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CVF在大鼠移植心脏缺血再灌注损伤中的保护作用研究 被引量:5
1
作者 兰纲 杨康 +4 位作者 吴蔚 白云 蒋彬 李军 熊刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期357-359,共3页
目的研究中华眼镜蛇毒因子(cobra venom factor,CVF)对同种大鼠移植心脏缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法近交系雄性B/N大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,建立腹腔异位心脏移植模型。实验组术前给予CVF尾静脉注射,观察移植心的存活时间,并... 目的研究中华眼镜蛇毒因子(cobra venom factor,CVF)对同种大鼠移植心脏缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法近交系雄性B/N大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,建立腹腔异位心脏移植模型。实验组术前给予CVF尾静脉注射,观察移植心的存活时间,并设B/N大鼠同系对照组。免疫组化法测定各组术后第1、3、5天移植心脏的C3沉积,并观察移植心的病理变化。结果接受CVF20μg/kg,2d1次,尾静脉给药的大鼠,移植心存活时间明显延长,平均达(11.69±0.72)d,而对照组为(6.65±0.35)d(P<0.01),组织内C3沉积较对照组同期明显减轻,病理损害程度减轻,优于同期对照组。结论CVF消耗补体显著延长移植心脏存活时间,能明显减轻近交系大鼠移植心脏缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒因子 心脏移植 缺血再灌注 补体 大鼠
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补体介导出血性脑损伤机制及CVF干预的实验研究 被引量:1
2
作者 马领松 周向阳 +4 位作者 费世早 吴家幂 储照虎 张帆 徐国祥 《皖南医学院学报》 CAS 2005年第4期253-256,共4页
目的研究补体成分C9、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠实验性脑出血后血肿周围的表达情况,探讨C9、TNF-α在脑出血后脑水肿中的作用及应用眼镜蛇毒因子(CVF)干预后的影响.方法采用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠尾状核制备脑出血模型... 目的研究补体成分C9、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠实验性脑出血后血肿周围的表达情况,探讨C9、TNF-α在脑出血后脑水肿中的作用及应用眼镜蛇毒因子(CVF)干预后的影响.方法采用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠尾状核制备脑出血模型,将动物分为假手术组、出血组和CVF干预组,分别在不同时间断头取脑,连续切片作C9、TNF-α免疫组化染色和HE染色,并进行脑组织含水量测定(干湿重法).结果脑出血后2h开始表达C9,24 h达高峰;TNF-α 24 h表达明显增加,48 h达高峰,各组与假手术组之间比较有差异(P<0.05);TNF-α的表达与C9的表达呈正相关关系(r=0.833,P<0.05);血肿周围脑组织含水量在ICH后2 h开始增加,24~72 h达高峰(P<0.01),此后逐渐回落,1周基本恢复正常水平,对侧半球相应部位及假手术对照组脑组织含水量没有明显变化;经CVF干预后,血肿周围组织C9、TNF-α表达量明显下降,干预组与出血组之间比较有显著差异(P<0.01).CVF干预组脑组织含水量明显低于常规ICH组(P<0.01).结论脑出血后补体级联激活C9及TNF-α表达明显增加,CVF干预后,C9及TNF-α表达下降,脑水肿减轻,能达到神经保护作用. 展开更多
关键词 脑出血 补体9 肿瘤坏死因子 眼镜蛇毒因子
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CVF联合小剂量CsA对大鼠同种异体心脏移植急性排斥反应的影响
3
作者 蒋彬 杨康 +3 位作者 兰纲 熊松柏 吴蔚 朱晓星 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1063-1065,共3页
目的探讨小剂量环孢素A(cyclosporine,CsA)联合眼镜蛇毒因子(cobravenomfactor,CVF)对大鼠同种异体心脏移植急性排斥反应的影响。方法采用改良Ono’s方法建立大鼠心脏移植排斥反应动物模型,将实验动物分为5组,每组9只。A组:对照组;B组:... 目的探讨小剂量环孢素A(cyclosporine,CsA)联合眼镜蛇毒因子(cobravenomfactor,CVF)对大鼠同种异体心脏移植急性排斥反应的影响。方法采用改良Ono’s方法建立大鼠心脏移植排斥反应动物模型,将实验动物分为5组,每组9只。A组:对照组;B组:半量CsA组;C组:全量CsA组;D组:CVF组;E组:半量CsA联合CVF组。分别在1、3、5、7d从各组中取1只处死,其余5只观察移植心脏存活天数,应用HE染色进行供心排斥反应病理分级,免疫组织化学检查CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞浸润情况,RT-PCR法检测供心IL-2、IL-10mRNA表达水平。结果A、B、C、D和E组大鼠移植心脏存活时间分别为(7.88±0.99)、(14.94±1.43)、(20.76±0.94)、(14.96±2.29)d和(31.10±3.36)d,与A组相比,各治疗组大鼠心脏存活时间均明显延长(P<0.01),E组移植心脏存活时间较B、C、D组明显延长(P<0.01)。各实验组免疫排斥发生时间延后,排斥反应分级减轻,CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞浸润减少,尤其C、E两组明显(P<0.01)。A与D组IL-2、IL-10mRNA含量无明显差异(P>0.05),E组与B、C组比较,IL-2、IL-10mRNA含量也无明显差异(P>0.05)。结论CsA和CVF在抗急性排斥反应上具有协同效应,小剂量CsA联合使用CVF能增强抗排斥反应疗效,优于大剂量CsA单用组,CVF能单独或者协同CsA抑制T细胞的浸润,但CVF对排斥相关细胞因子的分泌无明显作用,也不加强CsA抑制细胞因子分泌的效应,其抗排斥反应的机制还需进一步探讨。 展开更多
关键词 环孢素 蛇毒因子 心脏移植 同种异体移植物排斥 补体 免疫抑制剂
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某些中药成分对豚鼠补体及经CVF处理的豚鼠补体活性的影响 被引量:1
4
作者 吴耀生 舒雨雁 +1 位作者 李曼玲 庄茂辛 《广西医学院学报》 1991年第3期187-191,共5页
该文研究人参茎叶多糖、田七多糖、绞股兰皂甙、白花蛇舌草煎液对补体及经CVF处理的豚鼠补体活性的影响,发现上述中药成分对正常豚鼠补体水平无明显影响,但对经CVF处理后的豚鼠低补体状态在连续给药5~8天后有一定促进恢复作用。给豚鼠... 该文研究人参茎叶多糖、田七多糖、绞股兰皂甙、白花蛇舌草煎液对补体及经CVF处理的豚鼠补体活性的影响,发现上述中药成分对正常豚鼠补体水平无明显影响,但对经CVF处理后的豚鼠低补体状态在连续给药5~8天后有一定促进恢复作用。给豚鼠腹腔注射50μg/kg的CVF,CH_(50)下降94%~97%,12天后才恢复正常。此时再次给予同样剂量的CVF,几乎不能再产生降补体作用,可能是由于已产生CVF抗体的缘故。用CVF造成动物低补体状态以研究某些中药成分的药理作用是一新的尝试。 展开更多
关键词 补体 中药 cvf
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中华眼镜蛇蛇毒因子(CVF)对补体系统的作用及与人补作C_3和其他蛇毒抗原性关系 被引量:3
5
作者 陈川 舒雨雁 +1 位作者 庄茂辛 汤圣希 《Zoological Research》 CAS CSCD 1991年第4期367-374,共8页
中华眼镜蛇蛇毒经DEAE-Sepharose CL-6B。HPLC等多次柱层析分离出有抗补体及溶血活性的眼镜蛇蛇毒因子(Cobra venom factor,CVF),纯化后的CVF在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈单一区带,分子量为225000—230000,等电点为6.20。用二硫苏糖醇... 中华眼镜蛇蛇毒经DEAE-Sepharose CL-6B。HPLC等多次柱层析分离出有抗补体及溶血活性的眼镜蛇蛇毒因子(Cobra venom factor,CVF),纯化后的CVF在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈单一区带,分子量为225000—230000,等电点为6.20。用二硫苏糖醇还原经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得三类亚基,其分子量总和为237,000。 体外抗补体及溶血试验表明,CVF的作用是通过补体旁路途经使总补体活力下降。双向免疫电泳鉴定,发现CVF与人血清作用后,其中补体成分C_3分子的抗原性发生改变,则表明CVF的作用是通过激活补体成分C_3而发挥的。给豚鼠腹腔注射CVF(0.15ug/g体重)后,其血清总补体水平下降到正常值的3%以下,7天后回升,13天后恢复到正常水平。 单相免疫电泳表明,CVF与人补体C_3抗血清间无任何交叉免疫反应,但人血清与CVF抗血清间有微弱的免疫沉淀反应。另外,CVF的氨基酸组成与人补体C_3也较为相似。鉴定还表明眼镜蛇科中四种蛇毒与CVF抗血清有强烈的免疫沉淀反应,蝰蛇毒及海蛇毒也有免疫沉淀反应,但只有眼镜蛇毒具有抗补体活性。 展开更多
关键词 眼镜蛇 蛇毒因子 补体 抗原 免疫
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Protective Effect of Cobra Venom Factor on Lung Injury Induced by Cecal Puncture in Septic Rats
6
作者 WEI Qiao SHENG Ya-qian LI Guo-ping 《Chinese Journal of Biomedical Engineering(English Edition)》 CAS 2023年第4期170-176,共7页
Objective:To investigate the protective effect of cobra venom factor(CVF)on lung tissue injury in rats with sepsis induced by cecal puncture,with a view to providing theoretical basis for the development of new anti-s... Objective:To investigate the protective effect of cobra venom factor(CVF)on lung tissue injury in rats with sepsis induced by cecal puncture,with a view to providing theoretical basis for the development of new anti-sepsis drugs.Methods:A total of 144 rats were randomly divided into sham operation group,sepsis group and CVF group,with 48 rats in each group.Cecal ligation and puncture(CLP)was used to establish a rat model of sepsis.And 8 rats were taken from each group at 2,4,8,12,16and 24 h to observe the differences in lung wet/dry weight ratio,lung histopathological changes,and serum inflammatory factor levels.Results:CVF treatment significantly alleviated the degree of pulmonary edema and swelling in septic rats,slowed down the trend of elevated lung wet/dry weight ratio,and reduced the pathological damage of lungs.The degree of vascular congestion,edema and inflammatory cell infiltration in lung tissue of the sepsis group increased with time,and the degree of lesions in the CVF group was milder than that in the sepsis group.The TNF-αlevel in lung tissue of septic rats was significantly down-regulated by CVF treatment,and the TNF-αlevels in the CVF group during the 8-24 h period ranged from[8 h:(1.47±0.14)ng/ml]to[24 h:(1.14±0.03)ng/ml],which was closer to that in sham operation group.Meanwhile,the IL-10level decreased from(91.3±5.5)ng/L to(39.8±13.4)ng/L during 8-24 h,which was higher than other groups.Conclusion:CVF can play a protective role against injury by down-regulating TNF-αand up-regulating IL-10 pathways,which can serve to alleviate focal lung injury and pulmonary edema from sepsis. 展开更多
关键词 cobra venom factor(cvf) cecal puncture SEPSIS lung injury inflammatory factor
原文传递
眼镜蛇毒因子的体内过程及药物代谢动力学研究 被引量:7
7
作者 徐贵丽 彭显平 +3 位作者 杨艳 牟冰 孙黔云 熊郁良 《西南国防医药》 CAS 2002年第6期492-495,共4页
目的:探讨眼镜蛇毒因子的体内过程及其药物代谢动力学。方法:本文采用氯胺T氧化法,制备了^(125)Ⅰ眼镜蛇毒因子作示踪剂对“眼镜蛇毒因子(CVF)”的体内过程及药物代谢动力学进行了研究。结果:静脉注射后,大鼠体内血药浓度时间曲线为二... 目的:探讨眼镜蛇毒因子的体内过程及其药物代谢动力学。方法:本文采用氯胺T氧化法,制备了^(125)Ⅰ眼镜蛇毒因子作示踪剂对“眼镜蛇毒因子(CVF)”的体内过程及药物代谢动力学进行了研究。结果:静脉注射后,大鼠体内血药浓度时间曲线为二房室模型,T_(1/2)β为18.14h。小鼠尾静脉注射1h后,各脏器(除肌肉外)放射性活性达到峰值,其值(%)大小顺序如下:肾(15.93)>脾(10.66)>心(9.38)>肝(1.32)>肺(0.77)>脑(0.38)。^(125)Ⅰ-CVF静脉注射后,72h内尿排泄率达74.3%,而粪排泄率为7.02%。结论:眼镜蛇毒因子的体内过程符合二房室模型,静脉注射后主要从尿中排泄。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒因子 体内过程 药物代谢动力学 研究
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蛇毒因子消耗补体对大鼠同种心脏移植急性排斥反应的影响 被引量:6
8
作者 吴蔚 杨康 +3 位作者 白云 王婉瑜 李军 熊刚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期61-64,共4页
目的探讨蛇毒因子(CVF)消耗补体对大鼠同种心脏移植急性排斥反应的影响。方法建立Wistar至SD大鼠同种异位心脏移植模型,实验组经静脉注射CVF以消耗受体血清中补体,观察移植心存活时间,并从实验组和对照组中分别抽取5只大鼠于术后1、3、5... 目的探讨蛇毒因子(CVF)消耗补体对大鼠同种心脏移植急性排斥反应的影响。方法建立Wistar至SD大鼠同种异位心脏移植模型,实验组经静脉注射CVF以消耗受体血清中补体,观察移植心存活时间,并从实验组和对照组中分别抽取5只大鼠于术后1、3、5、6、7 d定时活杀,对比观察移植心急性排斥反应程度,血清补体活性以及CD4+、CD8+T细胞浸润程度。结果使用CVF的实验组,其移植心存活时间显著延长,平均达(32.39±23.82)d,部分移植心甚至达到长期存活,而对照组为(6.60±0.65)d(P<0.01),病理检查及免疫组化证实实验组急性排斥反应程度、组织内C3沉积情况和CD4+、CD8+T细胞浸润程度均较同期对照组明显减轻。结论CVF清除补体可抑制大鼠同种心脏移植急性排斥反应,显著延长移植心存活时间。 展开更多
关键词 心脏移植 同种移植 急性排斥反应 蛇毒因子 补体
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脂多糖激活补体诱导内皮细胞释放黏附分子和凋亡 被引量:10
9
作者 沈良贤 李敏 +1 位作者 孙黔云 石京山 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1245-1249,共5页
目的在细胞水平上研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活血清补体对内皮细胞的作用和影响。方法研究LPS激活血清补体的作用方式和特点,观察LPS激活补体对内皮细胞表达黏附分子和凋亡的影响。采用ELISA检测内皮细胞释放P-selectin、E-s... 目的在细胞水平上研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活血清补体对内皮细胞的作用和影响。方法研究LPS激活血清补体的作用方式和特点,观察LPS激活补体对内皮细胞表达黏附分子和凋亡的影响。采用ELISA检测内皮细胞释放P-selectin、E-selectin和ICAM-1的变化,化学发光法检测Caspase-3/7活化情况,SRB法检测LPS激活补体对内皮细胞生长的影响。结果 LPS能够激活血清补体,这种激活呈现量效、时效性。LPS激活血清补体可诱导内皮细胞瞬时明显释放P-selectin,E-selectin和ICAM-1表达也明显上调,同时可导致Caspase-3/7活化。在本实验条件下,LPS激活血清补体对内皮细胞生长未产生抑制。结论 LPS激活血清补体可损伤内皮细胞,导致内皮细胞明显表达黏附分子以及发生凋亡。 展开更多
关键词 脂多糖 补体 内皮细胞 黏附分子 凋亡 补体激 眼镜蛇毒因子
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补体旁路激活导致内皮细胞活化和损伤 被引量:14
10
作者 孙黔云 李敏 +1 位作者 叶巧玲 李红玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期925-929,共5页
目的研究补体替代途径的激活对血管内皮细胞活化和损伤的作用。方法采用眼镜蛇毒因子(CVF)与人血清孵育,特异激活补体替代途径。将孵育物作用于人微血管内皮细胞,采用ELISA检测内皮细胞P-selectin、E-selectin、ICAM-1、MCP-1和IL-8的表... 目的研究补体替代途径的激活对血管内皮细胞活化和损伤的作用。方法采用眼镜蛇毒因子(CVF)与人血清孵育,特异激活补体替代途径。将孵育物作用于人微血管内皮细胞,采用ELISA检测内皮细胞P-selectin、E-selectin、ICAM-1、MCP-1和IL-8的表达,采用酶活性测定法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,化学发光法检测内皮细胞caspase-8活化信号,MTT法检测内皮细胞增殖活性,并检测内皮细胞释放NO的变化。结果补体旁路激活导致内皮细胞瞬时表达P-selectin,并进而使内皮细胞上调表达E-selectin、ICAM-1、MCP-1和IL-8。内皮细胞经补体激活物刺激后,LDH释放增加、凋亡信号caspase-8活化上调以及NO释放下调,同时,细胞增殖也受到抑制。结论补体旁路激活能诱导内皮细胞活化和损伤,介导血管内皮的生理结构与功能发生变化,从而可能导致相应的炎症和组织损伤。 展开更多
关键词 补体激活 内皮细胞活化 炎症 补体替代途径 黏附分子 趋化因子 眼镜蛇毒因子
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人红细胞膜CD59的分离及对依赖补体血小板损伤的保护 被引量:8
11
作者 古亚娟 黄守坚 孙家钧 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期512-515,共4页
目的研究补体调节蛋白CD59通过阻止补体攻膜复合物(MAC)的形成发挥其对依赖补体血小板损伤的保护作用。方法用连续柱层析从眼镜蛇粗毒中分离纯化出眼镜蛇毒因子(CVF)。人红细胞膜经低渗破膜、超滤、木瓜蛋白酶消化、正丁... 目的研究补体调节蛋白CD59通过阻止补体攻膜复合物(MAC)的形成发挥其对依赖补体血小板损伤的保护作用。方法用连续柱层析从眼镜蛇粗毒中分离纯化出眼镜蛇毒因子(CVF)。人红细胞膜经低渗破膜、超滤、木瓜蛋白酶消化、正丁醇抽提和连续柱层析分离纯化出补体调节蛋白CD59。用ChronoLog型血小板聚集仪测定血小板变形、聚集和ATP释放反应。结果预先加入CD59可抑制CVF引起的大白鼠血小板变形和ATP释放,不影响CVF引起的血小板聚集及粘附性增加。结论血小板膜表面形成的MAC是补体激活引起血小板变形和ATP释放的关键。 展开更多
关键词 红细胞膜 CD59 分离 血小板损伤 眼镜蛇毒因子
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绿原酸对小鼠急性肺损伤的保护作用研究 被引量:10
12
作者 郭静 李敏 +2 位作者 杨毅 张霖 孙黔云 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1214-1218,1251,共6页
本文探讨了绿原酸对补体旁路激活致小鼠急性肺损伤的保护作用及可能的作用机制。将32只KM小鼠随机分为正常对照组、模型组、白藜芦醇组、绿原酸组,预防给药7 d后,用特异性补体旁路激活蛋白眼镜蛇毒因子(CVF)尾静脉注射复制小鼠急性肺损... 本文探讨了绿原酸对补体旁路激活致小鼠急性肺损伤的保护作用及可能的作用机制。将32只KM小鼠随机分为正常对照组、模型组、白藜芦醇组、绿原酸组,预防给药7 d后,用特异性补体旁路激活蛋白眼镜蛇毒因子(CVF)尾静脉注射复制小鼠急性肺损伤模型。测定肺含水量、肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞数目和蛋白含量,ELISA法检测BALF和血清中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、P选择素(P-selectin)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的含量,HE染色法观察肺组织病理形态学变化,免疫组化法测定肺组织中NF-κB p65的磷酸化水平。研究发现,绿原酸可以降低小鼠BALF中蛋白含量、炎性细胞数目、IL-6和TNF-α含量以及肺组织匀浆中MPO活性,并可显著降低血清中IL-6、TNF-α及P-selectin、ICAM-1水平;病理形态学显示绿原酸可以显著抑制炎性细胞浸润,免疫组化结果显示绿原酸可显著抑制小鼠NF-κB p65的磷酸化水平。以上结果说明绿原酸可明显减轻补体旁路激活诱导的小鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB p65的磷酸化及降低炎症反应程度有关。 展开更多
关键词 绿原酸 白藜芦醇 补体旁路 急性肺损伤 眼镜蛇毒因子 NF-ΚB P65
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眼镜蛇毒神经生长因子诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡作用的研究 被引量:6
13
作者 韦世秀 刘成军 +2 位作者 李牡艳 宋慧 李佳荃 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第22期1909-1912,共4页
目的:研究广西眼镜蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡。方法:应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定不同质量浓度(0.0125,0.025,0.05,0.1,0.2g.L-1)... 目的:研究广西眼镜蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡。方法:应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定不同质量浓度(0.0125,0.025,0.05,0.1,0.2g.L-1)NGF处理24,48,72,96h对人鼻咽癌CNE-2生长的抑制率;Hoechst33342荧光染色观察凋亡细胞的形态;琼脂糖凝胶电泳测定DNA断裂状况;流式细胞术检测细胞周期变化和细胞凋亡率。结果:不同浓度的NGF能抑制CNE-2细胞增殖,并呈浓度-时间效应关系,作用24,48,72,96h的半数抑制浓度(IC50)分别为0.213,0.095,0.048,0.033g.L-1;经NGF(0.1g.L-1)处理细胞48h后,荧光染色呈现典型的细胞凋亡形态学特征;DNA凝胶电泳可见凋亡细胞特有的DNA片段;0.05,0.1,0.2g.L-1NGF作用48h后,CNE-2细胞被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率分别为(28.2±2.0)%、(39.9±1.9)%、(50.3±1.3)%。结论:NGF通过诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡而产生抗鼻咽癌活性。 展开更多
关键词 广西眼镜蛇毒 神经生长因子 鼻咽癌 CNE-2细胞 细胞凋亡
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补体抑制剂对大鼠神经病理性疼痛模型的作用研究 被引量:7
14
作者 聂发传 王金保 +1 位作者 苏东 石英 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期240-242,共3页
目的:观察补体抑制剂对神经病理性疼痛(NPP)发病的影响,并初步探讨其机制。方法:18只SD大鼠随机分成三组:A组:假手术+术后生理盐水静脉注射;B组:慢性坐骨神经结扎模型(CCI)+术后生理盐水静脉注射;C组:CCI模型+术后眼镜蛇毒因子(CVF)静... 目的:观察补体抑制剂对神经病理性疼痛(NPP)发病的影响,并初步探讨其机制。方法:18只SD大鼠随机分成三组:A组:假手术+术后生理盐水静脉注射;B组:慢性坐骨神经结扎模型(CCI)+术后生理盐水静脉注射;C组:CCI模型+术后眼镜蛇毒因子(CVF)静脉注射。大鼠致伤模型建立后第一天开始根据分组每日尾静脉注射CVF 50μg/kg或等量的生理盐水。分别于术前和术后1、3、5、7天测定大鼠的热痛阈值和机械痛阈值,并于术后7天处死大鼠取腰6、7脊髓节段,测定SOD和MDA的组织含量。结果:CCI模型大鼠术后第1天均出现痛阈下降,给于补体抑制剂CVF干预后大鼠痛阈逐渐恢复而生理盐水对痛阈无影响;与A组相比,B组大鼠术后第7天脊髓SOD活力明显降低而MDA显著升高;C组SOD和MDA变化幅度显著小于B组。结论:CVF显著改善了CCI模型大鼠痛敏状态,可能的机制是CVF维护了脊髓氧化-抗氧化平衡,从而呈现出对脊髓组织的保护作用。 展开更多
关键词 补体 眼镜蛇毒因子 神经病理性疼痛 大鼠
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眼镜蛇毒因子对神经病理性疼痛大鼠脊髓背角神经元的保护效应 被引量:5
15
作者 王金保 王姝媛 +3 位作者 王琪 聂发传 张再旺 肖俊 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期333-335,共3页
目的观察眼镜蛇毒因子(CVF)对慢性坐骨神经损伤(CCI)后大鼠脊髓背角神经元的保护效应。方法 36只SD大鼠随机均分成三组,CCI+生理盐水(CS组)、CCI+CVF 50μg/kg(CC组)和尾静脉注射生理盐水(SS组)。于术前和术后1、3、5、7 d测定大鼠的热... 目的观察眼镜蛇毒因子(CVF)对慢性坐骨神经损伤(CCI)后大鼠脊髓背角神经元的保护效应。方法 36只SD大鼠随机均分成三组,CCI+生理盐水(CS组)、CCI+CVF 50μg/kg(CC组)和尾静脉注射生理盐水(SS组)。于术前和术后1、3、5、7 d测定大鼠的热痛阈值和机械痛阈值,并于术后7 d处死大鼠取脊髓组织,在电镜下观察脊髓背角神经元的内部结构变化,并测定脊髓匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)吸光度。结果与SS组相比,CS组大鼠热痛阈值和机械痛阈值降低,脊髓匀浆中SOD活力明显降低,而MDA显著升高(P<0.05);与CS组相比,CC组大鼠热痛阈值和机械痛阈值升高,脊髓匀浆中SOD活力明显升高,而MDA却迅速下降(P<0.01)。给予CVF后,CCI大鼠脊髓背角神经元线粒体的肿胀程度减轻。结论 CVF能减轻CCI后脊髓背角神经元的损伤程度,可能与其减少自由基和脂质过氧化的损伤有关。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒因子 神经病理性疼痛 超氧化物歧化酶 丙二醛
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广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 宋慧 张学荣 +2 位作者 周元聪 江涛 舒雨雁 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期265-270,共6页
目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL... 目的采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性。方法将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达NGF蛋白。超声破菌后,将上清液经Ni^(2+)-NTA柱纯化,收集并冻干NGF融合蛋白,用蛋白印迹法分析其NGF抗原活性,并通过促PC12细胞生长法观察其生物活性。结果经蛋白印迹分析可知在38 ku处的条带具有NGF抗原活性。加入天然蛇毒NGF,生长轴突的PC12细胞为(83±3)%,重组品为(21±3)%,表明经纯化的融合蛋白具有NGF生物活力,但活性弱于天然蛇毒NGF。结论在大肠杆菌中可以表达出有活性的蛇毒NGF蛋白。 展开更多
关键词 眼镜蛇 蛇毒 神经生长因子 蛋白表达
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淫羊藿苷对补体旁路激活诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用 被引量:5
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作者 郭静 李娇 +4 位作者 张霖 杨毅 朱芳娟 李敏 孙黔云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期988-993,共6页
目的探讨淫羊藿苷(ICA)对补体旁路激活造成的小鼠急性肺损伤的保护作用及作用机制。方法 32只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、PDTC组、淫羊藿苷组,预防给药7 d后,用特异性补体旁路激活蛋白眼镜蛇毒因子(CVF),尾静脉注射复制小鼠... 目的探讨淫羊藿苷(ICA)对补体旁路激活造成的小鼠急性肺损伤的保护作用及作用机制。方法 32只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、PDTC组、淫羊藿苷组,预防给药7 d后,用特异性补体旁路激活蛋白眼镜蛇毒因子(CVF),尾静脉注射复制小鼠急性肺损伤模型。测定小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量和炎性细胞数目;肺组织匀浆后测定髓过氧化物酶(MPO)活性;ELISA法检测BALF和血清中IL-6、TNF-α、P-selectin、ICAM-1的含量;HE染色法观察肺组织病理形态学变化;免疫组化法测定肺组织中NF-κB p65的磷酸化水平,并采用双萤光素酶报告基因检测系统,在细胞水平上测定补体旁路激活对微血管内皮细胞中NF-κB的核内转录活性的影响。结果 ICA可以明显降低小鼠肺组织匀浆液中MPO含量和BALF中炎性细胞数目,并同时降低BALF中IL-6、TNF-α、P-selectin含量和血清中TNF-α、P-selectin、ICAM-1水平,减轻小鼠肺部炎性细胞浸润,明显抑制小鼠肺组织中NF-κB p65的磷酸化,并有效抑制NF-κB核内转录活性的上调。结论 ICA能有效减轻补体旁路激活诱导的小鼠肺部急性炎症反应,其机制可能与抑制肺组织炎性细胞浸润、NF-κB p65的磷酸化及核内转录活性,从而降低炎症反应水平有关。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 补体旁路 急性肺损伤 眼镜蛇毒因子 NF-ΚB P65 炎症
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蛇毒抗补体蛋白atrase B抑制补体活化引起的血小板聚集 被引量:4
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作者 王彩娥 孙黔云 +1 位作者 李敏 石京山 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1205-1209,共5页
目的观察眼镜蛇毒抗补体蛋白atrase B抑制补体活化引起的血小板聚集。方法采用眼镜蛇毒因子激活补体诱导血小板聚集,观察atrase B对补体活化引起人凝胶过滤血小板聚集的影响,并采用流式细胞仪测定血小板膜P-选择素和GPⅡb/Ⅲa表达情况... 目的观察眼镜蛇毒抗补体蛋白atrase B抑制补体活化引起的血小板聚集。方法采用眼镜蛇毒因子激活补体诱导血小板聚集,观察atrase B对补体活化引起人凝胶过滤血小板聚集的影响,并采用流式细胞仪测定血小板膜P-选择素和GPⅡb/Ⅲa表达情况。结果Atrase B能抑制补体激活引起的血小板聚集和P-选择素、GPⅡb/Ⅲa在血小板膜上的表达。结论眼镜蛇毒抗补体蛋白atrase B能有效抑制补体激活引起的血小板活化、聚集。 展开更多
关键词 抗补体蛋白 补体活化 血小板活化 血小板聚集 眼镜蛇毒因子 蛇毒 P-选择素 糖蛋白GPⅡb/Ⅲa
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小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的新方法 被引量:11
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作者 孙黔云 叶巧玲 闫银萍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1619-1622,共4页
目的针对现有补体溶血活性测定方法不适宜测定小鼠血清补体的缺点,构建一种血清用量少、灵敏度高的小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的新方法。方法选用具有代表性的3个小鼠品系KM、BALB/c和C57BL/6小鼠的血清补体作为测定材料,以兔红... 目的针对现有补体溶血活性测定方法不适宜测定小鼠血清补体的缺点,构建一种血清用量少、灵敏度高的小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的新方法。方法选用具有代表性的3个小鼠品系KM、BALB/c和C57BL/6小鼠的血清补体作为测定材料,以兔红细胞为溶血靶细胞,利用眼镜蛇毒因子(CVF)特异激活补体替代途径的特点,构建和优化小鼠血清补体替代途径溶血活性测定的方法,并采用该方法测定两种抗补体蛋白对小鼠体内血清补体活性的影响。结果以CVF作为激活剂成功构建了测定小鼠血清补体替代途径溶血活性的微量新方法。3个品系小鼠的血清在5~20μl的范围内即可分别达到合适的溶血度。该方法明显减少了血清用量,并能有效提高溶血度。结论基于CVF特异激活补体替代途径的特点而构建的小鼠血清补体替代途径溶血活性测定新方法,血清用量少、灵敏度高、稳定性好,适用于测定小鼠血清补体的溶血活性。 展开更多
关键词 小鼠血清 补体溶血活性 补体替代途径 补体激活 眼镜蛇毒因子 抗补体蛋白
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眼镜蛇毒因子对神经病理性疼痛干预效应的实验研究 被引量:5
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作者 王金保 聂发传 +3 位作者 易斌 顾建腾 崔建 林江凯 《医学研究生学报》 CAS 2008年第2期129-133,共5页
目的:观察眼镜蛇毒因子(CVF)对慢性坐骨神经压迫损伤(CCI)大鼠痛阈和脊髓补体表达的影响,探讨补体异常活化在神经病理性疼痛(NPP)中的作用。方法:SD大鼠随机分为假手术+等渗盐水组(对照组)、CCI+等渗盐水组、CCI+CVF组。CCI+等渗盐水组... 目的:观察眼镜蛇毒因子(CVF)对慢性坐骨神经压迫损伤(CCI)大鼠痛阈和脊髓补体表达的影响,探讨补体异常活化在神经病理性疼痛(NPP)中的作用。方法:SD大鼠随机分为假手术+等渗盐水组(对照组)、CCI+等渗盐水组、CCI+CVF组。CCI+等渗盐水组和CCI+CVF组采用经典坐骨神经结扎术,建立CCI模型,对照组仅暴露坐骨神经而不结扎,CCI+CVF组在坐骨神经结扎后第4d经尾静脉注射50μg/kg的CVF。各组分别于术前和术后3、7、11和14 d记录热痛阈值和机械痛阈值,并测定血清和脊髓中补体蛋白C3的表达。结果:与对照组比较,CCI+等渗盐水组及CCI+CVF组大鼠于术后3 d出现明显机械性痛觉超敏和热痛觉过敏(P<0.01);与CCI+等渗盐水组相比,CCI+CVF组大鼠在尾静脉注射CVF后热痛敏和机械痛敏明显减轻(P<0.01),但随着药效的衰减,痛觉过敏又逐渐恢复。和痛阈变化一样,血清和脊髓补体C3水平在CVF干预后显著下降,随着药效的减弱又逐渐恢复,而等渗盐水治疗组无此变化。结论:尾静脉注射CVF具有减轻NPP大鼠机械痛敏和热痛敏的作用,补体C3活化状态可能与NPP疼痛和CVF镇痛效应有重要关系。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒因子 神经病理性疼痛 补体C3
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