青蒿素对敏感/抗性疟原虫感染小鼠肠紧密连接蛋白表达及膜流动性影响差异研究

为研究青蒿素对敏感/抗性疟原虫感染小鼠肠紧密连接蛋白表达及膜流动性影响,采用Western blot试验测定目的蛋白表达,TMA-DPH细胞膜流动性试剂盒结合荧光偏振法测定膜流动性,研究青蒿素给药前后对敏感/抗性伯氏疟原虫感染小鼠肠主要紧密连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1表达及细胞膜流动性差异。结果表明:青蒿素敏感/抗性疟原虫感染小鼠肠脏器指数增加,青蒿素处理后脏器指数较模型组亦显著提高;抗性模型组(K-CMC-Na)肠紧密连接蛋白ZO-1、claudin-1水平均较正常组和敏感组显著下调,但occludin表达较正常组上调,与敏感组无显著差异;青蒿素给药后使健康小鼠claudin-1、ZO-1水平异常下调,且显著降低敏感/抗性疟原虫感染小鼠相关蛋白的表达水平,同时青蒿素处理抗性组claudin-1表达较敏感组上调,但occludin、ZO-1水平则显著下降;青蒿素给药显著降低敏感/抗性组小鼠肠细胞膜流动性,且前者较后者更低。这一研究提示青蒿素对疟原虫感染所致的肠道反应可能无治疗作用,反而通过进一步破坏宿主肠道屏障,加重肠炎和感染;同时青蒿素耐药疟原虫感染后引起肠紧密连接和膜流动性的变化,二者是否存在因果关系需深入研究。

九香虫提取物对锰中毒大鼠睾丸损伤的干预效果及Claudin1作用

目的探讨九香虫石油醚提取物(CcE)对锰中毒大鼠睾丸组织损伤的干预效果及Claudin1的作用。方法成年雄性SD大鼠50只,随机分为5个组:空白对照组、锰模型组、CcE低剂量干预组(50 mg/kg/d)、CcE中剂量干预组(100 mg/kg/d)、CcE高剂量干预组(200 mg/kg/d)。锰染毒建立大鼠生殖损伤模型,使用不同剂量的CcE进行干预,监测大鼠的行为学改变及生殖器官脏器系数和精子数目,并进行睾丸锰含量和形态学变化分析,检测Claudin1表达水平及分布,评价干预效果。结果锰模型组与空白对照组比较,大鼠的行为学指标即扑捉、骑跨、插入及射精的次数明显降低(P<0.05);CcE各剂量干预组与锰模型组比较,大鼠的上述行为学指标明显升高(P<0.05)。锰模型组与空白对照组比较,大鼠睾丸、附睾脏器系数与精子数目明显减少(P<0.05);CcE各剂量干预组与锰模型组比较,上述指标均有所升高。锰模型组与空白对照组比较,大鼠锰含量明显增高(P<0.05);CcE低剂量干预组与锰模型组比较,大鼠锰含量明显降低(P<0.05)。锰模型组与空白对照组比较,大鼠睾丸组织Claudin1蛋白的表达量明显降低(P<0.05);CcE中、高剂量干预组与锰模型组比较,Claudin1蛋白的表达量明显增加(P<0.05)。锰模型组与空白对照组比较,大鼠睾丸组织结构破坏,Claudin1分布减少且仅基底膜处可见;CcE各剂量干预组与锰模型组比较,大鼠睾丸组织结构明显改善,Claundin1分布增多且可见于各级精母细胞与支持细胞之间。结论九香虫石油醚提取物可拮抗锰引起的大鼠生殖系统损伤,且与Claudin1相关。

麝香配伍乳香调节小鼠前列腺Claudins mRNA表达的实验研究

目的探讨麝香配伍乳香对正常C57BL/6小鼠前列腺组织Claudins mRNA表达的影响。方法正常C57BL/6小鼠48只随机分为4组:麝香组、乳香组、配伍组和对照组,每组12只。按组别分别给予麝香、乳香、麝香+乳香、生理盐水灌胃,分别于24、48h时处死6只取前列腺组织。采用实时荧光定量PCR方法检测小鼠前列腺组织Claudin-1、Claudin-2、Claudin-3、Claudin-4、Claudin-5、Claudin-7、Claudin-8、Claudin-10mRNA表达。结果 24h时,与对照组比较,配伍组Claudin-2、Claudin-3、Claudin-4、Claudin-8表达下调(P<0.05,P<0.01);与麝香组和乳香组比较,配伍组Claudin-2、Claudin-3、Claudin-4、Claudin-5、Claudin-8表达下调(P<0.05,P<0.01)。48h时,与对照组比较,麝香组Claudin-2、Claudin-3、Claudin-4、Claudin-5、Claudin-8mRNA表达下调(P<0.05,P<0.01),乳香组Claudin-5 mRNA表达下调(P<0.05),配伍组Claudin-5mRNA表达下调(P<0.05);与配伍组比较,麝香组Claudin-2、Claudin-8 mRNA表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论麝香配伍乳香可加快Claudin-2、Claudin-3、Claudin-4、Claudin-8mRNA表达下调速度,两种药物具有"相须"为用的协同性。