过表达环状RNA-103809调节乳腺癌细胞氧化应激和免疫

目的探究过表达环状RNA-103809(circRNA-103809)对乳腺癌细胞氧化应激和免疫的调节。方法将pc DNA空质粒、circ RNA-103809过表达质粒转染乳腺癌细胞MCF-7,分别作阴性对照组和circ103809组,另设置空白对照组。q RT-PCR检测各组细胞中circ103809的表达,克隆形成实验检测细胞生长,生化试剂盒检测氧化应激标记物超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH),流式细胞术检测线粒体膜电位的变化,Western blot检测细胞中增殖相关蛋白Ki67、p21、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞增殖基因c-Myc的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)和qRT-PCR检测炎症因子白细胞介素(IL-6、IL-10)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS),免疫荧光检测p65的含量。结果与空白对照组和阴性对照组相比,circ103809组细胞中绿色荧光信号增强,circ103809的相对表达量、p21蛋白相对表达量、GSH和MDA含量、Bax/Bcl-2水平、IL-10表达明显升高,细胞集落形成率、Ki67、PCNA、c-Myc蛋白相对表达量、SOD含量、IL-6、i NOS表达及p65入核阳性率明显降低(P<0.05)。结论过表达circRNA-103809可抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖,可能与促进氧化应激水平、减轻炎症反应有关。

circRNA 103809通过miR-620/GPC5通路抑制肝癌细胞系增殖的分子机制

目的研究肝癌细胞系Hep-3B中环状(circ)RNA 103809通过miR-620/磷脂酰肌醇聚糖(GPC)5通路调控肝癌细胞系增殖的分子机制。方法通过实时荧光定量PCR检测肝癌细胞系Hep-3B中的circRNA-103809、miR-620、GPC5的RNA水平;通过Western印迹检测GPC5蛋白水平;CCK8试剂盒、细胞集落形成试验检测细胞增殖情况。结果Hep-3B中,circRNA-103809表达水平明显下调(P<0.01),miR-620明显上调(P<0.01);GPC5的RNA和蛋白表达水平均明显表达下调(P<0.01)。在细胞水平过表达circRNA-103809,检测miR-620表达水平明显下调(P<0.01),GPC5表达明显上调,细胞增殖活性降低(P<0.01);下调miR-620使GPC5表达明显上调,细胞增殖活性明显降低(P<0.01)。结论过表达circRNA-103809可以通过下调miR-620然后上调GPC5的途径抑制Hep-3B细胞增殖活性,可能成为临床治疗潜在靶点。