奈达铂与顺铂联合应用对人食管癌Eca-109细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究奈达铂(NDP)联合顺铂(DDP)对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用MTT法对Eca-109细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术分析早期凋亡细胞比例;采用RT-PCR和免疫细胞化学分析Ki-67及Bax、Bcl-2表达的变化。结果:NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用时,低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2IC50(NDP)+1/2IC50(DDP)对Eca-109细胞的抑制率分别为(41.85±4.1)%,(47.38±2.9)%和(52.45±0.9)%;流式细胞术结果表明正常对照组、NDP组、DDP组、联合用药组细胞早期凋亡率依次增加,单独用药组与联合用药组相比有差异;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67、Bcl-2表达率显著降低,而Bax表达显著增高。结论:与两药高浓度单独应用相比,低浓度NDP和DDP联合应用对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。

利用FRET技术实时研究顺铂诱导的Caspase-9活化

该研究旨在在活细胞内研究顺铂诱导Caspase-9活化的动态过程。实验样品经顺铂处理后,应用基于FRET原理设计的荧光探针pSCAT-9来检测Capase-9活化的动态过程。结果表明:在顺铂诱导细胞凋亡的后期,可以明显检测到Caspase-9的活化,且其进程快,约30 m in即可完成。研究表明,应用FRET技术,可以在活细胞内实时、直观、可视地研究顺铂诱导的Capase-9活化,从而客观地反映Caspase-9在该凋亡信号通路中的动态行为及时空传递特性。

卵巢癌术后血浆CA125的半衰期与预后的关系

对18例经手术和病理证实为卵巢上皮癌患者，术后施以顺铂、阿霉素、环磷酰胺（PAC方案）联合化疗。在术前、化疗及随访过程中采取静脉血用放射免疫法测定CA125浓度。由化疗第一、第三疗程前CA125水平，根据Buller等提供的公式计算半衰期。结果发现18例患者中半衰期＞20天者10例（56％），有8例出现复发或死亡；而半衰期＜20天的8例则存活良好。提示化疗早期CA125水平及血浆半衰期对卵巢癌患者的预后评定有一定的价值，检测该指标可及时发现耐药或复发，从而及早采取相应的治疗措施。

多西他赛联合顺铂同期放化疗在宫颈癌治疗中的急性毒性反应分析

目的：比较宫颈癌放化同期治疗过程中,顺铂单药每周方案与多西他赛联合顺铂（ TP）方案化疗的急性毒性反应。方法回顾性分析2013年1月至2015年3月,我科收治的180例IB-IVB宫颈癌患者,放疗采用3-DCRT或IM-RT技术,1次/d,每周5次。化疗方案如下,顺铂单药组：共81例,化疗剂量40mg/m 2,每周1次,放疗期间化疗5~6周期；TP组：共计99例,多西他赛：60mg/m 2,注射用顺铂60mg/m 2,每3周1次,放疗期间化疗2周期。结果血液学毒性：顺铂单药组,32例患者出现Ⅲ-Ⅳ度骨髓抑制（39．5%）；而TP组30例（30．3%）,两组患者骨髓抑制发生率及严重程度差异无统计学意义（P=0．192）。而TP组患者的下消化道及泌尿系毒性均高于顺铂单药组。两组患者在放疗总时间差异无统计学意义,两组患者的初步疗效相似（P=0．92,1．0）。结论与单药顺铂每周方案相比,TP方案化疗并没有增加急性毒副反应,患者的耐受性较好。

siRNA特异性抑制卵巢癌细胞生长因子受体-2基因表达及其意义的研究

目的探讨RNA干扰(RNAi)抑制卵巢癌细胞表皮生长因子受体-2(HER-2)基因的表达及其细胞效应。方法实验分为以下3组空白对照组(未经转染的人卵巢癌SKOV-3细胞)、转染非特异性的siRNA组及转染特异性的siRNA组。干涉后5d加顺铂。采用半定量PCR技术(RT-PCR)和Western印迹法检测HER-2mRNA和蛋白的表达,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞对顺铂的化学敏感性的变化,分析观察细胞生物学特性的改变。结果HER-2siRNA对HER-2mRNA表达明显抑制,作用能持续10d左右;干涉第7天后开始出现蛋白质表达的明显减弱,转染特异性siRNA组的蛋白质阳性表达率为(25·5±0·8)%,非特异性siRNA组为(95·7±0·8)%,空白对照组为(96·6±1·2)%,前组与后两组比较差异有统计学意义(均P<0·001)。干涉后随着HER-2mRNA表达下降,细胞凋亡增加,第6天凋亡率最高,达(53·2±1·0)%,转染非特异性siRNA组为(4·1±0·3)%,空白对照组为(4·1±0·3)%,差异有统计学意义(P<0·001);干涉后,转染特异性siRNA组的细胞存活率为(58·4±0·8)%,转染非特异性siRNA组为(68·0±0·6)%,空白对照组为(67·0±0·3)%,前组与后两组比较差异有统计学意义(均P<0·001)。结论体外合成的siRNA能有效抑制SKOV-3细胞中HER-2表达,促进细胞的凋亡,提高细胞对顺铂的敏感性,RNAi为卵巢癌的基因治疗提供了一种新策略。