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High patatin like phospholipase domain containing 8 expression as a biomarker for poor prognosis of colorectal cancer
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作者 Peng-Yang Zhou De-Xiang Zhu +4 位作者 Yi-Jiao Chen Qing-Yang Feng Yi-Hao Mao Ao-Bo Zhuang Jian-Min Xu 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2024年第3期787-797,共11页
BACKGROUND Patatin like phospholipase domain containing 8(PNPLA8)has been shown to play a significant role in various cancer entities.Previous studies have focused on its roles as an antioxidant and in lipid peroxidat... BACKGROUND Patatin like phospholipase domain containing 8(PNPLA8)has been shown to play a significant role in various cancer entities.Previous studies have focused on its roles as an antioxidant and in lipid peroxidation.However,the role of PNPLA8 in colorectal cancer(CRC)progression is unclear.AIM To explore the prognostic effects of PNPLA8 expression in CRC.METHODS A retrospective cohort containing 751 consecutive CRC patients was enrolled.PNPLA8 expression in tumor samples was evaluated by immunohistochemistry staining and semi-quantitated with immunoreactive scores.CRC patients were divided into high and low PNPLA8 expression groups based on the cut-off va-lues,which were calculated by X-tile software.The prognostic value of PNPLA8 was identified using univariate and multivariate Cox regression analysis.The over-all survival(OS)rates of CRC patients in the study cohort were compared with Kaplan-Meier analysis and Log-rank test.RESULTS PNPLA8 expression was significantly associated with distant metastases in our cohort(P=0.048).CRC patients with high PNPLA8 expression indicated poor OS(median OS=35.3,P=0.005).CRC patients with a higher PNPLA8 expression at either stage I and II or stage III and IV had statistically significant shorter OS.For patients with left-sided colon and rectal cancer,the survival curves of two PN-PLA8-expression groups showed statistically significant differences.Multivariate analysis also confirmed that high PNPLA8 expression was an independent prog-nostic factor for overall survival(hazard ratio HR=1.328,95%CI:1.016-1.734,P=0.038). 展开更多
关键词 BIOMARKER Colorectal cancer Expression level Overall survival Patatin like phospholipase domain containing 8 Prognosis
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兔抗小鼠含SET结构域(赖氨酸甲基转移酶)8(Setd8)多克隆抗体制备和应用 被引量:8
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作者 马海涛 郭佳倩 +4 位作者 夏静 牛长敏 申雪沂 孙红亚 郑英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期246-251,共6页
目的在大肠杆菌表达小鼠含SET结构域(赖氨酸甲基转移酶)8(Setd8)蛋白并制备兔抗Setd8多克隆抗体。方法将p GADT7-Setd8质粒和p ET-30a载体分别双酶切后连接、转化和鉴定,构建p ET-30a-Setd8原核表达质粒。将p ET-30a-Setd8质粒转化到E.c... 目的在大肠杆菌表达小鼠含SET结构域(赖氨酸甲基转移酶)8(Setd8)蛋白并制备兔抗Setd8多克隆抗体。方法将p GADT7-Setd8质粒和p ET-30a载体分别双酶切后连接、转化和鉴定,构建p ET-30a-Setd8原核表达质粒。将p ET-30a-Setd8质粒转化到E.coli BL21中,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,通过镍亲和层析柱进行蛋白纯化。应用纯化的Setd8蛋白免疫新西兰大白兔,获得Setd8多克隆抗体。利用ELISA、Western blot法及免疫组织化学染色法对所得多克隆抗体进行效价测定及特异性鉴定。结果应用限制性内切酶双酶切后电泳及序列测定法,成功构建的p ET-30a-Setd8重组质粒在大肠杆菌中IPTG诱导下能够高效表达重组Setd8蛋白。免疫获得的多克隆抗体经ELISA检测其抗体效价为1∶1 000 000,Western blot法结果显示制备的多克隆抗体能特异性识别细胞和组织中的Setd8蛋白,免疫组织化学染色法显示多克隆抗体识别的Setd8主要表达于成年小鼠睾丸组织中的精原细胞。结论成功获得较高纯度Setd8蛋白,制备的Setd8多克隆抗体具有较高反应性和特异性。 展开更多
关键词 Setd8 多克隆抗体 鉴定
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Target inhibition of caspase-8 alleviates brain damage after subarachnoid hemorrhage 被引量:3
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作者 Da-Qiang Ke Zhi-Yang Chen +2 位作者 Zhou-Ling Li Xia Huang Hui Liang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第7期1283-1289,共7页
Caspase-8 plays an important role in the mediation of inflammation and the effect of its role in subarachnoid hemorrhage remains elusive.The nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3 inflammaso... Caspase-8 plays an important role in the mediation of inflammation and the effect of its role in subarachnoid hemorrhage remains elusive.The nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3 inflammasome has been postulated to mediate inflammation during SAH.The aim of the present study was to investigate the effects of caspase-8 inhibition on SAH injury and further elucidate the molecular mechanisms.In this study,a subarachnoid hemorrhage model was established by endovascular perforation process in adult male Sprague-Dawley rats.Z-IETD-FMK(0.5,1,2 mg/kg;an inhibitor of caspase-8)was delivered via intravenous(tail vein)injection immediately after subarachnoid hemorrhage.After 12 hours of subarachnoid hemorrhage,western blot assay showed that the expression of cleaved caspase-8 was significantly increased at 12 hours,peaked at 24 hours,and then decreased at 72 hours after subarachnoid hemorrhage.Immunofluorescence staining demonstrated that caspase-8 was expressed in microglia after subarachnoid hemorrhage.Z-IETDFMK significantly improved neurological deficits and reduced brain water content 24 hours after subarachnoid hemorrhage.The Morris water maze and rotarod test confirmed that Z-IETD-FMK significantly improved spatial learning and memory abilities and motor coordination at 21–27 days after subarachnoid hemorrhage.Furthermore,inhibition of caspase-8 activation reduced the expression of pyrin domain-containing 3,caspase-1,and interleukin-1βafter subarachnoid hemorrhage.In conclusion,our findings suggest that caspase-8 inhibition alleviates subarachnoid hemorrhage-induced brain injuries by suppressing inflammation.The study was approved by the Institutional Animal Ethics Committee of the First Affiliated Hospital,School of Medicine,Zhejiang University,China(approval No.2016-193)on February 25,2016. 展开更多
关键词 brain water content CASPASE-8 INFLAMMATION Morris water maze neurological function NEUROPROTECTION pyrin domain-containing 3 rotarod test subarachnoid hemorrhage Z-IETD-FMK
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RNA结合蛋白NONO通过影响SKP2、E2F8表达调控乳腺癌细胞增殖的研究 被引量:2
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作者 陈景森 熊志毅 +2 位作者 李欢 张文夏 王恩礼 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第7期823-826,共4页
目的探讨不含POU结构域的八聚体核苷酸结合蛋白(NONO)是否通过影响S期激酶相关蛋白2(SKP2)和E2F转录因子8(E2F8)表达从而调控乳腺癌细胞增殖。方法收集2019年6月至2020年6月于该院接受乳腺癌根治术治疗的43例乳腺癌患者的乳腺癌组织及... 目的探讨不含POU结构域的八聚体核苷酸结合蛋白(NONO)是否通过影响S期激酶相关蛋白2(SKP2)和E2F转录因子8(E2F8)表达从而调控乳腺癌细胞增殖。方法收集2019年6月至2020年6月于该院接受乳腺癌根治术治疗的43例乳腺癌患者的乳腺癌组织及癌旁组织石蜡块。采用免疫组织化学SP染色检测NONO、SKP2和E2F8在组织中的表达。将MCF-7细胞分为MCF-7组(无特殊处理)、sh-NC-MCF-7组(加入sh-NC序列正义链的慢病毒LV3液)和sh-NONO-MCF-7组(加入含sh-NONO序列正义链的慢病毒LV3液)。检测sh-NONO的沉默效率,筛选稳定株。分析沉默NONO对乳腺癌细胞增殖能力、细胞周期以及SKP2和E2F8表达的影响。结果乳腺癌组织中NONO、SKP2和E2F8阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05);与MCF-7和sh-NC-MCF-7组比较,sh-NONO-MCF-7组NONO蛋白表达水平降低(P<0.05),提示成功构建NONO沉默MCF-7细胞株;与MCF-7和sh-NC-MCF-7组比较,sh-NONO-MCF-7组增殖能力降低(P<0.05);与MCF-7和sh-NC-MCF-7组比较,sh-NONO-MCF-7组G_(0)/G_(1)期细胞比例显著增加,S期和G_(2)/M期细胞比例显著降低(P<0.05);与MCF-7和sh-NC-MCF-7组比较,sh-NONO-MCF-7组SKP2和E2F8蛋白表达水平以及SKP2和E2F8 mRNA相对表达水平均显著降低(P<0.05)。结论沉默NONO表达可通过下调SKP2和E2F8表达,诱导细胞周期阻滞,从而抑制乳腺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 乳腺癌 不含POU结构域的八聚体核苷酸结合蛋白 S期激酶相关蛋白2 E2F转录因子8 细胞增殖 细胞周期
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LYPD8在结直肠癌中的表达及其生物学功能 被引量:1
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作者 钱峻 严富国 +3 位作者 陈文山 陈允 黄海平 叶明燕 《浙江医学》 CAS 2020年第19期2042-2046,I0003,共6页
目的探讨含有Ly6/Plaur结构域的高度糖基化的磷脂酰肌醇锚定蛋白8(LYPD8)在结直肠癌(CRC)中的表达及其生物学功能。方法将收集自2015年3月至2016年9月在温州医科大学附属新昌医院的40例CRC患者的CRC组织与相应的癌旁结直肠组织以及正常... 目的探讨含有Ly6/Plaur结构域的高度糖基化的磷脂酰肌醇锚定蛋白8(LYPD8)在结直肠癌(CRC)中的表达及其生物学功能。方法将收集自2015年3月至2016年9月在温州医科大学附属新昌医院的40例CRC患者的CRC组织与相应的癌旁结直肠组织以及正常结直肠组织进行比较,检测不同临床分期患者CRC组织中LYPD8 mRNA表达,STAT3、p65的磷酸化水平以及IL-6、TNF-α的分泌水平;同时利用真核表达载体(pIRES2)构建过表达LYPD8的质粒DNA,检测LYPD8过表达对CRC细胞增殖和迁移的影响。结果与正常组织和癌旁组织相比,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期CRC患者癌组织中LYPD8 mRNA表达水平均明显降低(均P<0.05),其中Ⅲ期患者降低最明显(P<0.05)。CRC组织中STAT3/p65磷酸化水平及IL-6、TNF-α水平均明显增加(均P<0.05)。SW480细胞中LYPD8过表达,其存活凋亡百分比明显降低(P<0.05),迁移个数明显减少(P<0.05)。结论LYPD8在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者CRC组织中的表达较癌旁组织及正常组织明显降低;LYPD8在CRC细胞中通过诱导STAT3、p65去磷酸化,抑制TNF-α、IL-6的分泌,从而抑制CRC细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 含有Ly6/Plaur结构域的高度糖基化的磷脂酰肌醇锚定蛋白8 结直肠癌 细胞增殖 信号传导与活化转录因子3
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Nod样受体蛋白3和胱天蛋白酶募集域蛋白8基因多态性与克罗恩病的相关性
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作者 郭茂东 丁进 +5 位作者 陈燕萍 施昕 马拥军 叶晓华 魏姣姣 陈跃华 《浙江临床医学》 2022年第5期646-649,共4页
目的 探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3)和胱天蛋白酶募集域蛋白8(CARD8)基因多态性与克罗恩病(CD)的相关性.方法 收集130例CD患者和144名正常对照者,采用改良多重高温连接酶检测反应技术检测NLRP3(rs10754558)和CARD8(rs2043211)2个单核苷酸... 目的 探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3)和胱天蛋白酶募集域蛋白8(CARD8)基因多态性与克罗恩病(CD)的相关性.方法 收集130例CD患者和144名正常对照者,采用改良多重高温连接酶检测反应技术检测NLRP3(rs10754558)和CARD8(rs2043211)2个单核苷酸多态性(SNP).结果 CD组与对照组比较,NLRP3(rs10754558)和CARD8(rs2043211)2个SNP位点的突变等位基因和基因型频率差异均无统计学意义(P>0.05).分层分析显示,与结肠型CD比较,回肠病变CD患者CARD8(rs2043211)位点的突变等位基因(T)和基因型(TT)频率均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NLRP3(rs10754558)和CARD8(rs2043211)基因多态性与CD的易感性无关,而CARD8(rs2043211)基因突变可能影响CD患者的疾病部位. 展开更多
关键词 Nod样受体蛋白3 胱天蛋白酶募集域蛋白8 克罗恩病 基因多态性
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卷曲螺旋结构蛋白8(CCDC8)功能研究进展 被引量:4
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作者 贾晓鹏 齐春侠 +1 位作者 路玲玲 魏民 《生命的化学》 CAS CSCD 2016年第5期710-714,共5页
卷曲螺旋结构蛋白8(coiled-coil domain containing 8,CCDC8)是一个由CCDC8基因编码目前功能未知的蛋白质。已有的证据表明,CCDC8是一个膜蛋白,与细胞骨架蛋白Obsl1(Obscurin-like protein1)、泛素E3连接酶Cul7(Cullin 7)在一个信号通路... 卷曲螺旋结构蛋白8(coiled-coil domain containing 8,CCDC8)是一个由CCDC8基因编码目前功能未知的蛋白质。已有的证据表明,CCDC8是一个膜蛋白,与细胞骨架蛋白Obsl1(Obscurin-like protein1)、泛素E3连接酶Cul7(Cullin 7)在一个信号通路。CCDC8、Obsl1或者Cul7基因突变可以引起身材矮小的3-M综合征(3M syndrome)。CCDC8与锚蛋白ANKRA2(ankyrin-repeat family A protein 2)、p53通路相关的细胞凋亡有关;CCDC8与乳腺癌、肺癌等癌症有关;CCDC8还可与艾滋病毒(HIV-1)结构蛋白Gag相互作用,诱导Gag的内化、多泛素化和降解。 展开更多
关键词 卷曲螺旋结构蛋白8(ccdc8) 3-M综合征 癌症 HIV-1
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赖氨酸单甲基转移酶SETD8上调三阴性乳腺癌细胞程序性死亡因子配体1蛋白表达及其临床意义 被引量:5
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作者 夏想厚 尹文娟 +4 位作者 扈杰杰 竺美珍 路春阳 杨红健 俞洋 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1030-1032,共3页
目的探讨赖氨酸单甲基转移酶SETD8对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞程序性死亡因子配体1(PD-L1)表达的影响及其对临床预后的意义。方法构建SETD8基因沉默及过表达TNBC细胞株MDA-MB-231,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(West... 目的探讨赖氨酸单甲基转移酶SETD8对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞程序性死亡因子配体1(PD-L1)表达的影响及其对临床预后的意义。方法构建SETD8基因沉默及过表达TNBC细胞株MDA-MB-231,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测TNBC稳转细胞PD-L1基因及蛋白表达改变并采用t检验比较PD-L1基因及蛋白表达改变的差异。免疫组织化学检测112例TNBC组织内SETD8与PD-L1表达,Spearman等级相关分析SETD8与PD-L1表达的相关性,Kaplan-Meier生存分析法分析癌组织内SETD8表达高低对三阴性乳腺癌预后的影响。结果SETD8上调TNBC细胞PD-L1蛋白表达,而PD-L1mRNA表达改变不明显;112例TNBC乳腺癌患者中PD-L1和SETD8有45例共同高表达,29例为共同低表达,SETD8与PD-L1表达呈正相关(r=0.301,P<0.05),SETD8高表达提示TNBC的5年总生存率为58.7%,显著低于SETD8低表达的77.8%(χ^2=4.509,P<0.05)。结论SETD8上调TNBCPD-L1表达,SETD8高表达提示TNBC的5年总生存率显著降低。 展开更多
关键词 SETD8 三阴性乳腺癌 程序性死亡因子配体1 免疫治疗
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TIPE2在脓毒症小鼠急性肺损伤内源性保护机制中的作用:与TREM-1/NLRP3炎症小体信号通路的关系 被引量:4
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作者 王倩 金振帅 +3 位作者 孔倩 袁敏 明婷倩 吴晓静 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1502-1505,共4页
目的评价肿瘤坏死因子-α诱导蛋白家族8-样蛋白2(TIPE2)在脓毒症小鼠急性肺损伤内源性保护机制中的作用及其与髓样细胞表达触发受体-1(TREM-1)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的关系。方法雄性野生型小鼠和TIPE2基因敲除小鼠各2... 目的评价肿瘤坏死因子-α诱导蛋白家族8-样蛋白2(TIPE2)在脓毒症小鼠急性肺损伤内源性保护机制中的作用及其与髓样细胞表达触发受体-1(TREM-1)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体信号通路的关系。方法雄性野生型小鼠和TIPE2基因敲除小鼠各20只,分别采用随机数字表法分为野生型假手术组(WT-sham组)、野生型急性肺损伤组(WT-ALI组)、TIPE2基因敲除型假手术组(KO-sham组)及TIPE2基因敲除急性肺损伤组(KO-ALI组),每组10只。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症小鼠急性肺损伤模型。术后24 h时腹主动脉采血样后处死小鼠取肺组织,光镜下观察肺组织病理学结果并行肺损伤评分,确定湿重/干重(W/D)比值,检测髓过氧化物酶(MPO)活性,采用Western blot法检测TIPE2、TREM-1、NLRP3、caspase-1和GSDMD的表达,采用ELISA法检测血清IL-1β和IL-18的浓度。结果与WT-sham组比较,WT-ALI组和KO-ALI组肺损伤评分、W/D比值、MPO活性、肺组织TREM-1、NLRP3、caspase-1、GSDMD表达水平及血清IL-1β和IL-18浓度升高,TIPE2表达下调(P<0.05);与WT-ALI组比较,KO-ALI组肺损伤评分、W/D比值、MPO活性、TREM-1、NLRP3、caspase-1、GSDMD表达水平及血清IL-1β和IL-18的浓度升高,TIPE2表达下调(P<0.05)。结论TIPE2参与了脓毒症小鼠急性肺损伤的内源性保护机制,与抑制TREM-1/NLRP3炎症小体信号通路激活有关。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-α诱导蛋白家族8-样蛋白2 脓毒症 急性肺损伤 NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3 髓样细胞表达触发受体-1
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胃癌患者免疫微环境中表型特征及其与临床病理参数和预后的关系 被引量:3
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作者 吴杨 陈雨琪 +2 位作者 石通国 谭能姣 陈卫昌 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第35期2786-2794,共9页
目的探究胃癌患者免疫微环境中的表型特征,分析其与临床病理参数及预后的关系。方法纳入研究的92例胃癌组织[男58例,女34例;年龄M(Q_(1),Q_(3)),70(59,77)岁]及84例癌旁组织[男57例,女27例,年龄70(59,77)岁]购自上海芯超生物科技有限公... 目的探究胃癌患者免疫微环境中的表型特征,分析其与临床病理参数及预后的关系。方法纳入研究的92例胃癌组织[男58例,女34例;年龄M(Q_(1),Q_(3)),70(59,77)岁]及84例癌旁组织[男57例,女27例,年龄70(59,77)岁]购自上海芯超生物科技有限公司,标本来自样本库中的28家医院,检测其白细胞分化抗原(CD)8、CD4、T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白3(TIM3)、人叉头盒蛋白P3(Foxp3)及共定位肿瘤浸润性淋巴细胞(TILs)亚群的表达水平。根据各阳性淋巴细胞百分比的最佳截断值将胃癌及癌旁组织分别分为高表达组和低表达组,分析各免疫表型在胃癌及癌旁组织中的表达量;采用Kaplan-Meier法进行生存分析;采用Cox比例风险模型探究胃癌患者预后的影响因素。结果胃癌组织中CD8、CD4、TIM3和Foxp3阳性细胞百分比的最佳截断值分别为12.73%、1.39%、10.77%和2.44%;胃癌组织中Foxp3的表达量高于癌旁组织[M(Q_(1),Q_(3)),0.93(0.45,2.16)比0.31(0.09,0.86),P<0.001];CD8[4.92(2.34,8.80)比8.81(6.61,12.17),P<0.001]、CD4[4.79(1.77,11.36)比8.40(4.84,12.77),P=0.022]和TIM3[5.68(2.05,11.58)比7.07(3.13,11.43),P=0.338]的表达量低于癌旁组织;不同淋巴结转移和临床分期的胃癌患者中TIM3表达量的差异均有统计学意义(均P<0.05)。胃癌组织中CD4高表达、TIM3低表达和Foxp3低表达的患者5年生存率均较差,其中CD4高、低表达组分别为29.3%、64.7%;TIM3高、低表达组分别为60.9%、30.4%;Foxp 3高、低表达组分别为64.3%、33.3%(均P<0.05)。胃癌组织中共定位CD8^(+)TIM3+TILs、CD4^(+)TIM3+TILs、CD8^(+)Foxp3^(+)TILs、CD4^(+)Foxp3^(+)TILs阳性细胞百分比的最佳截断值分别为3.86%、0.23%、0.08%、0.76%;胃癌组织中CD8^(+)Foxp3^(+)TILs的表达量高于癌旁组织(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示CD4高表达(HR=3.079,95%CI:1.350~7.024,P=0.008)、TIM3低表达(HR=0.428,95%CI:0.208~0.879,P=0.021)、Foxp3低表达(HR=0.288,95%CI:0.121~0.687,P=0.005)是胃癌患者术后5年生存率的影响因素。结论胃癌患者具有复杂的免疫微环境特征,CD4、TIM3、Foxp3的表达量与患者预后密切相关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 白细胞分化抗原8 白细胞分化抗原4 T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白3 人叉头盒蛋白P3 预后
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