108株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的临床分布与耐药基因研究

目的了解仁济医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌株(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的临床分布与耐药基因型。方法收集2013年1月—2015年7月仁济医院临床分离108株CRKP,进行K-B纸片法检测18种抗菌药物敏感性、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)初筛及表型确证试验、聚合酶链反应检测ESBLs、碳青霉烯酶、质粒介导的AmpC酶与喹诺酮耐药基因。结果 108株CRKP对复方磺胺耐药率最低(32.4%),其次为磷霉素、庆大霉素和阿米卡星(82.4%、95.4%和97.2%)。科室分布前3位为神经外科、外科ICU和普外科。ESBLs基因中CTX-M-9,SHV和TEM酶基因阳性率为96.3%、85.2%和75.9%。108株CRKP均检测出KPC-2基因。而金属酶基因仅1株检测出IMP-1。喹诺酮耐药基因中qnrB基因检出率达91.7%(99/108)。AmpC酶中只检测出DHA基因,阳性率13.9%(15/108)。结论我院临床分离CRKP携带多种耐药基因,对数10种临床常用抗菌药物同时耐药,应加强对该类菌株的监控,控制其在院内的传播流行。

城市自来水中临床抗生素耐药基因的分布研究

为了解长江流域中下游城市/县自来水中临床抗生素耐药基因(cARGs)分布和污染来源等相关问题,文章采用定量聚合酶链式反应技术,测定了长江中下游12个城市/县自来水中9种cARGs、整合子基因intl1和转座子基因tnpA的相对丰度,并对intl1、tnpA、环境因子与cARGs的相关性进行了分析。用微生物溯源(MST)方法确定了自来水中cARGs污染的潜在来源。结果表明:(1)在所有地区中,铜陵市自来水的总cARGs相对丰度最高(5.50×10^(-2)拷贝数/16S rRNA),南京市最低(1.56×10^(-3)拷贝数/16S rRNA);(2)除荆州市外的其他城市/县自来水中最多的cARGs种类是blaTEM,而最低的是黏菌素类;(3)tnpA的相对丰度均低于intl1,且与sul3的相对丰度呈显著正相关(p<0.05);(4)自来水中的总氮含量与blaCTX-M丰度呈显著负相关(p<0.05);(5)MST仅检测到反刍动物和非特异性物种的粪便污染,其中九江市的非特异性物种标记相对丰度最高(4.11×10^(-2)拷贝数/16S rRNA)。

健康猪直肠粪便中沙门菌I类整合子与耐药基因的检测

目的了解安徽省规模化猪场健康猪直肠粪便中沙门菌分离株多重耐药情况及其与I类整合子和耐药基因的携带关系。方法采用标准K-B纸片法对22株沙门菌分离株进行15种抗生素敏感试验;应用PCR技术对沙门菌分离株进行I类整合子及耐药基因检测。结果 22株沙门菌分离株中有20株(90.91%)对2种以上抗生素耐药,属于多重耐药株,羧氨苄青霉素-四环素-卡那霉素-氯霉素-氟苯尼考是主要多重耐药谱;22株沙门菌中有19株(86.4%)携带I类整合子,tetB、aph(3)-IIa和cmlA基因分别检出最高。结论沙门菌多重耐药性与整合子携带之间的关系密切,耐药表型测定结果与耐药基因检测结果基本一致,基因组DNA携带的耐药基因种类多于质粒。

耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌的临床分布及基因组流行病学分析

【背景】鲍曼不动杆菌是造成临床感染的重要病原菌之一,其对碳青霉烯类抗生素的耐药形势日益严重,利用基因组测序技术解析其临床分布特征和流行病学规律有助于临床感染的有效防治。【目的】研究沧州市中心医院2018年检出的200株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)的临床分布和基因组流行病学特征,以期为预防院内感染及抗感染治疗提供理论依据。【方法】选取2018年各临床科室的耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌,采用细菌鉴定及药敏分析仪对16种抗生素进行药敏试验;PCR扩增检测碳青霉烯酶基因;多位点序列分型技术(multilocus sequence typing,MLST)检测菌株序列型;基因组流行病学分析揭示菌株传播关系。【结果】本院CRAB主要分布在急诊重症加强护理病房(intensive care unit,ICU)(47.0%)、呼吸内科(19.5%)和重症医学科(12.0%),它们对亚胺培南、美罗培南、氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、庆大霉素、左旋氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/棒酸、阿米卡星及第三四代头孢类抗生素头孢他定、头孢曲松、头孢吡肟等12种抗生素高度耐药,对复方新诺明呈现出中度耐药趋势,仅对多粘菌素B、美满霉素及头孢哌酮/舒巴坦等3种抗生素敏感。耐药基因聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)结果显示,CRAB菌株中180株(90.0%)携带苯唑西林酶(oxacillinase,OXA)-23基因,19株(9.5%)携带OXA-24基因,只有1株携带OXA-58基因。MLST结果显示,除一株OXA-58阳性株为一个新ST型STnew外,其余均为国际克隆群CC2型。基因组流行病学显示本院菌株共可划分为A、B、C、D这4个类群,以D类群为主要流行群且不同病区均有分布。【结论】本院CRAB菌株多重耐药严峻,以携带OXA-23基因的CC2克隆群菌株为主,可能存在不同病区间的感染传播,应加强重点科室环境的清洁工作,严格规范医务人员的技术操作规程,慎用碳青霉烯类药物,尽量减少感染并防止耐药率进一步升高。

199株革兰阴性临床分离株的耐药及blaKPC基因携带状况的研究

目的了解革兰阴性临床分离株的耐药情况及其产碳青霉烯酶携带状况。方法采用VITEK-2 Compact全自动细菌药敏鉴定分析系统进行鉴定菌株和耐药性检测;用纸片扩散法进行碳青霉烯酶初步筛选试验,改良Hodge试验作为表型确认试验;荧光定量PCR法检测bla KPC基因。结果 199株革兰阴性临床分离株中铜绿假单胞菌占19.10%,鲍曼不动杆菌占17.09%,肺炎克雷伯菌占16.58%,大肠埃希菌占15.08%;4种主要革兰阴性临床分离株对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢呋辛酯耐药率为80%以上。对头孢曲松和呋喃妥英的耐药率分别为77.0%和71.7%;5重及以上的耐药菌株占83.0%,其中铜绿假单胞菌的多重耐药率为100.0%,鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌对10类抗生素均耐药的菌株分别占52.9%和21.2%;碳青霉烯酶阳性率为30.2%(60/199),碳青霉烯酶阳性菌bla KPC基因携带率为71.7%(43/60)。结论革兰阴性临床分离株的耐药性状况不容乐观,其中产碳青霉烯酶比例已逐渐增高,应加强对其的检测和控制。