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2019—2022年广西鸭圆环病毒分子流行病学研究
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作者 熊陈勇 曾素先 +11 位作者 刘惠心 赵康 施开创 施喻文 谢守玉 韦显凯 龙凤 冯淑萍 屈素洁 王露霞 林昌华 尹彦文 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期373-381,共9页
【目的】了解广西鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)的遗传进化特征。【方法】试验于2019—2022年从广西地区采集761份病死鸭临床样本,利用实时荧光定量PCR检测DuCV感染情况。通过PCR扩增DuCV全基因组序列,利用DNAStar分析其与参考毒株... 【目的】了解广西鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)的遗传进化特征。【方法】试验于2019—2022年从广西地区采集761份病死鸭临床样本,利用实时荧光定量PCR检测DuCV感染情况。通过PCR扩增DuCV全基因组序列,利用DNAStar分析其与参考毒株核苷酸和氨基酸序列相似性,使用RDP4和SimPlot 3.5.1软件分析DuCV重组事件,采用Mega 7.0软件构建遗传进化树,应用BioEdit软件分析DuCV Cap蛋白氨基酸变异位点。【结果】DuCV阳性率为22.5%,基因组大小为1988~1996 bp。广西DuCV毒株全基因组、Rep和Cap基因与参考毒株核苷酸序列相似性分别为71.9%~99.6%、83.1%~99.9%和52.8%~99.9%。基因重组分析显示,DuCV-GX13-2019和DuCV-GX14-2020存在重组事件。Cap蛋白共有78个氨基酸位点发生突变,与DuCV-1相比,DuCV-2在第3、12、15、23、31、42、56和64位氨基酸处完全变异。广西毒株为DuCV-1和DuCV-2基因型,DuCV-1为主要优势毒株,且DuCV-1b亚型流行最为广泛。【结论】广西地区DuCV发病较严重,部分毒株存在重组事件,Cap蛋白突变率高,DuCV多种亚型均有流行。研究结果为广西地区DuCV流行病学调查提供基本数据。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒(ducv) 遗传进化 相似性 流行病学
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DuCV和GPV与DEV三重PCR检测方法的建立及应用
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作者 田琴 张明华 +3 位作者 周碧君 程振涛 王开功 文明 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期225-230,共6页
根据GenBank中的序列,合成针对鸭圆环病毒(DuCV)REP基因、鹅细小病毒(GPV)NS1基因、鸭肠炎病毒(DEV)UL6基因的3对特异性引物,以病毒的克隆质粒作为模板,进行退火温度、引物终浓度的优化,建立一种能同时鉴别DuCV、GPV、DEV的三重PCR检测... 根据GenBank中的序列,合成针对鸭圆环病毒(DuCV)REP基因、鹅细小病毒(GPV)NS1基因、鸭肠炎病毒(DEV)UL6基因的3对特异性引物,以病毒的克隆质粒作为模板,进行退火温度、引物终浓度的优化,建立一种能同时鉴别DuCV、GPV、DEV的三重PCR检测方法,并检验该方法的特异性、敏感性和重复性。结果显示:试验所建立的三重PCR检测方法的最适退火温度为58.5℃,引物DuCV REP、GPV NS1、DEV UL6的最适终浓度分别为0.9、0.6、0.7μmol/L;该方法能够同时扩增出DuCV、GPV和DEV的特异性片段,而不能扩增出NDV、RA、AIV、DHV和TUMV,表明该方法特异性强;该方法对质粒DuCV、GPV和DEV模板的最低检测量分别为1、100、10 fg,表明该方法敏感性好;运用该方法对DuCV+GPV+DEV、DuCV+GPV、GPV+DEV、DuCV+DEV、DuCV、GPV、DEV进行检测,均能扩增出与预期一致的特异性片段,表明该方法重复性好;运用该方法对42份临床样本进行检测,其检出率分别为26.19%、30.95%和19.05%,与单一PCR的检出结果一致,表明该方法能适用于临床样本的检测。试验建立的方法具有快速、简便、特异性强、敏感性好、重复性好等特点,可用于DuCV、GPV和DEV临床样本混合感染的快速诊断及鉴别诊断。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒(ducv) 鹅细小病毒(GPV) 鸭肠炎病毒(DEV) 三重PCR 退火温度 引物终浓度
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Epidemiological Investigation and Genome Analysis of Duck Circovirus in Southern China 被引量:11
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作者 Chun-he Wan Guang-hua Fu Shao-hua Shi Long-fei Cheng Hong-mei Chen Chun-xiang Peng Su Lin Yu Huang 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2011年第5期289-296,共8页
Duck circovirus (DuCV), a potential immunosuppressive virus, was investigated in Southern China from March 2006 to December 2009 by using a polymerase chain reaction (PCR) based method. In this study, a total of 1... Duck circovirus (DuCV), a potential immunosuppressive virus, was investigated in Southern China from March 2006 to December 2009 by using a polymerase chain reaction (PCR) based method. In this study, a total of 138 sick or dead duck samples from 18 different farms were examined with an average DuCV infection rate of-35%. It was found that ducks between the ages of 40~60 days were more susceptible to DuCV. There was no evidence showing that the DuCV virus was capable of vertical transmission. Farms with positive PCR results exhibited no regularly apparent clinical abnormalities such as feathering disorders, growth retardation or lower-than-average weight. The complete genomes of 91 strains from Fujian Province and 1 from Zhejiang Province were sequenced and analyzed. The 10 DuCV genomes, comlbared with others genomes downloaded from GenBank, ranged in size from 1988 to 1996 base pairs, with sequence identities ranging from 83.2% to 99.8%. Phylogenetic analysis based on genome sequences demonstrated that DuCVs can be divided into two distinct genetic genotypes, Group I (the Euro-USA lineage) and Group II(the Taiwan lineage), with approximately 10.0% genetic difference between the two types. Molecular epidemiological data suggest there is no obvious difference among DuCV strains isolated from different geographic locations or different species, including Duck, Muscovy duck, Mule duck, Cheery duck, Mulard duck and Pekin duck. 展开更多
关键词 Duck circovims(ducv) Epidemiological investigation GENOME Phylogenetic analysis
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猪圆环病毒研究进展 被引量:16
4
作者 刘金鑫 孙孟娇 +2 位作者 陈磊 王雪娇 银森森 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第2期94-97,共4页
近年来猪圆环病毒感染给养猪业的健康发展带来巨大威胁。猪感染圆环病毒后可引起的疾病有猪断奶后多系统衰弱综合征(PMWS)、猪皮炎和肾病综合征(PDNS)、猪呼吸系统衰弱综合征(PRDC)等。近年来,基于PMWS而对PCV所做的研究工作不断深入,... 近年来猪圆环病毒感染给养猪业的健康发展带来巨大威胁。猪感染圆环病毒后可引起的疾病有猪断奶后多系统衰弱综合征(PMWS)、猪皮炎和肾病综合征(PDNS)、猪呼吸系统衰弱综合征(PRDC)等。近年来,基于PMWS而对PCV所做的研究工作不断深入,对病毒的相关特性有了较为清晰的认识。论文就近年来猪圆环病毒的致病性、流行病学、诊断及防控等方面的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 病原学 诊断 防控
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广西部分地区鸭圆环病毒感染情况调查 被引量:10
5
作者 屈素洁 粟艳琼 +5 位作者 郑敏 覃勇 莫胜兰 陆文俊 梁媛 严斯刚 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第11期156-158,共3页
为了解广西鸭圆环病毒(duck circovirus,DuCV)感染情况,根据已发表的鸭圆环病毒序列合成了1对PCR引物,利用该引物对采集于百色、柳州和桂林3个市的321份鸭组织样品进行了检测。结果表明,58份样品能扩增出228bp的特异条带,总阳性率为18.0... 为了解广西鸭圆环病毒(duck circovirus,DuCV)感染情况,根据已发表的鸭圆环病毒序列合成了1对PCR引物,利用该引物对采集于百色、柳州和桂林3个市的321份鸭组织样品进行了检测。结果表明,58份样品能扩增出228bp的特异条带,总阳性率为18.07%;且3个市均能检出阳性样品,阳性率分别为18%(54/300)、5.6%(1/18)和100%(3/3)。结果证实,广西百色、柳州、桂林地区的鸭群中不同程度地存在鸭圆环病毒感染现象。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒 聚合酶链式反应 流行病学调查
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猪圆环病毒Ⅱ型的研究进展 被引量:11
6
作者 徐娜 李宝玉 +1 位作者 娄忠子 柳纪省 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期22-26,共5页
猪圆环病毒Ⅱ型(porcine circovirus type2,PCV-2)是引起猪圆环病毒病(porcine circovirus desease,PCVD)的主要病原,在猪群中广泛存在。本病毒可以单独或者与其它病原混合感染猪只,引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、育肥猪皮炎与... 猪圆环病毒Ⅱ型(porcine circovirus type2,PCV-2)是引起猪圆环病毒病(porcine circovirus desease,PCVD)的主要病原,在猪群中广泛存在。本病毒可以单独或者与其它病原混合感染猪只,引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、育肥猪皮炎与肾病综合征(PDNS)等一系列较为复杂的疾病,严重威胁猪只的健康。经过10余年持续不断的努力,各国对PCV-2的研究日益深入,对病毒的相关特性也有了较为清晰的认识。对病毒的病原学、流行病学、致病机理、临床症状、病理变化、诊断和防制对策等方面的研究进展进行了简要综述。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 病原学 致病机理 诊断 防制
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新型猪圆环病毒疫苗的研究进展 被引量:9
7
作者 蔡杰 呼高伟 +3 位作者 王乃东 邓治邦 王爱兵 杨毅 《经济动物学报》 CAS 2016年第3期171-174,178,共5页
从20世纪90年代开始流行到现在,全球范围内暴发的猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)给世界各国的养猪业造成了巨大的经济损失。我国是世界的养猪大国和猪肉制品消费大国,PCVAD对我国的养猪业的发展产生了很大的影响。疫苗是预防PCVAD最直接有... 从20世纪90年代开始流行到现在,全球范围内暴发的猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)给世界各国的养猪业造成了巨大的经济损失。我国是世界的养猪大国和猪肉制品消费大国,PCVAD对我国的养猪业的发展产生了很大的影响。疫苗是预防PCVAD最直接有效的方法,文中对近年来国内外猪圆环病毒疫苗的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 猪圆环病毒相关疾病 疫苗
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鸭圆环病毒Cap基因在昆虫细胞杆状病毒系统中的表达及鉴定 被引量:4
8
作者 张兴晓 邹金峰 +4 位作者 相琪旺 王鑫 陈琳 谢之景 姜世金 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期7-11,共5页
通过PCR方法扩增完整的鸭圆环病毒Cap基因,按正确的阅读框架将其克隆入pFastBacTM HTB杆状病毒载体,将筛选的阳性重组载体pF-CP转化至含有杆状病毒穿梭载体和辅助载体的DH10Bac大肠杆菌感受态细胞,经过蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组表... 通过PCR方法扩增完整的鸭圆环病毒Cap基因,按正确的阅读框架将其克隆入pFastBacTM HTB杆状病毒载体,将筛选的阳性重组载体pF-CP转化至含有杆状病毒穿梭载体和辅助载体的DH10Bac大肠杆菌感受态细胞,经过蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组表达载体rBacmid-CP。在脂质体的介导下转染Sf9昆虫细胞,72h后获得重组杆状病毒。Western blot和间接免疫荧光(IFA)试验结果表明,表达的蛋白与原核表达Cap蛋白免疫小鼠采集的血清具有良好的反应原性,为进一步研究Cap蛋白的功能奠定基础。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒 Cap基因 昆虫细胞-杆状病毒表达系统 IFA
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PRRSV人工单独感染及其与PCV2人工联合感染的病理学比较 被引量:12
9
作者 彭长凌 高崧 刘秀梵 《徐州医学院学报》 CAS 2006年第1期49-52,共4页
目的比较猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和断奶仔猪多系统萎缩综合征(PMWS)的病理学变化。方法用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染了2头3周龄仔猪,同时设立了3头健康对照猪。在攻毒前后分别于耳缘静脉采血,用HerdChek IDEX... 目的比较猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和断奶仔猪多系统萎缩综合征(PMWS)的病理学变化。方法用PRRSV ATCC VR-2332株和猪圆环病毒2型(PCV2)联合感染了2头3周龄仔猪,同时设立了3头健康对照猪。在攻毒前后分别于耳缘静脉采血,用HerdChek IDEXX Kit测其血清抗体。PRRSV和PCV2联合感染猪分别在感染后1周、3周剖杀,PRRSV单独感染猪和健康对照猪分别在感染后1周、2周和3周剖杀。剖杀后采集肺、脾、扁桃体和腹股沟淋巴结,用甲醛溶液固定,组织石蜡切片以观察显微病理变化。结果剖检结果和石蜡切片结果均显示了试验猪在攻毒后发生程度不一的间质性肺炎及相应的显微病变。结论PRRSV和PCV2联合感染引起的病变比PRRSV单独感染要严重。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒 病理变化
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抗猪圆环病毒2型病毒样颗粒单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1
10
作者 侯强 侯绍华 +5 位作者 贾红 姜一曈 鑫婷 李明 陈青 朱鸿飞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期325-329,共5页
为制备能够特异性识别猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)的单克隆抗体(MAb),本研究利用杆状病毒表达系统分别制备了具有VLP结构的核衣壳蛋白(Cap)和去掉核定位信号肽的tCap蛋白,以前者为免疫原,后者为筛选抗原制备了一株杂交瘤细胞(1F... 为制备能够特异性识别猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)的单克隆抗体(MAb),本研究利用杆状病毒表达系统分别制备了具有VLP结构的核衣壳蛋白(Cap)和去掉核定位信号肽的tCap蛋白,以前者为免疫原,后者为筛选抗原制备了一株杂交瘤细胞(1F6),通过western blot、间接免疫荧光和透射电镜对其生物学特性进行鉴定。结果显示,1F6 MAb与PCV2 VLP具有良好的特异性反应,同时能够特异性识别天然PCV2和线性结构的Cap蛋白。本研究制备的MAb为PCV2抗原表位的鉴定和PCV2 VLP定量方法的建立提供了工具。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 单克隆抗体 核衣壳蛋白 病毒样颗粒
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DNA免疫法制备猪圆环病毒Ⅱ型ORF3抗体 被引量:1
11
作者 谢俊岭 耿美鸽 +2 位作者 吴迪 卻小宁 周双海 《中国农学通报》 CSCD 2012年第17期97-100,共4页
为了制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)开放阅读框3(ORF3)蛋白的抗体,并为ORF3功能研究奠定基础,用PCR方法扩增PCV2ORF3基因,对其PCR产物用EcoRI与XhoI进行酶切,并对真核表达载体pCDNA3.1(+)进行同样酶切,连接2种目的酶切产物后转化E.coliDH5a... 为了制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)开放阅读框3(ORF3)蛋白的抗体,并为ORF3功能研究奠定基础,用PCR方法扩增PCV2ORF3基因,对其PCR产物用EcoRI与XhoI进行酶切,并对真核表达载体pCDNA3.1(+)进行同样酶切,连接2种目的酶切产物后转化E.coliDH5a感受态,菌落PCR和序列测定结果显示成功构建出重组质粒pCDNA3.1-PCV2ORF3。将该重组质粒接种BALB/c小鼠,用间接免疫荧光(IFA)检测小鼠血清PCV2ORF3抗体的特异性及其效价。IFA结果证实经PCV2ORF3重组质粒接种所制备的小鼠血清是PCV2ORF3的特异性抗体,小鼠血清PCV2ORF3抗体效价在经过4次接种后均达到1:25以上,抗体检测结果表明成功制备了具有较高效价的PCV2ORF3抗体。研究结果提示:可以通过质粒DNA免疫方法来快速、简便地制备PCV2ORF3抗体,为PCV2ORF3抗体制备提供了一种新的有效途径。 展开更多
关键词 猪圆环病毒Ⅱ型 DNA免疫 小鼠 ORF3抗体 效价
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PRRSV-PCV2重组病毒的构建及PRRSV转录调控机制研究 被引量:4
12
作者 郑海红 孙志 +1 位作者 朱兴全 袁世山 《微生物与感染》 2008年第3期147-153,共7页
目的本研究旨在探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性cDNA克隆作为猪圆环病毒(PCV2)的主要免疫原开放阅读框架2(ORF2)表达载体的可行性,以及利用重组病毒对PRRSV复制转录过程进行解剖。方法以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进... 目的本研究旨在探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性cDNA克隆作为猪圆环病毒(PCV2)的主要免疫原开放阅读框架2(ORF2)表达载体的可行性,以及利用重组病毒对PRRSV复制转录过程进行解剖。方法以北美株PRRSV感染性克隆pAPRRS为平台进行反向遗传操作,分别在pAPRRS的ORF1和ORF2间,ORF5和ORF6间,ORF6和ORF7间插入PCV2ORF2,且对拯救病毒vPCV进行了病毒学及分子生物学鉴定。结果vPCV的sg mRNA2.1利用了PRRSV mRNA2的转录调控序列(TRS),形成由PRRSVGP2和PCV2衣壳蛋白组成的sgm RNA2.1。外源基因的插入同时也导致重组病毒启用新的TRS而产生3条新亚基因组,其中sgm RNA2.2和sgm RNA2.3采用PCV2上的序列来取代PRRSVRNA2本身的TRS;另一条sgm RNA2.4则为非经典型亚基因组,其TRS在PRRSV相应的AUG下游。结论2株PRRSV-PCV2重组病毒可以稳定传代,为进一步研发PRRSV遗传标疫苗奠定了基础;插入片段上一些类似TRS序列的引入及插入片段(718bp)过长导致PRRSV ORF2TRS本身和其两翼序列的RNA结构变化是引起重组病毒遗传不稳定性的最主要原因;PRRSV可以利用TRS样外源序列作为转录启动子,这为进一步解剖PRRSV复制转录过程奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸道综合征病毒 猪圆环病毒Ⅱ型 载体表达 转录调控序列
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检测猪圆环病毒2型DNA的套式PCR方法的建立及应用 被引量:3
13
作者 靳玉芬 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第7期1950-1951,共2页
为了进一步调查研究PVC2的流行病学及其致病机制,根据猪圆环病毒2型GD株及已发表的PCV2的全基因组序列,对来自广东、广西、湖南、海南等地287个猪场送检的1 560个可疑病料进行PCR扩增,并对扩增产物进行克隆、酶切、测序鉴定,建立了PCV2... 为了进一步调查研究PVC2的流行病学及其致病机制,根据猪圆环病毒2型GD株及已发表的PCV2的全基因组序列,对来自广东、广西、湖南、海南等地287个猪场送检的1 560个可疑病料进行PCR扩增,并对扩增产物进行克隆、酶切、测序鉴定,建立了PCV2检测的套式PCR方法。结果表明,PCR扩增获得了预期大小的片断,将测序结果与GenBank收录的PCV2序列进行比较,发现同源性均在90%以上。该PCR方法对PCV2是特异的,并具有良好的重复性和稳定性。用该PCR方法对287个猪场的1 560份样品进行了检测,其中983份为PCV2阳性,表明该病在我国广泛流行。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 套式PCR
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PCR Detection and Sequence Analysis of Duck Circovirus in Sick Muscovy Ducks 被引量:7
14
作者 Shi-jin JIANG Xing-xiao ZHANG +5 位作者 Shao-ning LIU Yu WANG Yi-bo KONG Xiu-li WEI Ya-ni SUN Qin ZHAO 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2008年第4期265-271,共7页
The duck circovirus (DuCV) infection in sick ducks from Fujian Province was investigated. The liver samples of 43 sick Muscovy ducks with infectious serositis were collected from 12 duck farms in Fujian Province Bas... The duck circovirus (DuCV) infection in sick ducks from Fujian Province was investigated. The liver samples of 43 sick Muscovy ducks with infectious serositis were collected from 12 duck farms in Fujian Province Based on the published sequences of DuCV, two primers were designed for the detection of DuCV and four pairs of primers were designed to amplify four overlapping fragments that cover the complete genome of DuCV. The specific PCR products were amplified from positive samples. The fragments were then cloned into pMD18-T vector and sequenced, and the full length genomic sequence of the FJ0601 isolate of DuCV was obtained. PCR analysis showed that the proportion of ducks which were positive for circovirus was 79% and 10 out of the 12 farms were positive. Sequence analysis showed that the complete genome of DuCV-FJ0601 was 1988 bp and possessed features common to the family Circoviridae which included a stem-loop structure and the Rep protein motifs. Homology analysis showed that FJ0601 isolate of DuCV had 97.3%-97.5% nucleotide sequence identity to all the four Taiwan isolates (TC1/2002, TC2/2002, TC3/2002, TC4/2002), 82.9% identity to the America (33753-52) isolate and 82.3% identity to the Germany isolate. Phylogenetic analysis with Clustal W, however, showed that FJ0601 isolate of DuCV was on a common branch with Taiwan isolates, and Germany and America isolates belonged to the other branch. 展开更多
关键词 Duck Circovirus (ducv PCR Full length genome Sequence analysis
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鸭圆环病毒的PCR鉴定及分子特点分析 被引量:5
15
作者 刘新勃 孙嘉 +2 位作者 吴少鹏 鞠孜敬 唐德宏 《山东畜牧兽医》 2018年第2期5-7,共3页
本研究采用2对针对鸭圆环病毒(DuCV)的特异性引物,对57份病死鸭病料进行PCR检测,探究了DuCV在病死鸭的感染情况;同时,随机选择2个DuCV阳性的样品进行克隆、序列测定。结果显示,病死鸭中DuCV阳性率为7.0%;同源性分析显示,2株DuCV的核苷... 本研究采用2对针对鸭圆环病毒(DuCV)的特异性引物,对57份病死鸭病料进行PCR检测,探究了DuCV在病死鸭的感染情况;同时,随机选择2个DuCV阳性的样品进行克隆、序列测定。结果显示,病死鸭中DuCV阳性率为7.0%;同源性分析显示,2株DuCV的核苷酸序列与广西参考株(KC460535)的同源性最高,分别为97.7%、96%。基因进化树分析显示,2株DuCV与德国参考株(AY228555)和广西参考株(KC460532、KC460535)属于同一群,为基因1型。本研究对病死鸭DuCV感染情况的初步调查,补充了其流行病学资料,对肉鸭疫病防控具有一定的参考意义。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒(ducv)PCR鉴定分子特点
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广西鸭圆环病毒流行毒株遗传变异分析 被引量:9
16
作者 粟艳琼 郑敏 +2 位作者 张步娴 屈素洁 莫胜兰 《动物医学进展》 北大核心 2015年第10期20-25,共6页
为了解广西鸭圆环病毒(DuCV)流行毒株的遗传变异情况,进一步为研制鉴别诊断DuCV方法和制定科学防控措施奠定基础。采用PCR方法对采自广西不同地区的阳性鸭组织样品进行了全基因组扩增和测序,共获得14个完整的DuCV全基因组序列。与GenBan... 为了解广西鸭圆环病毒(DuCV)流行毒株的遗传变异情况,进一步为研制鉴别诊断DuCV方法和制定科学防控措施奠定基础。采用PCR方法对采自广西不同地区的阳性鸭组织样品进行了全基因组扩增和测序,共获得14个完整的DuCV全基因组序列。与GenBank中登录的52个国内外DuCV毒株进行遗传进化分析及同源性比较。结果表明,当前广西同时存在基因1.1亚型、基因1.2亚型和基因2.1亚型3种不同的DuCV毒株在流行,其中基因1.1亚型和1.2亚型为优势流行毒株。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒 流行毒株 遗传变异
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鸭圆环病毒Cap蛋白的原核表达 被引量:2
17
作者 粟艳琼 郑敏 +3 位作者 莫胜兰 屈素洁 张步娴 梁媛 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第3期19-23,共5页
为表达鸭圆环病毒(DuCV)Cap蛋白,通过Gene Designer 2.0软件对DuCV Cap基因进行分析和密码子优化,构建DuCV Cap基因重组表达质粒pET-32a-Cap,转化BL21(DH3)株感受态细胞。用终浓度为0.1mmol/L的IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示... 为表达鸭圆环病毒(DuCV)Cap蛋白,通过Gene Designer 2.0软件对DuCV Cap基因进行分析和密码子优化,构建DuCV Cap基因重组表达质粒pET-32a-Cap,转化BL21(DH3)株感受态细胞。用终浓度为0.1mmol/L的IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示Cap融合蛋白的分子质量约为48ku,表达的重组蛋白占菌体总蛋白的43.1%。Western blot检测显示该融合蛋白可以被针对His标签蛋白的抗体所识别。利用镍离子亲和纯化株对重组蛋白进行了纯化,纯度为92.3%。为进一步建立DuCV血清学检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒 CAP蛋白 原核表达
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荧光定量PCR检测2型猪圆环病毒方法的建立 被引量:3
18
作者 敖艳华 穆光慧 +2 位作者 郭沈涛 齐冬梅 张毓金 《广东畜牧兽医科技》 2014年第1期28-31,共4页
通过克隆2型猪圆环病毒(PCV2)的开放阅读框2(0RF2)基因编码其核衣壳蛋白(Cap)的一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.根据GenBank中的靶序列设计一对引物和一条TaqMan探针.对PCR反应条件优化后,对构建的标准阳性模板定量,然... 通过克隆2型猪圆环病毒(PCV2)的开放阅读框2(0RF2)基因编码其核衣壳蛋白(Cap)的一段靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板.根据GenBank中的靶序列设计一对引物和一条TaqMan探针.对PCR反应条件优化后,对构建的标准阳性模板定量,然后1 0&#215;倍比稀释进行荧光定量PCR(qPCR)扩增并制作标准曲线,初步建立了PCV2检测的qPCR方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0&#215;102拷贝/μ L,线性范围为101 ~ 109,达9个数量级,并且具有很好的特异性.对起始浓度为1.0&#215;108、1.0&#215; 106、1.0&#215;104拷贝/μL的标准品的最终实际测得CT均值分别为12.77、19.72和26.89;变异系数分别为0.25%、0.10%和0.13%,均小于1%,说明此方法具有良好的准确性和重复性. 展开更多
关键词 猪圆环病毒 TAQMAN探针
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和田地区规模化鸭场鸭圆环病毒感染情况调查 被引量:1
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作者 姜水兵 努尔麦麦提·麦麦提敏 《湖北畜牧兽医》 2021年第9期5-7,共3页
为明确和田地区鸭圆环病毒(DuCV)在鸭群中的感染情况,通过双重PCR技术对2021年和田地区5个规模化养殖场共100例病、死鸭样品进行鸭圆环病毒检测。对检测出的阳性样品随机挑选4份进行基因测序,并进行序列比较及遗传进化分析。检测结果显... 为明确和田地区鸭圆环病毒(DuCV)在鸭群中的感染情况,通过双重PCR技术对2021年和田地区5个规模化养殖场共100例病、死鸭样品进行鸭圆环病毒检测。对检测出的阳性样品随机挑选4份进行基因测序,并进行序列比较及遗传进化分析。检测结果显示,20%(20/100)样品感染了鸭圆环病毒,且优势流行毒株为DuCV-1;和田流行优势毒株与源自山东的毒株关系最近;DuCV阳性样品中鸭出血病毒、呼长孤病毒感染率略高于DuCV阴性样品。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒(ducv) 感染 检测 和田地区
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我国自然发病鸭群中鸭圆环病毒的流行病学调查 被引量:18
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作者 刘少宁 张兴晓 +5 位作者 陈智 高继明 魏秀丽 孔义波 朱岩丽 姜世金 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1402-1405,共4页
为了解鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)在我国鸭群中的感染状态,从我国养鸭业比较集中的山东、江苏、四川、福建、广东5个省份36个鸭群采集临床有发病表现的343只病、死鸭的病理组织样品,以提取的组织DNA为模板通过特异性斑点杂交和PC... 为了解鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)在我国鸭群中的感染状态,从我国养鸭业比较集中的山东、江苏、四川、福建、广东5个省份36个鸭群采集临床有发病表现的343只病、死鸭的病理组织样品,以提取的组织DNA为模板通过特异性斑点杂交和PCR方法检测DuCV的感染情况。结果显示上述5个省份的鸭均检出了DuCV,病、死鸭中DuCV的个体阳性率为81.63%(280/343),群体阳性率为94.44%(34/36)。结果表明我国鸭群中已普遍存在DuCV的感染。 展开更多
关键词 鸭圆环病毒 流行病学调查 PCR 核酸探针杂交
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