺激组(Hypoxia组)、敲低对照+低氧刺激组(sh-ctrl+hypoxia组)、circ_0068655敲低+低氧刺激组(sh-circ_0068655+hypoxia组),缺氧的HCM分为敲低对照+miR-498-inhibitor-NC组(sh-ctrl+miR-498-inhibitor-NC组)、circ_0068655敲低+miR-498-inhibitor-NC组(sh-circ_0068655+miR-498-inhibitor-NC组)及circ_0068655敲低+miR-498-inhibitor组(sh-circ_0068655+miR-498-inhibitor组),qRT-PCR检测各组HCM中circ_0068655和miR-498表达量,CCK-8、ELISA及Transwell检测细胞活性、凋亡、迁移及侵袭能力。RNA pull-down及双荧光素酶实验分析circ_0068655和miR-498结合关系。结果MI大鼠心肌组织中circ_0068655的表达高于Sham组,miR-498表达低于Sham组,敲低circ_0068655可以改善缺氧诱导的HCM心肌细胞活力,提高心肌细胞迁移及侵袭能力,降低细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达。circ_0068655可结合并负向调节miR-498的表达。miR-498抑制剂可抑制敲低circ_0068655对缺氧心肌细胞保护作用。结论circ_0068655能通过吸附miR-498促进心肌梗死及心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 心肌细胞 凋亡 circ_0068655 miR-498
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环状RNA circ_0120051通过miR-144-3p/IDH2轴抑制心肌成纤维细胞的纤维化表型研究
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作者 梁俣 胡志琴 +5 位作者 温艺红 伍华燕 王娅 刘宇鹏 单志新 方咸宏 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期196-205,共10页
【目的】研究环形RNA circ_0120051对心肌成纤维细胞的纤维化表型的调控作用和机制。【方法】通过实时萤光定量PCR(RT-qPCR)检测健康器官捐献者(n=24)与心力衰竭(HF)病人(n=21)心肌标本中circ_0120051及其宿主基因溶质载体家族8成员A1(S... 【目的】研究环形RNA circ_0120051对心肌成纤维细胞的纤维化表型的调控作用和机制。【方法】通过实时萤光定量PCR(RT-qPCR)检测健康器官捐献者(n=24)与心力衰竭(HF)病人(n=21)心肌标本中circ_0120051及其宿主基因溶质载体家族8成员A1(SLC8A1)的表达水平。核糖核酸外切酶(RNase R)消化实验鉴定circ_0120051的RNA稳定性。RT-qPCR检测circ_0120051在人心肌细胞AC16中的核质分布情况。利用腺病毒在C57BL/6乳小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中过表达circ_0120051,通过RT-qPCR和Western blot检测过表达circ_0120051对mCFs中纤维化相关基因表达的影响,利用细胞划痕实验检测对mCFs迁移能力的影响。通过RNA免疫共沉淀技术(RIP)验证circ_0120051与miR-144-3p间的结合作用,利用双萤光素酶报告基因实验鉴定miR-144-3p与靶基因异柠檬酸脱氢酶2(Idh2)3’-UTR的结合位点。【结果】Circ_0120051在心衰病人心肌中表达显著增加,而其宿主基因SLC8A1表达无显著差异。Circ_0120051主要定位于人心肌细胞的胞质中。RNase R消化实验证实circ_0120051相对于线性SLC8A1 mRNA具有典型的环状RNA稳定性。过表达circ_0120051可抑制mCFs中纤维化相关基因表达和mCFs的迁移能力。RIP实验证实circ_0120051与miR-144-3p之间具有明显结合作用。在mCFs中转染miR-144-3p可促进纤维化相关基因的表达,并有效逆转circ_0120051对mCFs纤维化表型的抑制作用。双萤光素酶报告基因实验证实miR-144-3p与Idh2的3’-UTR存在结合作用。miR-144-3p可在转录水平抑制mCFs中Idh2表达,而过表达circ_0120051可增加mCFs中IDH2表达。在mCFs中转染miR-144-3p和Idh2的小干扰RNA(siRNA),可一致性地逆转circ_0120051对纤维化相关基因表达和mCFs迁移的抑制作用。【结论】Circ_0120051通过特异结合miR-144-3p并增加其靶基因IDH2表达来发挥抑制mCFs纤维化表型的作用。 展开更多
关键词 心肌纤维化 环状RNA 微RNA Circ_0120051 心肌成纤维细胞
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白头翁皂苷D通过调控circ_0001178/miR-885-5p对甲状腺癌细胞的生物学行为的影响
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作者 潘巧虹 周影 +4 位作者 颜卫文 李莉 孙雯 陶桂兰 肖欢 《河北医药》 CAS 2024年第9期1296-1300,共5页
目的探讨白头翁皂苷D对甲状腺癌细胞生物学行为的影响及其对circ_0001178/miR-885-5p分子轴的调控作用。方法不同浓度的白头翁皂苷D处理人甲状腺癌细胞SW579,si-NC、si-circ_0001178、miR-NC、miR-885-5p mimics转染至SW579细胞,pcDNA-c... 目的探讨白头翁皂苷D对甲状腺癌细胞生物学行为的影响及其对circ_0001178/miR-885-5p分子轴的调控作用。方法不同浓度的白头翁皂苷D处理人甲状腺癌细胞SW579,si-NC、si-circ_0001178、miR-NC、miR-885-5p mimics转染至SW579细胞,pcDNA-circ_0001178、anti-miR-885-5p转染至SW579细胞后加入白头翁皂苷D处理;qRT-PCR检测circ_0001178与miR-885-5p的表达量;MTT、平板克隆形成实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0001178与miR-885-5p的靶向关系。结果白头翁皂苷D可降低circ_0001178的表达量、细胞活力及N-cadherin蛋白水平(P<0.05),可抑制克隆形成数、迁移及侵袭,还可促进miR-885-5p表达及E-cadherin的表达(P<0.05),且呈剂量依赖性;转染si-circ_0001178或转染miR-885-5p mimics可抑制细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;circ_0001178能够靶向调控miR-885-5p;转染pcDNA-circ_0001178或转染anti-miR-885-5p均可逆转白头翁皂苷D对细胞生物学行为的作用。结论白头翁皂苷D可通过调控circ_0001178/miR-885-5p分子轴而抑制甲状腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 白头翁皂苷D circ_0001178 miR-885-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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circ_0073585在急性髓系白血病中的表达及功能研究
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作者 周永勍 苏肖宇 +1 位作者 赵倩 邓兆群 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1018-1025,共8页
目的:研究环状RNA(circular RNA,circRNA)circ_0073585在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达水平、临床意义及其在白血病细胞中的功能。方法:采用实时定量PCR(RQ-PCR)检测106例初诊AML患者及38例对照者骨髓标本中circ_0073585的表达水... 目的:研究环状RNA(circular RNA,circRNA)circ_0073585在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达水平、临床意义及其在白血病细胞中的功能。方法:采用实时定量PCR(RQ-PCR)检测106例初诊AML患者及38例对照者骨髓标本中circ_0073585的表达水平,比较两组的表达差异并分析其临床意义。根据受试者工作特征(ROC)曲线来评估circ_0073585的表达对AML的诊断价值。将过表达circ_0073585载体及空载体的慢病毒感染的THP-1细胞分为circ_0073585-THP-1和NC-THP-1两组,通过CCK-8法、流式细胞术分析circ_0073585对THP-1细胞增殖、生存、凋亡及药物敏感性的影响。结果:与对照组相比,circ_0073585在AML患者骨髓中的表达水平显著降低(P<0.001)。circ_0073585高、低表达组在白细胞计数(P<0.05)、血小板计数(P<0.01)及染色体危险程度(P<0.05)方面差异有统计意义。与NC-THP-1细胞相比,circ_0073585-THP-1细胞增殖及生存能力减弱(P<0.01)、凋亡率增加(P<0.01),对高三尖杉酯碱(P<0.05)及柔红霉素(P<0.001)的敏感性增加。结论:circ_0073585在AML患者中表达水平下降,过表达circ_0073585可抑制白血病细胞的增殖能力、生存能力,促进凋亡,并提高白血病细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 环状RNA circ_0073585 急性髓系白血病
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circ_0001649抑制卵巢癌SKOV3细胞糖酵解、增殖、迁移及侵袭的机制研究
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作者 欧阳诗洁 熊琼英 李仙丽 《西部医学》 2024年第8期1143-1149,共7页
目的探讨circ_0001649对卵巢癌SKOV3细胞糖酵解、增殖、迁移、侵袭的影响及其可能作用机制。方法选取2018年2月—2019年12月我院收治经病理诊断为卵巢癌的患者39例,采用qRT-PCR法检测卵巢癌组织与癌旁组织中circ_0001649、miR-223的表... 目的探讨circ_0001649对卵巢癌SKOV3细胞糖酵解、增殖、迁移、侵袭的影响及其可能作用机制。方法选取2018年2月—2019年12月我院收治经病理诊断为卵巢癌的患者39例,采用qRT-PCR法检测卵巢癌组织与癌旁组织中circ_0001649、miR-223的表达水平;体外培养人卵巢癌细胞SKOV3,分别将pcDNA、pcDNA-circ_0001649、anti-miR-NC、anti-miR-223、pcDNA-circ_0001649与miR-NC、pcDNA-circ_0001649与miR-223 mimics转染至SKOV3细胞;观察SKOV3细胞中circ_0001649、miR-223的表达水平;检测葡萄糖消耗与乳酸、细胞增殖、迁移及侵袭能力。结果circ_0001649在卵巢癌组织表达水平低于癌旁组织表达,且miR-223的表达水平高于癌旁组织表达(P<0.05);转染pcDNA-circ_0001649或转染anti-miR-223可降低葡萄糖消耗及乳酸水平(P<0.05),明显降低OD值及Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平(P<0.05),减少迁移及侵袭细胞数(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实circ_0001649可靶向结合miR-223;pcDNA-circ_0001649与miR-223 mimics共转染后可明显提高OD值及Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白水平(P<0.05),增加迁移及侵袭细胞数(P<0.05),提高葡萄糖消耗及乳酸水平(P<0.05)。结论circ_0001649过表达可对miR-223表达起到下调的作用,进而达到卵巢癌SKOV3细胞发生发展起到抑制作用。 展开更多
关键词 circ_0001649 miR-223 卵巢癌 糖酵解 增殖 迁移 侵袭
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木香烃内酯通过调控circ_0000285/miR-409-3p影响胃癌细胞恶性表型
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作者 刘昭 郑志超 +1 位作者 张亚鹏 任玉川 《肿瘤药学》 CAS 2024年第2期193-202,共10页
目的探讨木香烃内酯对胃癌细胞恶性表型的影响及可能机制。方法体外培养胃癌细胞HGC-27,采用不同剂量(2.5、10、40μmol·L^(-1))木香烃内酯干预HGC-27细胞24 h,或转染circ_0000285小干扰RNA至HGC-27细胞后培养24 h。采用40μmol... 目的探讨木香烃内酯对胃癌细胞恶性表型的影响及可能机制。方法体外培养胃癌细胞HGC-27,采用不同剂量(2.5、10、40μmol·L^(-1))木香烃内酯干预HGC-27细胞24 h,或转染circ_0000285小干扰RNA至HGC-27细胞后培养24 h。采用40μmol·L^(-1)木香烃内酯干预转染circ_0000285过表达载体的HGC-27细胞24 h。CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,划痕实验和Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blotting检测细胞中Bcl-2、Bax、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,RT-qPCR检测circ_0000285和miR-409-3p表达,双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000285和miR-409-3p的调控关系。结果木香烃内酯可降低HGC-27细胞的OD值、集落形成数、迁移距离、侵袭数,以及Bcl-2、N-cadherin蛋白表达水平,提高细胞凋亡率及Bax、E-cadherin蛋白表达水平,并呈剂量依赖性。木香烃内酯可抑制HGC-27细胞中circ_0000285的表达,促进miR-409-3p表达。干扰circ_0000285表达可降低HGC-27细胞的增殖、迁移能力,并促进细胞凋亡。circ_0000285可靶向结合并负调控miR-409-3p。过表达circ_0000285可逆转木香烃内酯对HGC-27细胞恶性表型的影响。结论木香烃内酯可能通过调控circ_0000285/miR-409-3p轴抑制胃癌细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 木香烃内酯 胃癌 circ_0000285 miR-409-3p 细胞增殖 迁移 侵袭 凋亡
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circ_0000502靶向miR-1231调控甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖和凋亡
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作者 李颖胜 陈利灵 王亮 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第2期187-192,共6页
目的探讨circ_0000502对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法选取26例甲状腺乳头状癌组织及相应癌旁组织。将TPC-1细胞分为NC组、si-NC组、si-circ_0000502组、miR-NC组、miR-1231组、si-circ_0000502+anti-miR... 目的探讨circ_0000502对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法选取26例甲状腺乳头状癌组织及相应癌旁组织。将TPC-1细胞分为NC组、si-NC组、si-circ_0000502组、miR-NC组、miR-1231组、si-circ_0000502+anti-miR-NC组、si-circ_0000502+anti-miR-1231组。qRT-PCR检测circ_0000502和miR-1231的表达水平;MTT检测细胞活性;Transwell、流式细胞术检测细胞的迁移、侵袭和细胞凋亡情况;Western blotting检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000502和miR-1231的靶向关系。结果甲状腺乳头状癌组织和细胞中circ_0000502呈高表达,miR-1231呈低表达。沉默circ_0000502或过表达miR-1231降低了TPC-1细胞增殖活力、迁移、侵袭细胞数,抑制PCNA、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达,促进细胞凋亡和Bax蛋白表达(P<0.05)。circ_0000502靶向调控miR-1231表达(P<0.05),下调miR-1231表达逆转了沉默circ_0000502对TPC-1细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响(P<0.05)。结论沉默circ_0000502通过靶向上调miR-1231调控TPC-1细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡。 展开更多
关键词 circ_0000502 miR-1231 甲状腺乳头状癌 增殖 迁移 侵袭 凋亡 TPC-1细胞
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外泌体来源的circ_0003759在肝细胞癌的表达及其诱导巨噬细胞M2型极化的临床意义
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作者 杜艾浓 唐妮 +2 位作者 陈旭祥 周爽 曾江正 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2024年第5期417-423,共7页
目的探讨外泌体来源的circ_0003759在肝细胞癌(HCC)中的表达情况,及其诱导巨噬细胞M2极化对HCC预后的影响。方法基于GSE97332联合HCC患者血清外泌体环状RNA(cirRNAs)测序数据筛选出circ_0003759。透射电镜及蛋白质免疫印迹法鉴定及检测... 目的探讨外泌体来源的circ_0003759在肝细胞癌(HCC)中的表达情况,及其诱导巨噬细胞M2极化对HCC预后的影响。方法基于GSE97332联合HCC患者血清外泌体环状RNA(cirRNAs)测序数据筛选出circ_0003759。透射电镜及蛋白质免疫印迹法鉴定及检测外泌体,荧光定量PCR检测外泌体circ_0003759表达水平。PKH26标记HCC外泌体与人巨噬细胞共培养,流式细胞术检测巨噬细胞M2型极化标记物CD206和CD209。构建sh_circ_0003759慢病毒并转染至肝癌HCCLM3细胞,抽提外泌体与人巨噬细胞共培养,检测巨噬细胞M2型极化情况。CIBERSORT分析HCC微环境免疫细胞浸润丰度,Kaplan-Meier法和Cox比例风险回归模型分析M2型巨噬细胞对HCC预后的影响。基因集富集分析(GSEA)巨噬细胞M2型极化的相关信号通路。结果circ_0003759在HCC组织和HCC血清外泌体中表达显著增加(P<0.05)。将HCC外泌体与人巨噬细胞共同培养后,巨噬细胞CD206和CD209阳性细胞比率显著上升(P<0.05)。肝癌HCCLM3细胞转染sh_circ_0003759,将其外泌体与人巨噬细胞共同培养后,巨噬细胞CD206和CD209阳性细胞比率显著下降(P<0.05)。此外,HCC组织中M2型巨噬细胞的浸润相对丰度明显高于对照组(P<0.001),生存分析结果表明M2型巨噬细胞相对丰度高的HCC患者预后较差(P<0.05)。GSEA分析显示巨噬细胞M2型极化与补体、炎性反应、干扰素γ及抗肿瘤坏死因子α/细胞核因子κB免疫信号通路的抑制相关。结论HCC外泌体高表达circ_0003759并诱导巨噬细胞M2型极化,与HCC预后差、免疫抑制状态相关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 外泌体 circ_0003759 巨噬细胞M2型极化 肿瘤微环境
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Circ_0003855 involvement of esophageal cancer progression through miR-622/FLOT1
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作者 JINGJING TIAN XIBAO HU XINRONG ZHANG 《Oncology Research》 SCIE 2024年第5期925-931,共7页
To confirm the relationship between Circ_0003855 and EC,we purchased the Human esophageal carcinoma cell line Eca109 and normal human esophageal epithelial cells HEEC,and the expression levels of Circ_0003855,miR-622,... To confirm the relationship between Circ_0003855 and EC,we purchased the Human esophageal carcinoma cell line Eca109 and normal human esophageal epithelial cells HEEC,and the expression levels of Circ_0003855,miR-622,and FLOT1 were detected.The results show that Circ_0003855 and FLOT1 were highly expressed in Eca109 cells,while miR-622 was lowly expressed(p<0.05).Subsequently,Circ_0003855 small interfering RNA(si-Circ_0003855)and its negative control(si-NC)were used to detect changes in cellular biological behaviors.We found that the activity of Eca109 cells was reduced after interfering with the expression of Circ_0003855,and miR-622 expression was elevated,while FLOT1 was decreased(p<0.05).Additionally,si-Circ_0003855 and miR-622 inhibitor sequence(miR-622-inhibition)were co-transfected into cells with miR-622-inhibition alone,and untreated Eca109 cells were used as a control to detect the expression of FLOT1.Co-transfection of si-Circ_0003855 and miR-622-inhibition showed no significant difference in FLOT1 expression compared to the control cells(p>0.05).Synthesizing the results of these experiments above,we believe that interfering with the expression of Circ_0003855 can inhibit the activity of EC cells,and its mechanism is related to miR-622 and FLOT1. 展开更多
关键词 Circ_0003855 miR-622 FLOT1 Esophageal cancer Cell proliferation
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环状RNA circ_104939在肺腺癌组织中的作用研究
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作者 戴万辉 彭辉勇 +1 位作者 戴锦东 朱栋炜 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第1期35-41,共7页
目的:探讨环状RNA circ_104939在肺腺癌组织中的临床意义。方法:采集10例肺腺癌病人的肿瘤组织和癌旁组织进行环状RNA测序分析,以肿瘤组织表达明显增高的环状RNA circ_104939作为研究对象。利用qRT-PCR检测30对肺腺癌组织与癌旁组织中ci... 目的:探讨环状RNA circ_104939在肺腺癌组织中的临床意义。方法:采集10例肺腺癌病人的肿瘤组织和癌旁组织进行环状RNA测序分析,以肿瘤组织表达明显增高的环状RNA circ_104939作为研究对象。利用qRT-PCR检测30对肺腺癌组织与癌旁组织中circ_104939的表达量,验证测序结果。用qRT-PCR检测和分析circ_104939在肺腺癌细胞系(HCC-78、A549、KTA-7以及PC-9)和正常人支气管上皮细胞BEAS-2B中的表达差异。siRNA敲减circ_104939后,用MTT、平板划痕实验、Transwell实验、流式细胞术检测细胞周期实验分别检测肺腺癌细胞(KTA-7和PC-9)增殖、迁移、侵袭以及细胞周期的变化。利用RNA pulldown和荧光素酶报告实验验证circ_104939的可能靶标miR-191-5p。siRNA敲减circ_104939后,将肺腺癌细胞(KTA-7和PC-9)分别皮下注射到裸鼠体内构建荷瘤小鼠模型,检测移植瘤体积以及质量。结果:相比癌旁组织,肺腺癌组织中的circ_104939表达显著增高(P<0.01);circ_104939在肺腺癌细胞中的表达水平明显高于正常人支气管上皮细胞(P<0.05或P<0.01)。circ_104939敲减后,KTA-7和PC-9细胞增殖、侵袭能力、细胞周期进展、PC-9细胞迁移能力下降(P<0.05或P<0.01)。circ_104939能够海绵样吸附miR-104939。circ_104939敲减后,荷瘤小鼠肿瘤体积减小(P<0.05或P<0.01),肿瘤质量显著降低(P<0.01或P<0.001)。结论:circ_104939在肺腺癌组织中呈高表达,有望作为肺腺癌诊断和治疗的靶点。 展开更多
关键词 肺腺癌 环状RNA circ_104939
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环状RNA Circ_0000291/miR-326/PTBP1轴影响肝细胞癌进展
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作者 庞敏 邓芳 李珊珊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1210-1216,共7页
目的:探讨Circ_0000291作为miR-326的分子海绵调控多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:qRT-PCR检测Circ_0000291、miR-326、PTBP1在组织标本和细胞中的表达。双荧光素酶报告实验检测Circ_0... 目的:探讨Circ_0000291作为miR-326的分子海绵调控多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:qRT-PCR检测Circ_0000291、miR-326、PTBP1在组织标本和细胞中的表达。双荧光素酶报告实验检测Circ_0000291和miR-326以及miR-326和PTBP1的靶向调控关系。CCK-8、Transwell、流式细胞术和ELISA分别检测细胞的增殖、侵袭、凋亡以及免疫调控相关因子TNF-α、IFN-γ的表达。结果:相对于正常组织和肝细胞,Circ_0000291和PTBP1在HCC组织标本和细胞中表达升高,而miR-326表达水平显著降低(均P<0.05)。下调Circ_0000291可以抑制细胞的增殖、侵袭和免疫逃逸,诱导细胞凋亡(均P<0.05),转染miR-326后观察到与下调Circ_0000291类似的结果,但是上调Circ_0000291可以部分拮抗miR-326对细胞的作用(均P<0.05)。在HCC中,Circ_0000291作为分子海绵调控miR-326表达,促进PTBP1表达。结论:Circ_0000291可以吸附miR-326从而上调PTBP1,促进HCC细胞的增殖、侵袭和免疫逃逸,抑制凋亡,从而促进HCC的发展。 展开更多
关键词 Circ_0000291 miR-326 PTBP1 肝细胞癌 增殖 凋亡 免疫逃逸
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