哮喘患儿Clara细胞分泌蛋白的临床意义

目的探讨Clara细胞分泌蛋白(CCSP)检测在儿童哮喘中的临床意义。方法采用酶联免疫吸附法检测50例哮喘急性发作期患儿血清CCSP水平,其中22例患儿经治疗后于缓解期采血复查,另设20例健康儿童作对照。结果哮喘急性发作期、缓解期患儿血清CCSP水平均较健康对照组显著降低(P<0.001,0.01)。中重度发作哮喘患儿,血清CCSP浓度显著低于轻度发作的哮喘患儿(P<0.001)。病程长的哮喘患儿CCSP水平显著低于病程短者(P<0.05)。结论CCSP具有抗感染作用,CCSP的减少可诱导或加重哮喘儿童的呼吸道炎症。检测血清CCSP是反映小呼吸道Clara细胞受损的一种非侵入性方法;CCSP可作为判断哮喘病情、治疗效果及预后的指标之一。

哮喘患儿血清Clara细胞分泌蛋白、白细胞介素-18、嗜酸粒细胞趋化蛋白检测的意义

目的:探讨哮喘儿童血清Clara细胞分泌蛋白(CCSP)、白细胞介素-18(IL-18)、嗜酸粒细胞趋化蛋白(Eotaxin)水平与哮喘的关系及其检测意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测39例支气管哮喘患儿急性发作期血清CCSP、IL-18、Eotaxin的水平,选取同期健康儿童37例作为对照组。结果:哮喘组患儿血清CCSP浓度为(4.5±0.6)ng/m L,低于对照组的(12.4±2.6)ng/m L;哮喘组患儿血清IL-18浓度为(786.6±69.4)pg/m L,高于对照组的(96.3±11.9)pg/m L;哮喘组患儿血清Eotaxin浓度为(147.0±43.0)ng/m L,高于对照组的(84.0±32.0)ng/m L,两组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:CCSP在哮喘患儿呼吸道炎症损伤、修复、呼吸道重塑过程中可能起保护作用;IL-18、Eotaxin因子参与了气道黏膜损伤的病理过程且与哮喘发作密切相关。

血清CC16和骨膜蛋白在哮喘患儿急性期和缓解期的表达水平差异及意义

目的分析急性期、缓解期哮喘患儿血清Clara细胞分泌蛋白(CC16)、骨膜蛋白表达水平变化,并探究其与肺功能、小气道功能、气道炎症相关性及其对哮喘急性发作的评估价值。方法选取2021年9月~2023年1月本院收治的87例哮喘急性期患儿(急性期组),且经治疗后病情转为缓解期(缓解期组),另选同期50例健康儿童作为对照组。观察三组血清CC16、骨膜蛋白水平。对比分析急性期组不同程度者血清CC16、骨膜蛋白、肺功能[一秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV_(1))、FEV_(1)/用力肺活量(FVC)]、小气道功能[最大呼气中期流量(MMEF)、用力呼气25%肺活量的瞬间流量(FEF_(25%))、用力呼气75%肺活量的瞬间流量(FEF_(75%))]与气道炎症[嗜酸性粒细胞(EOS)、呼出气一氧化氮(FeNO)]。分析CC16、骨膜蛋白与肺功能、小气道功能、气道炎症、急性发作严重程度相关性。交互作用分析血清CC16、骨膜蛋白对哮喘急性发作的影响。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清CC16、骨膜蛋白对哮喘急性发作的评估效能。结果急性期组血清CC16水平低于缓解期组、对照组,骨膜蛋白水平高于缓解期组、对照组(P<0.05);重度及危重组血清CC16、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、MMEF、FEF 25%、FEF_(75%)低于中度、轻度组,骨膜蛋白、EOS、FeNO高于中度、轻度组(P<0.05);CC16与哮喘急性发作程度呈负相关(r=-0.706,P<0.001),骨膜蛋白与哮喘急性发作程度呈正相关(r=0.779,P<0.001);CC16与急性期患者FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、MMEF、FEF 25%、FEF_(75%)呈正相关,EOS、FeNO呈负相关,而骨膜蛋白与之相反(P<0.001);CC16降低对骨膜蛋白升高的效应具有正向交互作用;CC16、骨膜蛋白及联合检测评估哮喘急性发作的AUC分别为0.813(95%CI:0.732~0.879)、0.812(95%CI:0.731~0.878)、0.931(95%CI:0.869~0.969),且联合评估的AUC大于单项指标评估(Z=3.057、3.058;P=0.018、0.017,P均<0.05)。结论急性期哮喘患儿血清CC16水平较缓解期降低,骨膜蛋白水平较缓解期升高,其与肺功能、小气道功能、气道炎症密切相关,且哮喘急性发作者CC16水平降低可能促进骨膜蛋白表达,联合检测其水平对哮喘急性发作具有一定评估价值。

CC16及转录因子T-bet、GATA-3对支气管哮喘患者气道炎症的调控作用

目的探讨Clara细胞分泌蛋白(CC16)及转录因子T-bet、GATA-3在支气管哮喘患者气道炎症中的价值。方法采取病例对照研究,收集25例哮喘急性发作期患者和33例健康对照组。采外周静脉血分离血浆,提取外周血单个核细胞(PBMC),用ELISA测定血浆中CC16、IFN-γ、IL-4的水平;用RT-PCR法检测PBMC转录因子T-bet mRNA和Gata-3 mRNA表达水平。结果哮喘组CC16及IFN-γ分别为(21.96±7.31)ng/mL和(118.73±22.59)pg/mL,明显低于对照组[(64.88±25.27)ng/mL和(145.53±29.50)pg/mL,P均<0.01],哮喘组IL-4高于对照组[(425.22±4.37)pg/mL比(69.72±10.15)pg/mL,P<0.01]。哮喘组T-bet mRNA、T-bet/GATA-3表达水平(0.12±0.01,0.25±0.04)显著低于对照组(0.48±0.12,1.89±0.65)(P均<0.01),GATA-3 mRNA表达(0.45±0.05)较对照组(0.30±0.08)明显升高(P<0.01)。CC16与T-bet mRNA表达水平、T-bet/GATA-3呈正相关(r值分别为0.792和0.761,P均<0.01);与GATA-3 mRNA无明显相关性(r=-0.146,P=0.551)。结论哮喘患者CC16水平降低,对气道炎症的保护性削弱,可能与T-bet/GATA-3和IFN-γ/IL-4的失衡有关。

哮喘患者血清及肺泡灌洗液中CCSP的测定与临床研究

目的:通过测定支气管哮喘患者治疗前后肺泡灌洗液(BALF)及血清Clara细胞分泌蛋白(CCSP)水平的变化,明确Clara细胞及其分泌蛋白在哮喘发病中的作用,探讨内源性抗炎机制。方法:选择哮喘急性发作和缓解期及健康对照病人各15例,留取静脉血和BALF,用ELISA方法测定CCSP的水平,同时测患者肺功能FEV1、FVC和MMEF值,并对结果进行统计学分析。结果:哮喘急性发作组和缓解组血清及BALF上清液CCSP水平显著低于健康对照组(P<0.05),急性发作组和缓解组血清及BALF上清液CCSP水平无统计学差异。哮喘急性发作组肺功能FEV1、FVC、MMEF明显低于缓解组及健康对照组(P<0.01)。直线相关分析表明,哮喘急性发作组、缓解组及健康对照组血清及BALF上清液CCSP水平和FEV1均呈正相关。哮喘急性发作组、缓解组及健康对照组血清中CCSP水平显著低于BALF上清液中CCSP水平,两者呈高度正相关。结论:本研究结果提示Clara细胞分泌蛋白作为抑炎因子参与了哮喘的发病过程,对于完善气道炎症理论和探索哮喘新的诊断和治疗方法具有重要意义。

呼吸道立方形上皮细胞分泌蛋白对呼吸道合胞病毒肺部感染和免疫调节的作用

目的探讨呼吸道立方形上皮细胞分泌蛋白(CCSP)对呼吸道合胞病毒(RSV)肺部感染和免疫调节的作用。方法以CCSP基因剔除小鼠[CCSP(-/-)]和野生型小鼠(129J,WT)为模型,通过呼吸道接种感染RSV,然后对肺部的炎症和免疫学反应进行研究。结果与WT小鼠比较,CCSP(-/-)小鼠RSV病毒的清除率下降,肺部炎症增强,Th2细胞因子和中性粒细胞趋化因子水平增加。结论CCSP缺乏可促进RSV感染所引起的肺部炎症和Th2免疫反应。

采用TOPOTA克隆技术构建人CC10质粒并在BEAS-2B细胞中的表达

目的:采用TOPO TA克隆技术构建及鉴定人CC10基因表达载体,并在支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞中获得稳定表达,初步探讨CC10在呼吸道上皮细胞炎症反应中的作用。方法:提取人下鼻甲组织的总RNA,逆转录反应生成c DNA,再用PCR方法扩增出含人CC10编码区全长的DNA片段,将PCR产物直接连接到pc DNA3.1/V5-His TOPO TA载体中,转化至大肠杆菌后经筛选鉴定出CC10表达载体,用脂质体法将CC10质粒转染到BEAS-2B,细胞免疫荧光法检测CC10蛋白的表达。随后用促炎细胞因子IL-1β刺激转染空质粒和CC10质粒的BEAS-2B细胞,用实时定量RT-PCR和ELISA检测炎性趋化因子RANTES m RNA和蛋白的表达。结果:目的基因与TOPO TA载体在室温下5 min的连接反应效率91.7%,用酶切法鉴定质粒并测序,人CC10基因成功克隆到真核细胞表达载体pc DNA3.1中,CC10蛋白在BEAS-2B细胞中无表达,但在体外转染CC10质粒后CC10蛋白表达明显增高。转染CC10质粒的BEAS-2B细胞可抑制IL-1β诱导的RANTES m RNA和蛋白的表达。结论:利用TOPO TA克隆技术可高效、快速的构建人CC10基因表达载体,并能够在BEAS-2B细胞中获得稳定表达,CC10蛋白在呼吸道上皮细胞中可发挥抗炎作用。

支气管哮喘患者血清及BALF中CCSP的测定与临床研究

目的通过测量支气管哮喘患者治疗前后支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清 Clara 细胞分泌蛋白(CCSP)水平的变化,明确 Clara 细胞及其分泌蛋白在哮喘发病中的作用,探讨内源性抗炎机制,完善哮喘的气道炎症理论。方法选择健康对照组15人,哮喘急性发作期和缓解期病人各15例,留取静脉血和支气管肺泡灌洗液,用 ELISA 方法分别测定血清和 BALF 上清液中CCSP 的水平,同时测定患者肺功能用力肺活量(FVC)、一秒钟用力呼气容积的肺活量(FEVt)及呼气中段流量(MMEF),并对结果进行统计学分析。结果哮喘急性发作组和哮喘缓解组血清及 BALF 上清液 CCSP 水平显著低于健康对照组,P<0.05;哮喘急性发作组和哮喘缓解组血清及 BALF 上清液 CCSP 水平无统计学差异;哮喘急性发作组肺功能 FEV_1、FVC、MMEF 显于低于哮喘缓解组及健康对照组,P<0.01;哮喘缓解组及健康对照组肺功能 FEV_1、FVC、MMEF 值无统计学差异。直线相关分析表明,哮喘急性发作组血清和 BALF 上清液 CCSP 水平与 FEV_1呈高度正相关(相关系数分别为 r=0.798,P<0.01;r=0.762,P<0.01);哮喘缓解组患者血清和 BALF 上清液 CCSP 水平与 FEV_1呈正相关关系(r=0.645,P<0.01;r=0.716,P<0.01);健康对照组血清和 BALF 上清液 CCSP 水平与 FEV_1呈高度正相关(r=0.789,P<0.01;r=0.732,P<0.01)。哮喘急性发作组血清 CCSP 水平显著低于 BALF 上清液中 CCSP 水平,且两者呈高度正相关(r=0.875,P<0.01);哮喘缓解组血清 CCSP 水平显著低于 BALF上清液 CCSP 水平,两者呈高度正相关(r=0.936,P<0.01);健康对照组血清 CCSP 水平亦显著低于 BALF 上清液 CCSP 水平,两者亦呈高度正相关(r=0.825,P<0.01)。结论本研究结果提示 Clara 细胞分泌蛋白,参与了哮喘各期的发病机制,CCSP 变化可作为哮喘病情变化和治疗效果的指标之一。

Clare细胞分泌蛋白在支气管哮喘中的研究进展

支气管哮喘(哮喘)是一种常见的慢性呼吸道炎症性疾病,主要以气道高反应性为特征。Clare细胞分泌蛋白(CC16)是由细支气管的非纤毛细胞分泌的蛋白质,在肺中被认为是天然的抗炎因子,也被称为下呼吸道上皮屏障破坏的指标。本文就近年来CC16与哮喘的相关性研究作一综述。