类风湿关节炎小鼠模型中Bregs细胞、IL-10和TGF-β的变化及其内在关系

目的:探讨Bregs细胞、血清中IL-10和TGF-β与类风湿关节炎(RA)活动的相关性。方法:建立小鼠Ⅱ型胶原诱导类风湿关节炎(CIA)模型;采用HE染色观察对照组和CIA组小鼠关节滑膜和周围细胞的变化,并提取滑膜组织中的mRNA检测其中IL-10和TGF-β的变化。采用CBA法测定CIA组与对照组血清中IL-10、TGF-β的含量。采用流式细胞术检测CIA组与对照组中Breg细胞(CD1dhighCD5+CD19high)比例的变化。结果:对照组小鼠足爪关节无红肿;CIA组小鼠足跖部出现肿胀,关节明显红肿增粗。CIA组与对照组关节炎评分差异显著(P<0.05)。对照组小鼠滑膜细胞排列整齐,无增生,无炎症细胞浸润;CIA组滑膜细胞水肿,排列不整齐,有3~5层明显增生,有大量的炎症细胞浸润,并出现新生血管。与对照组相比,CIA组滑膜细胞中IL-10和TGF-β的mRNA表达水平差异显著(P<0.05)。同时,CIA组血清中IL-10和TGF-β的含量较对照组显著升高(P<0.05)。与对照组相比,CIA组小鼠脾脏中Breg细胞(CD1dhighCD5+CD19high)比例明显增多(P<0.05)。结论:与对照组相比,在CIA组小鼠血清和滑膜组织中IL-10和TGF-β表达水平、脾脏中Breg细胞比例均显著升高,Breg细胞在RA发病进程中起重要作用。

胶原诱导与抗原诱导C57BL/6小鼠类风湿关节炎造模的比较研究

目的通过对C57BL/6小鼠背景下胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)和抗原诱导的关节炎(antigen-induced arthritis,AIA)造模情况的分析,来比较其造模成功率和关节炎进展的差异性。方法将42只小鼠分成两组,一组为CIA,一组为AIA。每组3只作为正常组,18只作为模型组。最后一次造模后定期监测小鼠的体重、膝关节和踝关节直径。结果在C57BL/6背景下,CIA造模成功率不高且严重程度差异大,AIA造模成功率高但维持时间短。结论为了更全面地研究类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的致病机制,可能更适合在后续的转基因小鼠身上造CIA模型。

黄连解毒汤调控炎性免疫抗类风湿性关节炎机制

目的:观察黄连解毒汤对胶原诱导性关节炎(CIA)模型小鼠病理改变及免疫损伤的影响,探讨黄连解毒汤抗类风湿性关节炎的可能机制。方法:24只DBA/1小鼠,随机分为正常组、模型组、甲氨喋呤组和黄连解毒汤组,每组6只,采用Ⅱ型胶原诱导建立CIA小鼠模型,给药组给予黄连解毒汤水煎液(5 g·kg^(-1))和甲氨喋呤(0.5 mg·kg^(-1))干预,观察小鼠关节肿胀症状,每3 d进行关节炎指数评分,评分达到峰值后取材;流式细胞仪检测外周血粒细胞、单核细胞、T淋巴细胞;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测关节炎症因子表达;微计算机断层扫描技术(Micro-CT)扫描踝关节;苏木素-伊红(HE)染色检测关节组织病理改变。结果:与正常组比较,模型组小鼠关节肿胀,关节炎指数评分明显升高(P<0.05);外周血粒细胞比例明显升高(P<0.05),单核细胞、T淋巴细胞比例明显降低(P<0.05),中性粒细胞淋巴细胞比例(NLR)显著升高(P<0.01);关节组织炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6表达升高(P<0.01);Micro-CT可见踝关节明显骨质破坏,病理可见到关节周围组织存在大量的炎性细胞浸润、滑膜增生。与模型组比较,黄连解毒汤组小鼠关节肿胀症状明显减轻,关节炎指数评分明显降低(P<0.05);外周血T淋巴细胞比例升高,NLR显著降低(P<0.01);关节中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达显著下降(P<0.01);骨破坏及关节组织病理损伤情况明显改善。结论:Ⅱ型胶原导致CIA小鼠全身和关节局部炎性免疫损伤,黄连解毒汤干预减轻炎性免疫损伤,并且对关节局部的作用更为显著,从而抑制CIA小鼠关节病变和骨破坏。