Mesenteric vein thrombosis in a patient heterozygous for factor Ⅴ Leiden and G20210A prothrombin genotypes

Mesenteric venous thrombosis(MVT)is a rare but life threatening form of bowel ischemia.It is implicated in 6%-9% of all cases of acute mesenteric ischemia.The proportion of patients with primary(or idiopathic)MVT varies from 0% to 49%,with a decrease in frequency secondary to more recent availability of newer investigations for hypercoagulability.The presence of factor Ⅴ Leiden(FVL)and prothrombin G20210A mutations(PGM)have been well documented in these cases.However,there have been scarce case reports describing MVT in heterozygotes of both these mutations occurring simultaneously and its implications on long term management.Our case describes acute MVT in a previously asymptomatic young patient with no prior history of venous thromboembolism.The patient was found to be heterozygous for FVL and PGM and treated with lifelong anticoagulation with warfarin(goal international normalized ratio:2-3)and avoidance of hormonal contraceptives.

口服避孕药与凝血因子的变化及因子Ⅴ基因突变的关系

目的 探讨国产复方口服避孕药 (COC)与凝血因子的变化及因子V基因突变的关系。方法 测定 14 1例健康妇女凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅹ活性 ;分析女性脑卒中患者因子Ⅴ基因多态性。结果 炔诺酮组和炔诺孕酮组凝血因子X活性均数均显著高于对照组 (97 0 8± 14 78,P <0 0 5 ;98 5 8± 13 2 8,P <0 0 1) ;炔诺酮组凝血因子Ⅷ活性均显著高于对照组 (15 0 96± 5 7 11,P <0 0 5 ) ;二服药组凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ活性均数与对照组相似 ,差异无显著性 ;女性脑卒中患者中服避孕药者和非服避孕药者均未发现因子Ⅴ基因多态性。结论 长期服用国产低剂量COC对妇女的凝血因子有一些负面影响 ,不同避孕药的影响略有不同 ;COC不会引起中国妇女凝血因子ⅤLeiden突变。

凝血因子Ⅱ、Ⅴ基因多态性与脑梗死的关联研究

目的探讨中国湖南长沙地区汉族人群中凝血因子Ⅱ(FⅡ)、凝血因子Ⅴ(FⅤ)基因单核苷酸多态性与脑梗死之间的关联。方法采用PCR及飞行时间质谱技术对351例确诊为脑梗死的汉族患者(病例组)及417例对照组FⅡ基因rs1799963位点、FⅤ基因rs6025位点进行基因分型。结果病例组FⅡ基因rs1799963位点基因型均为G/G,对照组中基因型为G/G和A/G。病例组与对照组中FⅤ基因rs6025位点基因型均为G/G。对基因型及等位基因频率进行χ2检验示,病例组FⅡ基因rs1799963位点的基因型分布与对照组相比较差异无统计学意义(P>0.05);病例组等位基因频率与对照组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析示,FⅡ基因rs1799963位点多态性与脑梗死不相关(P>0.05)。结论 FⅡ基因rs1799963位点多态性和FⅤ基因rs6025位点多态性均可能与中国长沙汉族人群脑梗死之间不存在关联。

复合杂合突变致遗传性凝血因子Ⅴ缺陷症家系的表型与基因型分析

目的:通过检测复合杂合突变导致遗传性凝血因子Ⅴ(FⅤ)缺陷家系的表型和基因突变分析,探讨其分子发病机制。方法:检测先证者及其家系成员(共3代10人)血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、FⅤ促凝活性(FⅤ∶C)、FⅤ抗原(FⅤ∶Ag)及其他相关凝血指标以明确诊断。采用DNA直接测序分析F5基因的所有外显子、侧翼、5'和3'非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,发现突变位点用反向测序证实。使用ClustalX-2.1-win软件分析突变氨基酸的保守性,PROVEAN和MutationTaster在线生物信息学软件预测突变对蛋白质功能的影响,Swiss-PdbViewer软件在突变位点上进行蛋白质模型和氨基酸相互作用分析。结果:先证者PT和APTT较正常对照健康体检者显著延长,分别为34.2 vs 13.2 s和119.3 vs 36.0 s;FⅤ∶C和FⅤ∶Ag极度降低,分别为3%和6%。先证者的第二子、第三子、女儿和孙子的PT和APTT略有延长,FⅤ∶C和FⅤ∶Ag均有不同程度的降低,其他家庭成员的相关凝血参数均在正常范围内。先证者6号外显子上存在c.911G>A杂合错义突变,导致p.Gly276Glu;16号外显子上存在c.5343C>G杂合错义突变,导致p.Ser1781Arg。其第二子、第三子和孙子均携带p.Gly276Glu的杂合子,其女儿携带p.Ser1781Arg的杂合子,其他家庭成员均为野生型。保守分析结果表明,Gly276和Ser1781在同源物种中高度保守。2种生物信息学软件的预测结果相同,PROVEAN(得分-6.214和-12.79)表明,该复合杂合突变是一种有害突变;MutationTaster(得分0.976和0.999)提示,这些突变可能引起相应疾病。p.Gly276Glu蛋白质模型分析显示,Glu侧链延长,分子量变大,这将增加它与周围氨基酸之间的空间位阻,影响FⅤ蛋白的正常局部折叠,最终导致蛋白质活性和含量降低。由于尚无16号外显子FⅤ的X射线3D结构文件,本研究无法对p.Ser1781Arg突变蛋白进行空间结构分析。结论:在本研究中鉴定的新型复合杂合突变(p.Gly276Glu和p.Ser1781Arg)是该家系FⅤ水平下降的主要原因,其中p.Ser1781Arg国内外鲜见报道。

习惯性流产妇女中凝血因子V基因三种多态性和APC-R、LA的检测

目的 研究习惯性流产妇女与活化蛋白C抵抗 (APC R)、狼疮抗凝物质 (LA)和凝血因子Ⅴ (FⅤ )基因多态性的关系。方法 测定习惯性流产妇女 (未妊娠期 )和正常对照妇女的APC R、LA ,并用限制性内切酶片段多态性的方法检测FⅤG16 91→A、G10 91→C、A10 90→G 3种基因多态性的发生情况。结果 习惯性流产妇女的APC R和 3种FⅤ基因多态性测定未见阳性 ,LA阳性率达 15 .6 %。结论 中国妇女习惯性流产与APC R和 3种FⅤ基因多态性可能关系不大 。

遗传性因子V缺乏症的基因研究

研究一个遗传性凝血因子 (FV)缺乏症重型患者的基因缺陷。方法 :采用 RT- PCR及 PCR技术 ,对先证者FV c DNA序列全长和基因组 DNA中第 11和第 13外显子的序列进行了 PCR扩增 ,PCR产物回收纯化后直接测序。结果 :对先证者 FV基因组 DNA的部分序列的 PCR扩增 ,经 DNA测序 ,发现有两个基因突变位点 ,其中 2 86 3G→ A为中性多态性位点 ,另一个 336 6 C→ G为同义突变。对先证者 FV c DNA序列全长进行分段扩增均未见目的条带。结论 :推测先证者 FV缺乏可能为 FV基因某种新的突变导致 m RNA不稳定或转录调控异常所致。

视网膜中央静脉阻塞与凝血酶原基因G20210A及凝血因子Ⅴ基因Leiden突变的关系

目的:检测视网膜中央静脉阻塞(CRVO)患者凝血酶原(PT)基因G20210A及凝血因子Ⅴ(FⅤ)基因Leiden的突变情况,并探究二者突变情况与CRVO疾病的关系。方法:选取2016年6月至2018年12月本院收治的CRVO患者82例作为研究组,选取同期健康体检者80例作为对照组,应用全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;应用全自动化学发光仪检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、叶酸(FA)水平;检测PT基因G20210A和FⅤ基因Leiden的限制性长度多态性。采用向后法Logistic回归分析影响CRVO疾病发生的危险因素。结果:研究组与对照组性别、年龄、饮酒情况比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);研究组血清Hcy、TC、TG、HDL-C、LDL-C检测值显著高于对照组(P <0. 05),FA检测值显著低于对照组(P <0. 05)。研究组与对照组均仅检测到PT基因G20210A野生型和FⅤ基因Leiden野生型,均未见突变。Logistic回归分析显示,血清FA、TC、TG、LDLC水平均可能为CRVO发生的危险因素(P <0. 05)。结论:血清FA、TC、TG、LDL-C为CRVO发生的危险因素,而PT基因G20210A和FⅤ基因Leiden突变与CRVO发生无关。

一例遗传性凝血因子Ⅴ缺乏症发病机制研究

目的 研究遗传性凝血因子Ⅴ (FⅤ )缺乏症的发病机制。方法 通过免疫学方法和发色底物法检测血浆和血小板中的FⅤ含量 ,采用PCR产物直接测序和限制性酶切分析FⅤ基因 ,应用分子模建对所鉴定突变的生物结构病理学进行研究。结果 先证者血浆和血小板中FⅤ均缺乏。先证者FⅤ基因第 176 3位核苷酸存在A→C突变 (176 3A→C ,EMBLAJ2 972 5 4)。模建分析表明 ,该突变将导致分子内部形成空洞 ,并可能破坏Tyr5 30与Glu330之间形成的氢键。结论 176 3A→C突变将导致FⅤ稳定性降低 。

一种新的突变引起遗传性凝血因子Ⅴ缺乏症

目的 研究一个遗传性凝血因子Ⅴ (FⅤ )缺乏症家系的基因缺陷。方法 采用比浊法测定凝血酶原时间、凝血酶时间、活化的部分凝血活酶时间 ;采用凝血因子活性测定法 (一步法 )和BA ELISA法对先证者及其家系成员血浆FⅤ活性和抗原进行测定 ;采用PCR及DNA序列测定技术 ,对FⅤ基因组DNA中 2 5个外显子和 5′非翻译端的序列进行了PCR扩增 ,PCR产物回收纯化后直接测序 ,并经T/A克隆测序对所发现突变进行证实。结果 先证者血浆FⅤ严重缺乏 ,FⅤ活性为 1% ,FⅤ抗原为 1.5 4 %。基因研究显示为复合杂合子 ,其基因组DNA第 4外显子 6 75位核苷酸发生单个碱基A缺失 ,呈杂合状态 ,该致病基因来自先证者母亲 ,与来自父方的另外一条等位基因的未知缺陷 ,共同导致先证者血浆FⅤ严重缺乏。结论 发现一种新的突变 6 75delA ,该缺失引起移码 ,导致转录提前终止 ,引起遗传性FⅤ缺乏症。

凝血因子Ⅴ基因的一种新突变的发现与确证

目的 探讨先天性凝血因子Ⅴ (FⅤ )缺乏症的分子发病机制。方法 利用发色底物法检测血浆FⅤ凝血活性 ,采用PCR产物直接测序或T A克隆后测序、限制性酶切分析先证者FⅤ基因 ,并进行了一个家系和FⅤ基因多态性频率研究。结果 先证者 8号内含子 3′端剪接位点存在AG→GG的突变 ,这在家系和 10 0例正常对照人群的研究中得到证实。结论 FⅤ基因 8号内含子 3′端剪接位点的突变与先天性凝血因子Ⅴ缺乏症的发病有关。

先天性凝血因子Ⅴ缺乏症一种新基因突变的鉴定

目的 探讨先天性凝血因子Ⅴ (FⅤ )缺乏症的分子发病机制。方法 利用发色底物法检测血浆FⅤ凝血活性 ,采用PCR产物直接测序或T A克隆后测序、限制性酶切分析先证者FⅤ基因 ,并进行家系和FⅤ基因多态性频率研究。结果 先证者 18号外显子存在G5 72 9T(M16 96 7)的纯合子突变 ,相应的氨基酸变异为Gly1880Val,FⅤ分子结构分析表明 ,突变后FⅤ的重链和轻链结合松弛。结论 FⅤ基因G5 72 9T突变与先天性FⅤ缺乏症的发病有关。