circRNA001653对急性心肌梗死心肌细胞凋亡的作用及机制

目的探讨环状RNA(circRNA)_001653(circ_001653)对急性心肌梗死(AMI)心肌细胞凋亡的作用及机制。方法采用生物信息学分析AMI时差异表达的circRNA;大鼠心肌细胞分别培养于常氧(Normoxia组)和缺氧12 h(Hypoxia 12 h组)、24 h(Hypoxia 24 h组)、48 h(Hypoxia 48 h组)条件下,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测上述4组细胞中circ_001653、微小RNA(microRNA)-324-5p、ELAV样RNA结合蛋白1(ELAVL1)的表达;选取缺氧48 h的心肌细胞转染sh-NC(sh-NC组)、sh-circ_001653(sh-circ_001653组)、circ-NC(circ-NC组)、circ_001653(circ_001653组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-324-5p mimic(miR-324-5p mimic组)、circ_001653+miR-NC(circ_001653+miR-NC组)、circ_001653+miR-324-5p mimic(circ_001653+miR-324-5p mimic组)、miR-324-5p mimic+pcDNA3.1(miR-324-5p mimic+pcDNA3.1组)及miR-324-5p mimic+ELAVL1(miR-324-5p mimic+ELAVL1组)等载体,采用比色试剂盒和流式细胞术分别检测Normoxia组、Hypoxia-48 h组、sh-NC组、sh-circ_001653组、circ-NC组、circ_001653组、miR-NC组、miR-324-5p mimic组、circ_001653+miR-NC组、circ_001653+miR-324-5p mimic组、miR-324-5p mimic+pcDNA3.1组、miR-324-5p mimic+ELAVL1组心肌细胞中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-9活性及细胞凋亡水平。结果生物信息学分析结果显示,与正常组比较、circ_001653在AMI中表达增强(P<0.05);与Normoxia组比较,Hypoxia 48 h组细胞中circ_001653和ELAVL1表达升高、miR-324-5p表达降低(P<0.05);与Normoxia组比较,Hypoxia 48 h组细胞凋亡率与Caspase-3、Caspase-9活力均升高(P<0.05);与sh-NC组比较,sh-circ_001653组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力均降低(P<0.05);与circ-NC组比较,circ_001653组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力均升高(P<0.05);与circ_001653+miR-NC组比较,circ_001653+miR-324-5p mimic组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力均降低(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-324-5p mimic组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力均降低(P<0.05);与miR-324-5p mimic+pcDNA3.1组比较,miR-324-5p mimic+ELAVL1组细胞凋亡率和Caspase-3、Caspase-9活力升高(P<0.05)。结论circ_001653可促进AMI心肌细胞凋亡,其机制可能与circ_001653/miR-324-5p/ELAVL1轴作用有关。