鱼肝油软膏联合地奈德乳膏治疗儿童变应性接触性皮炎疗效及皮肤屏障修复作用研究

目的研究鱼肝油软膏联合地奈德乳膏治疗儿童变应性接触性皮炎(ACD)的疗效及对患儿皮损皮肤屏障的修复效果。方法选取ACD患儿80例随机分为对照组和试验组,每组各40例。对照组给予地奈德乳膏治疗,试验组给予鱼肝油软膏联合地奈德乳膏治疗。治疗2周后,比较两组患儿治疗前后主客观症状评分及皮肤屏障功能指标[角质层含水量、表皮油脂含量及表皮水分丢失量(TEWL)]的变化,以及两组疗效。Spearman相关性分析试验组临床疗效与角质层含水量、表皮油脂含量及TEWL的相关性。结果治疗后,两组局部烧灼感、瘙痒、丘疹、红斑等症状体征评分及水疱数目均较前降低(P<0.01);且试验组上述评分均低于对照组(P<0.05)。两组表皮油脂含量、角质层含水量均较前升高(P<0.05),TEWL则较前降低(P<0.05);且试验组各项皮肤屏障功能指标均优于对照组(P<0.05)。试验组临床疗效高于对照组(92.50%vs.75.00%,P<0.05)。试验组总有效率与表皮油脂含量、角质层含水量呈正相关(r_(s)=0.496,0.438,P<0.05),与TEWL水平呈负相关(r_(s)=-0.483,P<0.05)。结论鱼肝油软膏联合地奈德乳膏治疗儿童ACD,可以有效缓解局部病灶症状,修复损伤皮肤屏障,优于单用地奈德乳膏治疗。

不同类型卡拉胶美拉德产物的制备及其对鲅鱼鱼糜凝胶品质的影响

该文以鳕鱼鱼皮胶原蛋白肽和3种不同构型的卡拉胶(κ型、ι型、λ型)为原料,通过干热法制备不同反应时间的美拉德产物,运用红外光谱、褐变程度、接枝度、荧光强度和表面疏水性对反应产物进行结构表征。并将美拉德产物添加到鲅鱼鱼糜中,分析卡拉胶构型对其影响机制,并探究提高鱼糜制品品质的最优配比。结果表明,3种美拉德产物随着孵育时间的增加,产物的接枝率、褐变程度逐渐提高,荧光强度在4 d达到最大,随后下降,而表面疏水性随时间的延长而降低。将3种美拉德产物添加入鲅鱼鱼糜中,相较于空白组,鱼糜的凝胶强度和硬度都有显著提升,其中添加孵育6 d的κ-卡拉胶美拉德产物的鱼糜,其凝胶强度和硬度最大,分别为1825.48 g·mm和31.31 N。因此,经美拉德反应改性的肽能增强鱼糜的凝胶强度和硬度,且孵育6 d的κ-卡拉胶美拉德产物使鱼糜的凝胶强度和硬度最大。

响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铁工艺

采用响应面法优化鳕鱼皮胶原蛋白肽与氯化亚铁进行螯合反应的条件,制备小分子肽螯合铁产品。以pH值、小分子肽与FeCl2的质量比和小分子肽液质量分数3因素的5水平进行二次正交旋转组合试验,建立螯合物得率的二次回归方程。结果表明:最佳螯合工艺条件为胶原蛋白肽与氯化亚铁的质量比4:1、小分子肽液质量分数3.5%、pH7.0。在此条件下,螯合物得率为37.31%,与模型的预测值37.46%接近。红外光谱检测结果显示,亚铁离子与小分子肽中的NH2+和COO-有螯合,是一种新型螯合物。

响应面法优化鳕鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取工艺

为了提高鳕鱼皮中酸溶性胶原蛋白的提取率,选取提取液浓度、提取时间和料液比为影响因素,以胶原蛋白提取率为响应值,在单因素实验基础上,根据中心组合(Box-Behnken)实验设计原理,对鳕鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取工艺进行优化。结果表明酸法提取胶原蛋白最佳工艺条件:醋酸浓度为0.47 mol/L、料液比为1∶33、提取时间为90.2 h。在此条件下提取所得酸溶性胶原蛋白提取率的理论值为37.92%,实验验证值为37.36%。相对误差为1.49%,说明采用响应面法优化得到的酸法提取鳕鱼皮胶原蛋白的工艺参数准确可靠,为鳕鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取提供了一定的技术参考。

鳕鱼皮胶原蛋白酶解液的制备及抗氧化研究

[目的]利用酶解法从鳕鱼皮中提取胶原蛋白肽,研究其抗氧化能力。[方法]以鳕鱼鱼皮为原料,采用胃蛋白酶进行酶解,通过正交试验研究pH、水解温度、加酶量及水解时间4个因素对酶解鳕鱼皮的影响,确定胃蛋白酶酶解鳕鱼皮的最佳条件,并采用试剂盒法对酶解产物进行抗氧化活性研究。[结果]各因素对酶解鳕鱼皮的影响为水解时间>水解温度>加酶量>pH,胃蛋白酶酶解鳕鱼皮的最佳工艺条件为:加酶量4%、温度37℃、pH 3、时间3 h。此条件下,蛋白质水解度可达到6.91%。胃蛋白酶酶解鳕鱼皮得到的胶原肽粗品具有一定的抗氧化能力,并对超氧阴离子自由基具有较强的清除作用。[结论]该研究为开发新的抗氧化剂提供科学参考。

鳕鱼皮胶原蛋白的提取与应用

鳕鱼加工过程中鱼皮约占鳕鱼总重量的十分之一,其富含丰富的胶原蛋白。胶原蛋白具有支撑机体器官、保护组织等功能,同时也是组成细胞间质的重要功能蛋白质。从鳕鱼皮中提取胶原蛋白,不仅避免资源浪费,同时也减少环境污染。本文总结了近几年从鳕鱼皮中提取胶原蛋白常见的方法:热水法、碱法、盐法和酶法,并分析了各方法的特点。热水提取法破坏胶原蛋白结构使其隔膜作用、稳定作用及协助传输等作用减少;碱法提取由于产生消旋混合物,故较少使用此方法;盐法提取所得产物缺乏稳定性,不宜大规模生产;酶法提取成本低、效率高,使用广泛。由于胶原蛋白具有独特的三重螺旋结构、低免疫原性、生产成本低、可大规模生产和优良的生物降解性等优点,使得其在医药、食品、化妆品等领域应用广泛,具有极大的发展前景。

鳕鱼皮胶原蛋白肽酶解液脱色脱腥工艺的研究

鱼皮胶原蛋白肽是指鱼皮胶原或明胶经蛋白酶等降解处理后制得的产物。该产物在氨基酸组成方面与大分子的胶原蛋白不相上下,而且更容易被人体吸收,还表现出超出大分子胶原蛋白的生理活性,可广泛应用于食品、医药和保健品等行业。近年来,由于口蹄疫、疯牛病等动物疾病的爆发及宗教等原因,从水产品中提取胶原蛋白或胶原蛋白多肽已成为国内外研究的热点。但胶原蛋白水解产物具有令人不愉快的颜色和气味,限制了其推广应用。本研究以蛋白质损失率和感官值为考察指标,通过单因素和正交实验,研究了活性炭对水解产物脱色脱腥的效果。确定最佳脱色脱腥工艺条件为活性炭用量0.3%(w/v)、温度50℃、时间45min、pH5.5,在此条件下水解产物蛋白质损失率为4.2%,感观值为8,基本达到了脱色脱腥的目的,提高了水解蛋白的品质。

热水法抽提鳕鱼皮胶原蛋白条件的响应面分析

以鳕鱼皮为原料,先用酸碱浸泡鱼皮,去除脂肪和杂蛋白,并使鱼皮充分膨胀。再利用热水抽提法,以胶原蛋白的产率为主要指标,考察pH、温度,水解时间的变化对指标的影响,并考察这些因素对指标的交互影响。利用响应面法优化得出的胶原蛋白提取最佳工艺条件是pH 5.0,温度为42℃,提取时间为25.72 h。在最优条件下胶原蛋白的提取率为83.75%。

酶解鳕鱼皮制备血管紧张素转换酶抑制剂ACEI的研究

鳕鱼皮脱除杂蛋白、脂肪后,经海洋低温碱性蛋白酶YS-80水解,制备具有血管紧张素转换酶抑制剂活性的降血压肽,以紫外分光光度法检测HHL体系的紫外吸收确定降压肽的活性。通过温度、pH值、酶料比、料水比,时间等单因素实验,选取合理水平,做L18(37)正交实验,最终优化得到最佳制备条件为温度41℃、pH9.0、酶料比为840U/g、料水比50g/L、反应时间60min。此条件下所得降压肽的血管紧张素转换酶抑制率为82.13%,IC50为2.73mg/mL(以蛋白质计)。该工艺的成熟与完善,为利用海洋低值产物开发海洋生物酶转化肽、寻找活性先导化合物提供了思路,给海洋低值成品的开发带来了良好的前景。

鳕鱼皮胶原活性多肽的制备研究

以鳕鱼皮为研究对象,研究不同蛋白酶对鳕鱼皮酶解效果的影响。实验以水解度为指标,通过正交试验确定胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的最佳酶解条件。采用试剂盒法对4种酶解液进行抗氧化活性测定。结果显示,碱性蛋白酶酶解液的总抗氧化能力最强,达到2.431 U/mgprot;中性蛋白酶酶解液清除超氧阴离子自由基的能力最强。

利用鳕鱼皮制备饲用胶原肽添加剂及其抗氧化研究

以鳕鱼皮为原料,采用双酶复合法提取胶原多肽作为饲用添加剂。以水解度为指标,通过正交试验确定酶解的最适条件。结果表明:碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶混合水解,加酶量分别为4%和4.5%,温度55℃p、H值8,时间11 h,蛋白质水解度可达到25.61%。分离得到的多肽组分,Mr<3 500 Da的占82%以上,抗氧化试验结果表明,水解产物有较好的抗氧化特性,有望作为高档水产饲料添加剂使用。

鳕鱼皮寡肽对人胃癌细胞SGC-7901增殖凋亡的影响及机制

目的探讨鳕鱼皮寡肽(CSO)对人胃癌细胞(SGC-7901)的增殖影响。方法用不同浓度CSO处理体外培养的SGC-7901细胞后,荧光显微镜下观察细胞4'6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色后细胞形态变化,应用CCK-8实验检测细胞活力,免疫印迹法和流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果 CSO对SGC-7901细胞增殖有明显的抑制作用,且并呈剂量、时间效应关系(P<0.05)。作用于SGC-7901胃癌细胞24 h、48 h和72 h的IC50分别是156.90 g/L、102.10 g/L、73.13 g/L。DAPI染色后发现,SGC-7901细胞随着CSO浓度增加可见大量的细胞核碎裂,荧光强烈。24 h细胞凋亡率检测显示,细胞随着浓度的增加凋亡率呈上升趋势,表明CSO对SGC-7901呈浓度效应关系。细胞周期观察发现,SGC-7901细胞G1期细胞数随着CSO浓度的增加而递增,而S/G2期细胞随着浓度的细胞递降。Caspase-3、Caspase-9随着CSO浓度的逐渐增高表达上调,Bcl-2表达下调。结论鳕鱼皮寡肽能抑制人胃癌细胞(SGC-7901)增殖,诱导凋亡,抑癌机制可能与Caspase-3、Caspase-9上调和Bcl-2下调相关。

鳕鱼皮中硫酸皮肤素的提取工艺

以鳕鱼皮为原料,采用木瓜蛋白酶和胰酶混合酶的方法,从鳕鱼皮中提取硫酸皮肤素,并通过乙醇沉淀的方法得到最终产品。研究料液比、酶添加量、p H、时间和温度等单因素对提取率的影响,并通过正交试验法对混合酶法提取硫酸皮肤素工艺条件进行优化。结果表明,混合酶提取硫酸皮肤素的最佳工艺为:料液比1∶25 mg/m L、酶添加量0.5%、p H8.5、提取时间22 h、提取温度50℃。采用此工艺条件提取率达到4.409%。

响应面法优化酶法提取鳕鱼皮中胶原蛋白条件

利用响应分析法考察了酶浓度、酶解反应时间和酶解温度3个因素对提取鳕鱼皮中胶原蛋白提取率的影响。研究发现,胶原蛋白的最佳提取条件为水解时间10.43h、水解温度16.32℃、酶浓度0.054%,提取率27.53%,比单因素试验最高的提取率高22.3%。并通过对所提取的鳕鱼皮的胶原蛋白的SDS-PAGE电泳分析,确定了所提取的蛋白质制品是纯度较高的胶原蛋白,经电泳测定鳕鱼皮胶原蛋白α1与α2链的分子量分别为113kDa和110kDa。

鳕鱼皮胶原蛋白肽铜螯合物的制备条件

为提高鳕鱼皮的附加值,采用正交试验法探讨鳕鱼皮胶原蛋白肽与硫酸铜螯合反应条件,制备鳕鱼皮胶原蛋白肽铜。结果表明:制备鳕鱼皮胶原蛋白肽螯合铜的最佳条件是胶原蛋白肽与硫酸铜的质量比为3.5∶1,pH 7.0,反应温度50℃,反应时间40min,该条件下铜离子的螯合率为34.35%。

花生凝胶软糖工艺研究

以花生仁、白砂糖、葡萄糖、卡拉胶与狭鳕鱼皮明胶复配凝胶剂为原料制作花生凝胶软糖,采用正交实验确定花生凝胶软糖的配方。实验结果表明花生凝胶软糖的最佳配方为:白砂糖添加量为20%、葡萄糖添加量为60%、卡拉胶与狭鳕鱼皮明胶的比例为3∶2、凝胶剂(卡拉胶与狭鳕鱼皮明胶的混合物)添加量为4%。

氧化绿原酸改性鳕鱼皮明胶功能特性的研究

该试验研究经不同浓度氧化绿原酸(2.5%、5.0%、10.0%和20.0%)改性后鳕鱼皮明胶的抗氧化能力和乳化性。测定氧化绿原酸改性的鳕鱼皮明胶游离氨基的含量、表面疏水性、浊度、抗氧化活性以及硫代巴比妥酸值。结果表明,经氧化绿原酸改性的明胶抗氧化活性提高,但游离氨基含量和表面疏水性降低。5.0%氧化绿原酸改性明胶的浊度最高,较高浓度的氧化绿原酸会影响明胶的乳化性能。氧化绿原酸能够增强供氢能力,并作为金属螯合剂增强明胶的抗氧化活性。此外,氧化绿原酸改性的明胶能够增加乳状液的氧化稳定性。

鳕鱼皮胶原蛋白肽果汁饮料抗紫外线照射引起的皮肤光老化

为研究鳕鱼皮胶原蛋白肽果汁饮料(CJD)对紫外线诱导的皮肤光老化的调节作用,将ICR雄性小鼠随机分为正常组(NC)、模型组(MC)、CJD低剂量组(CJD-L)、中剂量组(CJD-M)和高剂量组(CJD-H),通过观察各组小鼠造模部位皮肤的表观特征、结合HE染色,皮肤中羟脯氨酸和水分的含量来评价CJD对小鼠皮肤光老化的防护作用;通过测定小鼠皮肤组织和血清中的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,丙二醛(MDA)的含量,来探究CJD对皮肤光老化的作用途径。结果显示,与MC组相比,CJD中剂量和高剂量组可以显著抑制光老化小鼠皮肤中水分的流失(p <0.05)及胶原含量的降低(p <0.01),显著提高小鼠皮肤组织和血清中T-SOD、GSH-Px、CAT的活力(p <0.05),显著降低MDA的含量(p <0.05)。研究表明,胶原蛋白肽饮料对紫外线引起的皮肤光老化有保护作用,能够有效预防和延缓光老化。

鳕鱼皮胶原蛋白的制备及其成分分析

目的探索如何提高鱼皮胶原蛋白的得率和质量,从而为水产品下脚料的开发利用研究提供参考。方法采用以酶法为主、热水浸提和酸法浸提为辅的方法提取鳕鱼皮胶原蛋白,对在胃蛋白酶添加量和料液比两参数不同的情况下提取的胶原蛋白得率进行统计,并对所提胶原蛋白进行了成分分析。结果与讨论胃蛋白酶添加量为1%,料液比为1∶10时胶原蛋白得率较高。提取鳕鱼皮胶原蛋白最适宜的胃蛋白酶添加量为1%,料液比为1∶10。

鳕鱼皮胶原蛋白肽在Caco-2细胞单层模型中的吸收机制

目的:鳕鱼皮胶原蛋白肽(cod skin collagen peptide,CSCP)对肝损伤具有较好的保护作用,但其吸收机制尚不明确,本实验拟采用人结肠腺癌Caco-2细胞单层模型对CSCP在肠道中的吸收机制进行研究,为CSCP在动物肠道内的吸收机制提供依据。方法:在进行转运实验前,先对CSCP在人工胃、肠液、不同pH值条件及在Caco-2细胞单层中的稳定性进行评价;采用CCK-8(cell counting kit-8)法确定CSCP在转运实验中的最高质量浓度,然后建立Caco-2细胞单层模型并测定跨膜电阻值和碱性磷酸酶活力以检验细胞单层的致密性、完整性和极化现象;考察转运时间、CSCP质量浓度、维拉帕米、MK-571、氧化苯砷和去氧胆酸钠对转运的影响,利用高效液相色谱法检测CSCP质量浓度并计算累积转运量和表观渗透系数。结果:在3h内,CSCP在人工胃、肠液及接近胃肠道pH值环境中基本保持稳定,转运过程中未见多肽发生水解。CSCP的转运具有时间和浓度依赖性,不受维拉帕米和氧化苯砷的影响,去氧胆酸钠和MK-571对CSCP的转运具有非常显著的促进作用(P<0.05)。结论:CSCP跨Caco-2细胞单层转运的机制为细胞旁路途径,其外排受到多药耐药蛋白的介导。