非小细胞肺癌组织中CLDN10和CSPG4水平表达与临床病理特征及预后的关系研究

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中紧密连接蛋白10(claudin 10,CLDN10)和硫酸软骨素蛋白聚糖4(chondroitin sulfate proteoglycan 4,CSPG4)表达与临床病理特征和预后的关系。方法随机选取2017年1月~2018年4月于南京医科大学附属泰州市人民医院进行手术的136例NSCLC患者为研究对象,并根据随访结局(生存或死亡)分为生存组(n=63)和死亡组(n=69)。收集136例患者于手术过程中切除的癌组织及癌旁组织标本;实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测癌组织及癌旁组织CLDN10和CSPG4表达水平,并分别以NSCLC患者癌组织中CLDN10和CSPG4表达水平的平均数为界限,分为CLDN10高表达组(n=66),CLDN10低表达组(n=70)和CSPG4高表达组(n=71),CSPG4低表达组(n=65);采用多因素COX回归分析确定NSCLC患者预后的影响因素;采用Kaplan-Meier生存曲线分析NSCLC患者CLDN10和CSPG4表达水平与其预后的关系。结果NSCLC组织中CLDN10表达水平(0.96±0.25)低于癌旁组织(1.73±0.42),CSPG4表达水平(1.80±0.46)高于癌旁组织(1.04±0.27),差异有统计学意义(t=18.372,16.617,均P<0.05)。与生存组比较,死亡组低未分化占比、淋巴结转移占比及癌组织中CSPG4表达水平较高,CLDN10表达水平较低,差异具有统计学意义(t/χ^(2)=8.463,7.423,11.696,6.426,均P<0.05)。CLDN10高表达组五年存活率(58.46%)高于低表达组(37.31%),CSPG4低表达组患者五年存活率(55.56%)高于高表达组(40.58%),差异有统计学意义(χ^(2)=7.848,4.018,均P<0.05)。多因素COX分析结果显示,CLDN10低表达、CSPG4高表达、低分化程度、淋巴结转移是NSCLC患者预后的危险因素(HR=1.362,1.368,1.335,1.314,均P<0.05)。结论NSCLC患者癌组织中CLDN10表达水平较低,CSPG4水平较高,且与NSCLC发展和预后密切相关。

紧密连接蛋白claudin-10功能的研究进展

Claudin-10是紧密连接跨膜蛋白claudin家族的一员,在多个器官和组织的上皮细胞中表达,存在claudin-10a与10b两种同工型。Claudin-10具有维持细胞膜选择透过性和调节离子经旁细胞途径转运的作用。近年来,claudin-10已被报道与多种疾病的发生发展过程相关。Claudin-10基因突变导致的多种器官功能受损的疾病被命名为HELIX综合征,患者具有无汗症、肾病、低钾血症、口干症及严重的牙釉质磨损等临床表现。本文将对claudin-10的分子结构、表达与分布、功能与疾病关系等方面的研究进展进行综述。

紧密连接蛋白claudin-10基因5′调控区序列的生物信息学分析

目的:研究紧密连接蛋白对claudin-10基因转录调控机制,并对潜在的转录因子结合位点进行分析。方法:利用BLAST比对分析TATA-box、GC-box和CAAT-box;利用在线分析软件Neural NetworkPromoter Prediction、PROMOTERSCAN和PROMOTER2.0分析claudin-10基因5′调控区序列中启动子;利用在线分析软件EMBOSS和CpGIsland Searcher分析claudin-10基因5′调控区序列中CpG岛位置;利用在线分析软件TFSEARCH分析claudin-10基因5′调控区序列中潜在的转录因子结合位点。结果:claudin-10基因5′调控区序列中存在1个CAAT-box和3个GC-box,没有TATA-box;claudin-10基因可能存在4个启动子位点;CpG岛为444bp区间(1700bp-2143bp)或834bp区间(1367bp-2200bp);评分在85分以上时,该区域具有159个潜在的转录因子结合位点;评分在90分以上时,该区域具有48个潜在的转录因子结合位点;评分在95分以上时,该区域具有9个潜在的转录因子结合位点。结论:通过生物信息学的方法对于claudin-10基因转录起始位点、启动子区域和潜在的转录因子结合位点进行预测,对于科研具有十分重要的指导意义,但最终的结论还需要实验来证实。

紧密连接蛋白claudin-10基因5′调控区序列的生物信息学分析

目的:拟对claudin-10基因转录起始位点和启动子区域进行预测,并对潜在的转录因子结合位点进行分析。方法:利用BLAST比对分析TATA-box、GC-box和CAAT-box;利用在线分析软件Neural Network Promoter Prediction、PROMOTER SCAN和PROMOTER 2.0分析claudin-10基因5′调控区序列中启动子;利用在线分析软件EMBOSS和CpG Island Searcher分析claudin-10基因5′调控区序列中CpG岛位置;利用在线分析软件TFSEARCH分析claudin-10基因5′调控区序列中潜在的转录因子结合位点。结果:claudin-10基因5′调控区序列中存在1个CAAT-box和3个GC-box,没有TATA-box;claudin-10基因可能存在4个启动子位点;CpG岛为444bp区间(1 700～2 143bp)或834bp区间(1 367～2 200bp);评分在85分以上时,该区域具有159个潜在的转录因子结合位点;评分在90分以上时,该区域具有48个潜在的转录因子结合位点;评分在95分以上时,该区域具有9个潜在的转录因子结合位点。结论:通过生物信息学的方法对于claudin-10基因转录起始位点、启动子区域和潜在的转录因子结合位点进行预测,对于科研具有十分重要的指导意义,但最终的结论还需要实验来证实。

claudin-10与原发性消化系统恶性肿瘤临床病理特征和预后相关性的系统评价和Meta分析

目的:应用Meta分析方法研究claudin-10表达与原发性消化系统恶性肿瘤患者临床病理和预后的相关性。方法:检索PubMed、Web of Science、Ovid MEDLINE、CNKI、维普、万方数据库,提取claudin-10表达与患者临床病理特征关系以及预后的数据,应用RevMan 5.3和Stata15.1软件进行Meta分析。结果:纳入6篇文献,512例原发性消化系统恶性肿瘤患者。原发性消化系统恶性肿瘤组织中claudin-10的高表达率显著高于正常对照组,差异具有统计学意义[OR=3.22,95%CI(2.26,4.60),P<0.01]。claudin-10高表达与肿瘤大小[OR=6.21,95%CI(2.44,15.83),P<0.01]、分化程度[OR=0.56,95%CI(0.32,0.99),P=0.05]、淋巴结转移[OR=3.41,95%CI(1.09,10.65),P=0.03]呈正相关;与患者性别[OR=1.62,95%CI(0.91,2.90),P=0.10]、年龄[OR=1.72,95%CI(0.97,3.07),P=0.06]、远处转移[OR=4.51,95%CI(0.55,36.70),P=0.16]、患者预后[HR=1.99,95%CI(0.93,4.23),P=0.08]无关。结论:claudin-10表达与原发性消化系统恶性肿瘤的临床病理特征相关,是潜在的肿瘤标志物。

Clinicopathological significance and prognostic value of claudin10 expression in primary malignant tumors of digestive system:A metaanalysis

Objective:To investigate the correlation between claudin10 expression and clinicopathological characteristics and prognosis of primary malignant tumors of digestive system.Methods:We searched the PubMed,Web of Science,Ovid MEDLINE,CNKI,CQVIP,and WanFang Data databases.The data between claudin10 expression and clinical characteristics as well as survival outcome were extracted.RevMan 5.3 and Stata 15.1 software were employed for metaanalysis.Results:A total of 6 studies containing 512 patients with primary malignant tumors of digestive system were analyzed.The analysis showed that high expression of claudin10 was more common in cancer tissue than in normal tissue[OR=3.22,95%CI(2.26,4.60),P<0.01],and was associated with increasing tumor size[OR=6.21,95%CI(2.44,15.83),P<0.01],high differentiation[OR=0.56,95%CI(0.32,0.99),P=0.05],positive lymph node metastasis[OR=3.41,95%CI(1.09,10.65),P=0.03].The expression of claudin10 was not associated with sex[OR=1.62,95%CI(0.91,2.90),P=0.10],age[OR=1.72,95%CI(0.97,3.07),P=0.06],distant metastasis[OR=4.51,95%CI(0.55,36.70),P=0.16],or prognosis[HR=1.99,95%CI(0.93,4.23),P=0.08].Conclusion:The expression of claudin10 is correlated with the clinicopathological features of primary malignant tumors of digestive system and is a potential tumor marker.

人claudin-10基因启动子转录调控的初步分析

[目的]构建不同长度的人claudin-10基因上游启动子荧光素酶报告基因载体,并在LO2细胞中比较其活性。[方法]以人LO2肝细胞基因组DNA为模板,PCR扩增获得claudin-10基因5'侧翼序列,并将其插入p MD18-T载体;PCR扩增获得不同长度的claudin-10基因上游启动子区序列,构建p GL3-Basic系列荧光素酶基因报告载体。瞬时转染LO2细胞,双荧光素酶报告基因分析系统检测转录活性。[结果]成功构建6个不同长度的人claudin-10基因上游启动子区(-1 451/+100bp、-1 022/+100bp、-1 005/+100bp、-677/+100bp、-377/+100bp和-108/+100bp)的报告载体;启动子活性实验结果表明:当claudin-10启动子片段从-1 005 bp截短至-677 bp,从-108 bp截短至+100 bp时活性显著下降(P<0.05);其余截短时活性无改变(P>0.05)。[结论]claudin-10启动子-1 005bp^-677bp和-108bp^+100bp区是claudin-10基因的主要转录调控区。

肠易激综合征患者炎性细胞因子的表达与酪酪肽、密封蛋白-1的相关性

目的通过检测IBS患者血清和结肠黏膜中炎性细胞因子与酪酪肽、密封蛋白1的表达及其相关性，探讨IBS的发病机制。方法选取2013年4月至2015年4月IBS门诊患者50例和健康对照者20名，采用ELISA法检测其血清酪酪肽、IL-10、TNF-α和密封蛋白-1水平；采用免疫组织化学法检测结肠黏膜中酪酪肽、IL-10、TNF-α和密封蛋白-1的蛋白表达水平。统计学分析采用单因素方差分析、最小显著差异（LSD）法、卡方检验和Pearson相关性分析。结果50例IBS患者中，腹泻型IBS组27例，便秘型IBS组23例。腹泻型IBS组血清酪酪肽水平及其结肠黏膜阳性表达率均高于健康对照组[（16.28±2.75） ng/L比（10.12±1.55） ng/L，66.7%（18/27）比30.0%（6/20）]，差异均有统计学意义（LSD-t＝10.19，χ2＝6.182；P均〈0.05）。腹泻型IBS组血清IL-10水平及其结肠黏膜表达率均低于健康对照组[（2.95±0.24） ng/L比（3.58±0.35） ng/L，22.2%（6/27）比50.0%（10/20）]，差异均有统计学意义（LSD-t＝4.52，χ2＝3.948；P均〈0.05），血清TNF-α水平及其结肠黏膜表达率均高于健康对照组[（8.73±0.41） ng/L比（7.73±0.51） ng/L，66.7%（18/27）比30.0%（6/20）]，差异均有统计学意义（LSD-t＝8.43，χ2＝6.182；P均〈0.05）。便秘型IBS组与健康对照组血清酪酪肽、IL-10、TNF-α水平[（10.24±1.34） ng/L比（10.12±1.55） ng/L，（3.43±0.71） ng/L比（3.58±0.35） ng/L，（7.81±0.26） ng/L比（7.73±0.51） ng/L ]及其结肠黏膜阳性表达率[39.1%（9/23）比30.0%（6/20），56.5%（13/23）比50.0%（10/20），34.8%（8/23）比30.0%（6/20）]比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）。腹泻型IBS组血清密封蛋白-1水平及其结肠黏膜表达阳性率均低于健康对照组[（94.44±6.61） ng/L比（103.64±5.47） ng/L，11.1%（3/27）比40.0%（8/20）]，差异均有统计学意义（LSD-t＝5.76，χ2＝5.349；P均〈0.05）；便秘型IBS组血清密封蛋白-1水平及其结肠黏膜表达阳性率均高于健康对照组[（115.54±3.42） ng/L比（103.64±5.47） ng/L，73.9%（17/23）比40.0%（8/20）]，差异均有统计学意义（LSD-t＝5.56，χ2＝5.055；P均〈0.05）。腹泻型IBS组血清IL-10与酪酪肽，以及TNF-α与密封蛋白-1均呈负相关（r＝－0.874、－0.863，P均〈0.05），血清TNF-α与酪酪肽，以及IL-10与密封蛋白-1均呈正相关（r＝0.865、0.876，P均〈0.05）。结论IBS患者可能存在抗炎因子和促炎因子失衡；酪酪肽可能通过促进IL-10和抑制TNF-α水平降低密封蛋白-1的表达，改善IBS患者的低度炎性反应。